CN110609102A - 获得食品提取液的方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提出了获得食品提取液的方法。该方法包括:将食品进行萃取处理,所述萃取处理是在乙腈和正己烷存在的条件下进行的,将萃取处理后获得的乙腈层溶液进行浓缩处理,将浓缩处理产物进行溶解处理,所述溶解处理是在甲醇和乙酸钠存在的条件下进行的,以及将溶解处理产物进行洗涤处理,所述洗涤处理是在正己烷存在的条件下进行的,所述洗涤处理形成的甲醇/乙酸钠层构成所述食品提取液。该操作简单、耗时短、成本低、提取充分,杂质少。
Description
技术领域
本发明涉及食品领域,具体地,本发明涉及获得食品提取液的方法及其应用。
背景技术
酸性橙Ⅱ属于化工染料,通常是金黄色粉末,故俗称金黄粉。工业上主要用在羊毛、皮革、蚕丝、锦纶、纸张的染色。同时,它又是一种指示剂,医学上常用于组织切片的染色。食品工业中,酸性橙Ⅱ属非食用色素,食品中禁止加入。这些物质如果在食品加工中使用,人食用后可能会引起食物中毒,长期食用甚至会致癌。但是,一些不法商贩利用其色泽鲜艳、着色力强、价格低廉的特点,将其作为色素掺入食品的生产与加工中以牟利,从而严重危害着消费者的身体健康。
目前检测食品中酸性橙Ⅱ没有国标方法,只有出口食品方法SN/T 3536-2013《出口食品中酸性橙Ⅱ的检测方法》,该方法操作繁琐、耗时长、成本高、检出限较高(0.1mg/kg),且对于少量添加酸性橙Ⅱ的食品无法检测出来。
因而,开发操作简单、耗时短、成本低、检出限低的检测食品中酸性橙Ⅱ的方法成为迫切需要。
发明内容
本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的:
现有技术中检测食品中的酸性橙Ⅱ的方法,均存在操作繁琐、检测时间长、检测成本高(每个样品的检测均需要使用一个新的固相萃取小柱,每个固相萃取小柱成本约14元人民币)且对于少量添加酸性橙Ⅱ的食品无法检测出来的问题。
基于上述问题和事实的发现,发明人提出了一种获得食品提取液(提取出食品中的酸性橙II)的方法以及利用该方法获得的食品提取液进行检测食品中酸性橙II的方法,该方法操作简单,操作时间短(大约节约5h)、检测成本低廉(不使用固相萃取小柱),检出限较低,能低至达到0.0038mg/kg。
在本发明的第一方面,本发明提出了一种获得食品提取液的方法。根据本发明的实施例,所述方法包括:将食品进行萃取处理,所述萃取处理是在乙腈和正己烷存在的条件下进行的,将萃取处理后获得的乙腈层溶液进行浓缩处理,将浓缩处理产物进行溶解处理,所述溶解处理是在甲醇和乙酸钠存在的条件下进行的,以及将溶解处理产物进行洗涤处理,所述洗涤处理是在正己烷存在的条件下进行的,所述洗涤处理形成的甲醇/乙酸钠层构成所述食品提取液。酸性橙II是一种式(I)所述的化合物,是一种盐的形式,现有技术中通常采用碱性物质将其游离出来,再采用醇类等极性较大的溶剂提取,然而直接利用该方法来提取食品中的酸性橙II,会面临着杂质过多的、提取不完全的问题,如现有技术中采用乙醇-氨来提取,需要经过固相萃取柱等方法净化,且检出限很高。而发明人在实验中惊喜地发现,采用乙腈和正己烷对食品进行萃取、洗涤等处理,能极大程度地提取出食品中的酸性橙II,且提取液中几乎没有杂质。根据本发明实施例的方法操作简单、耗时短、成本低、重复性好、提取充分,根据发明实施例的方法所获得的食品提取液中,除酸性橙II外,不含或极少含杂质。
根据本发明的实施例,上述方法还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一:
根据本发明的实施例,所述食品预先经过破碎处理。经过破碎处理的食品利用本发明实施例的方法提取更充分,耗时更短。
