CN110638043A - 一种富含益生菌的全营养配方食品及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开的一种富含益生菌的全营养配方食品，包括如下成分：蛋白质、碳水化合物、膳食纤维、脂肪、复合维生素、复合矿物质、益生菌、营养强化剂。本发明还提供了制备上述食品的方法，包括(1)采用真空冷冻干燥方法制备益生菌粉；(2)采用湿法工艺将蛋白质碳水化合物、膳食纤维、脂肪、复合维生素、复合矿物质、营养强化剂混合制备成全营养配方粉，再与益生菌粉混合。本发明还发现可以将该食品用于制备辅助治疗肠炎营养品，本发明优点在于，发明得到的全营养配方食品，营养搭配合理，易于消化吸收，能够作为单一营养来源满足进食受限、消化吸收障碍、代谢紊乱或特定疾病状态人群的营养需求，并且还对炎性肠病具有营养支持的作用。

Description

一种富含益生菌的全营养配方食品及其制备方法与应用

技术领域

本发明属于特殊医学用途配方食品技术领域，具体为一种富含益生菌的全营养配方食品及其制备方法与应用。

背景技术

特殊医学用途配方食品(简称“医用食品”)是指为满足进食受限、消化吸收障碍、代谢紊乱或特定疾病状态人群对营养素或膳食的特殊需要，专门加工配制而成的配方食品。医用食品需在医生或临床营养师的指导下单独食用或与其他食品配方混合食用，在临床治疗上兼具提供营养及减缓疾病症状的作用，与临床营养学密不可分，在辅助治疗效应和经济效应上都有其存在的必要性和必需性。全营养配方或特定全营养配方的医用食品可以作为使用者的单一营养来源，满足日常对营养素的需求，这有别于功能性食品；同时由于医用食品本身并不具有治疗疾病的功效，只能通过营养支持来起到辅助治疗的效果，所以同时也有别于药品。

医用食品通常可分为全营养配方食品、特定全营养配方食品及非全营养配方食品三类。其中，全营养配方食品对于那些长期只接触单一营养来源的人群来说，能够满足每天的营养需求，起到维持并促进健康的作用。

目前，已注册且获批通过的医用食品一共有18个，大部分都是面向婴儿的产品，因此，成人类的产品上存在很大的空缺，特别是针对某一种疾病，能够起到辅助治疗作用的全营养配方产品更是空白。

发明内容

为了解决现有技术中成人类全营养配方食品空缺，尤其是针对某一种疾病能够起到辅助治疗作用的全营养配方食品空缺的缺陷，本发明提供了一种富含益生菌的全营养配方食品及其制备方法与应用，实现的目的为，得到一种成人可以食用的全营养配方食品，确保长期单独使用该产品时，能够给患者提供全面的营养，且能够针对炎性肠病起到辅助治疗的作用。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为，本发明提供的一种富含益生菌的全营养配方食品，按照该食品的供能比计算，每100千卡食品包括如下成分：

蛋白质、碳水化合物、膳食纤维、脂肪、复合维生素、复合矿物质、益生菌、营养强化剂，

蛋白质提供15-20千卡的能量，碳水化合物提供50-65千卡的能量，脂肪提供20-30千卡的能量，所述脂肪中中链甘油三脂占总脂肪含量的40％以上，亚油酸提供的能量不低于2.0％，α-亚麻酸提供的能量不低于0.5％；

所述膳食纤维至多2.7g，所述复合维生素至少6.2mg，所述复合矿物质至少527.6mg，所述益生菌含量为1×10⁹CFU，所述营养强化剂为22.2-166.7mg。

进一步的，所述蛋白质为酪蛋白。

进一步的，所述碳水化合物为麦芽糊精、蔗糖中任意一种或一种以上。

进一步的，所述膳食纤维为低聚果糖。

进一步的，所述脂肪为植物油类脂肪包括大豆油、椰子油，大豆油与椰子油的质量比为1:3。其中，包含功能性成分亚油酸、α-亚麻酸，按照所述食品供能比计算，每100千卡食品包括2.85g的植物油类脂肪，其中，包含0.50g的亚油酸、以及92.63mg的α-亚麻酸。

进一步的，所述复合维生素包括如下成分：维生素A 39-225μg、维生素D 0.8-3.14μg、维生素E至少0.8mg、维生素K1至少4.4μg、维生素B1至少0.07mg、维生素B2至少0.07mg、维生素B6至少0.07mg、维生素B12至少0.13μg、维生素C至少5.6mg、烟酸至少0.2mg、叶酸至少22.2μg、泛酸至少0.29mg、生物素至少2.2μg。

进一步的，所述维生素A的来源选自醋酸视黄脂、棕榈酸视黄酯、全反式视黄醇、β-胡萝卜素中任意一种或一种以上；

所述维生素D的来源选自麦角钙化醇、胆钙化醇中的一种或一种以上；

所述维生素E的来源选自d-α-生育酚、dl-α-生育酚、d-α-醋酸生育酚、dl-α-醋酸生育酚、混合生育酚浓缩物、d-α-琥珀酸生育酚、dl-α-琥珀酸生育酚中的一种或一种以上；

所述维生素K1的来源为植物甲萘醌；

所述维生素B1的来源选自盐酸硫胺素、硝酸硫胺素中的一种或一种以上；

所述维生素B2的来源选自核黄素、核黄素-5’-磷酸钠中的一种或一种以上；

所述维生素B6的来源选自盐酸吡哆醇、5’-磷酸吡哆醇中的一种或一种以上；

所述维生素B12的来源选自氰钴胺、盐酸氰钴胺、羟钴胺中的一种或一种以上；

所述维生素C的来源选自L-抗坏血酸、L-抗坏血酸钾、L-抗坏血酸钠、L-抗坏血酸钙、抗坏血酸-6-棕榈酸盐中的一种或一种以上；

所述烟酸的来源选自烟酸、烟酰胺中的一种或一种以上；

所述泛酸的来源选自D-泛酸钠、D-泛酸钙中的一种或一种以上；

所述生物素为D-生物素。

进一步的，所述复合矿物质包括如下成分：钠元素至少83mg、钾元素至少111mg、铜元素44-500μg、镁元素18.3mg、铁元素0.83-2.30mg、锌元素0.4-2.2mg、锰元素25-611μg、钙元素至少56mg、磷元素至少40mg、碘元素至少6.7μg、氯元素至多218mg、硒元素3.3-22.2μg、铬1.8-55.6μg、钼5.6-50μg。

