CN110464671A - 一种冻肽面霜及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种冻肽面霜及其制备方法，涉及生物细胞护肤品技术领域，包括间充质干细胞冻肽溶液以及混合植物提取物溶液，混合植物提取物溶液包括一定配比的烟酰胺、马齿苋提取物、积雪草提取物、泛醇、尿囊素以及生育酚，提取物冻干粉使得干细胞提取物的活性及功能得到了保存和利用，有效延长其作用效果，并且通过与相应配比的生育酚、抗坏血酸四异棕榈酸酯、泛醇、烟酰胺、马齿苋提取物、积雪草提取物在适当温度环境进行混合成膏状物，从而使得冻肽面霜有效改善轮廓紧致度、减轻皱纹以及平滑度的功效。

Description

一种冻肽面霜及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物细胞护肤品技术领域，尤其涉及一种冻肽面霜及制备方法。

背景技术

干细胞对于女性的皮肤至关重要，皮肤保持年轻、完整以及出现问题以后的修复都要靠干细胞，而且很多顽固性的皮肤问题一般的护肤品解决不了，如果从根本上解决相应的皮肤问题主要依赖于修复皮肤，间充质干细胞的皮肤修复能力就很强，而且近几年在皮肤损伤领域的研究也越来越广泛，商业应用效果也很显著。

干细胞提取物包括细胞分泌的直径为30～150nm的小囊泡，内含来源于细胞相关的蛋白质与核苷酸等生物分子，在细胞交流间起重要作用。干细胞提取物是细胞分泌的小生物膜囊泡，与间充质干细胞相比，干细胞提取物体积更小、复杂性更低，易于生产和存储，间充质干细胞提取物富含生物活性分子，如蛋白质和RNA，存在于提取物中的许多蛋白质都属于酶类，具有催化活性。但是目前普遍存在的一个问题是细胞因子和干细胞提取物的生物活性难以持续作用，造成其作用效果持久力较低；同时面霜是基础护肤中最重要的一步，但是由于干细胞提取物的特性，现在难以将其有效成分高效融合在面霜中，并且产生积极的效果，因此如何能够延长细胞因子及提取物生物活性的保存并将其与其他有效成分组成改善面部皮肤的面霜成为了本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中存在的不足，提供一种冻肽面霜及其制备方法，该面霜实现了有效改善轮廓紧致度、减轻皱纹以及平滑度的功效。

本发明是通过以下技术方案予以实现：一种冻肽面霜，按体积份数比，包括5-20份间充质干细胞冻肽溶液以及80-95份混合植物提取物溶液，按质量分数比，间充质干细胞冻肽溶液包括15-45份提取物冻干粉以及55-85份蒸馏水，按质量份数比，混合植物提取物溶液包括0.5-2.2份生育酚、1-5份抗坏血酸四异棕榈酸酯、0.5-3份泛醇、0.5-2份烟酰胺，0.3-2份马齿苋提取物、0.5-2.5份积雪草提取物以及83.3-96.7份蒸馏水，提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞，按照正常培养的方法进行培养得到。

根据上述技术方案，优选地，按体积份数比，包括7-16份间充质干细胞冻肽溶液以及84-93份混合植物提取物溶液，按质量分数比，间充质干细胞冻肽溶液包括18-42份提取物冻干粉以及58-82份蒸馏水，按质量份数比，混合植物提取物溶液包括0.8-1.8份生育酚、1.2-4份抗坏血酸四异棕榈酸酯、0.7-2.5份泛醇、0.7-1.6份烟酰胺，0.5-1.7份马齿苋提取物、0.7-2.2份积雪草提取物以及86.2-95.4份蒸馏水，提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞，按照正常培养的方法进行培养得到。

根据上述技术方案，优选地，间充质干细胞饥饿培养的时间为12-24小时。

根据上述技术方案，优选地，间充质干细胞正常培养的时间为48-72小时。

根据上述技术方案，优选地，提取物冻干粉中包含有的干细胞因子成分为冻干状态。

一种冻肽面霜的制备方法，包括以下步骤：

间充质干细胞的培养：从羊胎盘中分离出间充质干细胞，用无酚红DMEM/F12和体积比浓度为8％-12％胎牛血清做完全培养基，放入T75细胞培养瓶在35-38℃、3-6％CO2条件下进行培养，培养时间为48-72小时；

