CN111157630B - 一种油酸苄酯及黄体酮注射液中油酸苄酯的检测方法 - Google Patents
一种油酸苄酯及黄体酮注射液中油酸苄酯的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111157630B CN111157630B CN201811165210.0A CN201811165210A CN111157630B CN 111157630 B CN111157630 B CN 111157630B CN 201811165210 A CN201811165210 A CN 201811165210A CN 111157630 B CN111157630 B CN 111157630B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- benzyl oleate
- acetonitrile
- benzyl
- oleate
- high performance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
Abstract
本发明提供一种油酸苄酯及黄体酮注射液中油酸苄酯的检测方法，采用辛烷基硅烷键合硅胶柱，流动相选用乙腈和水，乙腈和水的比例为94:6～96:4，选用检测器为紫外检测器，检测波长为200‑210nm。本发明的有益效果是该检测方法可用于油酸苄酯含量和有关物质的检测；还可以用于检测黄体酮注射液中的油酸苄酯杂质，并可用于指导稳定性样品的考察。
Description
技术领域
本发明属于化学分析领域，尤其是涉及一种油酸苄酯的检测方法。
背景技术
黄体酮注射液用于治疗月经失调，如闭经和功能性子宫出血、黄体功能不足、先兆流产和习惯性流产、经前期紧张性综合症的治疗。黄体酮注射液为黄体酮的灭菌油溶液，主要成分为黄体酮，辅料为注射用油，以及抑菌剂苯甲醇。一般油脂的主要成分为油酸和亚油酸的甘油三酯。本品的处方中含有苯甲醇，二者可能发生酯交换反应，产生杂质油酸苄酯。随着药品研发水平的提升以及相关制剂的不良反应日益被关注，药物从业人员对制剂产品中的有关物质的关注度也在日渐提高。对于最大日剂量为100mg的黄体酮注射液，对应苯甲醇的日剂量为200mg，大豆油的日剂量为1562mg，根据ICH Q3b，日剂量10mg～2g的制剂品种，杂质的鉴定限为0.2％或2mg(2mg/200mg+1562mg)＝0.11％)(取最小值)。
在药品中因注射剂型是直接入血或肌肉，安全风险等级较高，更需要对其中的潜在杂质进行检测。经查询现有技术，未查到任何文献及药典对油酸苄酯的测定方法进行报道和收载。因此，我们迫切需要建立一种新的分析方法，用于检测油酸苄酯的含量测定，尤其适合用于黄体酮注射液的油酸苄酯的含量的检测。美国药典USP、日本药典JP、英国药典BP等均记载了黄体酮注射液的检测方法，日本药典检测黄体酮注射液用到十八烷基硅烷化二氧化硅色谱柱，以7:3的乙腈：水为流动相，35℃柱温，241nm的紫外检测波长；美国药典检测黄体酮注射液用到L1色谱柱，流动相用到乙醇：水为11:9，40℃柱温，254nm的紫外检测波长；英国药典用到了C18色谱柱，流动相乙腈和水的梯度洗脱；药典中检测黄体酮注射液所用色谱柱为C18色谱柱，我们在研发过程中分别用过美国药典、日本药典和英国药典的方法均无法分离出黄体酮注射液中的油酸苄酯杂质，没有检测峰。
发明内容
本发明的目的是提供一种检测油酸苄酯的方法，尤其提供一种能检测黄体酮注射液中油酸苄酯的方法，该方法专属性好，重复性好，灵敏度高。
本发明的技术方案是：一种油酸苄酯的高效液相分析方法，采用辛烷基硅烷键合硅胶柱，流动相选用乙腈和水，乙腈和水的比例为94:6～96:4，选用检测器为紫外检测器，检测波长为200-210nm。
所述油酸苄酯的高效液相分析方法中，所述乙腈和水的比例选择95:5；
所述油酸苄酯的高效液相分析方法中，所述检测波长为205nm；
所述油酸苄酯的高效液相分析方法中，柱温选自30～50℃；
所述油酸苄酯的高效液相分析方法中，柱温优选40℃；
所述油酸苄酯的高效液相分析方法中，进样量为10～30μl；
所述油酸苄酯的高效液相分析方法中，进样量优选20μl；
所述油酸苄酯的高效液相分析方法中，流速为0.8～1.2ml/min；
所述油酸苄酯的高效液相分析方法中，流速优选1.0ml/min；
所述油酸苄酯的高效液相分析方法中，该方法所检测的定量限为0.017微克/ml；
所述油酸苄酯的高效液相分析方法中，该方法的检出限为0.0056μg/ml。
以上油酸苄酯的高效液相分析方法在黄体酮注射液中的应用：
一种黄体酮注射液中油酸苄酯的高效液相分析方法，采用辛烷基硅烷键合硅胶柱，流动相选用乙腈和水，乙腈和水的比例为94:6～96:4，选用检测器为紫外检测器，检测波长为200-210nm。
所述黄体酮注射液中油酸苄酯的高效液相分析方法，所述溶样液为四氢呋喃：乙腈为1:99。
