CN110478313A

CN110478313A - 一种卡络磺钠注射液

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Publication number: CN110478313A
Application number: CN201910413275.0A
Authority: CN
Inventors: 张海; 李昕琦; 徐海英; 万树伦
Original assignee: Sichuan Is Unified Into Fast Health Medicine Ltd Co
Current assignee: Sichuan Is Unified Into Fast Health Medicine Ltd Co
Priority date: 2019-05-17
Filing date: 2019-05-17
Publication date: 2019-11-22
Anticipated expiration: 2039-05-17
Also published as: CN110478313B

Abstract

本发明提供一种卡络磺钠注射液，它是由主药卡络磺钠，溶剂水与药学上可接受的附加剂组成；所述卡络磺钠中含有含量不高于1.5％式Ⅳ所示结构化合物。

Description

一种卡络磺钠注射液

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及卡络磺钠注射液。

背景技术

卡络磺钠化学名：1-甲基-6-氧代-2，3，5，6-四氢吲哚-5-缩氨脲-2-磺酸钠盐三水合物，分子式C₁₀H₁₁N₄NaO₅S·3H₂O，其结构式如式Ⅰ所示：

卡络磺钠由日本田边三菱制药株式会社(MITSUBISHI TANABE公司)原研，商品名:Adona阿洛那，适应于毛细血管阻力的减弱和渗透性的增强引起的出血倾向(例如紫癜等)；由于毛细血管阻力的减弱而从皮肤或粘膜和内膜渗出的眼底出血、肾出血和子宫出血；毛细血管阻力的减弱引起的手术期间和手术后异常出血。

目前，国内外药典中未收载卡络磺钠相关制剂质量标准；日本药典和韩国药典收载了卡络磺钠原料药质量标准，其对有关物质的控制采用的是高效液相色谱法高波长下(360nm)检测，仅对肾上腺色腙(式II，合成起始物料)和总杂质进行控制；而国内现行卡络磺钠原料药及其制剂质量标准，对于有关物质的控制采用的是薄层色谱法或高效液相色谱法高波长下(363nm)检测，仅对肾上腺色腙和总杂质进行控制，没有对卡络磺钠及其制剂降解杂质的相关研究和控制手段。

通过对卡络磺钠注射液进行全波段扫描，发现有低于360nm或363nm波长下检出的杂质，其中包括式Ⅳ化合物。通过对卡络磺钠及其制剂的稳定性期间样品进行低波长检测，发现式Ⅳ化合物会缓慢增加至超过本品制剂的鉴定限；因此，为控制卡络磺钠及其制剂中式Ⅳ化合物的含量，明确其安全性；分离纯化出对照品并进行结构确定，建立卡络磺钠及其制剂中式Ⅳ化合物的检测方法，确保药品安全性，成为亟待解决的问题。

为更好地控制卡络磺钠及其制剂的质量，提高其用药安全性，有必要深入研究。

发明内容

本发明人在采用高效液相法对卡络磺钠注射剂进行全波长扫描时，意外发现在低于360nm或363nm的波长下有新的色谱峰检出，通过进一步分离、纯化，发现式Ⅳ所示结构的新化合物，化学名：2-氨甲酰-1-(6-羟基-1-甲基-1H-吲哚-5-基)肼基磺酸钠，分子式：C₁₀H₁₁N₄O₅SNa，其结构式如下：

本发明的目的在于提供一种卡络磺钠注射液，它是由主药卡络磺钠，溶剂水与药学上可接受的附加剂组成；所述卡络磺钠中含有含量不高于1.5％式Ⅳ所示结构化合物；

进一步地，所述卡络磺钠中含有含量不高于1.0％式Ⅳ化合物，优选不高于0.75％。

更进一步地，所述卡络磺钠中含有含量不低于90％的卡络磺钠、含量不高于0.75％的式Ⅳ化合物，余量为其它有关物质。

进一步地，所述水为注射用水。

进一步地，所述附加剂为渗透压调节剂、抗氧剂、pH调节剂、稳定剂、助溶剂和/或络合剂。

更进一步地，所述渗透压调节剂为氯化钠、葡萄糖、氯化钾、氯化镁、氯化钙、山梨醇等，优选氯化钠或山梨醇；所述抗氧剂为亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、维生素C、苹果酸、抗坏血酸、棕榈酸酯任意一种或几种；所述pH调节剂为盐酸、酒石酸、氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、醋酸、醋酸钠、乳酸、枸橼酸、枸橼酸钠、碳酸氢钠、碳酸钠任意一种或几种；所述稳定剂为乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐或甘氨酸；所述助溶剂为吐温-80、甘油或丙二醇；所述络合剂为依地酸二钠、依地酸四钠、依地酸钙钠任意一种或几种。

本发明还提供了一种前述卡络磺钠注射液在制备止血药物中的应用。

本发明还提供了一种式Ⅳ化合物的检测方法，它是采用高效液相色谱法，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.12％磷酸二氢铵溶液-乙腈为流动相；用298±10nm、220±10nm波长检测，优选220nm。

