CN111821251B - 化妆品用组合物和化妆品 - Google Patents

Abstract

本公开涉及一种化妆品用组合物，该化妆品用组合物中含有CD200修饰的间充质干细胞外泌体。本公开提供的化妆品用组合物中含有CD200修饰的间充质干细胞外泌体，用于皮肤表面后，能够增加皮肤细胞活力，促进皮肤细胞新陈代谢，促进皮肤修复，延缓皮肤衰老。

Description

化妆品用组合物和化妆品

技术领域

本公开涉及化妆品技术领域，具体涉及一种化妆品用组合物和化妆品。

背景技术

皮肤是覆盖在人体表面的最大器官，由于直接与外界环境接触，受到氧化、干燥、紫外线等种种紧张因素的刺激，非常容易受到伤害。同时，又因为年龄、饮食和生活习惯等内在因素的影响，导致皮肤功能的衰退和修复障碍，从而使皮肤更加容易老化。随着人们生活水平以及对自身保健意识的不断提高，人们越来越关心自身器官的“抗老化”。据调查：从20岁以后(尤其是女性)，就开始担忧皮肤的老化。所以，抗老化化妆品日益成为广大女性消费者迫切需求的产品之一。

CD200基因位于人染色体3q12-q13上，是近年来发现与移植排斥相关的分子，CD200通过与其受体(CD200R)的结合可以抑制髓性(MYELOID)细胞(包括巨噬细胞和粒细胞)的活性、减轻多种自身免疫性疾病的症状、打破肿瘤免疫耐受、抑制部分T细胞的免疫反应等。CD200参与的细胞免疫抑制是维持免疫平衡和避免自身免疫疾病的重要机制。CD200敲除的小鼠容易患有包括实验性变应性脑脊髓炎，胶原诱导性关节炎，自身免疫性脱发等自身免疫性疾病，也可降低免疫排斥反应。

然而，暂未见将CD200用于制备化妆品以延缓皮肤老化的相关报道。

发明内容

本公开的目的是提供一种化妆品用组合物和化妆品。

为了实现上述目的，本公开提供一种化妆品用组合物，该化妆品用组合物中含有CD200修饰的间充质干细胞外泌体。

可选地，所述CD200修饰的间充质干细胞中CD200的阳性率不小于95％。

可选地，所述间充质干细胞包括脐带间充质干细胞、胎盘间充质干细胞、脂肪间充质干细胞或骨髓间充质干细胞中的至少一种。

可选地，所述外泌体由下述方法制备得到：

a、利用CD200重组慢病毒载体转染间充质干细胞，得到CD200修饰的间充质干细胞；

b、对所述CD200修饰的间充质干细胞进行培养，并于转染结束后5～7天收集培养上清；

c、对所述培养上清进行外泌体提取，得到所述外泌体。

可选地，以100重量份的所述化妆品用组合物为基准，所述外泌体的含量为5～40重量份；优选地，以100重量份的所述化妆品用组合物为基准，所述外泌体的含量为10-20重量份。

可选地，所述外泌体的浓度以蛋白浓度计为(10-100)mg/mL；

所述化妆品用组合物中，外泌体蛋白的最终浓度为1～2mg/mL。

可选地，所述化妆品用组合物还包括美白剂和/或植物消炎剂。

可选地，以100重量份的所述化妆品用组合物为基准，所述美白剂的含量为10-15重量份，所述植物消炎剂的含量为10-30重量份。

可选地，所述美白剂包括α-熊果苷、抗坏血酸多肽、烟酰胺和杜鹃花酸二甘氨酸钾中的至少一种；

所用植物消炎剂包括积雪草酸纯露、金银花纯露、薄荷精油、鼠尾草提取物和柠檬精油中的至少一种。

本公开还提供一种化妆品，该化妆品含有上述任意一项所述的化妆品用组合物。

通过上述技术方案，本公开提供的化妆品用组合物中含有CD200修饰的间充质干细胞外泌体，用于皮肤表面后，能够增加皮肤细胞活力，促进皮肤细胞新陈代谢，促进皮肤修复，延缓皮肤衰老。

本公开的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

附图是用来提供对本公开的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本公开，但并不构成对本公开的限制。在附图中：