本申请中根据油酸苄酯的理化性质，开发了一套液相色谱体系对其进行测定。检测波长的筛选，经紫外全扫，油酸苄酯的紫外吸收基本接近末端吸收，有两种可选择波长范围，因195nm波长范围处有干扰，最终选择205nm作为检测波长。流动相比例的筛选，选择了多组不同比例的流动相乙腈-水作为流动相的筛选，最终确定选择保留时间适中且各种物质对油酸苄酯的检测没有影响的乙腈-水的比例(94:6～96:4)作为洗脱流动相。本方法填补了用液相色谱方法检测油酸苄酯的空白，该检测方法可用于油酸苄酯含量和有关物质的检测；还可以用于检测黄体酮注射液中的油酸苄酯杂质，并可用于指导稳定性样品的考察。
附图说明
图1是实施例1中油酸苄酯的高相液相色谱图
图2是实施例2中的黄体酮注射液的高相液相色谱图
具体实施方式
下面将通过实施例对本发明作进一步的描述，这些描述并不是对本发明内容作进一步的限定。本领域的技术人员应理解，对本发明的技术特征所作的等同替换，或相应的改进，仍属于本发明的保护范围之内。
实施例1油酸苄酯的高效液相色谱检测
样品溶液：将油酸苄酯标准品10mg用1ml THF溶解，然后乙腈定容至10ml；
对照溶液，将样品溶液用乙腈稀释100倍后制备得到对照溶液；
空白溶液：1:99的四氢呋喃：乙腈；
精密量取空白溶液，样品溶液和对照溶液各20μl注入液相色谱仪；
色谱条件：
色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶柱(4.6×250mm，5μm)
流动相：乙腈：水为95:5
柱温：40℃
流速：1.0ml/min
检测波长：205nm
样品检测结果见附图1，保留时间为10.215的峰的位置为油酸苄酯；
实施例2黄体酮注射液中油酸苄酯的检测
供试品溶液配制：
原料(黄体酮)：将50mg的黄体酮用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
样品(黄体酮注射液)：取1ml样品先用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
大豆油(辅料)：取1ml大豆油先用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
油酸苄酯：将油酸苄酯标准品10mg用1ml THF溶解，然后乙腈定容至10ml；
精密量取各溶液20μl注入液相色谱仪；
色谱条件：
色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶柱(4.6×250mm，5μm)
流动相：乙腈：水为95:5
柱温：40℃
流速：1.0ml/min
检测波长：205nm
检测结果：原料的RT为3.354、空白溶液(溶剂)RT为2.786、大豆油RT为11.672、13.862、16.536，油酸苄酯RT10.215，各物质对油酸苄酯的检出均无干扰。
黄体酮注射液检测结果见附图2。出峰物质和分离度见下表
| 出峰顺序 | 物质 | 保留时间 | 分离度 |
| 1 | 溶剂 | 2.785 | |
| 2 | 黄体酮 | 3.353 | 2.36 |
| 3 | 未知杂质1 | 8.231 | 13.94 |
| 4 | 油酸苄酯 | 10.201 | 8.65 |
| 5 | 大豆油物质1 | 11.662 | 7.46 |
| 6 | 大豆油物质2 | 13.850 | 9.64 |
| 7 | 大豆油物质3 | 16.320 | 9.83 |
对照实施例2-1黄体酮注射液中油酸苄酯的检测
供试品溶液配制：
原料(黄体酮)：将50mg的黄体酮用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
样品(黄体酮注射液)：取1ml样品先用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
大豆油：取1ml大豆油先用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
油酸苄酯：将油酸苄酯标准品10mg用1ml THF溶解，然后乙腈定容至10ml；
以上样品混样，精密量取混合溶液20μl注入液相色谱仪；
色谱条件：
色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶柱(4.6×250mm，5μm)
流动相：乙腈：水为7:3(同日本药典中黄体酮注射液的检测方法)
柱温：40℃
流速：1.0ml/min
检测波长：205nm
检测结果中，油酸苄酯的保留时间在22.594min，样品中的油酸苄酯与大豆油物质1的峰有重合，不能分开，分离度为0.94。
对照实施例2-2黄体酮注射液中油酸苄酯的检测
供试品溶液配制：
原料(黄体酮)：将50mg的黄体酮用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
样品(黄体酮注射液)：取1ml样品先用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