进一步的，所述钠元素的来源选自氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠、碳酸氢钠中的一种或一种以上；

所述钾元素的来源选自磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、葡萄糖酸钾、柠檬酸钾、氯化钾中的一种或一种以上；

所述铜元素的来源选自硫酸铜、柠檬酸铜、葡萄糖酸铜、碳酸铜中的一种或一种以上；

所述镁元素的来源选自硫酸镁、氯化镁、氧化镁、碳酸镁、磷酸氢镁、葡萄糖酸镁中的一种或一种以上；

所述铁元素的来源选自焦磷酸铁、硫酸亚铁、葡萄糖酸亚铁、富马酸亚铁、乙二胺四乙酸铁钠、柠檬酸铁、柠檬酸铁铵中的一种或一种以上；

所述锌元素的来源选自硫酸锌、葡萄糖酸锌、氧化锌、乳酸锌、氯化锌、乙酸锌、柠檬酸锌中的一种或一种以上；

所述锰元素的来源选自硫酸锰、氯化锰、碳酸锰、柠檬酸锰、葡萄糖酸锰中的一种或一种以上；

所述钙元素的来源选自碳酸钙、葡萄糖酸钙、柠檬酸钙、L-乳酸钙、磷酸氢钙、氯化钙、甘油磷酸钙、磷酸三钙、氧化钙、硫酸钙中的一种或一种以上；

所述磷元素的来源选自磷酸钙、磷酸氢钙中的一种或一种以上；

所述碘元素的来源选自碘化钾、碘酸钾、碘化钠中的一种或一种以上；

所述氯元素的来源选自氯化钾、氯化钠、氯化锰、氯化锌、氯化镁、氯化胆碱中的一种或一种以上；

所述硒元素的来源选自亚硒酸钠、硒酸钠中的一种或一种以上；

所述铬元素的来源选自硫酸铬、氯化铬中的一种或一种以上；

所述钼元素的来源选自钼酸钠、钼酸铵中的一种或一种以上。

进一步的，所述益生菌为双歧杆菌。

优选的，所述双歧杆菌为保藏编号为GDMCC60797的菌株。该菌种保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏日期为2019年9月29日，保藏单位的地址是广州市先烈中路100号大院59号楼。

进一步的，所述营养强化剂包括牛黄碱、左旋肉碱、肌醇和胆碱中的一种或一种以上。

进一步的，所述胆碱选自酒石酸氢胆碱、氯化胆碱中的一种或一种以上。

本发明还提供了制备所述富含益生菌的全营养配方食品的方法，本发明以湿法工艺为主，辅以冷冻干燥技术，保证菌的活性。该方法包括如下步骤：

(1)将益生菌按照占培养基总质量2～4％的接种量接种到培养基中，于厌氧工作站37℃下培养18h，得到培养液；将培养液离心，得到菌体；将菌体用pH为7.4的磷酸盐缓冲液清洗3次后用冻干保护剂重悬，冻干保护剂和菌体的质量比为2:1，得到重悬液；将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到冷冻干燥后的益生菌粉；

(2)采用湿法工艺将蛋白质碳水化合物、膳食纤维、脂肪、复合维生素、复合矿物质、营养强化剂混合制备成全营养配方粉，再与步骤(1)得到的益生菌粉混合。

本发明还发现可以将上述食品用于制备辅助治疗炎性肠病营养品的应用。

炎性肠病简称IBD，是一种特殊的慢性肠道炎症性疾病。主要包括克罗恩病(Crohn’s disease，CD)、溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis，UC)。炎性肠病的病因和发病机制尚未完全明确，目前认为这是由多种因素相互作用导致的，主要包括遗传、感染、环境、免疫等因素。

临床表现：(1)消化系统表现：主要包括腹痛、腹泻、脓血便、腹部包块、瘘管形成、肛周病变等。(2)多种场外表现：包括恶心、呕吐、食欲缺乏等。(3)全身表现：发热、贫血、营养不良等。

炎性肠病病变范围广泛，消化道症状重，病情反复，病程长，加之代谢改变，极易发生营养不良。炎性肠病病人在初诊时多已伴有营养不良，而病情进展、药物或手术治疗则更加重了营养障碍，研究显示，在病情加重而住院治疗的炎性肠病患者中，蛋白质-能量营养不良发生率高达85％，约2/3的炎性肠病患者可能发生负氮平衡。由于腹泻等原因，炎性肠病患者体内血清中钾、钙、镁、磷等含量降低，一些脂溶性维生素，如维生素A、维生素E、维生素D水平也较正常人明显降低。体重丢失和低蛋白血证是炎性肠病营养不良的主要表现。故作为炎性肠病的治疗手段，营养支持与药物、手术等同等重要，且贯穿于炎性肠病整个治疗过程中。

因此，本发明筛选出上述具体成分组合成全营养配方食品，营养搭配合理，易于消化吸收，能够作为单一营养来源满足进食受限、消化吸收障碍、代谢紊乱或特定疾病状态人群的营养需求，并且结合益生菌，添加益生元，有利于促进营养物质的消化吸收、抑制肠道致病菌、调节肠道平衡、提高机体免疫力，所述益生菌优选保藏编号GDMCC60797的菌株，它能够代谢共轭亚麻酸，对DSS诱导的结肠炎具有良好的改善作用；再有，所述产品提供的膳食纤维为低聚果糖，是水溶性膳食纤维，可延长肠传递时间，且由于吸水能力强，可改善腹泻等症状，同时，低聚果糖一种益生元，能够促进益生菌增殖，从而抑制腐败菌的生长。

