CN110726788A - 一种高效液相色谱法分离和测定盐酸左西替利嗪及其有关物质的方法 - Google Patents

一种高效液相色谱法分离和测定盐酸左西替利嗪及其有关物质的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种高效液相色谱法分离和测定盐酸左西替利嗪及其5种有关物质的方法，该方法色谱柱为C18色谱柱，用含有庚烷磺酸钠和乙腈的混合液溶液的流动相洗脱后检测，流动相中还加入了碱。该方法可以同时对盐酸左西替利嗪片中盐酸左西替利嗪及其左西替利嗪乳糖酯、左西替利嗪聚乙二醇酯、对氯二苯甲酮、对氯二苯甲醇及对氯二苯甲基哌嗪5种有关物质中的任一一种或多种进行分离检测。与现有技术相比，盐酸左西替利嗪与各有关物质分离度较好，灵敏度高，并提高了分离检测效率。

Description

一种高效液相色谱法分离和测定盐酸左西替利嗪及其有关物 质的方法
技术领域
本发明属于医药分析领域，特别涉及一种高效液相色谱法分离和测定盐酸左西替利嗪中有关物质的方法。
背景技术
盐酸左西替利嗪为选择性组胺H1受体拮抗剂，为新一代高效非镇静抗组胺剂。适用于过敏性鼻炎（包括季节性持续过敏性鼻炎和常年性持续性过敏性鼻炎）及慢性特发性荨麻疹。盐酸左西替利嗪片因起效快、疗效显著为选择性抗组胺药物用于治疗过敏性鼻炎和荨麻疹的一线用药。
有关物质研究是制剂质量研究的关键问题之一，国内外对盐酸左西替利嗪片有关物质研究有文献报道。根据文献调研、盐酸左西替利嗪原料药合成工艺及片剂制剂生产工艺，可以得出盐酸左西替利嗪片的杂质谱，包括左西替利嗪乳糖酯、左西替利嗪聚乙二醇酯、对氯二苯甲酮、对氯二苯甲醇及对氯二苯甲基哌嗪。
通过文献检索未发现有一种检测方法对以上5种杂质能同时有效的检测。《进口药品注册标注JX20120199》和《美国药典》有关物质检测方法与本发明最为接近，色谱条件见下表：
Figure 909191DEST_PATH_IMAGE001
参照美国药典40版方法进行试验，结果对氯二苯甲酮和对氯二苯甲醇两种杂质与溶剂峰重叠；左西替利嗪乳糖酯未出峰；左西替利嗪聚乙二醇酯有多个峰，故该方法无法对要研究的对氯二苯甲酮、对氯二苯甲醇、左西替利嗪乳糖酯及左西替利嗪聚乙二醇酯四种杂质进行准确定量，需进一步优化色谱条件。结果见附图1。
发明人对流动性比例进行调整，增大或减小乙腈的比例，美国药典40版方法进行试验，结果发现对氯二苯甲醇、对氯二苯甲酮两种杂质均与溶剂峰重叠，仍无法对其准确定量。结果见附图2和附图3。
参照进口注册标准方法JX20120199进行试验，结果发现溶剂峰干扰左西替利嗪乳糖酯的检测；左西替利嗪的拖尾因子均大于2.0；左西替利嗪聚乙二醇与主峰重叠，无法准确定量。结果见附图4。
因此研究出合适的方法能准确高效的检测和分离出盐酸左西替利嗪中有关物质对盐酸左西替利嗪的质量研究非常重要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种检测和分离盐酸左西替利嗪中有关物质的方法，该方法能准确高效的检测和分离盐酸左西替利嗪中的有关物质，并能同时检测和分离对氯二苯甲酮、对氯二苯甲醇等5个有关物质。
本发明的技术方案是：采用高效液相色谱法检测和分离盐酸左西替利嗪及其有关物质，有关物质为左西替利嗪乳糖酯、左西替利嗪聚乙二醇酯、对氯二苯甲酮、对氯二苯甲醇及对氯二苯甲基哌嗪。色谱柱为C18色谱柱，用含有庚烷磺酸钠和乙腈混合溶液的流动相洗脱后用紫外检测器进行检测，其特征是：流动相还含有碱，流动相ph值为2.4-4.0。
进一步，所述流动相中的碱为三乙胺、二乙胺和氨水中的一种，优选三乙胺；
进一步，所述庚烷磺酸钠溶液ph值为3.0-3.5，优选ph值为3.5；
进一步，所述流动相为庚烷磺酸钠溶液：乙腈体积比为61-63:39-37，优选庚烷磺酸钠溶液：乙腈体积比为62:38；
所述流动相中庚烷磺酸钠溶液的制备方法为精密称定庚烷磺酸钠，用水溶解稀释配制成1mg/ml溶液，加入三乙胺，用硫酸溶液调节ph值至3.5。
优选十八烷基键合硅胶颗粒粒径为5μm，柱长为150mm。
其他色谱条件：
色谱柱适用的柱温范围为20-40℃，优选30℃；
流动相的流速为0.5-1.5ml/min，优选1.5ml/min。