提取物冻干粉的制备：待间充质干细胞生长程度达到70％-80％，使用生理盐水清洗间充质干细胞2-3次，用复方电解质注射液对间充质干细胞进行饥饿培养12-24小时，待细胞生长程度达到90％-95％后，对间质干细胞进行离心处理，离心完成后收取细胞培养上清液获取干细胞因子，并采用提取物提取试剂盒对间充质干细胞提取物进行提取，其中间充质干细胞提取物主要为外泌体，然后将提取的干细胞因子和外泌体混合均匀后放入冻干机中进行冻干，形成提取物冻干粉；

间充质干细胞冻肽溶液的制备：按质量分数比，称取15-45份提取物冻干粉以及55-85份蒸馏水，并在16-25℃条件下搅拌均匀成间充质干细胞冻肽溶液；

混合植物提取物溶液的制备：按质量份数比，首先量取0.5-2.2份生育酚、1-5份抗坏血酸四异棕榈酸酯、0.5-3份泛醇以及83.3-96.7份蒸馏水，在16-25℃条件下搅拌均匀成溶液状态，然后在30-42℃条件下依次添加0.5-2份烟酰胺、0.3-2份马齿苋提取物以及0.5-2.5份积雪草提取物，在加料的同时搅拌均匀制得混合植物提取物溶液；

冻肽面霜的制备：按体积份数比，依次量取5-20份间充质干细胞冻肽溶液以及80-95份混合植物提取物溶液放入混合装置内，常温下搅拌均匀制得膏状物。

本发明的有益效果是：将间充质干细胞分泌的所有细胞因子多肽以及提取物等有效成分全部高效提取并进行冻干，提取物冻干粉使得干细胞提取物的活性及功能得到了保存和利用，而且存活的时间可以更长，能够延长其作用效果，并且通过与相应配比的生育酚、抗坏血酸四异棕榈酸酯、泛醇、烟酰胺、马齿苋提取物、积雪草提取物在相应环境进行混合成膏状物，从而使得冻肽面霜有效改善轮廓紧致度、减轻皱纹以及平滑度的功效。

具体实施方式

为了使本技术领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明。

实施例1：

本发明提供了一种冻肽面霜，按体积份数比，包括5份间充质干细胞冻肽溶液以及95份混合植物提取物溶液，按质量分数比，间充质干细胞冻肽溶液包括15份提取物冻干粉以及85份蒸馏水，按质量份数比，混合植物提取物溶液包括0.5份生育酚、1份抗坏血酸四异棕榈酸酯、0.5份泛醇、0.5份烟酰胺，0.3份马齿苋提取物、0.5份积雪草提取物以及96.7份蒸馏水，提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，饥饿培养的时间为16小时，间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞，按照正常培养的方法进行培养得到，培养时间为56小时。

实施例2：

一种冻肽面霜，按体积份数比，包括20份间充质干细胞冻肽溶液以及80份混合植物提取物溶液，按质量分数比，间充质干细胞冻肽溶液包括45份提取物冻干粉以及55份蒸馏水，按质量份数比，混合植物提取物溶液包括2.2份生育酚、5份抗坏血酸四异棕榈酸酯、3份泛醇、2份烟酰胺、2份马齿苋提取物、2.5份积雪草提取物以及83.3份蒸馏水，提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，饥饿培养的时间为16小时，间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞，按照正常培养的方法进行培养得到，培养时间为56小时。

实施例3：

一种冻肽面霜，按体积份数比，包括15份间充质干细胞冻肽溶液以及85份混合植物提取物溶液，按质量分数比，间充质干细胞冻肽溶液包括30份提取物冻干粉以及70份蒸馏水，按质量份数比，混合植物提取物溶液包括1份生育酚、2份抗坏血酸四异棕榈酸酯、1.5份泛醇、1份烟酰胺，1份马齿苋提取物、1份积雪草提取物以及92.5份蒸馏水，提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，饥饿培养的时间为16小时，间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞，按照正常培养的方法进行培养得到，培养时间为56小时。

根据上述技术方案，优选地，提取物冻干粉中包含有的干细胞因子成分为冻干状态，并且提取物冻干粉置于-20℃保存，该温度环境下，能够有效延长提取物冻干粉中干细胞因子的活性和保存时间。

根据上述实施例，优选地，其主要用于制备脸部皮肤损伤修复的面霜，该种功效能够通过测试结果进行清晰结论。

间充质干细胞的培养：从羊胎盘中分离出间充质干细胞，用无酚红DMEM/F12和体积比浓度为8％-12％胎牛血清做完全培养基，放入T75细胞培养瓶在35-38℃、3-6％CO2条件下进行培养，培养时间为48-72小时；