本发明发现本其具有改善肠道炎症而对炎性肠病具有营养支持的作用，具体体现在：(1)对小鼠体重有回复作用；(2)降低MPO(髓过氧化物酶)的活性；(3)具有抑制促炎因子产生的作用；(4)具有显著改善肠炎小鼠的结肠病理学症状的作用；(5)具有显著修复肠炎小鼠的结肠粘膜屏障的作用。

本发明采用上述技术方案，有益效果包括：本发明得到的全营养配方食品，营养搭配合理，易于消化吸收，能够作为单一营养来源满足进食受限、消化吸收障碍、代谢紊乱或特定疾病状态人群的营养需求，并且还对炎性肠病具有营养支持的作用。

附图说明

图1是本发明实验例1中各实验小组小鼠体重变化对比图。

图2是本发明实验例2中各实验小组小鼠MPO活性含量对比图。

图3是本发明实验例3中各实验小组抑制促炎因子产生的效果对比图。

图4是本发明实验例4中各实验小组慢性肠炎小鼠的结肠病理学症状改善对比图。

图5是本发明实验例5中各实验小组慢性肠炎小鼠结肠粘膜屏障损伤修复对比图。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作出进一步的说明。本发明中没有特殊说明的操作方法都是现有技术，没有特殊说明的操作条件也都是常温常压下，试剂均为市售自购。

实施例一：本发明提供的富含益生菌的全营养配方食品，每100千卡包括提供50千卡能量的碳水化合物、提供15千卡能量的蛋白质、提供20千卡能量的脂肪，所述脂肪中中链甘油三脂占总脂肪含量的40％，亚油酸提供的能量为2.0％，α-亚麻酸提供的能量为0.5％、膳食纤维2.7g、维生素A125.5μg、维生素D1μg、维生素E5.4mg、维生素K16.7μg、维生素B10.21mg、维生素B2 0.21mg、维生素B6 0.25mg、维生素B12 0.71μg、维生素C18.28mg、烟酸2.34mg、叶酸40.58μg、泛酸1.17mg、生物素26.78μg、钠83.68mg、钾142.26mg、铜167.36μg、镁28.45mg、铁1.21mg、锌1.38mg、锰549.99μg、钙92.05mg、磷83.68mg、碘11.3μg、氯117.15g、硒5.44μg、铬7.53μg、钼10.88μg、营养强化剂22.2mg、益生菌含量为1×10⁹CFU。

进一步的，所述蛋白质为酪蛋白。

进一步的，所述碳水化合物为麦芽糊精、蔗糖按照任意比混合。

进一步的，所述膳食纤维为低聚果糖。

进一步的，所述脂肪为植物油类脂肪包括大豆油、椰子油，大豆油与椰子油的质量比为1:3。其中，包含功能性成分亚油酸、α-亚麻酸，按照所述食品供能比计算，每100千卡食品包括2.85g的植物油类脂肪，其中，包含0.50g的亚油酸、以及92.63mg的α-亚麻酸。

