CN110651711A - 一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法 - Google Patents

一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110651711A
CN110651711A CN201910883626.4A CN201910883626A CN110651711A CN 110651711 A CN110651711 A CN 110651711A CN 201910883626 A CN201910883626 A CN 201910883626A CN 110651711 A CN110651711 A CN 110651711A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture
culture medium
branches
variety
seedling
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201910883626.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110651711B (zh
Inventor
刘莉
冯瑞芳
王英
王元基
刘聪
孙鲁龙
杨亚州
赵政阳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Northwest A&F University
Original Assignee
Northwest A&F University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Northwest A&F University filed Critical Northwest A&F University
Priority to CN201910883626.4A priority Critical patent/CN110651711B/zh
Publication of CN110651711A publication Critical patent/CN110651711A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110651711B publication Critical patent/CN110651711B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
    • A01G24/20—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material
    • A01G24/22—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material containing plant material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G31/00—Soilless cultivation, e.g. hydroponics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture

Abstract

本发明属于果树苗木栽培技术领域，公开了一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法，采用培养基为MS+PVP 2.0g·L‑1的初代培养；采用培养基为MS+6‑BA 0.5mg·L‑1～0.75mg·L‑1+IBA 0.02mg·L‑1～0.05mg·L‑1处理的继代培养；采用生根培养基为1/2MS+IBA 0.75mg·L‑1～1.1mg·L‑1的生根培养；用育苗基质苔藓炼苗移栽，实现苹果品种的快速繁殖。本发明对于生产优质晚熟的换代品种苹果苗木，具有重要意义。

Description

一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法
技术领域
本发明属于果树苗木栽培技术领域，尤其涉及一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法。
背景技术
苹果新品种瑞阳、瑞雪是西北农林科技大学教授、陕西省苹果首席专家赵政阳教授带领其团队，历时20余年，倾尽心血、不断努力，实现了苹果新品种选育的重要突破，育成的2个优质晚熟苹果新品种，于2019年3月29日均已通过国家林木良种审定。其中，瑞阳为优质、丰产、晚熟、红色的品种，由富士及秦冠做亲本杂交选育而成；瑞雪为优质、晚熟、黄色的品种，由秦富1号和粉红女士杂交选育而成。瑞阳、瑞雪品种育成后几年来，已引起我国苹果主产区广泛关注，有望成为我国苹果晚熟品种的换代品种。目前，我国的苹果生产模式也逐步由传统低效郁闭果园模式转变为现代化矮砧密植集约高效生产栽培模式，苹果苗木是苹果生产栽培的基础，苗木的质量直接影响着果树正常生长。苹果苗木一旦受到病毒的侵染，严重影响果树的生长及果实品质和产量等正常生理机制，这成为中国苹果产业发展的隐患。
