CN110551090B - 一种超声波提取中药狗脊中抗肿瘤活性成分的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种超声波提取中药狗脊中抗肿瘤活性成分的方法，包括如下步骤：(1)将干燥的狗脊粉碎与α‑淀粉酶混匀，置于乙醇溶液中，调pH至5.5‑6.5后，于30‑35℃下，超声提取8‑12小时后，过滤收集滤液，滤液浓缩得浸膏；(2)将步骤(1)得到的浸膏分散于适量的水中，用等体积的乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相浓缩后，经硅胶柱层析，即得抗肿瘤活性α‑吡喃酮类化合物1和2，所述α‑吡喃酮类化合物具有如下化合物1‑2所示的结构：

Description

一种超声波提取中药狗脊中抗肿瘤活性成分的方法
技术领域
本发明属于超声提取植物活性成分领域，具体涉及一种超声波提取中药狗脊中抗肿瘤活性成分的方法。
背景技术
狗脊，为蚌壳蕨科金毛狗属植物金毛狗Cibotium barometz(L.)J.Sm.的干燥根茎，是一种中药。据报道，狗脊中含有酚酸类、蕨素类、糖及糖苷等多种化学成分，表现出多种药理活性，例如免疫调节、抗炎、抗肿瘤、降血糖等。本发明利用超声波提取，从狗脊中分离获得一种新型α-吡喃酮类抗肿瘤活性化合物。
发明内容
本发明提供一种抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于所述α-吡喃酮类化合物具有如下化合物1-2所示的结构：
Figure BDA0002241093860000011
本发明的另一实施方案提供上述抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物1-2的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)将干燥的狗脊粉碎与α-淀粉酶混匀，置于乙醇溶液中，调pH至5.5-6.5后，于30-35℃下，超声提取8-12小时后，过滤收集滤液，滤液浓缩得浸膏；
(2)将步骤(1)得到的浸膏分散于适量的水中，用等体积的乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相浓缩后，经硅胶柱层析，即得化合物1和2。
步骤(1)中所述粉碎优选粉碎至20-100目，α-淀粉酶的用量优选为狗脊质量的0.1％-0.12％，乙醇溶液为体积分数为50-95％乙醇溶液，其用量为每克狗脊使用15-20mL乙醇溶液；超声的频率为30-50kHz。
步骤(2)中所述水优选去离子水或蒸馏水，水的用量优选为狗脊质量的0.6-1.0倍；萃取次数优选1-3次；硅胶柱层析的固定相优选100-200目，200-300目、300-400目硅胶，流动相优选乙酸乙酯、石油醚、甲醇、二氯甲烷或氯仿中的一种或几种混合。
本发明的另一实施方案提供上述抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物1-2或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明的另一实施方案提供一种抗肿瘤药物，其特征在于该药物以化合物1、2或其药学上可接受的盐作为有效成分。该药物还可包括其他抗肿瘤活性成分。该药物还任选包括药学上可接受的辅料(优选载体、稀释剂或赋形剂)。所述药物的剂型优选片剂、胶囊或注射剂。
与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明首次在中药狗脊中发现了抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物1-2，扩展了人们对狗脊中的化学成分的认识，有助于人们进一步研究狗脊的药效、作用机制；本发明化合物1-2，尤其是化合物2对HCT116显示出较高的细胞毒活性，有望被开发用于治疗相关肿瘤疾病。
具体实施方式
为了便于对本发明的进一步理解，下面提供的实施例对其做了更详细的说明。但是这些实施例仅供更好的理解发明而并非用来限定本发明的范围或实施原则，本发明的实施方式不限于以下内容。本发明中使用的药材、试剂等均通过商业途径购买，其中α-淀粉酶是商业购买来源于地衣芽孢杆菌的产品。
实施例1
(1)取干燥的狗脊(200g)粉碎至20-100目与α-淀粉酶(200mg)混匀，置于95％乙醇溶液(3.0L)中，调pH至5.5-6.0后，于30℃下，超声提取12小时(超声频率30kHz)后，过滤收集滤液，滤液浓缩得浸膏；
(2)将步骤(1)得到的浸膏分散于去离子水(120mL)中，用等体积的乙酸乙酯萃取1次，乙酸乙酯相浓缩后，经硅胶柱层析(200-300目硅胶，乙酸乙酯/石油醚＝1/10-1/5，体积比)，即得化合物1(白色固体，23mg)和2(白色固体，16mg)。
化合物1：
Figure BDA0002241093860000021
结构确证数据如下：ESI-MS m/z 143.0[M+H]+、165.0[M+Na]+；1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:6.82(1H,s,H-5),5.83(1H,s,H-3),3.87(3H,s)；13C NMR(CDCl3,100MHz)δ:172.1(C-4),164.4(C-2),155.8(C-6)、105.9(C-5)、94.3(C-3)、57.6(C-7)。
化合物2：
Figure BDA0002241093860000031
结构确证数据如下：ESI-MS m/z 215.1[M+H]+、237.1[M+Na]+；1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:4.18(3H,s,OCH3 -8),4.52(2H,s,CH2 -7),4.39(2H,s,CH2 -9)、3.38(3H,s,OCH3 -10)、2.30(3H,s,CH3 -11)；13C NMR(CDCl3,100MHz)δ:171.8(C-4),168.6(C-2),163.2(C-6)、114.9(C-5)、110.1(C-3)、63.4(C-8)、62.5(C-10)、56.0(C-9)、55.4(C-7)、17.4(C-11)。
实施例2
(1)取干燥的狗脊(300g)粉碎(过20目筛后)与α-淀粉酶(360mg)混匀，置于50％乙醇溶液(6.0L)中，调pH至6.0-6.5后，于35℃下，超声提取8小时后(超声频率50kHz)，过滤收集滤液，滤液浓缩得浸膏；
(2)将步骤(1)得到的浸膏分散于去离子水(300mL)中，用等体积的乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯相浓缩后，经硅胶柱层析(100-200目硅胶，乙酸乙酯/石油醚＝1/10-1/5，体积比)，即得化合物1(白色固体，36mg)和2(白色固体，22mg)。结构确证数据与实施例一致。
实施例3
采用MTT方法对人肺癌细胞A549、人结肠癌细胞HCT116进行细胞毒活性测试。具体方法如下：取对数生长期的细胞，调整适当的细胞密度，接种于96孔板内，100μl/孔，培养于37℃，5％CO2的培养箱内，培养24h后加药，作用48h，分设空白组、给药组和阳性对照组(阿霉素作为阳性对照药)，每组设6个复孔；药物作用48h后，将细胞与0.25mg/ml MTT于37℃下共同孵育3-4h，离心，小心吸除培养液后每孔加入100μl DMSO，完全溶解后使用酶标仪于492nm测定其光密度OD值。最后以空白组OD值为100％，计算各组细胞抑制率。细胞抑制率＝1-给药组OD平均值/对照组OD平均值×100％。采用SPSS16.0统计分析软件，对数据进行统计分析，并根据剂量-抑制率等参数用非线性回归计算IC50。结果如下表。
Figure BDA0002241093860000041

