CN110833514B - 多肽冻干粉及其在制备抗衰老的化妆品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及护肤品技术领域，尤其涉及多肽冻干粉及其在制备抗衰老的化妆品中的应用。本发明提供的多肽冻干粉包括甘氨酸、海藻糖、甘露糖醇、血清白蛋白、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、聚山梨醇酯‑20和多肽，其中多肽选自三肽‑1、三肽‑2、六肽‑9、六肽‑11、乙酰五肽‑1、蓝铜胜肽、肌肽。本发明所述的多肽冻干粉具有良好的溶解度，且具有提高胶原蛋白产量的作用，能够改善面部细纹，提亮肤色，从而具有抗衰老的作用。

Description

多肽冻干粉及其在制备抗衰老的化妆品中的应用

技术领域

本发明涉及护肤品技术领域，尤其涉及多肽冻干粉及其在制备抗衰老的化妆品中的应用。

背景技术

皮肤是人类重要的组织器官，是抵御外界危害入侵的有力屏障，同时，在审美方面，细腻光滑的皮肤也受到人们的青睐。但因为环境和遗传因素等复杂因素，特别是，环境因素的叠加，如紫外线照射皮肤，导致大量的伤口样形态改变，主要是真皮。在阳光保护区内，最明显的变化发生在表皮内，主要影响基底细胞层。尽管对其基本机制仍知之甚少，但越来越多的证据表明，重要原因之一是皮肤结构性胶原蛋白生物合成不足和流失，产生结构性塌陷，表现出皱纹，往往还伴随着因氧化反应引起的色素沉淀，呈现出衰老迹象。一直以来人们运用各种手段掩盖和治疗这种衰老。运用具有生物活性的多肽作为有效功能成分治疗便为延缓衰老提供了新思路。

众所周知，多肽具有多种多样的生物学作用，在包括防御、免疫、应激、生长、稳态和繁殖在内的各种生理过程中，最显著的作用是信号调节分子。这些方面已被用于皮肤病学和美容学领域，促进细胞外基质合成，避免色素沉着，治疗先天免疫和炎症。然而，多肽活性物因功效显著专一，无副作用受到市场追捧，但也因功效专一，当面对实际综合性复杂问题时，达到效果不如预期。因此，针对这一实际问题，科技工作们采用两种或多种活性物协同或因症施药的方式解决，通常两个或两个以上多肽组合，亦或者加入天然提取物、透明质酸、烟酰胺或是其他功效物。但在众多组合中，并未有全面解决因胶原蛋白生物合成不足和流失引起的衰老。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供多肽冻干粉及其在制备抗衰老的化妆品中的应用，该多肽冻干粉能够提高人皮肤成纤维细胞中的胶原蛋白含量，从而抵抗皱纹，延缓衰老。

本发明提供了一种多肽冻干粉，其由如下质量分数的原料制得：

所述多肽选自三肽-1、三肽-2、六肽-9、六肽-11、乙酰五肽-1、蓝铜胜肽、肌肽中至少一种。

一些实施例中，所述多肽为三肽-1。

另一些实施例中，所述多肽为三肽-2。

另一些实施例中，所述多肽为六肽-9。

另一些实施例中，所述多肽为六肽-11。

另一些实施例中，所述多肽为乙酰五肽-1。

另一些实施例中，所述多肽为蓝铜胜肽。

另一些实施例中，所述多肽为肌肽。

一些实施例中，所述多肽为三肽-1和三肽-2。其中三肽-1和三肽-2的质量比为1～9:9～1，具体实施例中，三肽-1和三肽-2的质量比5:5、9:1或1:9。

一些实施例中，所述多肽为三肽-1和肌肽。其中三肽-1和肌肽的质量比为1～9:9～1，具体实施例中，三肽-1和肌肽的质量比5:5。

一些实施例中，所述多肽为肌肽和三肽-2。其中肌肽和三肽-2的质量比为1～9:9～1，具体实施例中，肌肽和三肽-2的质量比5:5。

一些实施例中，所述多肽冻干粉由如下原料制得：

所述的多肽冻干粉的制备方法，包括：

甘氨酸、海藻糖、甘露糖醇、血清白蛋白以水溶解，以磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调整pH值为6.0～7.5；加入预混的聚山梨醇酯-20和多肽，250～300rpm搅拌15～20min，经紫外照射灭菌30min，0.22μm过滤膜过滤后，-25℃所述冻干的程序包括两次升华：