综上所述，现有技术存在的问题是：
我国苹果品种单一，结构雷同、区域特色不明显，自育品种所占比例小，新品种就更小，想要从根本上解决问题，就应该加快自育新品种的苗木繁殖，拓展市场，优化品种结构，实现差异化发展，才能在国际市场占据一席之地。传统的果树苗木繁殖如直接进行大规模芽接，虽然在一定程度上能够解决果树苗木的繁殖，但是苗木受到病毒侵染的概率就大大加重，严重影响果树生长。
今后一段时期是我国苹果大规模更新换代的关键时期，如何从新品种的苗木方面提供支持和保障便成为一个值得高度重视的问题。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法。
本发明是这样实现的，一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法，所述苹果品种快速繁殖方法包括采用培养基为MS+PVP 2.0g·L-1的初代培养；采用继代培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1～0.75mg·L-1+IBA 0.02mg·L-1～0.05mg·L-1的继代培养；采用生根培养基为1/2MS+IBA 0.75mg·L-1～1.1mg·L-1的生根培养；用育苗基质苔藓炼苗移栽，实现苹果品种的快速繁殖。
进一步，所述苹果品种瑞阳快速繁殖方法通过采用培养基为MS+PVP 2.0g·L-1的初代培养；采用继代培养基为MS+6-BA 0.75mg·L-1+IBA 0.05mg·L-1的继代培养；采用生根培养基为1/2MS+IBA 0.9mg·L-1的生根培养；然后用育苗基质苔藓炼苗移栽，实现苹果新品种瑞阳的快速繁殖。
进一步，所述苹果品种快速繁殖方法包括以下步骤：
步骤一，以苹果新品种瑞阳为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，12月份取1年生休眠枝条，休眠枝经冬季砂藏后，于次年3月取出经1％NaClO溶液浸泡10min，25℃左右室温内水培，每天换水并剪掉旧剪口，枝条上其它剪口用封口膜封住，当水培枝条上的芽抽生为1.5㎝长度时，将茎尖取下并去除展开叶片备用；
步骤二，将处理好的茎尖用吸水纸吸干表面水分，接种到含2.0g·L-1的聚乙烯比咯烷酮的MS培养基中进行暗培养3天，之后转入光下培养，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂；
步骤三，将获得的无菌外植体接种到MS+6-BA 0.75mg·L-1+IBA 0.05mg·L-1的培养基中进行继代培养；
步骤四，选择继代培养3周获得的生长健壮且高度大于2㎝的植株，接种于1/2MS+IBA 0.9mg·L-1的生根培养基中进行培养；
步骤五，当组培苗根系长到0.5cm时，将生根苗移到自然光照下进行强光闭瓶炼苗1周，之后逐渐开瓶炼苗2-3d，将生根苗从培养基中取出，清洗掉根部附着的培养基，放入浓度1％的多菌灵和0.1mg·L-1生根粉混合液中浸泡3min后，移栽至放有苔藓的营养钵中，弱光培养3天，再逐渐转入正常光照下培养。
进一步，所述步骤一中：取材为冬季休眠枝，休眠枝经冬季砂藏后，于次年3月取出经1％NaClO溶液浸泡10min，当枝条上的芽抽生为1.5cm时，剪取嫩芽，去除展开叶片，自来水冲洗30min，用75％酒精处理5～8s，0.1％HgCl2处理时间为8min，无菌水冲洗5～7次；
所述步骤二中：放置在光照周期16h/d、光照强度2000lux，26℃条件下进行培养；
所述步骤三中：新品种瑞阳的最优培养处理为M8处理，每升附加30g蔗糖，8g琼脂；
所述步骤四中：新品种瑞阳的培养处理为M12处理，每升附加20g蔗糖，8g琼脂；
所述步骤五中：移栽苗的管理方式为移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第1周采用浓度为0.1％多菌灵溶液进行喷灌，第2周每天用清水喷灌1次，保持基质湿润透气，待生根苗抽生出新芽之后移出遮阴网。
进一步，所述苹果品种瑞雪快速繁殖方法通过采用培养基为MS+PVP 2.0g·L-1的初代培养；采用继代培养基为MS+6-BA 0.5mg·L-1+IBA 0.02mg·L-1的继代培养；采用生根培养基为1/2MS+IBA 0.75mg·L-1的生根培养；然后用育苗基质苔藓炼苗移栽，实现苹果新品种瑞雪的快速繁殖。
进一步，所述苹果品种瑞雪快速繁殖方法包括以下步骤：
步骤一，以苹果新品种瑞雪为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，12月份取1年生休眠枝条，休眠枝经冬季砂藏后，于次年3月取出经1％NaClO溶液浸泡10min，25℃室温内水培，每天换水并剪掉旧剪口，枝条上其它剪口用封口膜封住，当水培枝条上的芽抽生为1.5㎝长度时，将茎尖取下并去除展开叶片备用；