需要说明的是,本发明的食品不受特别限制,饮料、红酒、辣椒酱、黄鱼和卤肉类等食品都可以适用于根据本发明实施例的方法。根据本发明的具体实施例,所述食品包括选自辣椒酱、辣椒粉、卤肉、卤蛋的至少之一。根据本发明实施例的方法获得上述食品的提取液的效果更佳。
根据本发明的实施例,所述萃取处理是通过如下方式进行的:(1)将食品与乙腈、正己烷进行第一混合处理,以便得到第一混合液,所述第一混合液包括乙腈层以及正己烷层,(2)将步骤(1)得到的正己烷层溶液与乙腈进行第二混合处理,以便得到第二混合液,所述第二混合液包括乙腈层和正己烷层,(3)将步骤(1)的得到的乙腈层溶液与步骤(2)得到的乙腈层溶液进行合并处理,以便获得萃取处理产物。发明人发现,通过第一混合处理,能将食品中大部分的酸性橙II萃取到乙腈溶液中,然后通过第二混合处理,能将第一混合处理后剩余的少部分酸性橙II萃取出,将两次混合后得到的乙腈层溶液合并,即可得到萃取获得产物。需要说明的是,这里的萃取处理产物就是前面所述的将萃取处理后获得的乙腈层溶液。根据本发明实施例的方法,操作简单,耗时短,成本低廉,能最大程度地提取出食品中的酸性橙II,且几乎不含其它杂质。
根据本发明的实施例,所述乙腈为正己烷饱和的乙腈,所述正己烷为乙腈饱和的正己烷。发明人发现,用乙腈提取样品中的酸性橙II,用正己烷除去某些样品中的油脂成分,由于正己烷和乙腈有微弱的互溶性,在提取前先将乙腈和正己烷饱和,能避免在液液萃取时造成的乙腈提取液中的酸性橙II目标物进入到正己烷溶液中造成的损失,由此,根据本发明实施例的方法的提取效率进一步提高。
需要说明的是乙腈饱和的正己烷的用量不受特别限制,只需要满足充分饱和和静置,并使提取体系中的样品提取充分即可。根据本发明的具体实施例,所述食品与所述乙腈饱和的正己烷的用量比为5g:5mL。由此,根据本发明实施例的方法的提取效率进一步提高。
需要说明的是正己烷饱和的乙腈的用量不受特别限制,只需要满足充分饱和和静置,并使提取体系中的样品提取充分即可。
根据本发明的具体实施例,所述食品与所述正己烷饱和的乙腈的用量比为5g:(10~30)mL。由此,根据本发明实施例的方法的提取效率进一步提高。
根据本发明的具体实施例,所述食品与所述正己烷饱和的乙腈的用量比为5g:20mL。由此,根据本发明实施例的方法的提取效率更进一步提高。
需要说明的是,所述溶解处理所用的溶剂以及其比例不受特别限制,只要能满足溶解浓缩处理后产物即可。根据本发明的具体实施例,在所述溶解处理中,所述乙酸钠是以乙酸钠溶液的形式提供的,所述甲醇与乙酸钠溶液的体积比为65:35,所述乙酸钠溶液的浓度为0.02mol/L。发明人发现,采用根据本发明具体实施例的溶剂来溶解,与后续进行液相色谱检测的流动相一致,进而更加简化操作、节省时间。
根据本发明的实施例,所述萃取和洗涤处理是在涡旋的条件下进行的。由此,萃取、洗涤处理的效率进一步提高。
根据本发明的实施例,所述萃取处理进一步在超声频率为100KHZ的条件下进行不少于10min。由此,萃取处理的效率进一步提高。
在本发明的第二方面,本发明提出了一种检测食品中酸性橙Ⅱ的方法。根据本发明的实施例,所述方法包括:(1)利用前面所述的方法,对所述食品进行提取处理,以便获得食品提取液;(2)对所述食品提取液进行液相色谱检测,以便确定提取液中酸性橙Ⅱ的含量。根据本发明实施例的方法,操作简单、耗时短、成本低、检测结果准确、重复性好、检出限能低至0.0038mg/kg。
根据本发明的实施例,上述方法进一步包括如下附加技术特征至少之一:
根据本发明的实施例,所述提取液预先经过过滤处理。由此,能过滤掉不溶性微粒,满足液相色谱检测的条件。