本发明一个具体实施方式中，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶（150mm×4.6mm，5μm），流动相：庚烷磺酸钠溶液与乙腈的体积比为62:38，其中庚烷磺酸钠溶液的制备方法为取庚烷磺酸钠1.0g，加水溶解并稀释至1000ml，加0.3ml三乙胺，用0.5mol/L硫酸溶液调节pH值至3.5；
操作方法为：
取适量盐酸左西替利嗪片，用流动相溶解并配制成浓度为0.25mg/ml溶液，摇匀滤过，取滤液作为供试品溶液；精密称取盐酸西替利嗪乳糖酯对照品、对氯二苯甲基哌嗪对照品、西替利嗪聚乙二醇酯对照品、对氯二苯甲醇对照品和对氯二苯甲酮对照品，加流动相溶解并分别稀释成浓度为0.25ug/ml、0.25ug/ml、0.25ug/ml、0.25ug/ml、0.5ug/ml的溶液，作为对照品溶液。
取供试品溶液、对照品溶液各20ul分别注入液相色谱仪，按本发明色谱条件进行洗脱，流动相的流速为1.5ml/min，检测波长为230mg，色谱柱柱温为30℃。
采用本发明检测和分离盐酸左西替利嗪中有关物质的优势为：分离较好，专属性强，且能一次性分离左西替利嗪乳糖酯、左西替利嗪聚乙二醇酯、对氯二苯甲酮、对氯二苯甲醇及对氯二苯甲基哌嗪5种有关物质，效率显著提高。
附图说明
图1为对比实施例1供试品溶液色谱图；
图2为对比实施例2供试品溶液色谱图；
图3为对比实施例3供试品溶液色谱图；
图4为对比实施例4供试品溶液色谱图；
图5为实施例1供试品溶液色谱图；
图6为实施例2对照品溶液色谱图；
图7为实施例3对照品溶液色谱图；
图8为实施例4对照品溶液色谱图。
具体实施方式
下面通过具体实施例和附图对本申请作进一步详细说明。以下实施例仅对本申请进行进一步说明，不应理解为对本申请的限制。
本发明所用的试剂和原料均市售可得。
除特别说明外，以下实施例和对比实施例的高效液相色谱仪为LC-20AT高效液相色谱仪，检测器为紫外检测器：
对比实施例1美国药典40版方法检测盐酸左西替利嗪片中有关物质
色谱柱为phenomenex Luna Silica（ 250mm× 4.6mm，5μm）；流动相为乙腈：水：1mol/L硫酸=93:6.6:0.4；
供试品溶液配制：取10片相当于50mg盐酸左西替利嗪置250ml容量瓶中，加20ml硫酸溶液 (1mol/l硫酸:水=5.7:94.3)，振摇15min，加150ml乙腈，超声10分钟，冷却至室温，用乙腈定容，混匀，取10ml离心5min，取上清液。
对照品溶液配制：取盐酸西替利嗪乳糖酯对照品、对氯二苯甲基哌嗪对照品、西替利嗪聚乙二醇酯对照品、对氯二苯甲醇对照品和对氯二苯甲酮对照品，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每 1ml 中约含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。
取供试品溶液、对照品溶液各20ul分别注入液相色谱仪，按本发明色谱条件进行洗脱，流动相的流速为1.0ml/min，检测波长为230mg，色谱柱柱温为30℃，记录色谱图，得附图1。详细如表1和表2所示：
表1：对比实施例1条件下供试品溶液检测图谱
序号 保留时间 名称
1 未出峰 盐酸西替利嗪乳糖酯
2 12.578 盐酸左西替利嗪
3 18.366 对氯二苯甲基哌嗪
4 未出峰 西替利嗪聚乙二醇酯
5 与溶剂峰重叠 对氯二苯甲醇
6 与溶剂峰重叠 对氯二苯甲酮
表2：图1检测图谱的相关参数
峰号 保留时间 面积 理论塔板数（USP） 拖尾因子 分离度（USP） 高度
1 3.179 34305 945 0.854 / 1906
2 3.695 375 10522 1.128 1.850 129
3 4.211 1411 4818 1.835 2.668 160
4 4.938 190 10114 1.040 3.312 27
5 6.756 416 8474 / 7.419 32
6 7.225 151 6536 / 1.442 13
7 7.978 422 9983 / 2.225 37
8 8.317 766 6725 / 0.934 53
9 8.821 406 7442 / 1.237 27
10 9.270 635 9404 / 1.136 43
11 9.602 1435 11151 / 0.888 106
12 10.366 4721 12950 1.272 2.099 342
13 11.068 1413 13046 / 1.868 96