本发明还提供了一种式Ⅳ化合物在用于检测卡络磺钠及其制剂的对照品中的应用。

本发明最后提供了一种式Ⅳ化合物的制备方法，它包括如下步骤：

取卡络磺钠和亚硫酸氢钠，加水溶解，用磷酸氢二钠调节pH5.5-7.5，水浴加热90-150min，溶液注入制备型高效液相色谱仪，用流动相乙腈-磷酸二氢铵缓冲液洗脱，收集流份，流份浓缩至无乙腈，用C₁₈富集浓缩液，再用含乙腈的水溶液解析至完全，解析液旋转蒸干得样品，干燥后即得式Ⅳ化合物。

进一步地，所述卡络磺钠、亚硫酸氢钠和水的质量体积比为1g：0.075g：1L；所述pH值6，所述水浴加热120min；所述乙腈-磷酸二氢铵缓冲液体积比14:86，所述乙腈水溶液浓度为50％；所述乙腈水溶液中含0.01％(g/ml)碳酸氢钠。

与现有技术相比，本发明具有下述优点:

1、本发明分离、纯化出新的化合物，即式Ⅳ化合物，并对其进行了结构确证。

2、本发明分离、纯化了卡络磺钠及其制剂在存放过程中可能产生的有关物质，得到式Ⅳ化合物和其他有关物质。

3、本发明通过深入研究，将制备卡络磺钠注射液的各个环节控制在一定温度和pH值范围，有效控制卡络磺钠中式Ⅳ化合物的含量，以提高卡络磺钠注射液的稳定性和安全性。

4、本发明还提供了式Ⅳ化合物的制备方法，并将制备所得的式Ⅳ化合物作为对照品用于控制卡络磺钠及其制剂中式Ⅳ化合物的含量。

附图说明

图1式Ⅳ化合物HPLC图谱

图2式Ⅳ化合物红外光谱图

图3式Ⅳ化合物紫外光谱图

图4式Ⅳ化合物1H NMR谱图

图5式Ⅳ化合物13C NMR谱图

图6式Ⅳ化合物高分辨质谱图谱

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，但绝不是对本发明范围的限制。下面参照实施例进一步详细阐述本发明，但是本领域技术人员应当理解，本发明并不限于这些实施例以及使用的制备方法。而且，本领域技术人员根据本发明的描述可以对本发明进行等同替换、组合、改良或修饰，但这些都将包括在本发明的范围内。

实施例1式Ⅳ化合物的制备

取卡络磺钠1g，亚硫酸氢钠0.075g，加入水1L使溶解，取适量磷酸氢二钠调节pH值6，水浴加热120分钟，溶液用C18制备，流动相为乙腈：0.12％磷酸二氢铵(14:86)，波长220nm，收集产品段样品经45℃浓缩至无乙腈后，用C₁₈制备柱富集产品浓缩液，50％乙腈(加0.01％碳酸氢钠)解析产品至完全，解析液45℃旋转蒸干得样品，样品45℃鼓风干燥至恒重后再真空干燥，得式Ⅳ化合物0.02g。HPLC峰面积归一法，测得其含量不低于98％。HPLC图谱数据、高分辨质谱(HR-ESIMS)数据及¹HNMR和¹H-¹H COSY测定解析如下：

1、HPLC图谱数据

保留时间(分钟)	峰面积	峰面积(％)
			11.953	724012	1.81
13.853	39260562	98.19
			总计	39984574	100.00

2、高分辨质谱(HR-ESIMS)数据

3、1H NMR和1H-1H COSY测定解析表

实施例2卡络磺钠注射液的制备

注射液处方1

注射液处方2

注射液处方3

注射液处方4

注射液处方5

注射液处方6

注射液处方7

处方1～处方7的制备工艺：

(1)向浓配罐中注入处方量80％的注射用水,在充氮气保护下，先后向浓配罐中投入处方量的附加剂搅拌溶解；在溶液温度不超过60℃，加入处方量的卡络磺钠，搅拌30分钟后，经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液泵入稀配罐。

(2)向稀配罐中补加注射用水至处方量全量，搅拌30分钟。

(3)中间品检测；

(4)用0.22μm微孔滤膜精滤，安瓿灌装，封口；

(5)灯检；

(6)包装入库，成品全检。

以下通过试验例进一步说明本发明的有益效果：

试验例1检测式Ⅳ化合物

1、含量测定

照高效液相色谱法测定实施例1所得式Ⅳ化合物，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.12％磷酸二氢铵溶液-乙腈(91:9)为流动相；检测波长为220nm；HPLC峰面积归一法，测得其含量不低于98％(数据见表1，图谱见图1)。

表1HPLC图谱数据

2、结构确认

①红外吸收图谱(IR，见图2)，红外光谱数据见表2。

表2式Ⅳ化合物的红外光谱数据

②紫外-可见吸收光谱(UV，见图3)，紫外光谱数据见表3

表3式Ⅳ化合物的紫外光谱吸收峰

溶剂种类	λ<sub>1</sub>max(nm)	Abs	λ<sub>2</sub>max(nm)	Abs
					甲醇溶液	299.50	0.08	227.00	0.48