根据本发明的实施例,所述过滤处理是通过0.45μM的滤膜进行的。由此,能更佳地过滤掉不溶性微粒,更好地满足液相色谱检测的条件。
根据本发明的实施例,所述液相色谱的条件如下所示:
色谱柱:C18,250mm*4.6,5μm;
流动相:甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35;
流速:1.0ml/min;
检测波长:484nm;
进样量:20μl;
柱温:室温。上述条件能够准确检测出酸性橙II。
在本发明的第三方面,本发明提出了一种检测食品中酸性橙II的方法。根据本发明的实施例,所述方法包括:(1)将食品进行萃取处理,所述萃取处理是在正己烷饱和的乙腈和乙腈饱和的正己烷存在的条件下进行的,所述食品预先经过破碎处理,所述食品包括选自辣椒酱、辣椒粉、卤肉、卤蛋的至少之一,所述萃取处理是通过如下方式进行的:a)将食品与正己烷饱和的乙腈、乙腈饱和的正己烷进行第一混合处理,以便得到第一混合液,所述第一混合液包括乙腈层以及正己烷层,所述第一混合处理是在涡旋的条件下进行的,所述第一混合处理进一步在超声频率为100KHZ的条件下进行不少于10min,所述食品与所述乙腈饱和的正己烷的用量比为5g:5mL,所述食品与所述正己烷饱和的乙腈的用量比为5g:20mL,b)将步骤a)得到的正己烷层溶液与正己烷饱和的乙腈进行第二混合处理,以便得到第二混合液,所述第二混合液包括乙腈层和正己烷层,所述第二混合处理是在涡旋的条件下进行的,所述正己烷饱和的乙腈的用量为20mL,c)将步骤a)的得到的乙腈层溶液与步骤b)得到的乙腈层溶液进行合并处理,以便获得萃取处理产物,(2)将步骤(1)中萃取处理后获得的乙腈层溶液进行浓缩处理,(3)将浓缩处理产物进行溶解处理,所述溶解处理是在甲醇和乙酸钠存在的条件下进行的,所述乙酸钠是以乙酸钠溶液的形式提供的,所述甲醇与乙酸钠溶液的体积比为65:35,所述乙酸钠溶液的浓度为0.02mol/L,(4)将溶解处理产物进行洗涤处理,所述洗涤处理是在乙腈饱和的正己烷存在的条件下进行的,所述洗涤处理形成的甲醇/乙酸钠层构成所述食品提取液,所述洗涤处理是在涡旋的条件下进行的,(5)对所述食品提取液进行液相色谱检测,以便确定食品提取液中酸性橙Ⅱ的含量,所述提取液预先经过过滤处理,所述过滤处理是通过0.45μM的滤膜进行的;所述液相色谱的条件如下所示:
色谱柱:C18,250mm*4.6,5μm;
流动相:甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35;
流速:1.0ml/min;
检测波长:484nm;
进样量:20μl;
柱温:室温。根据本发明实施例的方法,操作简单、耗时短、成本低、重复性好、检测结果准确、检出限能低至0.0038mg/kg。
附图说明
图1是根据本发明实施例的酸性橙II的标准曲线回归方程的线性图;
图2是根据本发明实施例的标准品图;
图3是根据本发明实施例的标准曲线图;
图4是根据本发明实施例的样品图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例,所述实施例的示例在附图中示出。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的,旨在用于解释本发明,而不能理解为对本发明的限制。
需要说明的是,为了更好的验证本申请的检测出食品中的酸性橙Ⅱ的方法的准确度、重复性、精密度、检出限等,发明人采取在食品中添加不同浓度的酸性橙Ⅱ,并通过与SN/T3536-2013方法进行检测结果的对比来说明本申请的方法的效果。本申请的实施例1~3均采用卤肉作为检测基质,本申请实施例1~3的提取方法均是按照下面所述的本申请的一般提取方法进行,本申请对比实施例1~3的方法均是按照SN/T 3536-2013的提取方法进行,本申请实施例1~3、以及对比实施例1~3的色谱检测条件均是按照下面的色谱检测条件进行。