步骤二，将处理好的茎尖用吸水纸吸干表面水分，接种到含2.0g·L-1的聚乙烯比咯烷酮的MS培养基中进行暗培养3天，之后转入光下培养，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂；
步骤三，将获得的无菌外植体接种到MS+6-BA 0.5mg·L-1+IBA 0.02mg·L-1的培养基中进行继代培养；
步骤四，选择继代培养3周获得的生长健壮且高度大于2㎝的植株，接种于1/2MS+IBA 0.75mg·L-1的生根培养基中进行培养；
步骤五，当组培苗根系长到0.5cm时，将生根苗移到自然光照下进行强光闭瓶炼苗1周，之后逐渐开瓶炼苗2-3d，将生根苗从培养基中取出，清洗掉根部附着的培养基，放入浓度1％的多菌灵和0.1mg·L-1生根粉混合液中浸泡3min后，移栽至放有苔藓的营养钵中，弱光培养3天，再逐渐转入正常光照下培养。
进一步，所述步骤一中：取材方式为冬季休眠枝，休眠枝经冬季砂藏后，于次年3月取出经1％NaClO溶液浸泡10min，当枝条上的芽抽生为1.5cm时，剪取嫩芽，去除展开叶片，自来水冲洗30min，用75％酒精处理5～8s，0.1％HgCl2处理最佳时间为8min，无菌水冲洗5～7次；
所述步骤二中：放置在光照周期16h/d、光照强度2000lux，26℃条件下进行培养；
所述步骤三中：新品种瑞雪的培养处理为N4处理，每升附加30g蔗糖，8g琼脂；
所述步骤四中：新品种瑞雪的培养处理为N8处理，每升附加20g蔗糖，8g琼脂；
所述步骤五中：移栽苗的管理方式为移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第1周采用浓度为0.1％多菌灵溶液进行喷灌，第2周每天用清水喷灌1次，保持基质湿润透气待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮阴网。
综上所述，本发明的优点及积极效果为：本发明通过采用培养基为MS+PVP2.0mg·L-1的培养基初代培养，冬季休眠枝的取材方式下瑞阳和瑞雪外植体成活率为43.8％、37.6％；0.1％HgCl2处理8min茎尖时外植体的成活率分别为22.5％、24.1％，有利于瑞阳和瑞雪组培苗的建立；针对苹果新品种瑞阳采用MS+6-BA0.75mg·L-1+IBA 0.05mg·L-1处理的继代培养，扩繁系数高达8.73，而苹果新品种瑞雪采用MS+6-BA 0.5mg·L-1+IBA0.02mg·L-1处理的继代培养，扩繁系数高达5.38；采用1/2MS生根培养基，瑞阳、瑞雪品种分别采用IBA浓度为：0.9mg·L-1、0.75mg·L-1的生根培养，生根率分别为46.2％、47.3％；用育苗基质苔藓进行炼苗移栽，瑞阳和瑞雪的成活率为85.6％和95.2％；重复对苹果新品种瑞阳和瑞雪进行继代培养、生根培养和移栽，能够在较短时间内实现苹果新品种瑞阳和瑞雪的快速繁殖。通过组织培养技术保留了瑞阳和瑞雪品种的优良特性，有利于优良特性的保存，为苹果瑞阳、瑞雪的无病毒苗木生产提供了高效便捷的繁育技术，促进苹果产业的进一步发展。本发明建立一种苹果新品种瑞阳和瑞雪组培快速繁殖的方法，对于生产优质晚熟的苹果更新换代品种苗木，具有重要意义。
附图说明
图1是本发明实施例提供的苹果瑞阳和瑞雪品种快速繁殖方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法及应用技术，下面结合附图对本发明作详细的描述。
如图1所示，本发明实施例提供的苹果品种快速繁殖方法包括以下步骤：
S101：采用培养基为MS+PVP 2.0g·L-1的培养基初代培养；
S102：采用培养基为MS+6-BA 0.5mg·L-1～0.75mg·L-1+IBA 0.02mg·L-1～0.05mg·L-1的继代培养；
S103：采用生根培养基为1/2MS+IBA 0.75mg·L-1～1.1mg·L-1的生根培养；
S104：用育苗基质苔藓炼苗移栽，实现苹果品种的快速繁殖。
结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步的描述。
实施例1
本发明实施例提供的苹果新品种瑞阳快速繁殖方法包括以下步骤：
第一步，以苹果新品种瑞阳健康母树上一年生枝条为材料，休眠枝经冬季砂藏后，于次年春天取出经1％NaClO溶液浸泡10min，25℃左右室温内水培(无需添加他物)，每天换水并剪掉旧剪口，枝条上其它剪口用封口膜封住，当水培枝条上的芽抽生为1.5㎝左右长度时，将茎尖取下并去除展开叶片，自来水冲洗30min，用75％酒精处理5～8s，0.1％HgCl2处理8min，无菌水冲洗5～7次备用；
第二步，将处理好的茎尖用吸水纸吸干表面水分，接种到含2.0mg·L-1的MS培养基中进行暗培养3天，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂，之后转入光照2000lux，光周期16/8h，温度25℃条件下进行初代培养；
第三步，将获得的无菌外植体接种到MS+6-BA 0.75mg·L-1+IBA 0.05mg·L-1的培养基中进行继代培养，光照条件设置为2000lux，温度条件设置为25℃，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂；