图1是本公开实施例提供的各组母猫拆线后伤口处皮肤状况的示意图。

具体实施方式

以下对本公开的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本公开，并不用于限制本公开。

本公开的第一方面提供一种化妆品用组合物，该化妆品用组合物中含有CD200修饰的间充质干细胞外泌体。

本公开提供的化妆品用组合物中含有CD200修饰的间充质干细胞外泌体，该外泌体中含有大量的细胞因子CD200，能够增加细胞活力，促进细胞新陈代谢，促进皮肤修复，延缓皮肤衰老。

根据本公开，CD200修饰的间充质干细胞中CD200的阳性率可以在一定的范围内变化，例如，所述CD200修饰的间充质干细胞中CD200的阳性率不小于95％。其中，本公开所述的CD200阳性率可以利用领域内的常规方法进行测定，此处不再赘述。

根据本公开，间充质干细胞的种类可以在较宽的范围内选择，例如，所述间充质干细胞可以包括脐带间充质干细胞、胎盘间充质干细胞、脂肪间充质干细胞或骨髓间充质干细胞中的至少一种。

根据本公开，所述外泌体例如可以采用如下方法制备得到：a、利用CD200重组慢病毒载体转染间充质干细胞，得到CD200修饰的间充质干细胞；b、对所述CD200修饰的间充质干细胞进行培养，并于转染结束后5～7天收集培养上清；c、对所述培养上清进行外泌体提取，得到外泌体。

其中，用于转染的间充质干细胞可以为传代培养至P2～P6代的间充质干细胞，转染的时间可以为间充质干细胞贴壁后的2～6天。

其中，步骤c中，对培养上清进行外泌体提取，例如可以包括采用外泌体试剂盒对培养上清进行外泌体提取。此外，还可以采用超速离心法、超滤离心法、磁珠免疫法和PEG-base沉淀法对培养上清进行外泌体提取。

根据本公开，上述化妆品用组合物中外泌体的含量可以在一定的范围内变化，例如，以100重量份的所述化妆品用组合物为基准，所述外泌体的含量可以为5～40重量份；优选地，以100重量份的所述化妆品用组合物为基准，所述外泌体的含量可以为10-20重量份。在上述优选情况下，本公开的化妆品用组合物能够更有效地促进皮肤修复。

根据本公开，所述外泌体的浓度可以在较大的范围内变化，例如，所述外泌体的浓度以蛋白浓度计可以为(10-100)mg/mL；所述化妆品用组合物中，外泌体蛋白的最终浓度可以为1～2mg/mL。

根据本公开，所述化妆品用组合物还可以包括美白剂和/或植物消炎剂。

根据本公开，所述美白剂和植物消炎剂的含量可以在较大的范围内变化，例如，以100重量份的所述化妆品用组合物为基准，所述美白剂的含量可以为10-15重量份，所述植物消炎剂的含量可以为10-30重量份。

可选地，所述美白剂可以包括α-熊果苷、抗坏血酸多肽、烟酰胺和杜鹃花酸二甘氨酸钾中的至少一种；所述植物消炎剂可以包括积雪草酸纯露、金银花纯露、薄荷精油、鼠尾草提取物和柠檬精油中的至少一种。

其中，以重量百分比计，α-熊果苷的含量可以为0.5％-5％，抗坏血酸多肽的含量可以为3％-10％，烟酰胺的含量可以为2％-5％，杜鹃花酸二甘氨酸钾的含量可以为3％-10％；积雪草酸纯露的含量可以为1％-10％，金银花纯露的含量可以为1％-10％，薄荷精油的含量可以为1％-10％，鼠尾草提取物的含量可以为1％-10％，柠檬精油的含量可以为1％-10％。