大豆油：取1ml大豆油先用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
油酸苄酯：将油酸苄酯标准品10mg用1ml THF溶解，然后乙腈定容至10ml；
以上样品混样，精密量取混合溶液20μl注入液相色谱仪；
色谱条件：
色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶柱(4.6×250mm，5μm)
流动相：乙腈：水为90:10
柱温：40℃
流速：1.0ml/min
检测波长：205nm
检测结果中，油酸苄酯的保留时间在15.69min，样品中的油酸苄酯与未知杂质1的峰有重合，不能分开，分离度为0.83。
对照实施例2-3黄体酮注射液中油酸苄酯的检测
供试品溶液配制：
原料(黄体酮)：将50mg的黄体酮用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
样品(黄体酮注射液)：取1ml样品先用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
大豆油：取1ml大豆油先用1mlTHF溶解，再用乙腈定容至10ml；
油酸苄酯：将油酸苄酯标准品10mg用1ml THF溶解，然后乙腈定容至10ml；
以上样品混样，精密量取混合溶液20μl注入液相色谱仪；
色谱条件：
色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶柱(4.6×250mm，5μm)
流动相：乙腈：水为98:2
柱温：40℃
流速：1.0ml/min
检测波长：205nm
检测结果中，油酸苄酯的保留时间在5.198min，样品中的油酸苄酯与未知杂质1的峰有重合，不能分开，分离度为0.79。
以上对本发明的一个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。
Claims (7)
1.一种油酸苄酯的高效液相色谱分析方法，其特征在于：采用辛烷基硅烷键合硅胶柱，流动相选用乙腈和水，乙腈和水的比例为94:6～96:4，选用检测器为紫外检测器，检测波长为200-210nm，柱温为30～50℃；所述分析方法中样品溶液是将油酸苄酯标准品10mg用1mlTHF溶解，然后乙腈定容至10ml，将样品溶液用乙腈稀释100倍后制备得到对照溶液，空白溶液是1:99的四氢呋喃：乙腈溶液。
2.根据权利要求1所述的一种油酸苄酯的高效液相色谱分析方法，其特征在于：所述乙腈和水的比例为95:5。
3.根据权利要求1所述的一种油酸苄酯的高效液相色谱分析方法，其特征在于：所述检测波长为205nm。
4.根据权利要求1所述的一种油酸苄酯的高效液相色谱分析方法，其特征在于：所述柱温为40℃。
5.根据权利要求1所述 的一种油酸苄酯的高效液相色谱方法，其特征在于：进样量为10～30μl。
6.根据权利要求1所述的一种油酸苄酯的高效液相色谱分析方法，其特征在于：该方法的流速为0.8～1.2ml/min。
7.权利要求1所述的油酸苄酯的高效液相色谱分析方法在黄体酮注射液中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811165210.0A CN111157630B (zh) | 2018-11-07 | 2018-11-07 | 一种油酸苄酯及黄体酮注射液中油酸苄酯的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811165210.0A CN111157630B (zh) | 2018-11-07 | 2018-11-07 | 一种油酸苄酯及黄体酮注射液中油酸苄酯的检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111157630A CN111157630A (zh) | 2020-05-15 |
| CN111157630B true CN111157630B (zh) | 2022-12-06 |
Family
ID=70554390
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201811165210.0A Active CN111157630B (zh) | 2018-11-07 | 2018-11-07 | 一种油酸苄酯及黄体酮注射液中油酸苄酯的检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111157630B (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0163452A1 (en) * | 1984-05-22 | 1985-12-04 | Eli Lilly And Company | A novel process for carbon-carbon bond formation at the C-4 position of 3-acylaminoazetidinones |