本申请的一般提取方法:
(1)称取卤肉5.00g(卤肉预先进行粉碎),向基质中加入20ml正己烷饱和的乙腈,涡旋混合,超声处理10min,加入5ml乙腈饱和的正己烷,涡旋混合,超声处理10min,进行分层,得到乙腈层和正己烷层,
(2)取乙腈层至旋转蒸发瓶中,同时往正己烷层再加入20ml正己烷饱和的乙腈涡旋混合,取乙腈层至同一个旋转蒸发瓶中,50℃下蒸发至近干,
(3)往旋转蒸发瓶中加2ml甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35,涡旋混合,再次加入5ml乙腈饱和的正己烷,涡旋混合,取甲醇:乙酸钠层液体,通过0.45μm有机滤膜,上机检测。
SN/T 3536-2013的提取方法:
(1)液体试样:准确称取样品10.00g(精确至0.01g)(如含有乙醇需水浴加热除去乙醇后再用水定容至原体积)于25mL容量瓶中,用水定容至刻度,混匀,过0.45μm滤膜后,待测。固态试样:准确称取已粉碎样品2.00g(精确至0.01g),加乙醇-氨溶液20ml,超声波提取30min,再振荡提取10min后,仪不低于5000r/min的转速离心10min,重复提取一次,合并上清液,浓缩约至10ml,混匀后待净化。
(2)将步骤(1)中待净化液转移至固相萃取柱中,依次用3mL甲酸水溶液、3mL甲醇溶液淋洗,用6mL氨水甲醇溶液洗脱。整个国相萃取过程流速控制在5mL/min之内。收集洗脱液,氮吹至近干,加水定容至2mL,涡旋混合1min,过0.45μm滤膜后,待测。
色谱检测条件
色谱柱:C18,250mm*4.6,5μm;
流动相:甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35;
流速:1.0ml/min;
检测波长:484nm;
进样量:20μl;
柱温:室温。
实验结果:
1、检测限
按照本发明的检测条件,配制标准曲线,酸性橙Ⅱ的曲线范围为0.1μg/ml-10μg/ml,以目标峰的峰面积为纵坐标(y),酸性橙Ⅱ的浓度为横坐标(x),绘制标准曲线;逐级稀释法分析方法的检出限和定量限,根据信噪比为3的峰响应值,得出方法检出限;根据信噪比为10的峰响应值,得出方法的定量限,结果见表1。可以看出,实施例1和实施例2可以检测较低浓度的待测物。其中,对比例1和2是采用SN/T3536-2013的方法进行检测的。
表1:
项目 | 实施例1 | 实施例2 | 对比例1 | 对比例2 | |
检测限(mg/kg) | 酸性橙Ⅱ | 0.0038 | 0.0038 | 0.1 | 0.1 |
2、曲线方程
吸取酸性橙Ⅱ标准溶液,配成浓度为0μg/ml、0.1μg/ml、0.2μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、10μg/ml的标准曲线。浓度由低到高进样检测,以峰面积-浓度作图,见图1,得到标准曲线回归方程。Y=1.0710X-0.0213,R2=0.99995。标准品图谱见图2,标准曲线图见图3。
3、回收率:
实施例1:按照本发明方法对第一个加标点同时进行6水平检测。
实施例2:按照本发明方法对第二个加标点同时进行6水平检测。
实施例3:按照本发明方法对第三个加标点同时进行6水平检测。
对比例1~3分别按照SN/T 3536-2013的方法对比同一种基质样品进行3个加标点6水平检测。
