CN110577924A - 一种进化驯化嗜盐微藻的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种进化驯化嗜盐微藻的方法，属于生物质资源开发利用领域，该方法将嗜盐微藻分离成盐藻藻落，再进行活化，采用多步骤适应性进化方法降低渗透压剧变引起的嗜盐微藻的细胞损失，并通过LED的光生物反应器反复驯化微藻。该方法通过调控盐度设置，合理改变环境压力，实现嗜盐微藻的适应性进化，从而提升在类海水盐度培养条件下叶黄素的产量。本发明具有环境友好特点，有利于海洋资源利用和环境保护，利用逐步降低盐度进行环境压力驱动的适应性进化驯化盐藻，使得盐藻产叶黄素水平获得显著提高，具有良好的工业化前景。

Description

一种进化驯化嗜盐微藻的方法
技术领域
本发明属于生物质资源利用领域，具体地涉及一种进化驯化嗜盐微藻的方法。
背景技术
类胡萝卜素特别是叶黄素和beta-胡萝卜素等色素在全球范围内具有数十亿美元的应用市场。目前全球市场对于天然类胡萝卜素的需求越来越大。叶黄素作为抗氧化剂已被广泛应用于医药、食品和化妆品领域。嗜盐杜氏盐藻在应对环境压力时往往积累大量的类胡萝卜素，目前已开发成为beta-胡萝卜素的生产藻种。除了光照条件，盐度也是非常重要的环境因素影响杜氏盐藻的生长和色素积累。杜氏盐藻往往以高盐度条件如1.5M NaCl盐度条件作为最适生长条件,作为对照，海水中的氯化钠盐度大约在0.5M NaCl左右。目前叶黄素的生产多采用高等植物(如万寿菊等)作为原料，存在原料来源难且得率低，对环境影响大等问题；而利用微藻生产叶黄素，目前得率还比较低，并且使用高盐培养基，成本较高。因此亟需开发新型的工艺和方法来利用低廉的类海水培养基驯化盐藻来快速生产叶黄素。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种进化驯化嗜盐微藻的方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：一种进化驯化嗜盐微藻的方法，具体包括如下步骤：
1)将嗜盐微藻在Gg-8平板培养基上划线，并置于20-50μE/m2/s荧光灯条件下进行培养，培养温度为20-25℃，培养时间约1-2周，获得分离的盐藻藻落。
2)将步骤1获得的盐藻藻落接种于含30-50ml Gg-8培养基的摇瓶中，转速为100-150rpm，在20-25℃条件下培养5-7天，得到活化的藻种。
3)将步骤2所得活化的藻种接种至含300-400ml Gg-8培养基的光生物反应器中，接种活化的藻种的体积占培养基的20-25％，通入体积浓度为0.5-2.0％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5-7.5，培养温度为20-25℃，光照强度为200-300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的25％-50％，利用半连续培养模式，反复驯化微藻直到其生长速率恢复到未驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第一驯化盐藻。
4)将步骤3获得的第一驯化盐藻置于浓度为0.9-1.2M的NaCl溶液的光生物反应器中培养中进行培养，其余培养条件同步骤3，即该光生物反应器含300-400ml Gg-8培养基，接种活化的藻种的体积占培养基的20-25％，通入体积浓度为0.5-2.0％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5-7.5，培养温度为20-25℃，光照强度为200-300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的25％-50％，利用半连续培养模式，反复驯化第一驯化盐藻，直到其生长速率恢复到第一驯化盐藻驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第二驯化盐藻。
5)将步骤4获得的第二驯化盐藻置于浓度为0.45-0.75M的NaCl溶液的光生物反应器中进行培养，其他培养条件同步骤3，即该光生物反应器含300-400ml Gg-8培养基，接种活化的藻种的体积占培养基的20-25％，通入体积浓度为0.5-2.0％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5-7.5，培养温度为20-25℃，光照强度为200-300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的25％-50％，利用半连续培养模式，反复驯化第二驯化盐藻直到其生长速率恢复到第二驯化盐藻驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第三驯化盐藻。
进一步地，所述嗜盐微藻包括盐氏杜氏藻和巴氏杜氏藻等。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：采用多步骤适应性进化方法降低渗透压剧变引起的嗜盐微藻的细胞损失，并通过LED的光生物反应器反复驯化微藻，利用逐步降低的盐度条件进行适应性进化，并最终实现在类海水盐度下的适应性进化驯化微藻。该方法通过调控盐度设置，合理改变环境压力，实现嗜盐微藻的适应性进化，从而提升在类海水盐度培养条件下叶黄素的产量。同时本方法采用光合自养微生物，即微藻作为细胞工厂，利用二氧化碳，无机盐溶液和光能进行光合作用，整个生产体系低碳清洁，具有可持续性发展的特点。该方法也具有环境友好特点，有利于海洋资源利用和环境保护，利用逐步降低盐度进行环境压力驱动的适应性进化驯化盐藻，使得盐藻产叶黄素水平获得显著提高，微藻细胞积累叶黄素水平可达驯化前的3倍，具有良好的工业化前景。
附图说明
图1是适应性进化方法实施的基本流程；
图2是适应性进化的三个步骤分别获得的生物质产量；
图3是第一驯化盐藻获得叶黄素和叶绿素b的含量提升图；
图4是第二驯化盐藻获得叶黄素和叶绿素b的含量提升图；
图5是第三驯化盐藻获得叶黄素和叶绿素b的含量提升图。
具体实施方式
以下结合实施例和附图进一步详述本发明，应理解，所述是对本发明的解释而不是限定。
实施例1
如图1所示为适应性进化方法实施的基本流程，一种进化驯化嗜盐微藻的方法，具体包括如下步骤：
1)将盐氏杜氏藻(得克萨斯大学菌种保藏中心编号UTEX LB#200)在Gg-8平板培养基上划线，并置于20μE/m2/s荧光灯条件下进行培养，培养温度为20℃，培养时间2周，获得分离的盐藻藻落。
2)将步骤1获得的盐藻藻落接种于含30ml Gg-8培养基的摇瓶中，转速为100rpm，在20℃条件下培养5天，得到活化的藻种。
3)将步骤2所得活化的藻种接种至含300ml Gg-8培养基的光生物反应器中，接种活化的藻种的体积占培养基的20％，通入体积浓度为0.5％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5，培养温度为20℃，光照强度为200μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的25％，利用半连续培养模式，反复驯化微藻直到其生长速率恢复到未驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第一驯化盐藻。
4)将步骤3获得的第一驯化盐藻置于浓度为0.9M的NaCl溶液的光生物反应器中进行培养，其他培养条件同步骤3，即该光生物反应器含300ml Gg-8培养基，通入体积浓度为0.5％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5，培养温度为20℃，光照强度为200μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的25％，利用半连续培养模式，反复驯化第一驯化盐藻，直到其生长速率恢复到第一驯化盐藻驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第二驯化盐藻。
5)将步骤4获得的第二驯化盐藻置于浓度为0.45M的NaCl溶液的光生物反应器中进行培养，其他培养条件同步骤3，即该光生物反应器含300ml Gg-8培养基，通入体积浓度为0.5％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5，培养温度为20℃，光照强度为200μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的25％，利用半连续培养模式，反复驯化第二驯化盐藻直到其生长速率恢复到第二驯化盐藻驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第三驯化盐藻。
图2为适应性进化的三个步骤分别获得的生物质产量，分别对第一驯化盐藻、第二驯化盐藻、第三驯化盐藻取样，测OD，根据OD和微藻细胞干重的关系获得生物质浓度，可用于计算微藻生长速率，生物质倍增时间及生物质产量。第一次驯化结束的生物质产量约0.6克干重每升每天(gDCW/L/day)，第二次驯化结束获得的生物质产量约0.57gDCW/L/day，第三次驯化后获得的生物质产量约0.54gDCW/L/day，说明经本方法驯化后的微藻生物质产量可以恢复到接近初始最佳生长条件下的产量水平。
图3-5分别为第一驯化盐藻、第二驯化盐藻、第三驯化盐藻生产叶黄素和胡萝卜素b的水平。分别将第一驯化盐藻、第二驯化盐藻、第三驯化盐藻通过离心收集并洗涤，利用乙醇和正己烷的体积比为2:1混合提取色素，并利用高效液相色谱进行分析检测，对第一驯化盐藻、第二驯化盐藻、第三驯化盐藻中叶黄素和叶绿素b的含量进行定量检测。其中第一驯化盐藻的叶黄素和叶绿素b的产量分别提高至未驯化水平的1.2倍和1.74倍(图3)；第二驯化盐藻的叶黄素和叶绿素b的产量分别提高到第一驯化盐藻的1.24倍和1.17倍(图4)；第三驯化盐藻的叶黄素和叶绿素b的产量分别提高到第二驯化盐藻的1.99倍和1.03倍(图5)；可以得出，最终叶黄素积累水平可达未驯化前的3倍。
由上述实施例的方法进化驯化的盐氏杜氏藻，能够实现叶黄素的快速生产。
实施例2
一种进化驯化嗜盐微藻的方法，具体包括如下步骤：
1)将盐氏杜氏藻(得克萨斯大学菌种保藏中心编号UTEX LB#1644)在Gg-8平板培养基上划线，并置于50μE/m2/s荧光灯条件下进行培养，培养温度为25℃，培养时间1周，获得分离的盐藻藻落。
2)将步骤1获得的盐藻藻落接种于含50ml Gg-8培养基的摇瓶中，转速为150rpm，在25℃条件下培养3天，得到活化的藻种。
3)将步骤2所得活化的藻种接种至含400ml Gg-8培养基的光生物反应器中，接种活化的藻种的体积占培养基的25％，通入体积浓度为2.0％的二氧化碳，控制培养基的pH为7.5，培养温度为25℃，光照强度为300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的50％，利用半连续培养模式，反复驯化微藻直到其生长速率恢复到未驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第一驯化盐藻。
4)将步骤3获得的第一驯化盐藻置于浓度为1.2M的NaCl溶液的光生物反应器中进行培养，其他培养条件同步骤3，即该光生物反应器含400ml Gg-8培养基，通入体积浓度为2.0％的二氧化碳，控制培养基的pH为7.5，培养温度为25℃，光照强度为300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的50％，利用半连续培养模式，反复驯化第一驯化盐藻，直到其生长速率恢复到第一驯化盐藻驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第二驯化盐藻。
5)将步骤4获得的第二驯化盐藻置于浓度为0.75M的NaCl溶液的光生物反应器中进行培养，其他培养条件同步骤3，即该光生物反应器含400ml Gg-8培养基，通入体积浓度为2.0％的二氧化碳，控制培养基的pH为7.5，培养温度为25℃，光照强度为300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的50％，利用半连续培养模式，反复驯化第二驯化盐藻直到其生长速率恢复到第二驯化盐藻驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第三驯化盐藻。
分别对第一驯化盐藻、第二驯化盐藻、第三驯化盐藻取样，测OD，根据OD和微藻细胞干重的关系获得生物质浓度并计算生物质产量。第一次驯化结束的生物质产量约0.6克干重每升每天(gDCW/L/day)，第二次驯化结束获得的生物质产量约0.56gDCW/L/day，第三次驯化后获得的生物质产量约0.54gDCW/L/day。
分别将第一驯化盐藻、第二驯化盐藻、第三驯化盐藻通过离心收集并洗涤，利用乙醇和正己烷的体积比为2:1混合提取色素，并利用高效液相色谱进行分析检测，对第一驯化盐藻、第二驯化盐藻、第三驯化盐藻中叶黄素和叶绿素b的含量进行定量检测。最终叶黄素和叶绿素b含量的最终积累水平均可达到未驯化前的2倍。
由上述实施例的方法进化驯化的盐氏杜氏藻，能够实现叶黄素的快速生产。
实施例3
一种进化驯化嗜盐微藻的方法，具体包括如下步骤：
1)将巴氏杜氏藻(得克萨斯大学菌种保藏中心编号UTEX LB#2538)在Gg-8平板培养基上划线，并置于50μE/m2/s荧光灯条件下进行培养，培养温度为20℃，培养时间约2周，获得分离的盐藻藻落。
2)将步骤1获得的盐藻藻落接种于含50ml Gg-8培养基的摇瓶中，转速为100rpm，在20℃条件下培养5天，得到活化的藻种。
3)将步骤2所得活化的藻种接种至含300ml Gg-8培养基的光生物反应器中，接种活化的藻种的体积占培养基的25％，通入体积浓度为1％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5，培养温度为25℃，光照强度为300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的50％，利用半连续培养模式，反复驯化微藻直到其生长速率恢复到未驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第一驯化盐藻。
4)将步骤3获得的第一驯化盐藻置于浓度为1M的NaCl溶液的光生物反应器中进行培养，其他培养条件同步骤3，即该光生物反应器含300ml Gg-8培养基，通入体积浓度为1％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5，培养温度为25℃，光照强度为300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的50％，利用半连续培养模式，反复驯化第一驯化盐藻，直到其生长速率恢复到第一驯化盐藻驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第二驯化盐藻。
5)将步骤4获得的第二驯化盐藻置于浓度为0.5M的NaCl溶液的光生物反应器中进行培养，其他培养条件同步骤3，即该光生物反应器含300ml Gg-8培养基，通入体积浓度为1％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5，培养温度为25℃，光照强度为300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的50％，利用半连续培养模式，反复驯化第二驯化盐藻直到其生长速率恢复到第二驯化盐藻驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第三驯化盐藻。
分别对第一驯化盐藻、第二驯化盐藻、第三驯化盐藻取样，测OD，根据OD和微藻细胞干重的关系获得生物质浓度并计算生物质产量。第一次驯化结束的生物质产量约0.5克干重每升每天(gDCW/L/day)，第二次驯化结束获得的生物质产量约0.48gDCW/L/day，第三次驯化后获得的生物质产量约0.46gDCW/L/day。
分别将第一驯化盐藻、第二驯化盐藻、第三驯化盐藻通过离心收集并洗涤，利用乙醇和正己烷的体积比为2:1混合提取色素，并利用高效液相色谱进行分析检测，对第一驯化盐藻、第二驯化盐藻、第三驯化盐藻中叶黄素和叶绿素b的含量进行定量检测。最终叶黄素和叶绿素b含量的最终积累水平均可达驯化前的2.4倍。
由上述实施例的方法进化驯化的巴氏杜氏藻，能够实现叶黄素的快速生产。

Claims (2)

1.一种进化驯化嗜盐微藻的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
1)将嗜盐微藻在Gg-8平板培养基上划线，并置于20-50μE/m2/s荧光灯条件下进行培养，培养温度为20-25℃，培养时间约1-2周，获得分离的盐藻藻落。
2)将步骤1获得的盐藻藻落接种于含30-50ml Gg-8培养基的摇瓶中，转速为100-150rpm，在20-25℃条件下培养5-7天，得到活化的藻种。
3)将步骤2所得活化的藻种接种至含300-400ml Gg-8培养基的光生物反应器中，接种活化的藻种的体积占培养基的20-25％，通入体积浓度为0.5-2.0％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5-7.5，培养温度为20-25℃，光照强度为200-300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的25％-50％，利用半连续培养模式，反复驯化微藻直到其生长速率恢复到未驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第一驯化盐藻。
4)将步骤3获得的第一驯化盐藻置于浓度为0.9-1.2M的NaCl溶液的光生物反应器中培养中进行培养，其余培养条件同步骤3，即该光生物反应器含300-400ml Gg-8培养基，接种活化的藻种的体积占培养基的20-25％，通入体积浓度为0.5-2.0％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5-7.5，培养温度为20-25℃，光照强度为200-300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的25％-50％，利用半连续培养模式，反复驯化第一驯化盐藻，直到其生长速率恢复到第一驯化盐藻驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第二驯化盐藻。