第四步，选择继代培养3周获得的生长健壮且高度大于2㎝的植株，接种于1/2MS+IBA 0.9mg·L-1的生根培养基中进行培养，光照条件设置为2000lux，温度条件设置为25℃，每升培养基附加20g蔗糖，8g琼脂；
第五步，当组培苗根系长到0.5cm时，将生根苗移到自然光照下进行强光闭瓶炼苗1周左右，之后逐渐开瓶炼苗2-3d，将生根苗从培养基中取出，清洗掉根部附着的培养基，放入浓度1％的多菌灵和0.1mg·L-1生根粉混合液中浸泡3min后，移栽至放有苔藓的营养钵中，弱光培养3天，再逐渐转入正常光照下培养。
在第五步中，移栽苗的管理方式为移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第1周采用浓度为0.1％多菌灵溶液进行喷灌，第2周每天用清水喷灌1次，保持基质湿润透气，待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮阴网。
本发明实施例提供的苹果新品种瑞阳快速繁殖方法具体包括以下步骤：
步骤一，初代培养
以苹果新品种瑞阳为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，利用不同的取材方法(冬季休眠枝经砂藏后取出在1％NaClO溶液中浸泡10min；萌芽前；萌芽后)，25℃左右室温内水培(无需添加他物)，每天换水并剪掉旧剪口，枝条上其它剪口用封口膜封住，当水培枝条上的芽抽生为1.5㎝左右长度时，将茎尖取下并去除展开叶片，自来水冲洗30min，用75％酒精处理5～8s，0.1％HgCl2处理(6、8、10、12min)，无菌水冲洗5～7，将处理好的茎尖用吸水纸吸干表面水分，接种到含2.0mg·L-1的MS培养基中进行暗培养3天，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂，每个三角瓶接3个芽，每处理20瓶，之后转入光照2000lux，光周期16/8h，25℃条件下进行初代培养，2周后调查0.1％HgCl2不同处理时间下外植体的褐化率、污染率、成活率，以及不同取材方式下外植体的成活率，最终得出苹果新品种瑞阳以冬季休眠枝的取材方式为佳，外植体成活率最高为43.8％，0.1％HgCl2处理时间最佳为8min，此时褐化率、污染率、成活率分别为50.6％、26.9％、22.5％。
步骤二，继代培养
将获得的无菌外植体接种到含有不同IBA浓度的MS培养基中进行继代培养，每升附加30g蔗糖，8g琼脂，每瓶3株，每个处理20瓶，重复3次，苹果新品种瑞阳的最优培养处理为M8处理，即MS+6-BA0.75 mg·L-1+IBA0.05 mg·L-1(琼脂8g·L-1，光照2000lux)；
步骤三，生根培养
选择继代培养3周获得的生长健壮，且高度大于2㎝的植株，接种于1/2MS+不同浓度IBA处理(0、0.6、0.75、0.9、1.1mg·L-1)的生根培养基中进行生根培养，每瓶接种3个，每个处理20瓶，重复3次，得到瑞阳最适宜的生根培养基为1/2MS+IBA0.9 mg·L-1(蔗糖20g·L-1，琼脂8g·L-1)；
步骤四，炼苗移栽
当组培苗根系长到0.5cm时，将生根苗移到自然光照下进行强光闭瓶炼苗1周左右，之后逐渐开瓶炼苗2-3d，将生根苗从培养基中取出，清洗掉根部附着的培养基，放入浓度1％的多菌灵和0.1g·L-1生根粉混合液中浸泡3min后，移栽至分别含(泥炭土、3/4泥炭土+1/4珍珠岩、6/8泥炭土+1/8珍珠岩+1/8蛭石、苔藓)的营养钵中，弱光培养3天，再逐渐转入正常光照下培养；移栽苗的管理方式为：将生根苗在遮阴网下进行管理，第1周采用浓度为0.1％多菌灵溶液进行喷灌，第2周每天用水喷灌1次，保持移栽基质湿润透气。2周后统计炼苗移栽成活率，得出用苔藓炼苗移栽成活率最好。
实施例2
本发明实施例提供的苹果新品种瑞雪快速繁殖方法包括以下步骤：
第一步，以苹果新品种瑞雪健康母树上一年生枝条为材料，休眠枝经冬季砂藏后，于次年春天取出经1％NaClO溶液浸泡10min，25℃左右室温内水培(无需添加他物)，每天换水并剪掉旧剪口，枝条上其它剪口用封口膜封住，当水培枝条上的芽抽生为1.5㎝左右长度时，将茎尖取下并去除展开叶片，自来水冲洗30min，用75％酒精处理5～8s，0.1％HgCl2处理8min，无菌水冲洗5～7次备用；
第二步，将处理好的茎尖用吸水纸吸干表面水分，接种到含2.0mg·L-1的MS培养基中进行暗培养3天，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂，之后转入光照2000lux，光周期16/8h，温度25℃条件下进行初代培养；
第三步，将获得的无菌外植体接种到MS+6-BA 0.5mg·L-1+IBA 0.02mg·L-1的培养基中进行继代培养，光照条件设置为2000lux，温度条件设置为25℃，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂；