进一步的，所述维生素A的来源选自棕榈酸视黄酯、全反式视黄醇、β-胡萝卜素的混合物；

所述维生素D的来源选自麦角钙化醇、胆钙化醇；

所述维生素E的来源选自dl-α-生育酚、d-α-醋酸生育酚、dl-α-醋酸生育酚、混合生育酚浓缩物、d-α-琥珀酸生育酚、dl-α-琥珀酸生育酚的混合物；

所述维生素K1的来源为植物甲萘醌；

所述维生素B1的来源选自硝酸硫胺素和盐酸硫胺素；

所述维生素B2的来源选自核黄素和核黄素-5’-磷酸钠；

所述维生素B6的来源选自盐酸吡哆醇和5’-磷酸吡哆醇；

所述维生素B12的来源选自钴胺、盐酸氰钴胺、羟钴胺的混合物；

所述维生素C的来源选自L-抗坏血酸钾、L-抗坏血酸钠、L-抗坏血酸钙、抗坏血酸-6-棕榈酸盐的混合物；

所述烟酸的来源选自烟酸、烟酰胺的混合物；

所述泛酸的来源选自D-泛酸钙和D-泛酸钠；

所述生物素为D-生物素。

进一步的，所述钠元素的来源选自磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠、碳酸氢钠的混合物；

所述钾元素的来源选自磷酸氢二钾、葡萄糖酸钾、柠檬酸钾、氯化钾的混合物；

所述铜元素的来源选自柠檬酸铜、葡萄糖酸铜、碳酸铜的混合物；

所述镁元素的来源选自氯化镁、氧化镁、碳酸镁、磷酸氢镁、葡萄糖酸镁的混合物；

所述铁元素的来源选自焦硫酸亚铁、葡萄糖酸亚铁、富马酸亚铁、乙二胺四乙酸铁钠、柠檬酸铁、柠檬酸铁铵的混合物；

所述锌元素的来源选自葡萄糖酸锌、氧化锌、乳酸锌、氯化锌、乙酸锌、柠檬酸锌的混合物；

所述锰元素的来源选自氯化锰、碳酸锰、柠檬酸锰、葡萄糖酸锰的混合物；

所述钙元素的来源选自葡萄糖酸钙、柠檬酸钙、L-乳酸钙、磷酸氢钙、氯化钙、甘油磷酸钙、磷酸三钙、氧化钙、硫酸钙的混合物；

所述磷元素的来源选自磷酸氢钙、磷酸钙；

所述碘元素的来源选自碘酸钾、碘化钠、碘化钾的混合物；

所述氯元素的来源选自自氯化钾、氯化钠、氯化锰、氯化锌、氯化镁、氯化胆碱；

所述硒元素的来源选自亚硒酸钠、硒酸钠；

所述铬元素的来源选自硫酸铬、氯化铬；

所述钼元素的来源选自钼酸钠、钼酸铵。

进一步的，所述益生菌为双歧杆菌。优选的所述双歧杆菌为保藏编号为GDMCC60797的菌株。

进一步的，营养强化剂为牛黄碱、左旋肉碱、肌醇和胆碱的混合物，所述胆碱选自酒石酸氢胆碱和氯化胆碱。

本发明还提供了制备所述富含益生菌的全营养配方食品的方法，该方法包括如下步骤：

(1)将益生菌按照占培养基总质量2％的接种量接种到培养基中，于厌氧工作站37℃下培养18h，得到培养液；将培养液离心，得到菌体；将菌体用pH为7.4的磷酸盐缓冲液清洗3次后用冻干保护剂重悬，冻干保护剂和菌体的质量比为2:1，得到重悬液；将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到冷冻干燥后的益生菌粉；

(2)采用湿法工艺将蛋白质碳水化合物、膳食纤维、脂肪、复合维生素、复合矿物质、营养强化剂混合制备成全营养配方粉，再与步骤(1)得到的益生菌粉混合。

实施例二：本发明提供的富含益生菌的全营养配方食品，每100千卡包括提供65千卡能量的碳水化合物、提供20千卡能量的蛋白质、提供30千卡能量的脂肪，所述脂肪中中链甘油三脂占总脂肪含量的48％，亚油酸提供的能量为4.4％，α-亚麻酸提供的能量为0.8％、膳食纤维1g、维生素A 225μg、维生素D3.14μg、维生素E 5.4mg、维生素K1 6.7μg、维生素B10.21mg、维生素B2 0.21mg、维生素B6 0.25mg、维生素B12 0.71μg、维生素C18.28mg、烟酸02.34mg、叶酸40.58μg、泛酸1.17mg、生物素26.78μg、钠83.68mg、钾142.26mg、铜500μg、镁18.3mg、铁2.30mg、锌2.2mg、锰611μg、钙92.05mg、磷83.68mg、碘11.30μg、氯117.15mg、硒22.2μg、铬55.6μg、钼50μg、营养强化剂166.7mg、益生菌含量为1×10⁹CFU。

进一步的，所述蛋白质为酪蛋白。

进一步的，所述碳水化合物为麦芽糊精、蔗糖按照任意比混合。

进一步的，所述膳食纤维为低聚果糖。

进一步的，所述脂肪为植物油类脂肪包括大豆油、椰子油，大豆油与椰子油的质量比为1:3。其中，包含功能性成分亚油酸、α-亚麻酸，按照所述食品供能比计算，每100千卡食品包括2.85g的植物油类脂肪，其中，包含0.50g的亚油酸、以及92.63mg的α-亚麻酸。

进一步的，所述维生素A的来源选自棕榈酸视黄酯、全反式视黄醇、β-胡萝卜素的混合物；

所述维生素D的来源选自麦角钙化醇、胆钙化醇；

所述维生素E的来源选自dl-α-生育酚、d-α-醋酸生育酚、dl-α-醋酸生育酚、混合生育酚浓缩物、d-α-琥珀酸生育酚、dl-α-琥珀酸生育酚的混合物；

所述维生素K1的来源为植物甲萘醌；

所述维生素B1的来源选自硝酸硫胺素和盐酸硫胺素；

所述维生素B2的来源选自核黄素和核黄素-5’-磷酸钠；

所述维生素B6的来源选自盐酸吡哆醇和5’-磷酸吡哆醇；

所述维生素B12的来源选自钴胺、盐酸氰钴胺、羟钴胺的混合物；

所述维生素C的来源选自L-抗坏血酸钾、L-抗坏血酸钠、L-抗坏血酸钙、抗坏血酸-6-棕榈酸盐的混合物；

所述烟酸的来源选自烟酸、烟酰胺的混合物；

所述泛酸的来源选自D-泛酸钙和D-泛酸钠；

所述生物素为D-生物素。

进一步的，所述钠元素的来源选自磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠、碳酸氢钠的混合物；

所述钾元素的来源选自磷酸氢二钾、葡萄糖酸钾、柠檬酸钾、氯化钾的混合物；

所述铜元素的来源选自柠檬酸铜、葡萄糖酸铜、碳酸铜的混合物；

所述镁元素的来源选自氯化镁、氧化镁、碳酸镁、磷酸氢镁、葡萄糖酸镁的混合物；

所述铁元素的来源选自焦硫酸亚铁、葡萄糖酸亚铁、富马酸亚铁、乙二胺四乙酸铁钠、柠檬酸铁、柠檬酸铁铵的混合物；

所述锌元素的来源选自葡萄糖酸锌、氧化锌、乳酸锌、氯化锌、乙酸锌、柠檬酸锌的混合物；

所述锰元素的来源选自氯化锰、碳酸锰、柠檬酸锰、葡萄糖酸锰的混合物；

所述钙元素的来源选自葡萄糖酸钙、柠檬酸钙、L-乳酸钙、磷酸氢钙、氯化钙、甘油磷酸钙、磷酸三钙、氧化钙、硫酸钙的混合物；

所述磷元素的来源选自磷酸氢钙、磷酸钙；

所述碘元素的来源选自碘酸钾、碘化钠、碘化钾的混合物；

所述氯元素的来源选自自氯化钾、氯化钠、氯化锰、氯化锌、氯化镁、氯化胆碱；

所述硒元素的来源选自亚硒酸钠、硒酸钠；

所述铬元素的来源选自硫酸铬、氯化铬；

所述钼元素的来源选自钼酸钠、钼酸铵。

进一步的，所述益生菌为双歧杆菌。优选的所述双歧杆菌为保藏编号为GDMCC60797的菌株。

进一步的，营养强化剂为牛黄碱、左旋肉碱、肌醇和胆碱的混合物，所述胆碱选自酒石酸氢胆碱和氯化胆碱。

本发明还提供了制备所述富含益生菌的全营养配方食品的方法，该方法包括如下步骤：

(1)将益生菌按照占培养基总质量4％的接种量接种到培养基中，于厌氧工作站37℃下培养18h，得到培养液；将培养液离心，得到菌体；将菌体用pH为7.4的磷酸盐缓冲液清洗3次后用冻干保护剂重悬，冻干保护剂和菌体的质量比为2:1，得到重悬液；将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到冷冻干燥后的益生菌粉；