③核磁共振氢谱(1H NMR，见图4)，数据见表4。

表4 KL式Ⅳ化合物的1H NMR和1H-1H COSY测定解析表

④核磁共振碳谱(¹³C NMR，见图5)，数据见表5。

表5 KL式Ⅳ化合物的13CNMR、HSQC和HMBC测定数据表

⑤高分辨质谱(HR-ESIMS，见图6)，数据见表6。

表6式Ⅳ化合物的高分辨质谱数据表

试验例2检测药物制剂中式Ⅳ化合物

照高效液相色谱法测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.12％磷酸二氢铵溶液-乙腈(93.5:6.5)为流动相；检测波长为220nm。

精密量取样品适量(注射液为直接量取用，注射用冻干制剂及无菌粉末为取适当样品，研细，精密称取适量)，加流动相定量稀释制成每1ml中约含卡络磺钠0.4mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。另取式Ⅳ化合物适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含2μg式Ⅳ化合物的溶液，作为对照品溶液。再精密量取供试品溶液、对照溶液与对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。其中式Ⅳ化合物按外标法以峰面积计算。

连续24个月检测卡络磺钠药物注射液中各物质含量，考察其稳定性，具体见表7。

表7制剂的稳定性考察

由上表可见，采用本发明的式Ⅳ化合物高效液相检测方法，并以Ⅳ化合物为对照品的外标法结果计算，对室温放置卡络磺钠注射液中的式Ⅳ化合物进行连续24个月考察，能明显监测到卡络磺钠注射液的质量变化趋势，为卡络磺钠及其制剂的质量标准研究、处方工艺研究、稳定性研究、药品不良反应的机制研究提供了基础；同时，为卡络磺钠及其制剂的生产、包装、储存、运输及应用条件的选择提供依据。

综上，本发明卡络磺钠注射液中式Ⅳ化合物得到有效控制，提高了卡络磺钠注射液的安全性；本发明提供的式Ⅳ化合物作为对照品用于检测卡络磺钠及其制剂中式Ⅳ化合物的含量，为卡络磺钠及其制剂的质量标准研究、处方工艺研究、稳定性研究、药品不良反应的机制研究提供了依据，具备实际应用推广价值。

Claims

1.一种卡络磺钠注射液，其特征在于：它是由主药卡络磺钠，溶剂水与药学上可接受的附加剂组成；所述卡络磺钠中含有含量不高于1.5％式Ⅳ所示结构化合物；

2.根据权利要求1所述的注射液，其特征在于，所述卡络磺钠中含有含量不高于1.0％式Ⅳ化合物，优选不高于0.75％。

3.根据权利要求1或2任一项所述的注射液，其特征在于，所述卡络磺钠中含有含量不低于90％的卡络磺钠、含量不高于0.75％的式Ⅳ化合物，余量为其它有关物质。

4.根据权利要求1所述的注射液，其特征在于，所述水为注射用水。

5.根据权利要求1所述的注射液，其特征在于，所述附加剂为渗透压调节剂、抗氧剂、pH调节剂、稳定剂、助溶剂和/或络合剂。

6.根据权利要求5所述的注射液，其特征在于，所述渗透压调节剂为氯化钠、葡萄糖、氯化钾、氯化镁、氯化钙或山梨醇，优选氯化钠或山梨醇；所述抗氧剂为亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、维生素C、苹果酸、抗坏血酸、棕榈酸酯、氢醌、羟基香豆素、维生素E任意一种或几种；所述pH调节剂为盐酸、酒石酸、氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、醋酸、醋酸钠、乳酸、枸橼酸、枸橼酸钠、碳酸氢钠、碳酸钠任意一种或几种；所述稳定剂为乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐或甘氨酸；所述助溶剂为吐温-80、甘油或丙二醇；所述络合剂为依地酸二钠、依地酸四钠、依地酸钙钠任意一种或几种。

7.权利要求1-6任一项所述的卡络磺钠注射液在制备止血药物中的应用。

8.一种检测式Ⅳ化合物的方法，其特征在于，用高效液相色谱法，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.12％磷酸二氢铵溶液-乙腈为流动相；用298±10nm、220±10nm波长检测，优选220nm。

9.式Ⅳ化合物在用于检测卡络磺钠及其制剂的对照品中的应用。

10.一种式Ⅳ所示化合物，其特征在于，其结构式如下：

11.一种式Ⅳ化合物的制备方法，其特征在于，它包括如下步骤：

12.根据权利要求11所述制备方法，其特征在于，所述卡络磺钠、亚硫酸氢钠和水的质量体积比为1g：0.075g：1L；所述pH值6，所述水浴加热120min；所述乙腈-磷酸二氢铵缓冲液体积比14:86，所述乙腈水溶液浓度为50％；所述乙腈水溶液中含0.01％(g/ml)碳酸氢钠。