第四步，选择继代培养3周获得的生长健壮且高度大于2㎝的植株，接种于1/2MS+IBA 0.75mg·L-1的生根培养基中进行培养，光照条件设置为2000lux，温度条件设置为25℃，每升培养基附加20g蔗糖，8g琼脂；
第五步，当组培苗根系长到0.5cm时，将生根苗移到自然光照下进行强光闭瓶炼苗1周左右，之后逐渐开瓶炼苗2-3d，将生根苗从培养基中取出，清洗掉根部附着的培养基，放入浓度1％的多菌灵和0.1mg·L-1生根粉混合液中浸泡3min后，移栽至放有苔藓的营养钵中，弱光培养3天，再逐渐转入正常光照下培养。
在第五步中，移栽苗的管理方式为移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第1周采用浓度为0.1％多菌灵溶液进行喷灌，第2周每天用清水喷灌1次，保持基质湿润透气待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮阴网。
本发明实施例提供的苹果新品种瑞雪快速繁殖方法具体包括以下步骤：
步骤一，初代培养
以苹果新品种瑞雪为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，利用不同的取材方法(冬季休眠枝经砂藏后取出在1％NaClO溶液中浸泡10min；萌芽前；萌芽后)，25℃左右室温内水培(无需添加他物)，每天换水并剪掉旧剪口，枝条上其它剪口用封口膜封住，当水培枝条上的芽抽生为1.5㎝左右长度时，将茎尖取下并去除展开叶片，自来水冲洗30min，用75％酒精处理5～8s，0.1％HgCl2处理(6、8、10、12min)，无菌水冲洗5～7，将处理好的茎尖用吸水纸吸干表面水分，接种到含2.0mg·L-1的MS培养基中进行暗培养3天，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂，每个三角瓶接个3芽，每处理20瓶，之后转入光照2000lux，光周期16/8h，25℃条件下进行初代培养，2周后调查0.1％HgCl2不同处理时间下外植体的褐化率、污染率、成活率，以及不同取材方式下外植体的成活率，最终得出苹果新品种瑞雪以冬季休眠枝的取材方式为佳，外植体成活率最高为37.6％，0.1％HgCl2处理时间最佳为8min，此时褐化率、污染率、成活率分别为52.6％、23.7％、24.1％。
步骤二，继代培养
将获得的无菌外植体接种到含有不同IBA浓度的MS培养基中进行继代培养，每升附加30g蔗糖，8g琼脂，每瓶3株，每个处理20瓶，重复3次，苹果新品种瑞雪的最优培养处理为N4处理，即MS+6-BA0.5 mg·L-1+IBA0.02 mg·L-1(琼脂8g·L-1，光照2000lux)；
步骤三，生根培养
选择继代培养3周获得的生长健壮，且高度大于2㎝的植株，接种于1/2MS+不同浓度IBA处理(0、0.6、0.75、0.9、1.1mg·L-1)的生根培养基中进行生根培养，每瓶接种3个，每个处理20瓶，重复3次，得到瑞雪最适宜的生根培养基为1/2MS+IBA0.75 mg·L-1(蔗糖20g·L-1，琼脂8g·L-1)；
步骤四，炼苗移栽
当组培苗根系长到0.5cm时，将生根苗移到自然光照下进行强光闭瓶炼苗1周左右，之后逐渐开瓶炼苗2-3d，将生根苗从培养基中取出，清洗掉根部附着的培养基，放入浓度1％的多菌灵和0.1g·L-1生根粉混合液中浸泡3min后，移栽至分别含(泥炭土、3/4泥炭土+1/4珍珠岩、6/8泥炭土+1/8珍珠岩+1/8蛭石、苔藓)的营养钵中，弱光培养3天，再逐渐转入正常光照下培养；移栽苗的管理方式为：将生根苗在遮阴网下进行管理，第1周采用浓度为0.1％多菌灵溶液进行喷灌，第2周每天用水喷灌1次，保持移栽基质湿润透气。2周后统计炼苗移栽成活率，得出用苔藓炼苗移栽成活率最好。
下面结合实验和数据对本发明的技术效果作进一步的说明。
实验1,(针对实施例1)
1、参考表1不同取材方法对品种成活率的影响；
表1不同取材方法对瑞阳成活率的影响
Figure BDA0002206638730000101
注：同列数相同字母表示差异不显著(p>0.05)，不同字母表示差异显著(p<0.05)。数据为Mean±SE(平均值±标准误)；下同。
2、不同0.1％HgCl2处理时间对外植体生长的影响
表2不同0.1％HgCl2处理时间对瑞阳外植体生长的影响
3、不同IBA浓度处理对瑞阳继代培养的影响
表3不同IBA浓度处理对瑞阳继代培养的影响
Figure BDA0002206638730000112
鉴于瑞阳的增殖系数较低，故将植物生长调节剂浓度作如表4调整：
表4 6-BA浓度对瑞阳继代培养的影响
Figure BDA0002206638730000113
4、不同IBA浓度处理对瑞阳生根率的影响：
表5不同IBA浓度处理对瑞阳生根率的影响
Figure BDA0002206638730000114
5、不同栽培基质土对生根苗移栽成活率的影响：
表6不同栽培基质土对瑞阳生根苗移栽成活率的影响
实验2(针对实施例2)
1、参考表7不同取材方法对品种成活率的影响：
表7不同取材方法对瑞雪成活率的影响
Figure BDA0002206638730000122
注：同列数相同字母表示差异不显著(p>0.05)，不同字母表示差异显著(p<0.05)。数据为Mean±SE(平均值±标准误)；下同。