| WO2011090812A2 (en) * | 2010-01-22 | 2011-07-28 | Archer Daniels Midland Company | Processes for making high purity renewable source-based plasticizers and products made therefrom |
| CN107449834A (zh) * | 2016-05-31 | 2017-12-08 | 江苏正大丰海制药有限公司 | 一种氯维地平及其脂肪乳注射液中有关物质的检测方法 |
| CN108169370A (zh) * | 2017-12-19 | 2018-06-15 | 万舒（北京）医药科技有限公司 | 测定生物样品中丙酮酸乙酯及其代谢物丙酮酸的方法 |
| CN108508109A (zh) * | 2018-03-29 | 2018-09-07 | 西北大学 | 丙烯酸高碳烷基酯的含量检测方法 |
-
2018
- 2018-11-07 CN CN201811165210.0A patent/CN111157630B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0163452A1 (en) * | 1984-05-22 | 1985-12-04 | Eli Lilly And Company | A novel process for carbon-carbon bond formation at the C-4 position of 3-acylaminoazetidinones |
| WO2011090812A2 (en) * | 2010-01-22 | 2011-07-28 | Archer Daniels Midland Company | Processes for making high purity renewable source-based plasticizers and products made therefrom |
| CN107449834A (zh) * | 2016-05-31 | 2017-12-08 | 江苏正大丰海制药有限公司 | 一种氯维地平及其脂肪乳注射液中有关物质的检测方法 |
| CN108169370A (zh) * | 2017-12-19 | 2018-06-15 | 万舒（北京）医药科技有限公司 | 测定生物样品中丙酮酸乙酯及其代谢物丙酮酸的方法 |
| CN108508109A (zh) * | 2018-03-29 | 2018-09-07 | 西北大学 | 丙烯酸高碳烷基酯的含量检测方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 2-(4-溴甲基苯基)-萘并[2,3,d]咪唑的合成及应用;周宏兵 等;《中国药科大学学报》;20000630(第2期);第84-87页 * |
| Multiplexed analysis of steroid hormones in saliva by LC-MS/MS with 2-hydrazinopyridine derivatization;NirosaNadarajah 等;《Clinical Mass Spectrometry》;20170831;第4-5卷;第1-10页 * |
| 高效液相色谱法测定薏苡仁中甘油三油酸酯的含量;陈勇 等;《中国现代应用药学》;20050630;第22卷(第03期);第246-247页 * |
| 高效液相色谱法测定黄体酮注射液的有关物质;高娟 等;《天津药学》;20090630;第21卷(第03期);第24-26页 * |
| 黄体酮的合成工艺改进;吴庆安 等;《合成化学》;20160229;第24卷(第02期);第174-177页 * |
| 黄体酮阴道环中有关物质检测的方法学研究;邱顺晨 等;《中国计划生育学杂志》;20180131;第26卷(第01期);第21-24页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111157630A (zh) | 2020-05-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108051534B (zh) | 一种快速筛查中成药和保健品中非法添加的132种化学药物的方法 | |
| Gomis et al. | Simultaneous determination of fat-soluble vitamins and provitamins in milk by microcolumn liquid chromatography | |
| Luo et al. | Simultaneous determination of thiamphenicol, florfenicol and florfenicol amine in swine muscle by liquid chromatography–tandem mass spectrometry with immunoaffinity chromatography clean-up | |