(2)采用湿法工艺将蛋白质碳水化合物、膳食纤维、脂肪、复合维生素、复合矿物质、营养强化剂混合制备成全营养配方粉，再与步骤(1)得到的益生菌粉混合。

实施例三：本发明提供的富含益生菌的全营养配方食品，每100千卡包括提供55千卡能量的碳水化合物、提供17千卡能量的蛋白质、提供25千卡能量的脂肪，所述脂肪中中链甘油三脂占总脂肪含量的55％，亚油酸提供的能量为5％，α-亚麻酸提供的能量为4％、膳食纤维1.5g、维生素A125.5μg、维生素D1μg、维生素E5.4mg、维生素K16.7μg、维生素B10.21mg、维生素B2 0.21mg、维生素B6 0.25mg、维生素B12 0.13μg、维生素C 5.6mg、烟酸0.2mg、叶酸22.2μg、泛酸0.29mg、生物素2.2μg、钠83mg、钾111mg、铜44μg、镁18.3mg、铁0.83mg、锌0.4mg、锰25μg、钙56mg、磷40mg、碘6.7μg、氯218mg、硒3.3μg、铬1.83μg、钼5.6μg、营养强化剂100mg、益生菌含量为1×10⁹CFU。

进一步的，所述蛋白质为酪蛋白。

进一步的，所述碳水化合物为麦芽糊精、蔗糖按照任意比混合。

进一步的，所述膳食纤维为低聚果糖。

进一步的，所述脂肪为植物油类脂肪包括大豆油、椰子油，大豆油与椰子油的质量比为1:3。其中，包含功能性成分亚油酸、α-亚麻酸，按照所述食品供能比计算，每100千卡食品包括2.85g的植物油类脂肪，其中，包含0.50g的亚油酸、以及92.63mg的α-亚麻酸。

进一步的，所述维生素A的来源选自棕榈酸视黄酯、全反式视黄醇、β-胡萝卜素的混合物；

所述维生素D的来源选自麦角钙化醇、胆钙化醇；

所述维生素E的来源选自dl-α-生育酚、d-α-醋酸生育酚、dl-α-醋酸生育酚、混合生育酚浓缩物、d-α-琥珀酸生育酚、dl-α-琥珀酸生育酚的混合物；

所述维生素K1的来源为植物甲萘醌；

所述维生素B1的来源选自硝酸硫胺素和盐酸硫胺素；

所述维生素B2的来源选自核黄素和核黄素-5’-磷酸钠；

所述维生素B6的来源选自盐酸吡哆醇和5’-磷酸吡哆醇；

所述维生素B12的来源选自钴胺、盐酸氰钴胺、羟钴胺的混合物；

所述维生素C的来源选自L-抗坏血酸钾、L-抗坏血酸钠、L-抗坏血酸钙、抗坏血酸-6-棕榈酸盐的混合物；

所述烟酸的来源选自烟酸、烟酰胺的混合物；

所述泛酸的来源选自D-泛酸钙和D-泛酸钠；

所述生物素为D-生物素。

进一步的，所述钠元素的来源选自磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠、碳酸氢钠的混合物；

所述钾元素的来源选自磷酸氢二钾、葡萄糖酸钾、柠檬酸钾、氯化钾的混合物；

所述铜元素的来源选自柠檬酸铜、葡萄糖酸铜、碳酸铜的混合物；

所述镁元素的来源选自氯化镁、氧化镁、碳酸镁、磷酸氢镁、葡萄糖酸镁的混合物；

所述铁元素的来源选自焦硫酸亚铁、葡萄糖酸亚铁、富马酸亚铁、乙二胺四乙酸铁钠、柠檬酸铁、柠檬酸铁铵的混合物；

所述锌元素的来源选自葡萄糖酸锌、氧化锌、乳酸锌、氯化锌、乙酸锌、柠檬酸锌的混合物；

所述锰元素的来源选自氯化锰、碳酸锰、柠檬酸锰、葡萄糖酸锰的混合物；

所述钙元素的来源选自葡萄糖酸钙、柠檬酸钙、L-乳酸钙、磷酸氢钙、氯化钙、甘油磷酸钙、磷酸三钙、氧化钙、硫酸钙的混合物；

所述磷元素的来源选自磷酸氢钙、磷酸钙；

所述碘元素的来源选自碘酸钾、碘化钠、碘化钾的混合物；

所述氯元素的来源选自自氯化钾、氯化钠、氯化锰、氯化锌、氯化镁、氯化胆碱；

所述硒元素的来源选自亚硒酸钠、硒酸钠；

所述铬元素的来源选自硫酸铬、氯化铬；

所述钼元素的来源选自钼酸钠、钼酸铵。

进一步的，所述益生菌为双歧杆菌。优选的所述双歧杆菌为保藏编号为GDMCC60797的菌株。

进一步的，营养强化剂为牛黄碱、左旋肉碱、肌醇和胆碱的混合物，所述胆碱选自酒石酸氢胆碱和氯化胆碱。

本发明还提供了制备所述富含益生菌的全营养配方食品的方法，该方法包括如下步骤：

(1)将益生菌按照占培养基总质量3％的接种量接种到培养基中，于厌氧工作站37℃下培养18h，得到培养液；将培养液离心，得到菌体；将菌体用pH为7.4的磷酸盐缓冲液清洗3次后用冻干保护剂重悬，冻干保护剂和菌体的质量比为2:1，得到重悬液；将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到冷冻干燥后的益生菌粉；