提取物冻干粉的制备：待间充质干细胞生长程度达到70％-80％，使用生理盐水清洗间充质干细胞2-3次，用复方电解质注射液对间充质干细胞进行饥饿培养12-24小时，待细胞生长程度达到90％-95％后，对间质干细胞进行离心处理，离心完成后收取细胞培养上清液获取干细胞因子，并采用提取物提取试剂盒对间充质干细胞提取物进行提取，其中间充质干细胞提取物主要为外泌体，然后将提取的干细胞因子和外泌体混合均匀后放入冻干机中进行冻干，形成提取物冻干粉；

间充质干细胞冻肽溶液的制备：按质量分数比，称取15-45份提取物冻干粉以及55-85份蒸馏水，并在16-25℃条件下搅拌均匀成间充质干细胞冻肽溶液；

混合植物提取物溶液的制备：按质量份数比，首先量取0.5-2.2份生育酚、1-5份抗坏血酸四异棕榈酸酯、0.5-3份泛醇以及83.3-96.7份蒸馏水，在16-25℃条件下搅拌均匀成溶液状态，然后在30-42℃条件下依次添加0.5-2份烟酰胺、0.3-2份马齿苋提取物以及0.5-2.5份积雪草提取物，在加料的同时搅拌均匀制得混合植物提取物溶液；

冻肽面霜的制备：按体积份数比，依次量取5-20份间充质干细胞冻肽溶液以及80-95份混合植物提取物溶液放入混合装置内，常温下搅拌均匀制得膏状物。

过敏性试验

第一步试验首先在100只小白鼠背面刮毛并涂抹实施例1-3配比生成的冻肽面霜，检测人员三天内观察小白鼠背面没有产生红肿、起痘等不良反应；第二步试验，选取60名20-45周岁的成年志愿者进行试验，60名试验人员分为3组每组20人，分别进行上述3组实施例的产品过敏性检测，所有测试人员的脸部涂抹相应实施例的冻肽面霜，检测人员随时检测测试人员的脖颈皮肤变化，经测试人员和检测人员鉴定所有测试者的脸部均没有出现红肿或者起痘等不良反应，因此该冻肽面霜不会对人体产生不良反应或者刺激反应。

疗效测试

鉴于女性对于化妆品的鉴别能力，因此选取27-35岁、36-40岁以及41-45岁各60名女性进行测试，三组年龄段的女性再分成3组分别使用实施例1-3的20人测试单元，测试人员领取对比溶液以及面霜，分别在左脸涂抹对比溶液，右脸涂抹相应实施例的面霜，对比溶液采用蒸馏水，并且测试人员并不知道对比溶液的成分，每天睡前涂抹一次，并且脸部左右两侧分别轻揉20分钟，持续使用一个月后，测试人员比对左脸，然后测试人员分别比对左脸并对使用该面霜的右脸的轮廓紧致度、减轻皱纹以及平滑度三项进行评分，A-效果非常显著，B-效果明显，C-效果一般，D-无效果，然后工作人员核对每组选项的评分人数，得到如表1的测试结果：

表1

经过对表1的数据分析，该冻肽面霜对于轮廓紧致度、减轻皱纹以及平滑度此类皮肤特征具有明显功效，由于年轻人的脸部皮肤相较于年龄较大的中年人而言，脸部皮肤的轮廓紧致度较好，因此随着年龄的增长，该面霜对于改善轮廓紧致度越好；而对于减轻皱纹以及平滑度的评定结果，各个年龄段的测试效果较为接近，相较于左脸涂抹蒸馏水具有明显功效，并且通过对比实施例1-3的评定，得出实施例3的三项评定明显优于其他两组实施例；因此结合表1能够轻易得出实施例3为最佳实施例的结果。

具体测试人员1：

姓名:孙小姐 年龄：36

肤质：干性 肤色暗沉 皱纹产生

使用周期：早晚都用，持续使用一个月，并且配合按摩20分钟

效果：一个月后经与之前照片对比，质地细腻好推开，吸收快，皮肤有光泽感，脸部饱满，面部轮廓有所提升，法令纹也淡了许多；

具体测试人员2：

姓名:贾小姐 年龄：25

肤质：混油皮 两颊干

使用周期：早晚各涂抹1次，并配合按摩20分钟

效果：通过与之前照片对比，面部滋润，皮肤细腻有光泽

具体测试人员3：

姓名:杨女士 年龄：42

肤质：脸部皮肤干性 肤色 暗沉斑点

使用周期：每晚睡前涂抹一次，并且连续使用4周

效果：面霜刚涂抹在脸部皮肤时有油腻感，随着按摩，涂抹的面霜很快被吸收，按摩完毕后，脸肌肤变得很柔软，经过与之前照片对比，干纹明显淡化，面色暗沉有所改善，皮肤整体感觉饱满有弹性。