结果见表2(实施例结果)及表3(对比例结果)。由表2可以得出,3组实施例,每组6个水平样品检测回收率在92.7%-102%之间,要较高于SN/T 3536-2013方法的回收率71.5%-89.5%。其中,加标样品的图谱见图4。
表2:
表3:
4、检测结果比较
将上述实施例1~3表格数据中每组六个数据进行相对标准偏差计算,对比例1~3每组六个数据进行相对标准偏差计算,得出的精密度(相对标准偏差)。
由表4可以看出,根据本发明实施例的方法可以大大节约检测时间和投入成本。
表4:
5、方法适用性
分别选取不同基质类型样品,进行1个加标点6水平检测,结果见表5,由表5可以得出本发明适用于辣椒酱、辣椒粉、卤肉、卤蛋常见基质中酸性橙的检测,回收率为92.7%~100.8%,符合方法要求。
表5:
综上可知,根据本发明实施例的方法相较于现有技术(SN/T 3536-2013)的准确度更高、重复性更好、精密度更好、检出限更低、所需时间更短、操作更简便、成本更低廉。
对比例4
与实施例1~3的区别在于,所使用的溶剂为乙腈和正己烷,而不是正己烷饱和的乙腈和乙腈饱和的正己烷,回收率较实施例1~3有了明显的降低,分析原因可能是在加入正己烷时,由于乙腈和正己烷溶液在液液混合时,有微量的互溶情况,导致已经提取到乙腈中的酸性橙Ⅱ溶解到正己烷中造成的损失。结果见表6。
表6:
由此可知,根据本发明实施例的方法中使用的溶剂为乙腈和正己烷,而不是正己烷饱和的乙腈和乙腈饱和的正己烷时,也能基本满足本发明的技术效果,但是根据本发明实施例的方法使用的溶剂为正己烷饱和的乙腈和乙腈饱和的正己烷时,准确度能进一步提高。
对比例5
与实施例1~3的区别在于,步骤(1)中的溶剂的用量不同,具体实验结见表7,由表7得出,更改步骤(1)中不同用量的提取溶剂,结果表明使用10ml正己烷饱和的乙腈,涡旋混合,超声处理10min,加入3ml乙腈饱和的正己烷检测结果偏低;使用20ml正己烷饱和的乙腈,涡旋混合,超声处理10min,加入5ml乙腈饱和的正己烷,结果符合要求;使用30ml正己烷饱和的乙腈,涡旋混合,超声处理10min,加入10ml乙腈饱和的正己烷,结果符合要求,但存在药品浪费情况,所以采用20ml正己烷饱和的乙腈,涡旋混合,超声处理10min,加入5ml乙腈饱和的正己烷进行提取。
表7:
由此可知,根据本发明实施例的方法中步骤(1)中使用的溶剂的量的不同都能基本满足本发明的技术效果,其中,步骤(1)中提取溶剂体系为20ml正己烷饱和的乙腈,涡旋混合,超声处理10min,加入5ml乙腈饱和的正己烷的提取效果最佳。
对比例6
与实施例1~3的区别在于,步骤(2)中的溶剂的用量不同,具体实验结见表8,由表8得出,更改步骤(2)中不同用量的提取溶剂,结果表明:取乙腈层至旋转蒸发瓶中,同时往正己烷层再加入10ml正己烷饱和的乙腈涡旋混合,取乙腈层至同一个旋转蒸发瓶中,50℃下蒸发至近干,回收率偏低;取乙腈层至旋转蒸发瓶中,同时往正己烷层再加入20ml正己烷饱和的乙腈涡旋混合,取乙腈层至同一个旋转蒸发瓶中,50℃下蒸发至近干,回收率符合要求;取乙腈层至旋转蒸发瓶中,同时往正己烷层再加入30ml正己烷饱和的乙腈涡旋混合,取乙腈层至同一个旋转蒸发瓶中,50℃下蒸发至近干;回收率符合要求,但存在药品浪费情况,所以采用取乙腈层至旋转蒸发瓶中,同时往正己烷层再加入30ml正己烷饱和的乙腈涡旋混合,取乙腈层至同一个旋转蒸发瓶中,50℃下蒸发至近干。
表8:
由此可知,根据本发明实施例的方法中步骤(2)中使用的溶剂的量的不同都能基本满足本发明的技术效果,其中,步骤(2)中提取溶剂体系为取乙腈层至旋转蒸发瓶中,同时往正己烷层再加入20ml~30mL的正己烷饱和的乙腈涡旋混合,取乙腈层至同一个旋转蒸发瓶中,50℃下蒸发至近干的提取效果最佳。
对比例7