2、不同0.1％HgCl2处理时间对外植体生长的影响
表8不同0.1％HgCl2处理时间对瑞雪外植体生长的影响
Figure BDA0002206638730000123
3、不同IBA浓度处理对瑞雪继代培养的影响
表9不同IBA浓度处理对瑞雪继代培养的影响
Figure BDA0002206638730000131
4、不同IBA浓度处理对瑞雪生根率的影响：
表10不同IBA浓度处理对瑞雪生根率的影响
Figure BDA0002206638730000132
5、不同栽培基质土对生根苗移栽成活率的影响：
表11不同栽培基质土对生根苗移栽成活率的影响
Figure BDA0002206638730000133
以上所述为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种苹果品种快速繁殖方法，其特征在于，所述苹果品种的快速繁殖方法包括采用培养基为MS+PVP 2.0g·L-1的初代培养；采用培养基为MS+6-BA 0.5mg·L-1～0.75mg·L-1+IBA 0.02mg·L-1～0.05mg·L-1处理的继代培养；采用生根培养基为1/2MS+IBA 0.75mg·L-1～1.1mg·L-1的生根培养；用育苗基质苔藓炼苗移栽，实现苹果品种的快速繁殖。
2.如权利要求1所述的苹果品种快速繁殖方法，其特征在于，所述苹果品种瑞阳快速繁殖方法通过采用培养基为MS+PVP 2.0g·L-1的初代培养；采用继代培养基为MS+6-BA0.75mg·L-1+IBA 0.05mg·L-1处理的继代培养；采用生根培养基为1/2MS+IBA 0.9mg·L-1的生根培养；然后用育苗基质苔藓炼苗移栽，实现苹果新品种瑞阳的快速繁殖。
3.如权利要求2所述的苹果品种快速繁殖方法，其特征在于，所述苹果品种瑞阳快速繁殖方法包括以下步骤：
步骤一，以苹果新品种瑞阳为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，12月份取1年生休眠枝条，休眠枝经冬季砂藏后，于次年3月取出经1％NaClO溶液浸泡10min，25℃左右室温内水培，每天换水并剪掉旧剪口，枝条上其它剪口用封口膜封住，当水培枝条上的芽抽生为1.5㎝长度时，将茎尖取下并去除展开叶片备用；
步骤二，将处理好的茎尖用吸水纸吸干表面水分，接种到含2.0g·L-1的聚乙烯比咯烷酮的MS培养基中进行暗培养3天，之后转入光下培养，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂；
步骤三，将获得的无菌外植体接种到MS+6-BA 0.75mg·L-1+IBA 0.05mg·L-1的培养基中进行继代培养；
步骤四，选择继代培养3周获得的生长健壮且高度大于2㎝的植株，接种于1/2MS+IBA0.9mg·L-1的生根培养基中进行培养；
步骤五，当组培苗根系长到0.5cm时，将生根苗移到自然光照下进行强光闭瓶炼苗1周，之后逐渐开瓶炼苗2-3d，将生根苗从培养基中取出，清洗掉根部附着的培养基，放入浓度为1％的多菌灵和0.1mg·L-1生根粉混合液中浸泡3min后，移栽至放有苔藓的营养钵中，弱光培养3天，再逐渐转入正常光照下培养。
4.如权利要求3所述的苹果品种瑞阳快速繁殖方法，其特征在于，所述步骤一中：取材为冬季休眠枝，休眠枝经冬季砂藏后，于次年3月取出经1％NaClO溶液浸泡10min，当枝条上的芽抽生为1.5cm时，剪取嫩芽，去除展开叶片，自来水冲洗30min，用75％酒精处理5～8s，0.1％HgCl2处理时间为8min，无菌水冲洗5～7次；
所述步骤二中：放置在光照周期16h/d、光照强度2000lux，26℃条件下进行培养；
所述步骤三中：新品种瑞阳的最优培养处理为M8处理，每升附加30g蔗糖，8g琼脂；
所述步骤四中：新品种瑞阳的培养处理为M12处理，每升附加20g蔗糖，8g琼脂；
所述步骤五中：移栽苗的管理方式为移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第1周采用浓度为0.1％多菌灵溶液进行喷灌，第2周每天用清水喷灌1次，保持基质湿润透气待生根苗抽生出新芽之后移出遮阴网。
5.如权利要求1所述的苹果新品种瑞雪快速繁殖方法，其特征在于，所述苹果品种瑞雪快速繁殖方法通过采用培养基为MS+PVP 2.0g·L-1的初代培养；采用培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+IBA 0.02mg·L-1处理的继代培养；采用生根培养基为1/2MS+IBA 0.75mg·L-1的生根培养；然后用育苗基质苔藓炼苗移栽，实现苹果新品种瑞雪的快速繁殖。
6.如权利要求5所述的苹果品种瑞雪快速繁殖方法，其特征在于，所述苹果品种瑞雪快速繁殖方法包括以下步骤：
步骤一，以苹果新品种瑞雪为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，12月份取1年生休眠枝条，休眠枝经冬季砂藏后，于次年3月取出经1％NaClO溶液浸泡10min，25℃室温内水培，每天换水并剪掉旧剪口，枝条上其它剪口用封口膜封住，当水培枝条上的芽抽生为1.5㎝长度时，将茎尖取下并去除展开叶片备用；