14 11.355 407 5383 / 0.569 33
15 12.578 7588611 11817 1.309 2.262 427660
16 15.778 2586 3495 1.236 4.181 59
17 18.366 10157 13079 1.380 3.028 407
总计 7648306 431129
经过实验得知，采用美国药典40版方法，对氯二苯甲酮和对氯二苯甲醇两种杂质应分别约在3.133min、3.142min出峰，供试品溶液中两种杂质与溶剂峰重叠；西替利嗪乳糖酯未出峰；5种杂质未能达到有效分离。
对比实施例2，调整流动相比例，采用美国药典40版方法检测
色谱柱为phenomenex Luna Silica（ 250mm× 4.6mm，5μm）；流动相为乙腈：水：1mol/L硫酸=96:3.6:0.4；
供试品溶液和对照品溶液配制与对比实施例1一致。
取供试品溶液、对照品溶液各20ul分别注入液相色谱仪，按本发明色谱条件进行洗脱，流动相的流速为1.0ml/min，检测波长为230mg，色谱柱柱温为30℃，记录色谱图，得附图2。详细如表3和表4所示：
表3：对比实施例2条件下供试品溶液检测图谱
序号 保留时间 名称
1 未出峰 盐酸西替利嗪乳糖酯
2 13.290 盐酸左西替利嗪
3 19.487 对氯二苯甲基哌嗪
4 未出峰 西替利嗪聚乙二醇酯
5 与溶剂峰重叠 对氯二苯甲醇
6 与溶剂峰重叠 对氯二苯甲酮
表4：图2检测图谱的相关参数
峰号 保留时间 面积 理论塔板数（USP） 拖尾因子 分离度（USP） 高度
1 3.182 34766 4156 0.651 / 2422
2 3.674 905 9424 1.214 2.819 187
3 4.310 1939 3981 0.861 2.994 184
4 6.886 280 8476 0.993 9.001 27
5 7.484 390 6465 / 1.782 25
6 8.276 349 6336 / 2.010 32
7 8.554 552 10974 / 0.749 47
8 8.982 462 7337 1.778 1.147 33
9 9.703 452 11252 / 1.835 40
10 10.013 1307 12606 / 0.859 99
11 10.913 4629 13143 1.259 2.440 320
12 11.618 1240 13961 / 1.823 85
13 12.000 236 10445 / 0.885 20
14 13.290 7438821 12098 1.296 2.707 397653
15 19.487 9834 12545 1.314 10.511 371
总计 7496162 401544
经过实验得知，增加乙腈比例，其他色谱条件同美国药典40版方法，对氯二苯甲酮和对氯二苯甲醇两种杂质应分别约在3.167min、3.183min出峰，供试品溶液中两种杂质与溶剂峰重叠；西替利嗪乳糖酯未出峰；5种杂质未能达到有效分离。
对比实施例3，调整流动相比例，采用美国药典40版方法检测
色谱柱为phenomenex Luna Silica（ 250mm× 4.6mm，5μ）；流动相为乙腈：水：1mol/L硫酸=88:11.6:0.4；
供试品溶液和对照品溶液配制与对比实施例1一致。
取供试品溶液、对照品溶液各20ul分别注入液相色谱仪，按本发明色谱条件进行洗脱，流动相的流速为1.0ml/min，检测波长为230mg，色谱柱柱温为30℃，记录色谱图，得附图3。详细如表5所示：
表5：对比实施例3条件下供试品溶液检测图谱
序号 保留时间 名称
1 未出峰 盐酸西替利嗪乳糖酯
2 10.535 盐酸左西替利嗪
3 14.869 对氯二苯甲基哌嗪
4 未出峰 西替利嗪聚乙二醇酯
5 与溶剂峰重叠 对氯二苯甲醇
6 与溶剂峰重叠 对氯二苯甲酮
经过实验可知，减小乙腈比例，其他色谱条件同美国药典40版方法，对氯二苯甲酮和对氯二苯甲醇两种杂质应分别约在3.050min、3.067min出峰，供试品溶液中两种杂质与溶剂峰仍然重叠；已知杂质对氯二苯甲基哌嗪与未知杂质分离度达不到要求，5种杂质未能达到有效分离。
对比实施例4，参照进口注册标准方法JX20120199检测盐酸左西替利嗪片中有关物质
色谱柱为Waters μBondapak C18 (30cm×3.9mm，10μm)；流动相为0.05%庚烷磺酸钠：乙腈=58:42，用0.5mol/l硫酸溶液调节流动相pH值至2.4；