本发明的有益效果是：将间充质干细胞分泌的所有细胞因子多肽以及提取物等有效成分全部高效提取并进行冻干，提取物冻干粉使得干细胞提取物的活性及功能得到了保存和利用，而且存活的时间可以更长，能够延长其作用效果，并且通过与相应配比的生育酚、抗坏血酸四异棕榈酸酯、泛醇、烟酰胺、马齿苋提取物、积雪草提取物在相应环境进行混合成膏状物，从而使得冻肽面霜有效改善轮廓紧致度、减轻皱纹以及平滑度的功效。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种冻肽面霜，其特征在于，按体积份数比，包括5-20份间充质干细胞冻肽溶液以及80-95份混合植物提取物溶液，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括15-45份提取物冻干粉以及55-85份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括0.5-2.2份生育酚、1-5份抗坏血酸四异棕榈酸酯、0.5-3份泛醇、0.5-2份烟酰胺，0.3-2份马齿苋提取物、0.5-2.5份积雪草提取物以及83.3-96.7份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，所述间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞，按照正常培养的方法进行培养得到。

2.根据权利要求1所述一种冻肽面霜，其特征在于，按体积份数比，包括7-16份间充质干细胞冻肽溶液以及84-93份混合植物提取物溶液，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括18-42份提取物冻干粉以及58-82份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括0.8-1.8份生育酚、1.2-4份抗坏血酸四异棕榈酸酯、0.7-2.5份泛醇、0.7-1.6份烟酰胺，0.5-1.7份马齿苋提取物、0.7-2.2份积雪草提取物以及86.2-95.4份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，所述间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞，按照正常培养的方法进行培养得到。

3.根据权利要求2所述的一种冻肽面霜，其特征在于，所述间充质干细胞饥饿培养的时间为12-24小时。

4.根据权利要求3所述的一种冻肽面霜，其特征在于，所述间充质干细胞正常培养的时间为48-72小时。

5.根据权利要求4所述的一种冻肽面霜，其特征在于，所述提取物冻干粉中包含有的干细胞因子成分为冻干状态。

6.一种冻肽面霜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

间充质干细胞的培养：从羊胎盘中分离出间充质干细胞，用无酚红DMEM/F12和体积比浓度为8％-12％胎牛血清做完全培养基，放入T75细胞培养瓶在35-38℃、3-6％CO2条件下进行培养，培养时间为48-72小时；

提取物冻干粉的制备：待间充质干细胞生长程度达到70％-80％，使用生理盐水清洗间充质干细胞2-3次，用复方电解质注射液对间充质干细胞进行饥饿培养12-24小时，待细胞生长程度达到90％-95％后，对间质干细胞进行离心处理，离心完成后收取细胞培养上清液获取干细胞因子，并采用提取物提取试剂盒对间充质干细胞提取物进行提取，其中间充质干细胞提取物主要为外泌体，然后将提取的干细胞因子和外泌体混合均匀后放入冻干机中进行冻干，形成提取物冻干粉；

间充质干细胞冻肽溶液的制备：按质量分数比，称取15-45份提取物冻干粉以及55-85份蒸馏水，并在16-25℃条件下搅拌均匀成间充质干细胞冻肽溶液；

混合植物提取物溶液的制备：按质量份数比，首先量取0.5-2.2份生育酚、1-5份抗坏血酸四异棕榈酸酯、0.5-3份泛醇以及83.3-96.7份蒸馏水，在16-25℃条件下搅拌均匀成溶液状态，然后在30-42℃条件下依次添加0.5-2份烟酰胺、0.3-2份马齿苋提取物以及0.5-2.5份积雪草提取物，在加料的同时搅拌均匀制得混合植物提取物溶液；

冻肽面霜的制备：按体积份数比，依次量取5-20份间充质干细胞冻肽溶液以及80-95份混合植物提取物溶液放入混合装置内，常温下搅拌均匀制得膏状物。