本公开还提供一种化妆品，该化妆品含有上述任意一项所述的化妆品用组合物。

可选地，所述化妆品可以包括面膜、眼霜、面霜、精华素、洁面乳、原液、爽肤水、乳液、纯露、隔离霜、BB霜、CC霜和防晒霜中的至少一种。

下面通过实施例来进一步说明本公开，但是本公开并不因此而受到任何限制。

本公开实施例中涉及的原料、试剂、仪器和设备，如无特殊说明，均可通过购买获得。

实施例1

本实施例用于说明本公开外泌体的制备。

本实施例中使用的基础培养基为MSC培养基与5％UltraGRO-Advanced血清替代物的混合物。

(1)使用常规方法构建人源CD200重组慢病毒载体(CD200(NM_005944)HumanTagged ORF Clone Lentiviral Particle CAT#:RC206356L1V)。

(2)利用基础培养基，将脐带间充质干细胞传代培养至P5代，并继续培养使间充质干细胞处于贴壁状态。贴壁后第2天，将间充质干细胞铺设在24孔板中，每孔1×10⁵个细胞。继续培养24小时，使每孔中的间充质干细胞数量翻倍。

(3)更换24孔板中的培养基为含有6μg/mL polybrene的基础培养基，每个培养孔2mL；然后分别在每个培养孔中加入适量的人源CD200重组慢病毒载体，并于37℃继续培养24小时。

(4)更换24孔板中的培养基为基础培养基，继续培养72小时，收集培养上清，并用MinuteTM外泌体沉淀试剂(EI-027)进行外泌体提取。

经检测，本实施例转染得到的CD200修饰的间充质干细胞中CD200的阳性率为95％。本实施例制备得到的外泌体蛋白浓度为100mg/mL。

实施例2

一种含有CD200修饰的脐带间充质干细胞外泌体的化妆品用组合物

该化妆品中含有实施例1制备得到外泌体、溶剂(水)、保湿剂(透明质酸钠、芦荟胶)、渗透剂(月桂氮酮)、增稠剂(椰油二乙醇胺)、芳香剂(玫瑰精油)和植物消炎剂(积雪草酸纯露)。

其中，以100重量份的所述化妆品为基准，外泌体的含量为5重量份，溶剂(水)的含量为40重量份，保湿剂(透明质酸钠)的含量为15重量份，芦荟胶的含量为5重量份，渗透剂(月桂氮酮)的含量为2重量份，增稠剂(椰油二乙醇胺)的含量为3重量份，芳香剂(玫瑰精油)的含量为5重量份，植物消炎剂(积雪草酸纯露)的含量为10重量份。

实施例3

一种含有CD200修饰的脐带间充质干细胞外泌体的化妆品用组合物，与实施例1不同的是，本实施例的化妆品中，以100重量份的所述化妆品为基准，外泌体的含量为40重量份。

实施例4

一种含有CD200修饰的脐带间充质干细胞外泌体的化妆品用组合物，与实施例1不同的是，本实施例的化妆品中，以100重量份的所述化妆品为基准，外泌体的含量为20重量份。

对比例1

利用基础培养基，将脐带间充质干细胞传代培养至P5代。然后利用CD200的流式抗体，筛选出CD200阴性的细胞亚群，并利用基础培养基培养3天，收集上清，并用MinuteTM外泌体沉淀试剂(EI-027)进行外泌体提取，得到CD200阴性的脐带间充质干细胞外泌体。本对比例提取得到的外泌体蛋白浓度为100mg/ml。

对比例2

按照实施例4的组成及配比配制化妆品用组合物，与实施例4不同的是，利用对比例1制备得到的CD200阴性的脐带间充质干细胞外泌体替换CD200修饰的脐带间充质干细胞外泌体。

测试实施例1

选择8名志愿者，性别随机。将志愿者分为两组，每组4人，第一组志愿者面部具有较多皱纹和鱼尾纹，第二组志愿者面部具有较多黄褐斑。

分别在每位志愿者的面部涂抹实施例4的化妆品，每天涂抹2-3次，每次按摩5-15分钟，直至皮肤充分吸收，连续涂抹1个月。在测试周期内不得使用其他化妆品。

1个月后，利用三色光自动肌肤分析仪对志愿者的皮肤进行表皮分析(红光)和UV毛孔分析(蓝光)，对比分析各志愿者皮肤纹理的改善情况，结果如表1和表2所示。

表1第一组志愿者皮肤纹理的改善情况

表2第二组志愿者皮肤色斑的改善情况

由表1和表2可以看出，本公开提供的化妆品用组合物中含有CD200修饰的间充质干细胞外泌体，用于皮肤表面后，能够增加皮肤细胞活力，促进皮肤细胞新陈代谢，延缓皮肤衰老。