供试品溶液配制：取本品5片，置 100ml 量瓶中，加乙腈-水（42:58）80ml，振摇使盐酸左西替利嗪溶解，用乙腈-水溶液（体积比为42:58）稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
对照品溶液配制：取盐酸西替利嗪乳糖酯对照品、对氯二苯甲基哌嗪对照品、西替利嗪聚乙二醇酯对照品、对氯二苯甲醇对照品和对氯二苯甲酮对照品，，精密称定，加乙腈-水溶液（体积比为42:58）溶解并定量稀释制成每 1ml 中含 0.25mg 的溶液，作为对照品溶液。
取供试品溶液、对照品溶液各20ul分别注入液相色谱仪，按本发明色谱条件进行洗脱，流动相的流速为1.2ml/min，检测波长为230mg，色谱柱柱温为30℃，记录色谱图，得附图4。详细如表6和表7所示：
表6：对比实施例4条件下供试品溶液检测图谱
序号 保留时间 名称
1 未出峰 盐酸西替利嗪乳糖酯
2 6.692 对氯二苯甲基哌嗪
3 7.529 盐酸左西替利嗪
4 未出峰 西替利嗪聚乙二醇酯
5 未出峰 对氯二苯甲醇
6 未出峰 对氯二苯甲酮
表7：图4检测图谱的相关参数
峰号 保留时间 面积 理论塔板数（USP） 拖尾因子 分离度（USP） 面积%
1 4.63 1113 3294 1.044 -- 0.015
2 5.138 924 8554 1.069 1.865 0.012
3 6.129 1333 5177 1.154 3.521 0.018
4 6.692 2736 6517 -- 1.676 0.036
5 6.919 786 1680 -- 0.45 0.01
6 7.529 7530229 2473 2.502 0.953 99.858
7 12.31 3838 6968 1.417 7.998 0.051
总计 7540958 100
经过实验可知，进口注册标注方法, 盐酸西替利嗪乳糖酯峰应在3.550min左右出峰，供试品溶液中溶剂峰干扰左西替利嗪乳糖酯的检测；左西替利嗪的拖尾因子大于2.0；左西替利嗪聚乙二醇酯峰应在8.517min左右出峰，供试品溶液中左西替利嗪聚乙二醇酯与主峰重叠，无法准确定量。
实施例1 本发明方法检测盐酸左西替利嗪片中有关物质
色谱柱为C18色谱柱（150mm×4.6mm，5μm）；流动相为庚烷磺酸钠溶液：乙腈=62:38，庚烷磺酸钠溶液制备方法为取庚烷磺酸钠1.0g，加水溶解并稀释至1000ml，加0.3ml三乙胺，用0.5mol/L硫酸溶液调节pH值至3.5。
供试品溶液配制：取本品10片，置200ml量瓶中，加流动相约160ml，振摇使盐酸左西替利嗪溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
对照品溶液配制：精密称取盐酸西替利嗪乳糖酯对照品、对氯二苯甲基哌嗪对照品、西替利嗪聚乙二醇酯对照品、对氯二苯甲醇对照品和对氯二苯甲酮对照品，加流动相溶解并分别稀释成浓度为0.25ug/ml、0.25ug/ml、0.25ug/ml、0.25ug/ml、0.5ug/ml的溶液，作为对照品溶液。
取供试品溶液、对照品溶液各20ul分别注入液相色谱仪，按本发明色谱条件进行洗脱，流动相的流速为1.5ml/min，检测波长为230mg，色谱柱柱温为30℃，记录色谱图，得附图5。详细如表8和表9所示：
表8：实施例1条件下供试品溶液检测图谱
序号 保留时间 名称
1 2.542 盐酸西替利嗪乳糖酯
2 4.392 盐酸左西替利嗪
3 6.450 对氯二苯甲基哌嗪
4 未出峰 西替利嗪聚乙二醇酯
5 未出峰 对氯二苯甲醇
6 未出峰 对氯二苯甲酮
表9：图5检测图谱的相关参数
峰号 保留时间 面积 理论塔板数（USP） 拖尾因子 分离度（USP） 面积%
1 2.525 1363 912 / / 0.021
2 3.192 1512 3761 / 2.004 0.023
3 3.358 396 1129 / 0.548 0.006
4 3.783 2095 3117 / 1.267 0.032
5 4.400 6478282 4617 1.30 2.327 99.755
6 5.642 1371 2920 / 3.670 0.021
7 5.875 3688 5007 / 0.622 0.057
8 6.458 1207 5214 1.48 1.691 0.019