(2)采用湿法工艺将蛋白质碳水化合物、膳食纤维、脂肪、复合维生素、复合矿物质、营养强化剂混合制备成全营养配方粉，再与步骤(1)得到的益生菌粉混合。

本发明还发现，将该食品可以用于制备辅助治疗炎性肠病营养品的应用。以下通过试验验证，本发明食品对机体辅助治疗肠炎的作用，以与人最为相近的小鼠进行试验，需要说明的是，这种试验本发明取了所需成分含量范围内无数具体数值进行了试验，本发明中列举的试验结果，是含量取平均值的试验结果，由于取其他含量值，其最终实现的作用一致，故为了节省篇幅，仅取这一个试验例用以举例说明：

设置对照组配方(不含益生菌)：每100千卡包括提供58千卡能量的碳水化合物、提供17千卡能量的蛋白质、提供25千卡能量的脂肪，所述脂肪中中链甘油三脂占总脂肪含量的48％，亚油酸提供的能量为4.4％，α-亚麻酸提供的能量为0.8％、膳食纤维0.84g、维生素A125.5μg、维生素D1μg、维生素E5.4mg、维生素K16.7μg、维生素B1 0.21mg、维生素B20.21mg、维生素B6 0.25mg、维生素B12 0.71μg、维生素C18.28mg、烟酸2.34mg、叶酸40.58μg、泛酸1.17mg、生物素26.78μg、钠83.68mg、钾142.26mg、铜167.36μg、镁28.45mg、铁1.21mg、锌1.38mg、锰549.99μg、钙92.05mg、磷83.68mg、碘11.3μg、氯117.15g、硒5.44μg、铬7.53μg、钼10.88μg、营养强化剂30.54mg。

1、有助于肠炎模型小鼠体重恢复

验证1：炎性肠病全营养配方食品有助于肠炎模型小鼠体重恢复实验：

将6-8周SPF级18-20g健康雄性C57BL/6小鼠20只，随机分为4组：空白组，模型组(Model)、营养配方组(对照组)、营养配方+菌组(本发明实施例一)。每组5只，饲养在江南大学实验动物中心，恒定温度21-26℃，湿度40-70％，噪声小于等于60dB，动物照度15-20LX。所有动物实验程序皆由江南大学动物福利与伦理管理委员会进行审查并批准。

实验第1天到第7天在水壶中添加3.5％DSS，正常饮食。期间对老鼠进行称重，观察粪便松散情况、出血情况，来判断造模是否成功。造模成功后自由饮水，模型组正常饮食，每天灌胃200μl生理盐水；对照组的换为不加益生菌的营养配方饲养，每天灌胃200μl生理盐水；营养配方+菌组换为本发明实施例一营养配方饲养，每天灌胃菌悬液1×10⁹CFU/200μl。每天记录体重变化，第15天后结束实验。

这些结果如附图1所示。由附图1可知，本发明中营养配方组在造模后，小鼠体重基本停止下降，并且开始有恢复的趋势。而模型组造模后会持续下降一段时间。

2、降低MPO(髓过氧化物酶)的活性

验证2：炎性肠病全营养配方食品降低MPO(髓过氧化物酶)的活性实验：

将6-8周SPF级18-20g健康雄性C57BL/6小鼠20只，随机分为4组：空白组，模型组(Model)、营养配方组(对照组)、营养配方+菌组(实施例一)。每组5只，饲养在江南大学实验动物中心，恒定温度21-26℃，湿度40-70％，噪声小于等于60dB，动物照度15-20LX。所有动物实验程序皆由江南大学动物福利与伦理管理委员会进行审查并批准。

实验第1天到第7天在水壶中添加3.5％DSS，正常饮食。期间对老鼠进行称重，观察粪便松散情况、出血情况，来判断造模是否成功。造模成功后自由饮水，模型组正常饮食，每天灌胃200μl生理盐水；配方组的换为对照组营养配方饲养，每天灌胃200μl生理盐水；营养配方+菌组换为实施例一营养配方饲养，每天灌胃菌悬液1×10⁹CFU/200μl。第15天后结束实验。实验结束后，麻醉小鼠，眼球采血，解剖，取小鼠同一位置结肠组织的匀浆液，通过MPO试剂盒进行MPO活性测定。小鼠结肠髓过氧化物酶(MPO)活性反应结肠组织中性粒细胞浸润程度，故MPO值可表征炎症程度，若MPO活性越强，则炎症越严重。

这些结果如附图2所示。由附图2可知(图1-图5中，a，b表示不同字母所代表的组别存在显著性的差异(P<0.05))，本发明中，相对于模型组，营养配方组在实验后MPO值有明显的下降，且营养配方+菌组下降更为显著。表明在喂食营养配方后能够减轻结肠炎小鼠的炎症状态，且与菌共同作用效果更好。

3、具有抑制促炎因子产生的作用

验证3：炎性肠病全营养配方食品抑制促炎因子产生的实验

将6-8周SPF级18-20g健康雄性C57BL/6小鼠20只，随机分为4组：空白组，模型组(Model)、营养配方组(对照组)、营养配方+菌组(实施例一)。每组5只，饲养在江南大学实验动物中心，恒定温度21-26℃，湿度40-70％，噪声小于等于60dB，动物照度15-20LX。所有动物实验程序皆由江南大学动物福利与伦理管理委员会进行审查并批准。

实验第1天到第7天在水壶中添加3.5％DSS，正常饮食。期间对老鼠进行称重，观察粪便松散情况、出血情况，来判断造模是否成功。造模成功后自由饮水，模型组正常饮食，每天灌胃200μl生理盐水；配方组的换为对照组营养配方饲养，每天灌胃200μl生理盐水；营养配方+菌组换为实施例一营养配方饲养，每天灌胃菌悬液1×10⁹CFU/200μl。第15天后结束实验。取血并处死小鼠，取小鼠同一位置结肠组织进行组织匀浆，之后通过ELISA试剂盒测定炎症因子。