与实施例1~3的区别在于,步骤(3)中的溶剂的用量不同,具体实验结果见表9,由表9得出,更改步骤(3)中不同用量的溶解溶剂,往旋转蒸发瓶中加1ml甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35,涡旋混合,再次加入2ml乙腈饱和的正己烷,涡旋混合,取甲醇:乙酸钠层液体,结果偏低;往旋转蒸发瓶中加2ml甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35,涡旋混合,再次加入5ml乙腈饱和的正己烷,涡旋混合,取甲醇:乙酸钠层液体,结果符合要求;往旋转蒸发瓶中加3ml甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35,涡旋混合,再次加入7ml乙腈饱和的正己烷,涡旋混合,取甲醇:乙酸钠层液体,结果符合要求,但存在药品浪费情况,所以采用往旋转蒸发瓶中加2ml甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35,涡旋混合,再次加入5ml乙腈饱和的正己烷,涡旋混合,取甲醇:乙酸钠层液体,通过0.45μm有机滤膜,上机检测。
表9:
由此可知,根据本发明实施例的方法中步骤(3)中使用的溶剂的量的不同都能基本满足本发明的技术效果,其中,步骤(3)中溶解溶剂为往旋转蒸发瓶中加2ml甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35,涡旋混合,再次加入5ml乙腈饱和的正己烷,涡旋混合,取甲醇:乙酸钠层液体或往旋转蒸发瓶中加3ml甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35,涡旋混合,再次加入7ml乙腈饱和的正己烷,涡旋混合,取甲醇:乙酸钠层液体的提取效果最佳。
在本说明书的描述中,参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外,在不相互矛盾的情况下,本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例,可以理解的是,上述实施例是示例性的,不能理解为对本发明的限制,本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (10)
1.一种获得食品提取液的方法,其特征在于,包括:
将食品进行萃取处理,所述萃取处理是在乙腈和正己烷存在的条件下进行的,
将萃取处理后获得的乙腈层溶液进行浓缩处理,
将浓缩处理产物进行溶解处理,所述溶解处理是在甲醇和乙酸钠存在的条件下进行的,以及
将溶解处理产物进行洗涤处理,所述洗涤处理是在正己烷存在的条件下进行的,所述洗涤处理形成的甲醇/乙酸钠层构成所述食品提取液。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述食品预先经过破碎处理;
任选地,所述食品包括选自辣椒酱、辣椒粉、卤肉、卤蛋的至少之一。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述萃取处理是通过如下方式进行的:
(1)将食品与乙腈、正己烷进行第一混合处理,以便得到第一混合液,所述第一混合液包括乙腈层以及正己烷层,
(2)将步骤(1)得到的正己烷层溶液与乙腈进行第二混合处理,以便得到第二混合液,所述第二混合液包括乙腈层和正己烷层,
(3)将步骤(1)的得到的乙腈层溶液与步骤(2)得到的乙腈层溶液进行合并处理,以便获得萃取处理产物。