| CN110726788B (zh) | 一种高效液相色谱法分离和测定盐酸左西替利嗪及其有关物质的方法 | |
| CN104749269A (zh) | 一种利用hplc测定阿格列汀原料药及制剂中对映异构体杂质的方法 | |
| Hu et al. | Stand out from matrix: Ultra-sensitive LC− MS/MS method for determination of histamine in complex biological samples using derivatization and solid phase extraction | |
| CN111141850A (zh) | 对乙酰氨基酚原料药有关物质的液相检测分离方法 | |
| CN106370739A (zh) | 康复新液制剂指纹图谱的质量测定方法及标准指纹图谱 | |
| Lee et al. | Simultaneous analysis method for polar and non-polar ginsenosides in red ginseng by reversed-phase HPLC-PAD | |
| CN107449846B (zh) | Hplc-ms测定小儿安神补脑颗粒中有效成分的方法 | |
| CN111157630B (zh) | 一种油酸苄酯及黄体酮注射液中油酸苄酯的检测方法 | |
| CN107167535A (zh) | 一种反相液相色谱法检测雷替曲塞对映异构体的方法 | |
| CN111307957A (zh) | 药物制剂中吐温80含量的检测方法 | |
| CN101169394A (zh) | 化妆品中克林霉素的高效液相色谱检测方法 | |
| Kardani et al. | Direct cholesterol and β-sitosterol analysis in food samples using monolithic molecularly-imprinted solid-phase microextraction fibers coupled with high performance liquid chromatography | |
| CN108181386B (zh) | 一种分离测定醋酸阿比特龙中间体中有关物质的方法 | |
| CN102901784A (zh) | 醋氯芬酸原料药中甲酸的顶空气相色谱检测方法 | |
| CN109507353A (zh) | 一种黑小麦麸皮中花色苷的高效液相色谱检测方法 | |
| CN102121924B (zh) | 一种醋酸甲基泼尼松龙及其杂质的分析方法 | |
| CN109668982B (zh) | 一种高效液相色谱法分离测定度他雄胺软胶囊中杂质a的方法 | |
| CN114280176A (zh) | 一种hplc检测恶拉戈利中有关物质的方法 | |
| CN115032284A (zh) | 一种分离检测咀嚼片中有关物质的方法 | |
| CN108226349B (zh) | 一种同时测定曲咪新乳膏中多种抑菌剂的检测方法 | |
| CN112666278A (zh) | 华佗再造丸中士的宁的限量检测方法 | |
| Abro et al. | HPLC determination of betamethasone and prednisolone in urine samples using monolithic column |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| CB02 | Change of applicant information | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 300 457 days north of Xinye Jiujie Street and east of Xinhuan West Road, Dongli District Development Zone, Tianjin Applicant after: Tianjin Pharmaceutical Research Institute Co.,Ltd. Address before: 300 457 days north of Xinye Jiujie Street and east of Xinhuan West Road, Dongli District Development Zone, Tianjin Applicant before: TIANJIN PHARMACEUTICALS Group Corp. |
|
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |