CN110577561A - 一种采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，属于医药制备技术领域。以人参二醇组皂苷为原料，经无机酸的乙醇水溶液前处理后，加入辐照助剂，通过60Co‑γ射线的辐照技术，于常温下辐照1‑15kGy；吸附柱纯化后，得目标物人参皂苷Rg3。本发明采用高能射线强化酸选择性水解，通过辐照制备所得的人参皂苷Rg3较普通酸水解得到的收率大幅度提高，催化时间更短，酸用量明显减少；并有效提高目标物产量和得率，同时，保证本制备方法操作简单、成本低及效率高。

Description

一种采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法
技术领域
本发明涉及一种制备人参皂苷Rg3的方法，尤其涉及一种采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，属于医药制备技术领域。
背景技术
人参皂苷是一种固醇类化合物，为四环三萜类皂苷，是五加科人参属植物（如：人参、三七及西洋参等）的主要药效成分。现代药理学研究表明，人参皂苷具有抗衰老、抗氧化、抗疲劳、抗炎、增强免疫力等多种功效。“人参皂苷衍生化及其抗肿瘤构效关系研究进展，曹满等”中记载：人参皂苷具有不同程度的抗肿瘤活性，其在抗癌活性构效关系的强弱规律为：原人参二醇型>原人参三醇型；苷元>单糖苷>二糖苷>三糖苷>四糖苷，其中，人参皂苷Rg3是一种具有二糖苷结构的人参二醇型皂苷，由人参二醇组皂苷（Rb1、Rb2、Rb3、Rc和Rd）通过选择性水解而得到的次级人参皂苷，具有抗疲劳、增强免疫力、降血压、抗肿瘤等功效，且人参皂苷Rg3对肝癌、肺癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌等具有明显的抑制作用。
目前，制备人参皂苷Rg3常采用的方法包括：
一、物理法，一般在高温高压条件下进行，处理时间长，分离纯化繁琐；
二、化学法，采用酸和碱进行转化，较容易定向水解而生成人参皂苷Rg3，成本低、操作简便，但反应温度一般需要控制为80～120℃，且人参二醇组皂苷易发生脱水、位移、环合等副反应；
三、生物法，反应条件相对温和，但成本高，反应条件苛刻，从而限制了其工业化应用。
传统的技术方法不同程度的存在产率低、时间长、 能耗大等不足，为适应时代发展的需要应当不断创新与改进。而辐照技术具有常温操作、环保无污染的优点，更与传统工艺有着优良的契合性，使得人参皂苷转化工艺成本降低、转化效率大幅度增加。但辐照转化机理上还未研究透彻，在转化工艺上具有广泛的拓展空间，无论在机理研究还是工艺开发上都具有巨大的开发价值。
在公开号为CN105218613A，名称为“一种快速高效水解三七叶总皂苷制备人参皂苷Rg3，Rh2的方法”的发明专利文献中，公开了：采用无机酸、微波降解三七叶总皂苷制备人参皂苷Rg3，微波是波长为0.1mm～1m的电磁波，主要作用是使水分子产生极化和旋转，仅起到分子搅拌作用，以此促进化学反应；且在该专利技术方案中，人参皂苷Rg3生成量及得率较低。
在公开号为CN102993258A，名称为“一种水解人参总皂苷制备人参皂苷Rg3的方法”的发明专利文献中，公开了：采用乙醇和乙酸水解人参二醇组皂苷制备人参皂苷Rg3，但其需要在80～85℃条件下水解，且在该专利技术方案中，人参皂苷Rg3生成量及得率也较低。
在公开号为CN106556658A，名称为“一种提高人参叶中人参皂苷含量的方法”的发明专利文献中，公开了：采用远红外线辐照处理人参叶粉末，以得富含人参皂苷Rk1和Rg5的提取物。在该技术方案中，以人参二醇组皂苷原料，在乙醇及无机酸的前处理下，再经过远红外线辐照，得到目标物Rg3；远红外线是波长为0.75～1000μm的电磁波，主要作用是使粒子发生不规则运动，继而引起物体的升温作用和共振运动，以此促进物理变化和化学反应；且在该专利技术方案中，反应温度为160～200℃，反应温度高，能耗大；而本技术方案在常温下反应即可进行，具有明显的技术和节能优势；
在公开号为CN104487079A，名称为“通过微波辐照产生的具有提高的人参皂苷Rg3、Rg5和Rk1含量比的人参属植物提取物、制备所述人参属植物提取物的方法以及包含所述人参属植物提取物的组合物”的发明专利中，公开了：通过对人参属植物或其提取物进行微波辐照获得的相对于人参皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rd、Re3、Rk1和Re5重量而言包含90%或更高Rg3、Rk1和Rg5的人参属植物提取物，制备人参属植物提取物的方法，以及用于以下的药物组合物和健康功能性食品组合物：改善抗癌药物的副作用（例如降低免疫力和产生抗癌药物抗性）之一，提高抗氧化、抗癌、抗炎、脑功能或认知功能，血管舒张，抑制血小板聚集，改善皮炎或改善银屑病。在该技术方案中，Rg3的得率较低（最高仅为20.08～23.32%）。
发明内容
γ射线是原子核能级跃迁退激时释放出的射线，由核衰变和正反物质湮灭方式产生，是波长短于0.01埃的电磁波，具有非常高的能量和极强的穿透能力。60Co-γ射线发射光子的平均能量为1.25MeV，远高于C、O原子的第一电离能，60Co-γ射线与人参二醇组皂苷原子的外层电子发生康普顿效应，进而产生康普顿电子和人参二醇组皂苷激发分子。人参二醇组皂苷分子发生糖苷键断裂，反应生成人参皂苷Rg3，人参二醇组皂苷激发分子与氢离子在60Co-γ射线作用下，更容易发生氧苷键贴氢反应和氧苷键断裂反应，进而提高人参皂苷Rg3生成速率，同时，乙醇在60Co-γ射线作用下，发生抽氢反应，抑制人参皂苷Rg3的降解、脱水及重排反应，进而提高人参皂苷Rg3的生成量。
基于此原理，本发明为了克服现有技术的不足，而提出了一种采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法。在本技术方案中，人参二醇组皂苷为原料，通过60Co-γ射线的辐照作用，制备目标物人参皂苷Rg3；有效提高目标物产量和得率，同时，保证本制备方法操作简单、成本低及效率高。
为了实现上述技术目的，提出如下的技术方案：
一种采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，包括如下步骤：
A.以人参二醇组皂苷为原料，加入无机酸的乙醇水溶液，得到质量体积比1：5～1：10的人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液；
B.向人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液中加入质量比为0.5～5%的辐照助剂，搅拌至完全溶解；
C.将经步骤B所得的混合液置于辐照反应器中，密封，以60Co-γ射线为辐照源，以0.5～3 kGy/h为辐照剂量率，常温下辐照1～15kGy；吸附柱纯化后，经检测，得目标物人参皂苷Rg3粗品。
进一步的，在步骤A中，所述无机酸的乙醇水溶液配制：先采用无水乙醇和双蒸水先配置成不同质量分数的乙醇水溶液，再向其中加入无机酸，配置成无机酸乙醇水溶液。乙醇水溶液质量分数为30～70%，无机酸浓度为0.1～2.0M。
进一步的，所述无机酸为硝酸、硫酸、磷酸及盐酸中的一种或至少两种的混合。
进一步的，所述辐照助剂为过硫酸铵、过硫酸钾、过氧化氢、抗坏血酸、维生素E及TEMPO（2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物）中的一种或至少两种的混合。
进一步的，所述乙醇水溶液质量分数为50～60%、无机酸浓度为0.5～1.0M及辐照剂量为3～5kGy时，所得到的目标物Rg3得率最高，制备时间最短，制备成本最低，故其为本技术方案中的优选。
进一步的，在步骤C中，向辐照后的溶液中加入碱水溶液，调pH至7～8以终止反应；然后将溶液减压浓缩至无醇味，再进行吸附柱分离纯化。
进一步的，所述碱水溶液包括质量分数25～28%的氨水、1moL/L 氢氧化钠水溶液及1moL/L 氢氧化钾水溶液中一种或至少两种的混合。
进一步的，在步骤C中，采用吸附柱进行纯化，且经高效液相色谱仪进行检测，其中，吸附柱中条件满足：
填料为AB-8大孔树脂，树脂粒径为0.3～1.25mm，密度为0.6～0.7g/mL，孔隙率为42～46%，柱长为50cm，内径为10cm，流速为1000 mL/h，温度为25℃，压力为1atm，洗脱液包括双蒸水和质量分数为70%的乙醇水溶液；
高效液相色谱仪内检测条件满足：
色谱柱为：AccLaimTMC18色谱柱，4.6mm x 150mm，5μm；
色谱柱柱温为：25℃；
流动相为：流动相A为乙腈，流动相B为双蒸水；
洗脱梯度：0→18 min，流动相A浓度为15%，流动相B 浓度为85%；18→28 min，流动相A浓度为23%，流动相B 浓度为77%；28→47 min，流动相A浓度为30%，流动相B 浓度为70%； 47→52 min，流动相A浓度为44%，流动相B 浓度为56%；52→69 min，流动相A浓度为68%，流动相B 浓度为32%；69→84 min，流动相A浓度为100%，流动相B 浓度为0%；84→89 min，流动相A浓度为92%，流动相B 浓度为8%；
流动相流速：1.0 mL/min；
测定波长为：203 nm；
进样量为：10μL。
所涉及液相样品制备方法为：取1g纯化后的人参皂苷Rg3粗品，加入质量分数为70%的乙醇水溶液10mL，搅拌至完全溶解，为检测的进样溶液。
Rg3得率计算公式为：Rg3得率 = Rg3产物含量 ×（粗品含量 ÷ 投料量）
所述辐照反应器为耐辐射、耐酸的密闭容器，体积根据实际需求而自由设定。
所述人参二醇组皂苷为采用现有成熟技术从五加科人参属植物各部位提取获得，所选取植物包括人参、西洋参、三七等，所选取植物部位可以是根、茎、叶、花等；或者，人参二醇组皂苷直接市场购买获得。
采用本技术方案，带来的有益技术效果为：
1）在本发明中，人参二醇组皂苷为原料，采用高能射线（60Co-γ射线）强化酸选择性水解，使得皂苷水解更加完全，进而通过本辐照制备所得的人参皂苷Rg3较普通酸水解得到的收率大幅度提高，催化时间更短，酸用量明显减少；并有效提高目标物产量和得率，同时，保证本制备方法操作简单、成本低及效率高；
2）尽管现有技术（公开号为CN105218613A）中公开了采用微波快速高效水解三七叶总皂苷制备人参皂苷Rg3，但其所采用的微波与本发明中采用的60Co-γ射线有本质区别，其中，微波是波长为0.1mm～1m的电磁波，主要作用是使水分子产生极化和旋转，仅起到分子搅拌作用，以此促进化学反应；在本发明中，60Co-γ射线是原子核能级跃迁退激时释放出的射线，通过核衰变和正反物质湮灭方式产生，是波长短于0.01埃的电磁波，具有非常大的能量和极强的穿透能力，60Co-γ射线与人参皂苷原子的外层电子发生康普顿效应，产生康普顿电子和人参二醇组皂苷激发分子，发生氧苷键贴氢反应和氧苷键断裂反应，进一步破坏人参皂苷分子结构，即本发明中的选择性水解更为彻底和完全，具体表现为：本发明与该现有技术相比，粗品中人参皂苷Rg3得率增加24.17～31.67%，所用酸量减少64.00～79.14%；且本发明可用廉价、耐辐射、耐酸的玻璃或塑料容器，而现有技术中采用昂贵的微波反应器；且本发明采用低能耗的高能γ射线进行制备，成本低；
3）尽管现有技术（公开号为CN102993258A）中公开了乙醇和乙酸水解人参二醇组皂苷制备人参皂苷Rg3，但其水解效率低、水解质量差，且能耗高（水解条件为80～85℃），具体表现为：本发明与该现有技术相比，粗品中人参皂苷Rg3得率增加了3.5～12.35%，即得出本发明生产效率高；以及本发明所用酸量减少了50.34～51.72%，即得出本发明成本低；以及本发明为常温制备而无需加热，即得出本发明能耗低，且本发明操作简单，制备周期短；
4）在本发明中，以高能射线使物质产生降解或化学反应，具有常温操作、环保无污染、穿透性好、副产物少等优点，是一种节约能源、减少污染的绿色工艺。目前，辐照技术在中药研究中，多集中于中药材辐照灭菌方面的基础研究，应用范围较窄，而将辐照技术应用于中药材（尤其是人参等高附加值药食同源药材）的研究中，采用高能射线引发人参皂苷化学反应，促进稀有成分高效转化，具有极大的研究意义和市场价值。
附图说明
图1 为本发明中以人参二醇组皂苷制备人参二醇皂Rg3的反应原理图
图2为本发明实施例10中编号5与空白对照分别制备人参二醇皂Rg3的色谱图。
具体实施方式
下面通过对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，包括如下步骤：
A.以人参二醇组皂苷为原料，加入无机酸的乙醇水溶液，得到质量体积比1：5的人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液；
B.向人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液中加入质量比为0.5%的辐照助剂，搅拌至完全溶解；
C.将经步骤B所得的混合液置于辐照反应器中，密封，以60Co-γ射线为辐照源，以0.5kGy/h为辐照剂量率，常温下辐照1kGy；吸附柱纯化后，经检测，得目标物人参皂苷Rg3粗品。
所述辐照反应器为玻璃材质或者防酸耐辐射的塑料材质，其容积根据实际需求而自由设置，包括0.1～1000 L。
实施例2
一种采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，包括如下步骤：
A.以人参二醇组皂苷为原料，加入无机酸的乙醇水溶液，得到质量体积比1：10的人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液；
B.向人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液中加入质量比为5%的辐照助剂，搅拌至完全溶解；
C.将经步骤B所得的混合液置于辐照反应器中，密封，以60Co-γ射线为辐照源，以3kGy/h为辐照剂量率，常温下辐照15kGy；吸附柱纯化后，经检测，得目标物人参皂苷Rg3粗品。
实施例3
一种采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，包括如下步骤：
A.以人参二醇组皂苷为原料，加入无机酸的乙醇水溶液，得到质量体积比1：7的人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液；
B.向人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液中加入质量比为2%的辐照助剂，搅拌至完全溶解；
C.将经步骤B所得的混合液置于辐照反应器中，密封，以60Co-γ射线为辐照源，以1.5kGy/h为辐照剂量率，常温下辐照4kGy；吸附柱纯化后，经检测，得目标物人参皂苷Rg3粗品。
实施例4
一种采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，包括如下步骤：
A.以人参二醇组皂苷为原料，加入无机酸的乙醇水溶液，得到质量体积比1：8的人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液；
B.向人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液中加入质量比为4.6%的辐照助剂，搅拌至完全溶解；
C.将经步骤B所得的混合液置于辐照反应器中，密封，以60Co-γ射线为辐照源，以2.5kGy/h为辐照剂量率，常温下辐照13kGy；吸附柱纯化后，经检测，得目标物人参皂苷Rg3粗品。
实施例5
在实施例1-4的基础上，更进一步的，
在步骤A中，所述无机酸的乙醇水溶液配制：先采用无水乙醇和双蒸水先配置成不同质量分数的乙醇水溶液，再向其中加入无机酸，配置成无机酸乙醇水溶液。乙醇水溶液质量分数为30%，无机酸浓度为0.1M。
所述无机酸为硝酸。
所述辐照助剂为过硫酸铵与TEMPO（2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物）的混合。
所述乙醇水溶液质量分数为50%、无机酸浓度为0.5M及辐照剂量为3kGy时，所得到的目标物Rg3得率高，制备时间最短，制备成本最低。
在步骤C中，向辐照后的溶液中加入碱水溶液，调pH至7以终止反应；然后将溶液减压浓缩至无醇味，再进行吸附柱纯化。
所述碱水溶液为质量分数25%的氨水。
实施例6
在实施例5的基础上，本实施例区别在于：
在步骤A中，所述无机酸的乙醇水溶液配制：先采用无水乙醇和双蒸水先配置成不同质量分数的乙醇水溶液，再向其中加入无机酸，配置成无机酸乙醇水溶液。乙醇水溶液质量分数为70%，无机酸浓度为2.0M。
所述无机酸为磷酸及盐酸的混合。
所述辐照助剂为过硫酸钾。
所述乙醇水溶液质量分数为60%、无机酸浓度为1.0M及辐照剂量为5kGy时，所得到的目标物Rg3得率高，制备时间最短，制备成本最低。
在步骤C中，向辐照后的溶液中加入碱水溶液，调pH至8以终止反应；然后将溶液减压浓缩至无醇味，再进行吸附柱纯化。
所述碱水溶液包括质量分数28%的氨水与1moL/L 氢氧化钠水溶液的混合。
实施例7
在实施例5-6的基础上，本实施例区别在于：
在步骤A中，所述无机酸的乙醇水溶液配制：先采用无水乙醇和双蒸水先配置成不同质量分数的乙醇水溶液，再向其中加入无机酸，配置成无机酸乙醇水溶液。乙醇水溶液质量分数为50%，无机酸浓度为0.8M。
所述无机酸为硫酸、磷酸及盐酸的混合。
所述辐照助剂为抗坏血酸与维生素E的混合。
所述乙醇水溶液质量分数为55%、无机酸浓度为0.8M及辐照剂量为4kGy时，所得到的目标物Rg3得率高，制备时间最短，制备成本最低。
在步骤C中，向辐照后的溶液中加入碱水溶液，调pH至7.5以终止反应；然后将溶液减压浓缩至无醇味，再进行吸附柱纯化。
所述碱水溶液为1moL/L 氢氧化钾水溶液。
实施例8
在实施例5-7的基础上，本实施例区别在于：
在步骤A中，所述无机酸的乙醇水溶液配制：先采用无水乙醇和双蒸水先配置成不同质量分数的乙醇水溶液，再向其中加入无机酸，配置成无机酸乙醇水溶液。乙醇水溶液质量分数为65%，无机酸浓度为1.9M。
所述无机酸为硫酸。
所述辐照助剂为过硫酸钾。
所述乙醇水溶液质量分数为57%、无机酸浓度为0.6M及辐照剂量为4.2kGy时，所得到的目标物Rg3得率高，制备时间最短，制备成本最低。
在步骤C中，向辐照后的溶液中加入碱水溶液，调pH至8以终止反应；然后将溶液减压浓缩至无醇味，再进行吸附柱纯化。
所述碱水溶液包括1moL/L 氢氧化钠水溶液及1moL/L 氢氧化钾水溶液的混合。
实施例9
在实施例5-8的基础上，更进一步，
采用吸附柱进行纯化，且经高效液相色谱仪进行检测，其中，吸附柱中条件满足：
填料为AB-8大孔树脂，树脂粒径为0.3～1.25mm，密度为0.6～0.7g/mL，孔隙率为42～46%，柱长为50cm，内径为10cm，流速为1000 mL/h，温度为25℃，压力为1atm，洗脱液包括双蒸水和质量分数为70%的乙醇水溶液；
高效液相色谱仪内检测条件满足：
色谱柱为：AccLaimTMC18色谱柱，4.6mm x 150mm，5μm；
色谱柱柱温为：25℃；
流动相为：流动相A为乙腈，流动相B为双蒸水；
洗脱梯度：0→18 min，流动相A浓度为15%，流动相B 浓度为85%；18→28 min，流动相A浓度为23%，流动相B 浓度为77%；28→47 min，流动相A浓度为30%，流动相B 浓度为70%； 47→52 min，流动相A浓度为44%，流动相B 浓度为56%；52→69 min，流动相A浓度为68%，流动相B 浓度为32%；69→84 min，流动相A浓度为100%，流动相B 浓度为0%；84→89 min，流动相A浓度为92%，流动相B 浓度为8%；
流动相流速：1.0 mL/min；
测定波长为：203 nm；
进样量为：10μL。
所涉及高效液相色谱仪检测的液相样品制备方法为：取1g纯化后的人参皂苷Rg3粗品，加入质量分数为70%的乙醇水溶液10mL，搅拌至完全溶解，为检测的进样溶液；此外，取1g人参二醇组皂苷原料，加入质量分数为70%的乙醇水溶液10mL，搅拌至完全溶解，为高效液相色谱仪检测的空白对照（如图2所示）。
且根据图2所得：本技术方案成功制备目标物人参皂苷Rg3，原料反应完全。
所述Rg3得率计算公式为：Rg3得率 = Rg3产物含量 ×（粗品含量 ÷ 投料量）
实施例10
取乙醇水溶液1000g和无机酸，加入原料人参二醇组皂苷200g和辐照助剂12g，充分搅拌使完全溶解，采取Co60-γ射线辐照后，用浓氨水调节pH 值至7～8，将液体浓缩至无醇味，浓缩液由顶端加入至直径为10cm、高为50cm及内装1000g AB-8大孔树脂的玻璃柱中，用2000mL 双蒸水洗脱，弃去水洗液；吸附柱继续用70% 的乙醇水溶液2000mL 洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到皂苷粗品，皂苷粗品取样进行HPLC检测，再分别得人参皂苷20（S）-Rg3含量及人参皂苷20（R）-Rg3含量，具体如下表1所示：
对照例1
取体积-体积比为95%乙醇3.5L、 质量-体积比为36%的乙酸0.5L、水1L，混合制成含乙醇为66.5%（体积-体积比）、含乙酸为7.2%（质量-体积比）的溶液， 置50 L的水解罐中，加入200g人参二醇组皂苷，充分搅拌使完全溶解，蒸汽加热至温度为80℃开始计时，加热回流水解90min，取出，减压蒸发至无醇味，用浓氨水调节pH值至7.0，由顶端加入到直径为10cm高为500cm的AB-8大孔树脂的玻璃吸附柱中，用2L水洗脱，弃去水洗液。玻璃吸附柱用65%的乙醇水溶液2L洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗品155.8g，皂苷粗品取样进行HPLC检测，人参皂苷20(S) -Rg3含量29.52%，人参皂苷20（R）-Rg3含量11.37%。
对照例2
取水溶液和浓盐酸配制成浓度为1mol/L的盐酸溶液100ml，加入人参二醇组皂苷20g充分搅拌使完全溶解，在800W微波反应器中于100°C水解 20 分钟，用浓氨水调节pH 值至7～8，将液体浓缩至无醇味，浓缩液由顶端加入内装100gAB-8大孔树脂的玻璃吸附柱中，用200mL双蒸水洗脱，弃去水洗液；玻璃吸附柱继续用70% 的乙醇水溶液200mL洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到粗品16.1g，皂苷粗品取样进行HPLC检测，人参皂苷20(S) -Rg3含量21.70%，人参皂苷20(R)-Rg3含量14.74%。
对照例3
一、基于实施例10，以本技术方案中所涉及的无机酸浓度（具体为盐酸）、乙醇浓度、辐照剂量和辐照剂量率为辐照制备方法中的因素（如下表2），进行正交试验（如下表3），以对本发明做进一步说明。
从表3中，可知：各因素影响顺序为B（乙醇浓度）>A（盐酸浓度）>D（辐照剂量）>C（辐照剂量率），优选工艺为A2B1C1D3，即盐酸浓度0.5mol/L，乙醇浓度50%，辐照剂量3kGy，辐照剂量率3kGy/h；而在制备效率、成本及人参皂苷Rg3纯度等多重因素的综合影响下，限定：在本技术方案的无机酸的乙醇水溶液中，乙醇水溶液质量分数为30～70%，无机酸浓度为0.1～2.0M；以及辐照剂量率为0.5～3 kGy/h，辐照剂量为1～15kGy。
二、基于实施例10，讨论本技术方案中所涉及的辐照助剂种类对Rg3得率的影响（如下表4），其中，无机酸是浓度为1mol/L的盐酸，辐照剂量为5kGy，辐照剂量率为3kGy/h，以对本发明做进一步说明。
三、基于实施例10，讨论本技术方案中所涉及的无机酸种类及皂苷原料溶液质量比对Rg3得率的影响（如下表5），其中，无机酸是浓度为1mol/L的盐酸，辐照剂量为5kGy，辐照剂量率为3kGy/h，以对本发明做进一步说明。

Claims (10)

1.一种采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，其特征在于，包括如下步骤：
A.以人参二醇组皂苷为原料，加入无机酸的乙醇水溶液，得到人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液；
B.向人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液中加入辐照助剂，搅拌至完全溶解，得混合液；
C.将经步骤B所得的混合液置于辐照反应器中，密封；以60Co-γ射线为辐照源，以0.5～3 kGy/h为辐照剂量率，于常温下辐照1～15kGy；然后，向辐照后的溶液中加入碱水溶液，调pH至7～8以终止反应；最后将溶液减压浓缩至无醇味，吸附柱纯化后，得目标物人参皂苷Rg3粗品。
2.根据权利要求1所述的采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，其特征在于，在步骤A的无机酸的乙醇水溶液中，乙醇水溶液质量分数为30～70%，无机酸浓度为0.1～2.0M。
3.根据权利要求1或2所述的采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，其特征在于，在步骤A中，所述无机酸为硝酸、硫酸、磷酸及盐酸中的一种或至少两种的混合。
4.根据权利要求1所述的采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，其特征在于，在步骤A中，所述人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液的质量体积比1：5～1：10。
5.根据权利要求1所述的采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，其特征在于，在步骤B中，所述辐照助剂的添加量为人参二醇组皂苷-无机酸的乙醇水溶液质量的0.5～5%。
6.根据权利要求1或5所述的采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，其特征在于，在步骤B中，所述辐照助剂为过硫酸铵、过硫酸钾、过氧化氢、抗坏血酸、维生素E及2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物中的一种或至少两种的混合。
7.根据权利要求1所述的采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，其特征在于，在步骤C中，所述碱水溶液包括质量分数为25～28%氨水、浓度为1moL/L 氢氧化钠水溶液及浓度为1moL/L 氢氧化钾水溶液中一种或至少两种的混合。
8.根据权利要求1所述的采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，其特征在于，所述乙醇水溶液质量分数为50～60%、无机酸浓度为0.5～1.0M及辐照剂量为3-5kGy。
9.根据权利要求1所述的采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，其特征在于，在步骤C中，采用吸附柱进行纯化，且经高效液相色谱仪进行检测；其中，
吸附柱中条件满足：
填料为AB-8大孔树脂，树脂粒径为0.3～1.25mm，密度为0.6～0.7g/mL，孔隙率为42～46%，柱长为50cm，内径为10cm，流速为1000 mL/h，温度为25℃，压力为1atm，洗脱液包括双蒸水和质量分数为70%的乙醇水溶液；
高效液相色谱仪内检测条件满足：
色谱柱为：AccLaimTMC18色谱柱，4.6*150mm，5μm；
色谱柱柱温为：25℃；
流动相为：流动相A为乙腈，流动相B为双蒸水；
流动相流速：1.0 mL/min；
测定波长为：203 nm；
进样量为：10μL。
10.根据权利要求9所述的采用辐照制备人参皂苷Rg3的方法，其特征在于，在高效液相色谱仪中，以流动相进行梯度洗脱，包括：
0→18 min，流动相A浓度为15%，流动相B 浓度为85%；18→28 min，流动相A浓度为23%，流动相B 浓度为77%；28→47 min，流动相A浓度为30%，流动相B 浓度为70%； 47→52 min，流动相A浓度为44%，流动相B 浓度为56%；52→69 min，流动相A浓度为68%，流动相B 浓度为32%；69→84 min，流动相A浓度为100%，流动相B 浓度为0%；84→89 min，流动相A浓度为92%，流动相B 浓度为8%。
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