步骤二，将处理好的茎尖用吸水纸吸干表面水分，接种到含2.0g·L-1的聚乙烯比咯烷酮的MS培养基中进行暗培养3天，之后转入光下培养，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂；
步骤三，将获得的无菌外植体接种到MS+6-BA 0.5mg·L-1+IBA 0.02mg·L-1的培养基中进行继代培养；
步骤四，选择继代培养3周获得的生长健壮且高度大于2㎝的植株，接种于1/2MS+IBA0.75mg·L-1的生根培养基中进行培养；
步骤五，当组培苗根系长到0.5cm时，将生根苗移到自然光照下进行强光闭瓶炼苗1周，之后逐渐开瓶炼苗2-3d，将生根苗从培养基中取出，清洗掉根部附着的培养基，放入浓度1％的多菌灵和0.1mg·L-1生根粉混合液中浸泡3min后，移栽至放有苔藓的营养钵中，弱光培养3天，再逐渐转入正常光照下培养。
7.如权利要求6所述的苹果品种瑞雪快速繁殖方法，其特征在于，所述步骤一中：取材方式为冬季休眠枝，休眠枝经冬季砂藏后，于次年3月取出经1％NaClO溶液浸泡10min，当枝条上的芽抽生为1.5cm时，剪取嫩芽，去除展开叶片，自来水冲洗30min，用75％酒精处理5～8s，0.1％HgCl2处理最佳时间为8min，无菌水冲洗5～7次；
所述步骤二中：放置在光照周期16h/d、光照强度2000lux，26℃条件下进行培养；
所述步骤三中：新品种瑞雪的培养处理为N4处理，每升附加30g蔗糖，8g琼脂；
所述步骤四中：新品种瑞雪的培养处理为N8处理，每升附加20g蔗糖，8g琼脂；
所述步骤五中：移栽苗的管理方式为移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第一周采用浓度为0.1％多菌灵溶液进行喷灌，第二周每天用清水喷灌一次，保持基质湿润透气，待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮阴网。
CN201910883626.4A 2019-09-18 2019-09-18 一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法 Active CN110651711B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910883626.4A CN110651711B (zh) 2019-09-18 2019-09-18 一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910883626.4A CN110651711B (zh) 2019-09-18 2019-09-18 一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110651711A true CN110651711A (zh) 2020-01-07
CN110651711B CN110651711B (zh) 2022-05-13

Family

ID=69038237

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910883626.4A Active CN110651711B (zh) 2019-09-18 2019-09-18 一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110651711B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111296296A (zh) * 2020-04-15 2020-06-19 河北省林业和草原科学研究院 一种苹果新品种红光1号和红光2号的快速繁殖方法
CN111357646A (zh) * 2020-01-15 2020-07-03 陕西青美生物科技有限公司 一种苹果砧木b9的组培快繁方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104054581A (zh) * 2014-07-14 2014-09-24 西北农林科技大学 一种苹果品种玉华早富快速繁殖的方法
CN104054549A (zh) * 2014-07-14 2014-09-24 西北农林科技大学 一种苹果品种烟富6号组培快繁的方法
CN107278893A (zh) * 2017-07-01 2017-10-24 西北农林科技大学 一种苹果砧木sh40快速繁殖的方法
KR102200064B1 (ko) * 2019-07-24 2021-01-08 충청북도 (관리부서:충청북도 농업기술원) 생장점 배양을 이용한 사과 왜성대목 m.9 및 m.26의 바이러스 무병주 생산방법

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104054581A (zh) * 2014-07-14 2014-09-24 西北农林科技大学 一种苹果品种玉华早富快速繁殖的方法