9 10.150 1881 8089 1.19 9.124 0.029
10 12.708 2400 8727 1.13 5.139 0.037
总计 6494195 100
根据结果可知，采用本发明方法，西替利嗪聚乙二醇酯出峰时间应约为8.133min左右，供试品溶液中未检出；对氯二苯甲醇出峰时间应约为18.817min，供试品溶液中未检出；对氯二苯甲酮出峰时间应约为45.933min，供试品溶液中未检出；盐酸西替利嗪乳糖酯的出峰时间为2.525min，分离度为2.004；对氯二苯甲基哌嗪的出峰时间为6.458min，分离度为1.691；溶剂峰对各杂质峰均无干扰，盐酸左西替利嗪片中以上5个杂质均能同时检出，且分离度良好。
实施例2 本方法检测盐酸左西替利嗪片中有关物质
色谱柱为C18色谱柱（150mm×4.6mm，5μm）；流动相为庚烷磺酸钠溶液：乙腈=62:38，庚烷磺酸钠溶液制备方法为取庚烷磺酸钠1.0g，加水溶解并稀释至1000ml，加0.3ml二乙胺，用0.5mol/L硫酸溶液调节pH值至3.5。
供试品溶液和对照品溶液与实施例1一致。
取供试品溶液、对照品溶液各20ul分别注入液相色谱仪，按本发明色谱条件进行洗脱，流动相的流速为1.5ml/min，检测波长为230mg，色谱柱柱温为30℃，记录色谱图，得附图6。详细如表10和表11所示：
表10：实施例2条件下对照品溶液检测图谱
序号 保留时间 名称
1 2.787 盐酸西替利嗪乳糖酯
2 4.969 盐酸左西替利嗪
3 7.032 对氯二苯甲基哌嗪
4 9.266 西替利嗪聚乙二醇酯
5 18.800 对氯二苯甲醇
6 44.710 对氯二苯甲酮
表11：图6检测图谱的相关参数
峰号 保留时间 面积 理论塔板数（USP） 拖尾因子 分离度（USP） 面积%
1 2.787 3487 1562 0.951 / 9.030
2 7.032 9669 7673 1.002 14.078 25.041
3 9.226 2350 1802 1.171 3.685 6.087
4 18.800 11660 10159 0.982 11.854 30.198
5 44.710 11446 8244 1.033 19.080 29.644
总计 38612 100.00
根据结果可知，采用本发明方法，混合对照溶液中各杂质之间的分离度均大于1.5，拖尾因子符合规定，溶剂峰对各杂质峰均无干扰，以上5个杂质均能同时检出，且分离度良好。
实施例3 本方法检测盐酸左西替利嗪片中有关物质
色谱柱为C18色谱柱（150mm×4.6mm，5μm）；流动相为庚烷磺酸钠溶液：乙腈=62:38，庚烷磺酸钠溶液制备方法为取庚烷磺酸钠1.0g，加水溶解并稀释至1000ml，加0.3ml氨水，用0.5mol/L硫酸溶液调节pH值至3.5。
供试品溶液和对照品溶液与实施例1一致。
取供试品溶液、对照品溶液各20ul分别注入液相色谱仪，按本发明色谱条件进行洗脱，流动相的流速为1.5ml/min，检测波长为230mg，色谱柱柱温为30℃，记录色谱图，得附图7。详细如表12和表13所示：
表12：实施例3条件下对照品溶液检测图谱
序号 保留时间 名称
1 2.822 盐酸西替利嗪乳糖酯
2 5.007 盐酸左西替利嗪
3 7.131 对氯二苯甲基哌嗪
4 9.404 西替利嗪聚乙二醇酯
5 19.021 对氯二苯甲醇
6 45.248 对氯二苯甲酮
表13：图7检测图谱的相关参数
峰号 保留时间 面积 理论塔板数（USP） 拖尾因子 分离度（USP） 面积%
1 2.822 3587 1589 0.898 / 7.915
2 7.131 10035 7565 0.995 14.102 22.146
3 9.404 3901 1087 1.501 3.095 8.608
4 19.021 12174 10281 1.305 10.170 26.868
5 41.819 5544 7827 1.016 17.264 12.235
6 45.248 10071 9768 0.909 1.843 22.227
总计 45311 100.00
根据结果可知，采用本发明方法，混合对照溶液中各杂质之间的分离度均大于1.5，拖尾因子符合规定，溶剂峰对各杂质峰均无干扰，以上5个杂质均能同时检出，且分离度良好。
实施例4 本方法检测盐酸左西替利嗪片中有关物质