5)将步骤4获得的第二驯化盐藻置于浓度为0.45-0.75M的NaCl溶液的光生物反应器中进行培养，其他培养条件同步骤3，即该光生物反应器含300-400ml Gg-8培养基，接种活化的藻种的体积占培养基的20-25％，通入体积浓度为0.5-2.0％的二氧化碳，控制培养基的pH为6.5-7.5，培养温度为20-25℃，光照强度为200-300μE/m2/s，光源为红蓝光混合LED光，其中，蓝光占混合LED光的25％-50％，利用半连续培养模式，反复驯化第二驯化盐藻直到其生长速率恢复到第二驯化盐藻驯化水平的95％左右并且其叶黄素积累水平提升到稳定不变的水平，获得第三驯化盐藻。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述嗜盐微藻包括盐氏杜氏藻和巴氏杜氏藻等。
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Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104277976A (zh) * 2014-10-22 2015-01-14 临沂大学 盐生杜氏藻提纯和驯化方法
CN104480015A (zh) * 2014-11-25 2015-04-01 临沂大学 一种盐生杜氏藻快速培养方法
CN106399111A (zh) * 2016-11-22 2017-02-15 福州大学 一种同步提高自养微藻的叶黄素和碳水化合物产量的方法
CN106591135A (zh) * 2016-12-06 2017-04-26 天津农学院 海水微藻通用培养基及培养方法
CN106754388A (zh) * 2016-12-27 2017-05-31 新奥科技发展有限公司 一种拟微绿球藻及其驯化方法和应用
CN107201313A (zh) * 2017-06-21 2017-09-26 威海海洋职业学院 一种杜氏盐藻光发酵培养液配方及其快速培养方法
EP3246311A1 (en) * 2016-05-21 2017-11-22 National Institute of Ocean Technology Process for the production of lutein

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104277976A (zh) * 2014-10-22 2015-01-14 临沂大学 盐生杜氏藻提纯和驯化方法
CN104480015A (zh) * 2014-11-25 2015-04-01 临沂大学 一种盐生杜氏藻快速培养方法
EP3246311A1 (en) * 2016-05-21 2017-11-22 National Institute of Ocean Technology Process for the production of lutein
CN106399111A (zh) * 2016-11-22 2017-02-15 福州大学 一种同步提高自养微藻的叶黄素和碳水化合物产量的方法
CN106591135A (zh) * 2016-12-06 2017-04-26 天津农学院 海水微藻通用培养基及培养方法
CN106754388A (zh) * 2016-12-27 2017-05-31 新奥科技发展有限公司 一种拟微绿球藻及其驯化方法和应用
CN107201313A (zh) * 2017-06-21 2017-09-26 威海海洋职业学院 一种杜氏盐藻光发酵培养液配方及其快速培养方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HUI CHEN ET AL: "Osmotic responses of Dunaliella to the changes of salinity", 《J CELL PHYSIOL》 *
WEIQI FU ET AL: "Enhancement of carotenoid biosynthesis in the green microalga Dunaliella salina with light-emitting diodes and adaptive laboratory evolution", 《APPL MICROBIOL BIOTECHNOL》 *
YIXI SU ET AL: "Adaptive Laboratory Evolution for enhanced carotenoid production in microalgae", 《METHODS IN MOLECULAR BIOLOGY》 *
成永旭 等: "《生物饵料培养学》", 31 August 2005, 中国农业出版社 *
程建峰: "《盐生杜氏藻的研究与开发》", 31 December 2013 *

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