这些结果如附图3所示，与模型组相比，本发明中营养配方组及营养配方+菌组中的促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6均出现降低。其中变化最为显著的是TNF-α。促进了结肠免疫的平衡，具有抗炎作用。

4、具有显著改善肠炎小鼠的结肠病理学症状的作用

验证4：炎性肠病全营养配方食品改善肠炎小鼠的结肠病理学症状实验

将6-8周SPF级18-20g健康雄性C57BL/6小鼠20只，随机分为4组：空白组，模型组(Model)、营养配方组(对照组)、营养配方+菌组(实施例一)。每组5只，饲养在江南大学实验动物中心，恒定温度21-26℃，湿度40-70％，噪声小于等于60dB，动物照度15-20LX。所有动物实验程序皆由江南大学动物福利与伦理管理委员会进行审查并批准。

实验第1天到第7天在水壶中添加3.5％DSS，正常饮食。期间对老鼠进行称重，观察粪便松散情况、出血情况，来判断造模是否成功。造模成功后自由饮水，模型组正常饮食，每天灌胃200μl生理盐水；配方组的换为对照组营养配方饲养，每天灌胃200μl生理盐水；营养配方+菌组换为实施例一营养配方饲养，每天灌胃菌悬液1×10⁹CFU/200μl。第15天后结束实验。实验结束后取血并处死小鼠，取小鼠同一位置结肠进行组织病理学分析，通过对小鼠结肠组织病理学切片进行苏木精-伊红染色，然后通过切片扫描仪观察组织病理情况。

这些结果如附图4所示，模型组(Model)的隐窝结构不规则甚至消失，并伴随有严重的杯状细胞消失及炎症细胞浸润；营养配方组中可以观察到隐窝的存在，但杯状细胞部分被破坏且存在轻微的炎症细胞浸润；营养配方+菌组结构相对完整，没有明显的炎症细胞浸润，具有一定的缓解和维持作用。

5、具有显著修复肠炎小鼠的结肠粘膜屏障的作用

验证5：炎性肠病全营养配方食品修复肠炎小鼠的结肠粘膜屏障损伤实验

将6-8周SPF级18-20g健康雄性C57BL/6小鼠20只，随机分为4组：空白组，模型组(Model)、营养配方组(对照组)、营养配方+菌组(实施例一)。每组5只，饲养在江南大学实验动物中心，恒定温度21-26℃，湿度40-70％，噪声小于等于60dB，动物照度15-20LX。所有动物实验程序皆由江南大学动物福利与伦理管理委员会进行审查并批准。

实验第1天到第7天在水壶中添加3.5％DSS，正常饮食。期间对老鼠进行称重，观察粪便松散情况、出血情况，来判断造模是否成功。造模成功后自由饮水，模型组正常饮食，每天灌胃200μl生理盐水；配方组的换为对照组营养配方饲养，每天灌胃200μl生理盐水；营养配方+菌组换为实施例一营养配方饲养，每天灌胃菌悬液1×10⁹CFU/200μl。第15天后结束实验。实验结束后取血并处死小鼠，取小鼠同一位置结肠组织进行病理学切片，之后进行阿利新蓝染色，然后通过通过切片扫描仪观察组织粘膜屏障的情况。

肠道覆盖着一层粘液，作为物理屏障保护着肠道，粘液层主要成分是杯状细胞分泌的黏蛋白MUC2，而阿利新蓝可将黏蛋白染成蓝色，所以我们用阿利新蓝染色来检测结肠粘液层的完整度。这些结果如附图5所示，模型组的杯状细胞及粘液层损伤严重；营养配方组小鼠结肠有一层较为完整的粘液层覆盖着小鼠肠道上皮，并含有较多的杯状细胞；营养配方+菌组改善效果最好，其含有大量杯状细胞，排列整齐，形状正常，杯状细胞内含有粘液，为结肠组织提供了良好的保护。

通过动物实验发现，与模型组相比，本发明中营养配方组可使肠炎模型小鼠的体重恢复，降低MPO(髓过氧化物酶)活性，改善结肠病变情况，修复粘膜屏障，减少促炎因子的分泌，可有效地缓解小鼠的肠炎症状。

本发明的目的是以上被测试的全营养配方在辅助治疗成人炎性肠病中也能够应用，本发明所得到的全营养配方食品能够适用于成人，也能够成为单一来源，辅助治疗成人炎性肠病，因此，本发明全营养配方食品在临床应用中具有巨大的应用前景。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (15)

1.一种富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，按照该食品的供能比计算，每100千卡食品包括如下成分：

蛋白质、碳水化合物、膳食纤维、脂肪、复合维生素、复合矿物质、益生菌、营养强化剂，

蛋白质提供15-20千卡的能量，碳水化合物提供50-65千卡的能量，脂肪提供20-30千卡的能量，所述脂肪中中链甘油三脂占总脂肪含量的40％以上，亚油酸提供的能量不低于2.0％，α-亚麻酸提供的能量不低于0.5％；

所述膳食纤维至多2.7g，所述复合维生素至少6.2mg，所述复合矿物质至少527.6mg，所述益生菌含量为1×10⁹CFU，所述营养强化剂为22.2-166.7mg。

2.根据权利要求1所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述蛋白质为酪蛋白。

3.根据权利要求1所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述碳水化合物为麦芽糊精、蔗糖中任意一种或一种以上。

4.根据权利要求1所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述膳食纤维为低聚果糖。

5.根据权利要求1所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述脂肪为植物油类脂肪包括大豆油、椰子油，大豆油与椰子油的质量比为1:3；其中，包含功能性成分亚油酸、α-亚麻酸，按照所述食品供能比计算，每100千卡食品包括2.85g的植物油类脂肪，其中，包含0.50g的亚油酸、以及92.63mg的α-亚麻酸。