色谱柱为C18色谱柱（150mm×4.6mm，5μm）；流动相为庚烷磺酸钠溶液：乙腈=60:40，庚烷磺酸钠溶液制备方法为取庚烷磺酸钠1.0g，加水溶解并稀释至1000ml，加0.3ml三乙胺，用0.5mol/L硫酸溶液调节pH值至3.5。
对照品溶液与实施例1一致。
取对照品溶液20ul分别注入液相色谱仪，按本发明色谱条件进行洗脱，流动相的流速为1.5ml/min，检测波长为230mg，色谱柱柱温为30℃，记录色谱图，得附图8。详细如表14和表15所示：
表14：实施例4条件下对照品溶液检测图谱
序号 保留时间 名称
1 2.249 盐酸西替利嗪乳糖酯
2 3.913 盐酸左西替利嗪
3 5.467 对氯二苯甲基哌嗪
4 6.612 西替利嗪聚乙二醇酯
5 15.274 对氯二苯甲醇
6 35.475 对氯二苯甲酮
表15：图8检测图谱的相关参数
峰号 保留时间 面积 理论塔板数（USP） 拖尾因子 分离度（USP） 面积%
1 2.027 1424 4187 1.166 / 3.657
2 2.249 2745 1945 1.137 1.344 7.049
3 5.467 10121 6989 1.005 13.826 25.985
4 6.612 3457 3714 1.081 3.293 9.876
5 15.271 11800 10173 0.996 16.662 30.295
6 35.475 9402 10126 1.068 20.042 24.138
总计 38949 100.00
根据结果可知，采用本发明方法，以上5个对照品杂质，盐酸西替利嗪乳糖酯出峰处有溶剂峰干扰，分离度不符合要求，故该方法无法对盐酸西替利嗪乳糖酯杂质进行准确定量，需优化色谱条件。
以上内容是结合具体的实施方式对本申请所作的进一步详细说明，不能认定本申请的具体实施只局限于这些说明。对于本申请所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本申请的保护范围。

Claims (10)

1.一种高效液相色谱法分离和测定盐酸左西替利嗪及其有关物质的方法，色谱柱为C18色谱柱，用含有庚烷磺酸钠溶液和乙腈混合溶液的流动相洗脱后用紫外检测器进行检测；
所述盐酸左西替利嗪有关物质为左西替利嗪乳糖酯、左西替利嗪聚乙二醇酯、对氯二苯甲酮、对氯二苯甲醇、对氯二苯甲基哌嗪；
其特征在于，流动相中还含有碱，庚烷磺酸钠溶液ph值为2.4-4.0；
所述分离和测定，包括单独分离和检测某一种有关物质，也包括同时分离和检测上述5种有关物质。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的碱为三乙胺、二乙胺或氨水中的一种。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的碱为三乙胺。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，庚烷磺酸钠溶液ph值为3.0-3.5。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，庚烷磺酸钠溶液ph值为3.5。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，流动相中庚烷磺酸钠溶液制备方法为精密称定庚烷磺酸钠，用水溶解稀释配制成1mg/ml溶液，加入三乙胺，用硫酸溶液调节ph值至3.5。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相为庚烷磺酸钠溶液：乙腈体积比为61-63:39-37。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，流动相为庚烷磺酸钠溶液：乙腈体积比为62:68。
9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，分析条件为：色谱柱适用的柱温范围为20-40℃；流动相的流速为0.5-1.5ml/min；紫外检测器的检测波长为230nm。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，分析条件为：色谱柱柱温为30℃；流动相的流速为1.5ml/min。
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