一次升华：使真空度达到15Pa，升温至-3℃，保持12h；

二次升华：使温度在2h内达到35℃，保温8h。

本发明所述的多肽冻干粉在制备抗衰老的化妆品中的应用。

所述抗衰老包括提高皮肤胶原蛋白含量和/或抑制皱纹产生。

所述胶原蛋白为I型胶原蛋白、II型胶原蛋白和/或III型胶原蛋白。

本发明所述的多肽冻干粉具有良好的溶解度，且实验表明采用本发明提供的多肽冻干粉制成化妆品，处理人皮肤成纤维细胞，结果表明，其中含有三肽-1和三肽-2的多肽冻干粉能够显著的提高胶原蛋白的产量。而以该化妆品进行志愿者试用调查后发现，所有受试者所涂抹局部区域均有相似程度的改善，说明该组合在人体效果明显。

本发明还提供了一种抗衰老的化妆品，其包括本发明所述的多肽冻干粉和化妆水。

所述多肽冻干粉与化妆水可以混合存在，也可互相独立存在。

本发明中，所述化妆水包括：

本发明所述的化妆品中，多肽冻干粉与化妆水的质量-体积比为1mg：2mL～10mL。

本发明中，所述化妆水的制备方法包括：

将EDTA-Na₂、透明质酸钠、山梨醇、丁二醇与水混合，升温至85±2℃，250rpm搅拌均质后保温30min；

降温至42±2℃，加入吡咯烷酮羧酸钠、天然保湿因子、玫瑰花纯露，搅拌溶解后，加入聚甘油-10月桂酸酯混合均匀，冷却至室温获得化妆水。

本发明提供的多肽冻干粉包括甘氨酸、海藻糖、甘露糖醇、血清白蛋白、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、聚山梨醇酯-20和多肽，其中多肽选自三肽-1、三肽-2、六肽-9、六肽-11、乙酰五肽-1、蓝铜胜肽、肌肽。本发明所述的多肽冻干粉具有良好的溶解度，且具有提高胶原蛋白产量的作用，能够改善面部细纹，提亮肤色，从而具有抗衰老的作用。

附图说明

图1胶原蛋白标准曲线；

图2各组测试胶原蛋白产量；

图3示使用前后皮肤改善情况。

具体实施方式

本发明提供了多肽冻干粉及其在制备抗衰老的化妆品中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。其中，三肽-1、三肽-2、六肽-9、六肽-11、乙酰五肽-1、蓝铜胜肽、肌肽均购自成都云希化工。所述玫瑰花纯露为保加利亚玫瑰花纯露采用水蒸气蒸馏法制得。所述天然保湿因子为NMF，其为皮肤角质层中存在的一种具有保水作用的吸附性水溶性物质，主要成分有各种氨基酸40％、吡咯烷酮羧酸12％、乳酸盐12％、尿素7％等。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1

利用人皮肤成纤维细胞建立胶原蛋白生物合成实验模型。以实施例1中制备的各组多肽冻干粉处理细胞，之后用酶联免疫法对细胞分泌的胶原蛋白含量进行检测，衡量所添加物作用效果。成纤维细胞实验模型情况如下：

成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，功能活动旺盛，细胞和细胞核较大，轮廓清楚，核仁大而明显，细胞质弱嗜碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动。

常规细胞培养法建立成纤维细胞系，实验模型实验选用第3-6代细胞。培养条件为(完全培养基：DMEM(内含2mM L-glutamine)+10％新生牛血清(NCS))，温度37.0℃，CO₂含量5％。用完全培养液配成4.0×10⁴个/mL的细胞悬液，接种于24孔板中，每孔500μL，即2.0×10⁴个/孔，置于37℃、5％二氧化碳条件下培养24小时。

吸尽孔中培养液，加药组每孔加入500μL含有多肽的完全培养液(各组多肽含量皆为10μg/ml)，空白对照组则加入500μl不含多肽的完全培养液，放入培养箱中继续培养48h。每个受试组设置3个复孔。

吸取每孔中的细胞培养液，分别装入1.5ml离心管中(注意做好标记以免混淆)，高速离心机中1000×g离心10min。取上清液100ul至1.5ml离心管，即为待检测样品。用酶联免疫法对细胞分泌的胶原蛋白含量进行检测。按照ELISA试剂盒说明书进行操作，先绘制标准曲线(图1)，再进行样品检测。检测结果如表1、图2：

表1各组处理胶原蛋白检测结果

通过分析以成纤维细胞为模型的细胞实验结果，可以得知，在同等用量下，组2～3、组8～11的组合物均能够提高细胞产生胶原蛋白的量。其中，组9的效果最为显著，说明该组多肽配合最为合理，从而产生了显著的增效协同作用，该组效果不仅优于对照组，与其他各组相比皆存在显著优势。