Claims (9)

1.一种抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于所述α-吡喃酮类化合物具有如下化合物1-2所示的结构：
Figure FDA0003064429770000011
2.权利要求1所述的抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)将干燥的狗脊粉碎与α-淀粉酶混匀，置于乙醇溶液中，调pH至5.5-6.5后，于30-35℃下，超声提取8-12小时后，过滤收集滤液，滤液浓缩得浸膏；
(2)将步骤(1)得到的浸膏分散于适量的水中，用等体积的乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相浓缩后，经硅胶柱层析，即得化合物1和2。
3.权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤(1)中α-淀粉酶的用量为狗脊质量的0.1％-0.12％，乙醇溶液为体积分数为50％-95％乙醇溶液，其用量为每克狗脊使用15-20mL乙醇溶液；超声的频率为30-50kHz。
4.权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤(2)中所述萃取次数为1-3次。
5.权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤(2)中硅胶柱层析的固定相选自100-200目，200-300目、300-400目硅胶，流动相选自乙酸乙酯、石油醚、甲醇、二氯甲烷或氯仿中的一种或几种混合。
6.权利要求1所述的抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。
7.一种抗肿瘤药物，其特征在于该药物以权利要求1所述的抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。
8.权利要求7所述的抗肿瘤药物，其特征在于该药物还任选包括药学上可接受的辅料。
9.权利要求8所述的抗肿瘤药物，其特征在于所述药物的剂型选自片剂、胶囊或注射剂。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL129871A (en) * 1994-05-06 2003-11-23 Pharmacia & Upjohn Inc Process for preparing 4-phenyl-substituted octanoyl-oxazolidin-2-one intermediates that are useful for preparing pyran-2-ones useful for treating retroviral infections
DE19750623A1 (de) * 1997-11-14 1999-05-20 Schwabe Willmar Gmbh & Co Pyranone, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung
US20070111952A1 (en) * 2003-11-28 2007-05-17 Benoit Mathieu Glycosylated triketide delta lactones
WO2007047646A2 (en) * 2005-10-14 2007-04-26 Janssen Pharmaceutica, N.V. Substituted dihydro-isoindolones useful in treating kinase disorders
CN100514057C (zh) * 2007-02-13 2009-07-15 美晨集团股份有限公司 构建狗脊药材hplc标准指纹图谱和鉴别药材质量的方法
CN102477400B (zh) * 2010-11-30 2014-07-23 上海来益生物药物研究开发中心有限责任公司 一种刺盘孢菌及其应用
US20170349548A1 (en) * 2014-12-26 2017-12-07 Biosystem Consulting Limited Company P21-activated kinase inhibitor
CN105924418B (zh) * 2016-04-29 2018-08-07 东北农业大学 一种新的吡喃酮类化合物及其制备方法和应用

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