测试实施例2

本测试实施例用于说明本公开的化妆品用组合物对皮肤的修复作用。

选择9只年龄为2～3岁且未绝育的母猫，各母猫的体重相当，且各母猫的初期指标无统计学差异。将上述母猫分为三组，每组3只。

分别对各组母猫进行绝育手术，绝育后的伤口进行缝合处理。

针对第一组母猫，使用碘伏处理伤口后，利用实施例4的组合物涂抹伤口，每日1次，连续涂抹3天。

针对第二组母猫，使用碘伏处理伤口后，利用对比例2的组合物涂抹伤口，每日1次，连续涂抹3天。

针对第三组母猫，仅使用碘伏处理伤口，每日1次，连续处理3天。

3天后，分别观察并记录三组母猫的伤口情况，结果见表3。分别记录三组母猫的拆线时间，并观察各组母猫拆线后伤口处的皮肤状况，结果见表3和图1。

表3

如图1所示，拆线后，第一组母猫伤口处的皮肤平整，皮肤纹理结构清晰；第二组母猫伤口处的皮肤有部分组织增生，皮肤纹理结构较清晰；第三组母猫伤口处的皮肤有较多组织增生，皮肤纹理结构紊乱。

由表3和图1可以看出，本公开提供的化妆品用组合物中含有CD200修饰的间充质干细胞外泌体，用于皮肤表面后，能够有效促进皮肤修复。

以上详细描述了本公开的优选实施方式，但是，本公开并不限于上述实施方式中的具体细节，在本公开的技术构思范围内，可以对本公开的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本公开的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本公开对各种可能的组合方式不再另行说明。

此外，本公开的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本公开的思想，其同样应当视为本公开所公开的内容。

Claims (10)

1.一种化妆品用组合物，其特征在于，该化妆品用组合物中含有CD200修饰的间充质干细胞外泌体；

所述外泌体由下述方法制备得到：

a、利用CD200重组慢病毒载体转染间充质干细胞，得到CD200修饰的间充质干细胞；

b、对所述CD200修饰的间充质干细胞进行培养，并于转染结束后5～7天收集培养上清；

c、对所述培养上清进行外泌体提取，得到所述外泌体。

2.根据权利要求1所述的化妆品用组合物，其特征在于，所述CD200修饰的间充质干细胞中CD200的阳性率不小于95％。

3.根据权利要求2所述的化妆品用组合物，其特征在于，所述间充质干细胞包括脐带间充质干细胞、胎盘间充质干细胞、脂肪间充质干细胞或骨髓间充质干细胞中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的化妆品用组合物，其特征在于，以100重量份的所述化妆品用组合物为基准，所述外泌体的含量为5～40重量份。

5.根据权利要求4所述的化妆品组合物，其特征在于，以100重量份的所述化妆品用组合物为基准，所述外泌体的含量为10-20重量份。

6.根据权利要求1～5中任意一项所述的化妆品用组合物，其特征在于，所述外泌体的浓度以蛋白浓度计为10-100mg/mL；

所述化妆品用组合物中，所述外泌体以蛋白浓度计的最终浓度为1～2mg/mL。

7.根据权利要求1-5中任意一项所述的化妆品用组合物，其特征在于，所述化妆品用组合物还包括美白剂和/或植物消炎剂。

8.根据权利要求7所述的化妆品用组合物，其特征在于，以100重量份的所述化妆品用组合物为基准，所述美白剂的含量为10-15重量份，所述植物消炎剂的含量为10-30重量份。

9.根据权利要求8所述的化妆品用组合物，其特征在于，所述美白剂包括α-熊果苷、抗坏血酸多肽、烟酰胺和杜鹃花酸二甘氨酸钾中的至少一种；

所用植物消炎剂包括积雪草酸纯露、金银花纯露、薄荷精油、鼠尾草提取物和柠檬精油中的至少一种。

10.一种化妆品，其特征在于，该化妆品含有权利要求1-9中任意一项所述的化妆品用组合物。

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