4.根据权利要求1或3所述的方法,其特征在于,所述乙腈为正己烷饱和的乙腈,所述正己烷为乙腈饱和的正己烷。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述食品与所述乙腈饱和的正己烷的用量比为5g:5mL;
任选地,所述食品与所述正己烷饱和的乙腈的用量比为5g:(10~30)mL,优选为5g:20mL。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述溶解处理中,所述乙酸钠是以乙酸钠溶液的形式提供的,所述甲醇与乙酸钠溶液的体积比为65:35,所述乙酸钠溶液的浓度为0.02mol/L。
7.根据权利要求1或3所述的方法,其特征在于,所述萃取和洗涤处理是在涡旋的条件下进行的;
优选地,所述萃取处理进一步在超声频率为100KHZ条件下进行不少于10min。
8.一种检测食品中酸性橙Ⅱ的方法,其特征在于,包括:
(1)利用权利要求1~7任一项所述的方法,对所述食品进行提取处理,以便获得食品提取液;
(2)对所述食品提取液进行液相色谱检测,以便确定提取液中酸性橙Ⅱ的含量。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述提取液预先经过过滤处理;
任选地,所述过滤处理是通过0.45μM的滤膜进行的;
任选地,所述液相色谱的条件如下所示:
色谱柱:C18,250mm*4.6,5μm;
流动相:甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35;
流速:1.0ml/min;
检测波长:484nm;
进样量:20μl;
柱温:室温。
10.一种检测食品中酸性橙Ⅱ的方法,其特征在于,包括:
(1)将食品进行萃取处理,所述萃取处理是在正己烷饱和的乙腈和乙腈饱和的正己烷存在的条件下进行的,所述食品预先经过破碎处理,所述食品包括选自辣椒酱、辣椒粉、卤肉、卤蛋的至少之一,所述萃取处理是通过如下方式进行的:
a)将食品与正己烷饱和的乙腈、乙腈饱和的正己烷进行第一混合处理,以便得到第一混合液,所述第一混合液包括乙腈层以及正己烷层,所述第一混合处理是在涡旋的条件下进行的,所述第一混合处理进一步在超声频率为100KHZ条件下进行不少于10min,所述食品与所述乙腈饱和的正己烷的用量比为5g:5mL,所述食品与所述正己烷饱和的乙腈的用量比为5g:20mL,
b)将步骤a)得到的正己烷层溶液与正己烷饱和的乙腈进行第二混合处理,以便得到第二混合液,所述第二混合液包括乙腈层和正己烷层,所述第二混合处理是在涡旋的条件下进行的,所述正己烷饱和的乙腈的用量为20mL,
c)将步骤a)的得到的乙腈层溶液与步骤b)得到的乙腈层溶液进行合并处理,以便获得萃取处理产物,
(2)将步骤(1)中萃取处理后获得的乙腈层溶液进行浓缩处理,
(3)将浓缩处理产物进行溶解处理,所述溶解处理是在甲醇和乙酸钠存在的条件下进行的,所述乙酸钠是以乙酸钠溶液的形式提供的,所述甲醇与乙酸钠溶液的体积比为65:35,所述乙酸钠溶液的浓度为0.02mol/L,
(4)将溶解处理产物进行洗涤处理,所述洗涤处理是在乙腈饱和的正己烷存在的条件下进行的,所述洗涤处理形成的甲醇/乙酸钠层构成所述食品提取液,所述洗涤处理是在涡旋的条件下进行的,
(5)对所述食品提取液进行液相色谱检测,以便确定食品提取液中酸性橙Ⅱ的含量,所述提取液预先经过过滤处理,所述过滤处理是通过0.45μM的滤膜进行的;所述液相色谱的条件如下所示:
色谱柱:C18,250mm*4.6,5μm;
流动相:甲醇:乙酸钠(0.02mol/L)=65:35;
流速:1.0ml/min;
检测波长:484nm;
进样量:20μl;
柱温:室温。
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