6.根据权利要求1所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述复合维生素包括如下成分：维生素A 39-225μg、维生素D 0.8-3.14μg、维生素E至少0.8mg、维生素K1至少4.4μg、维生素B1至少0.07mg、维生素B2至少0.07mg、维生素B6至少0.07mg、维生素B12至少0.13μg、维生素C至少5.6mg、烟酸至少0.2mg、叶酸至少22.2μg、泛酸至少0.29mg、生物素至少2.2μg。

7.根据权利要求6所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述维生素A的来源选自醋酸视黄脂、棕榈酸视黄酯、全反式视黄醇、β-胡萝卜素中任意一种或一种以上；

所述维生素D的来源选自麦角钙化醇、胆钙化醇中的一种或一种以上；

所述维生素E的来源选自d-α-生育酚、dl-α-生育酚、d-α-醋酸生育酚、dl-α-醋酸生育酚、混合生育酚浓缩物、d-α-琥珀酸生育酚、dl-α-琥珀酸生育酚中的一种或一种以上；

所述维生素K1的来源为植物甲萘醌；

所述维生素B1的来源选自盐酸硫胺素、硝酸硫胺素中的一种或一种以上；

所述维生素B2的来源选自核黄素、核黄素-5’-磷酸钠中的一种或一种以上；

所述维生素B6的来源选自盐酸吡哆醇、5’-磷酸吡哆醇中的一种或一种以上；

所述维生素B12的来源选自氰钴胺、盐酸氰钴胺、羟钴胺中的一种或一种以上；

所述维生素C的来源选自L-抗坏血酸、L-抗坏血酸钾、L-抗坏血酸钠、L-抗坏血酸钙、抗坏血酸-6-棕榈酸盐中的一种或一种以上；

所述烟酸的来源选自烟酸、烟酰胺中的一种或一种以上；

所述泛酸的来源选自D-泛酸钠、D-泛酸钙中的一种或一种以上；

所述生物素为D-生物素。

8.根据权利要求1所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述复合矿物质包括如下成分：钠元素至少83mg、钾元素至少111mg、铜元素44-500μg、镁元素18.3mg、铁元素0.83-2.30mg、锌元素0.4-2.2mg、锰元素25-611μg、钙元素至少56mg、磷元素至少40mg、碘元素至少6.7μg、氯元素至多218mg、硒元素3.3-22.2μg、铬1.8-55.6μg、钼5.6-50μg。

9.根据权利要求8所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述钠元素的来源选自氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、柠檬酸钠、碳酸氢钠中的一种或一种以上；

所述钾元素的来源选自磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、葡萄糖酸钾、柠檬酸钾、氯化钾中的一种或一种以上；

所述铜元素的来源选自硫酸铜、柠檬酸铜、葡萄糖酸铜、碳酸铜中的一种或一种以上；

所述镁元素的来源选自硫酸镁、氯化镁、氧化镁、碳酸镁、磷酸氢镁、葡萄糖酸镁中的一种或一种以上；

所述铁元素的来源选自焦磷酸铁、硫酸亚铁、葡萄糖酸亚铁、富马酸亚铁、乙二胺四乙酸铁钠、柠檬酸铁、柠檬酸铁铵中的一种或一种以上；

所述锌元素的来源选自硫酸锌、葡萄糖酸锌、氧化锌、乳酸锌、氯化锌、乙酸锌、柠檬酸锌中的一种或一种以上；

所述锰元素的来源选自硫酸锰、氯化锰、碳酸锰、柠檬酸锰、葡萄糖酸锰中的一种或一种以上；

所述钙元素的来源选自碳酸钙、葡萄糖酸钙、柠檬酸钙、L-乳酸钙、磷酸氢钙、氯化钙、甘油磷酸钙、磷酸三钙、氧化钙、硫酸钙中的一种或一种以上；

所述磷元素的来源选自磷酸钙、磷酸氢钙中的一种或一种以上；

所述碘元素的来源选自碘化钾、碘酸钾、碘化钠中的一种或一种以上；

所述氯元素的来源选自氯化钾、氯化钠、氯化锰、氯化锌、氯化镁、氯化胆碱中的一种或一种以上；

所述硒元素的来源选自亚硒酸钠、硒酸钠中的一种或一种以上；

所述铬元素的来源选自硫酸铬、氯化铬中的一种或一种以上；

所述钼元素的来源选自钼酸钠、钼酸铵中的一种或一种以上。

10.根据权利要求1所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述益生菌为双歧杆菌。

11.根据权利要求10所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述双歧杆菌为保藏编号为GDMCC60797的菌株。

12.根据权利要求1所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述营养强化剂包括牛黄碱、左旋肉碱、肌醇和胆碱中的一种或一种以上。

13.根据权利要求12所述的富含益生菌的全营养配方食品，其特征在于，所述胆碱选自酒石酸氢胆碱、氯化胆碱中的一种或一种以上。

14.一种权利要求1-13任意一项所述富含益生菌的全营养配方食品的制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)将益生菌按照占培养基总质量2～4％的接种量接种到培养基中，于厌氧工作站37℃下培养18h，得到培养液；将培养液离心，得到菌体；将菌体用pH为7.4的磷酸盐缓冲液清洗3次后用冻干保护剂重悬，冻干保护剂和菌体的质量比为2:1，得到重悬液；将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到冷冻干燥后的益生菌粉；

(2)采用湿法工艺将蛋白质碳水化合物、膳食纤维、脂肪、复合维生素、复合矿物质、营养强化剂混合制备成全营养配方粉，再与步骤(1)得到的益生菌粉混合。

15.权利要求1-13任意一项所述富含益生菌的全营养配方食品的应用，其特征在于，将该食品用于制备辅助治疗炎性肠病营养品的应用。

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