实施例2冻干粉和配套化妆水制备与功效验证

1、冻干粉制备

按照工艺制备冻干粉和配套化妆水，用于人体功效实验，三组中多肽组合比例为三肽-1：三肽-2＝9:1/5:5/1:9，组合总量百分数0.3％:

表2各组分质量分数(％)

制备工艺

①甘氨酸、海藻糖、甘露糖醇、血清白蛋白加入容器中，去离子水溶解，磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调整pH至6.5；

②预混聚山梨醇酯-20和多肽组合成分至均一，在搅拌状态下加入主容器中至均一；

③紫外照射灭菌30min，0.22μm过滤膜过滤分装；

④-25℃冷藏室过夜预冻，上冻干机，按设定的温度曲线干燥。

2、化妆水的制备

化妆水成分和质量分数组成：

组份               比例

A相：

B相：

吡咯烷酮羧酸钠             0.1％

天然保湿因子               0.2％

保加利亚玫瑰花纯露         10％

C相：

聚甘油-10月桂酸酯          0.5％

制备工艺：

①加入A相组份于容器中，加入去离子水，升温至85±2℃，机械搅拌均质，转数250rpm；

②搅拌至状态均一，且无不容物，保温30min，自然降温；

③降温至42±2℃，加入B组各组分，搅拌至状态澄清透明；

④混合C相至均一状态，缓慢加入主容器中，搅拌至状态均一；

⑤开始降温至室温，过滤收集产品

3、人体功效验证

取实施例2中制备的多肽冻干粉各2mg，分别溶解于20mL实施例2的化妆水中，制成3组化妆品。

30名受试者分为3组，每组测试一组上述化妆品。测试方法：在清洁皮肤后，取上述化妆品涂抹于脸部，每天使用两次，未使用完样品置于4℃环境储存。

每隔1周用visia拍照记录(图3)，以受试者未使用样品前成像为阴性对照，4周后，经visia分析，好于未使用前50％(＞50％)，好于未使用前30％(＞30％)，和未有明显改善的人数分布如下表：

表3人体功效实验人数分布

从结果分布表中可以看出，人体测试效果明显，组合多肽冻干粉具有促进胶原蛋白合成，抚平肌肤，抑制皱纹的效果。

以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种多肽冻干粉，其特征在于，由如下质量分数的原料制得：

甘氨酸 0.3%、海藻糖 0.2%、甘露糖醇 18.5%、血清白蛋白 0.1%、磷酸二氢钠 0.017%、磷酸氢二钠 0.12%、聚山梨醇酯-20 0.5%、多肽 0.3%、余量为水；

所述多肽为三肽-1和三肽-2，所述三肽-1和三肽-2的质量比为5：5。

2.权利要求1所述的多肽冻干粉的制备方法，包括：

甘氨酸、海藻糖、甘露糖醇、血清白蛋白以水溶解，以磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调整pH至 6～7.5；加入预混的聚山梨醇酯-20和多肽，250～300rpm搅拌15～20min，经紫外照射灭菌30min，0.22μm过滤膜过滤后，-25℃预冻8~12h再进行冻干，制得冻干粉；

所述冻干的程序包括两次升华：

一次升华：使真空度达到15Pa，升温至-3℃，保持12h；

二次升华：使温度在2h内达到35℃，保温8h。

3.权利要求1所述的多肽冻干粉在制备抗衰老的化妆品中的应用。

4.权利要求2所述制备方法制得的多肽冻干粉在制备抗衰老的化妆品中的应用。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗衰老包括提高皮肤胶原蛋白含量和/或抑制皱纹产生。

6.一种抗衰老的化妆品，其特征在于，

包括权利要求1所述的多肽冻干粉和化妆水；

或包括权利要求2所述制备方法制得的多肽冻干粉和化妆水。

7.根据权利要求6所述的化妆品，其特征在于，所述化妆水包括：

EDTA-2Na 0.05%、透明质酸钠 0.2%、山梨醇 5%、丁二醇 5%、吡咯烷酮羧酸钠 0.1%、天然保湿因子 0.2%、玫瑰花纯露 10%、聚甘油-10月桂酸酯 0.5%、余量为水。

8.根据权利要求6或7所述化妆品，其特征在于，所述化妆水的制备方法包括：

将EDTA-2Na、透明质酸钠、山梨醇、丁二醇与水混合，升温至85±2℃， 250rpm搅拌均质后保温30min；

降温至42±2℃，加入吡咯烷酮羧酸钠、天然保湿因子、玫瑰花纯露，搅拌溶解后，加入聚甘油-10月桂酸酯混合均匀，冷却至室温获得化妆水。

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