CN104054549A (zh) * 2014-07-14 2014-09-24 西北农林科技大学 一种苹果品种烟富6号组培快繁的方法
CN107278893A (zh) * 2017-07-01 2017-10-24 西北农林科技大学 一种苹果砧木sh40快速繁殖的方法
KR102200064B1 (ko) * 2019-07-24 2021-01-08 충청북도 (관리부서:충청북도 농업기술원) 생장점 배양을 이용한 사과 왜성대목 m.9 및 m.26의 바이러스 무병주 생산방법

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Q. R. SUN等: "Optimisation of the media for in vitro shoot proliferation and root induction in three new cold-hardy and dwarfing or semi-dwarfing clonal apple rootstocks", 《THE JOURNAL OF HORTICULTURAL SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY》 *
张秀英等: "苹果组培外植体获取及培养试验研究", 《云南农业科技》 *
王李芳: "苹果新品种脱毒快繁体系的建立及检测体系的优化", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库（电子期刊）农业科技辑》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111357646A (zh) * 2020-01-15 2020-07-03 陕西青美生物科技有限公司 一种苹果砧木b9的组培快繁方法
CN111296296A (zh) * 2020-04-15 2020-06-19 河北省林业和草原科学研究院 一种苹果新品种红光1号和红光2号的快速繁殖方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN110651711B (zh) 2022-05-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104054583B (zh) 一种苹果砧木t337快速繁殖的方法
Amin et al. In vitro response of apical bud explants from mature trees of jackfruit (Artocarpus heterophyllus)
CN108293878B (zh) 一种栝楼嫩叶的组培育苗方法
CN108739370B (zh) 一种利用成熟莲胚进行快繁的方法
CN108575488B (zh) 一种促进文冠果嫩枝扦插生根和成苗方法
CN110651711B (zh) 一种苹果新品种瑞阳和瑞雪快速繁殖方法
CN107087542A (zh) 一种苹果砧木b9快速繁殖的方法
CN105210870A (zh) 桃砧木中桃抗砧1号的组培繁殖技术
CN111084103A (zh) 一种欧李组培快繁的方法
JPH05268843A (ja) コケ類の培養種、及びそれを用いたコケ類の栽培方法
CN113080063B (zh) 一种粗糠树组织培养快速生根的方法
Rai et al. Micropropagation of Karonda (Carissa carandas) through shoot multiplication
CN108739408B (zh) 一种提高大叶金丝楸有效新梢分化数量的组织培养方法
CN104054549B (zh) 一种苹果品种烟富6号组培快繁的方法
CN110771365B (zh) 一种灵宝杜鹃的扦插繁殖方法
CN110754361B (zh) 一种浙江安息香离体胚诱导丛生芽快速繁殖方法
CN108450335B (zh) 一种淡水沙梨茎段组织快速繁殖方法
CN113951144B (zh) 一种促进虎斑兜兰种子无菌萌发及成苗的方法
CN112243860B (zh) 一种云南梧桐组培快繁方法
CN112106664B (zh) 一种壮丽含笑种子无菌萌发及快速繁殖方法
CN110012834B (zh) 一种提高金菠萝组织培养效率的方法
CN103385167B (zh) 一种宝莲灯子房培养及组培快繁方法
Zhai et al. Shoot multiplication and plant regeneration in Caragana fruticosa (Pall.) Besser
CN112293252A (zh) 一种檀香石斛的人工高效无性系繁殖方法
CN110583481A (zh) 一种诱导辽东楤木体细胞胚发生及植株再生的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant