CN110403900A - 一种冻肽眼霜及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种冻肽眼霜及其制备方法，涉及生物细胞护肤品技术领域，包括间充质干细胞冻肽溶液以及混合植物提取物溶液，提取物冻干粉使得干细胞提取物的活性及功能得到了保存和利用，有效延长其作用效果，并且通过相应配比的尿囊素、精氨酸、苏氨酸、瓜氨酸、甘草酸二钾、生育酚、β‑葡聚糖、烟酰胺、马齿苋提取物、积雪草提取物以及泛醇在适当温度环境进行混合成膏状物，从而使得冻肽眼霜实现了有效改善眼部细纹、保湿以及淡化色斑的功效。

Description

一种冻肽眼霜及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物细胞护肤品技术领域，尤其涉及一种冻肽眼霜及制备方法。

背景技术

眼霜作为护肤类化妆产品之一。有滋润功效，除了可以减低黑眼圈、眼袋问题外，同时也具备改善皱纹、细纹的功效。而眼霜是用来保护眼睛周围比较薄的这一层皮肤的，眼霜对眼袋、黑眼圈、鱼尾纹等都有一定的效用，但是不同的眼霜有不同的作用，从功能上分为滋润眼霜、紧实眼霜、保湿眼霜、抗老化眼霜、抗敏眼霜等等。

众所周知，干细胞对于女性的皮肤至关重要，皮肤保持年轻、完整以及出现问题以后的修复都要靠干细胞，而且很多顽固性的皮肤问题一般的护肤品解决不了，如果从根本上解决相应的皮肤问题主要依赖于修复皮肤，间充质干细胞的皮肤修复能力就很强，而且近几年在皮肤损伤领域的研究也越来越广泛，商业应用效果也很显著。

干细胞提取物包括细胞分泌的直径为30～150nm的小囊泡，内含来源于细胞相关的蛋白质与核苷酸等生物分子，在细胞交流间起重要作用。干细胞提取物是细胞分泌的小生物膜囊泡，与间充质干细胞相比，干细胞提取物体积更小、复杂性更低，易于生产和存储，间充质干细胞提取物富含生物活性分子，如蛋白质和RNA，存在于提取物中的许多蛋白质都属于酶类，具有催化活性。但是目前普遍存在的一个问题是细胞因子和干细胞提取物的生物活性难以持续作用，造成其作用效果持久力较低；眼霜是护肤中重要的一步，但是由于干细胞提取物的特性，现在难以将其有效成分高效融合在眼霜中，并且产生积极的效果，因此如何能够延长细胞因子及提取物生物活性的保存并将其与其他有效成分组成改善面部皮肤的眼霜成为了本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中存在的不足，提供一种冻肽眼霜及其制备方法，该眼霜实现了有效改善眼部细纹、保湿以及淡化色斑的功效。

本发明是通过以下技术方案予以实现：一种冻肽眼霜，按体积份数比，包括15-25份间充质干细胞冻肽溶液以及75-85份混合植物提取物溶液，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括20-40份提取物冻干粉以及60-80份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括0.3-1.5份尿囊素、0.3-2份精氨酸、0.3-1.8份苏氨酸、0.3-2份瓜氨酸、0.3-2份甘草酸二钾、0.5-2.5份生育酚、0.5-2份β-葡聚糖、0.5-2份烟酰胺、0.3-2.5份马齿苋提取物、0.3-2份积雪草提取物、0.5-3份泛醇以及76.7-95.9份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，所述间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞。

根据上述技术方案，优选地，按体积份数比，包括18-22份间充质干细胞冻肽溶液以及78-82份混合植物提取物溶液，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括23-35份提取物冻干粉以及64-77份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括0.4-1.3份尿囊素、0.4-1.8份精氨酸、0.3-1.5份苏氨酸、0.3-1.6份瓜氨酸、0.5-1.5份甘草酸二钾、0.7-2.2份生育酚、0.6-1.8份β-葡聚糖、0.7-1.6份烟酰胺、0.5-2.2份马齿苋提取物、0.5-1.8份积雪草提取物、0.8-2.5份泛醇以及80.2-94.3份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，所述间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞。

根据上述技术方案，优选地，所述提取物冻干粉中包含有的干细胞因子成分为冻干状态。

一种冻肽眼霜的制备方法，包括以下步骤：

间充质干细胞的培养：从羊胎盘中分离出间充质干细胞，用无酚红DMEM/F12和体积比浓度为8％-12％胎牛血清做完全培养基，放入T75细胞培养瓶在35-38℃、3-6％CO2条件下进行培养，培养时间为48-72小时；

提取物冻干粉的制备：待间充质干细胞生长程度达到70％-80％，使用生理盐水清洗间充质干细胞2-3次，用复方电解质注射液对间充质干细胞进行饥饿培养12-24小时，待细胞生长程度达到90％-95％后，对间质干细胞进行离心处理，离心完成后收取细胞培养上清液获取干细胞因子，并采用提取物提取试剂盒(现有)对间充质干细胞提取物进行提取，其中间充质干细胞提取物主要为外泌体，然后将提取的干细胞因子和外泌体混合均匀后放入冻干机中进行冻干，形成提取物冻干粉；

间充质干细胞冻肽溶液的制备：按质量分数比，称取20-40份提取物冻干粉以及60-80份蒸馏水，并在16-25℃条件下搅拌均匀成间充质干细胞冻肽溶液；

混合植物提取物溶液的制备：按质量份数比，首先量取0.3-1.5份尿囊素、0.3-2份精氨酸、0.3-1.8份苏氨酸、0.3-2份瓜氨酸、0.3-2份甘草酸二钾、0.5-2.5份生育酚、0.5-2份β-葡聚糖、0.5-2份烟酰胺、0.3-2.5份马齿苋提取物、0.3-2份积雪草提取物、0.5-3份泛醇以及76.7-95.9份蒸馏水，在常温下加入搅拌设备内，搅拌均匀成混合植物提取物溶液；

冻肽眼霜的制备：按体积份数比，依次量取15-25份间充质干细胞冻肽溶液以及75-85份混合植物提取物溶液放入混合装置内，常温下搅拌均匀制得膏状物。

本发明的有益效果是：本发明将间充质干细胞分泌的所有细胞因子多肽以及提取物等有效成分全部高效提取并进行冻干，提取物冻干粉使得干细胞提取物的活性及功能得到了保存和利用，而且存活的时间可以更长，能够延长其作用效果，并且通过相应配比的尿囊素、精氨酸、苏氨酸、瓜氨酸、甘草酸二钾、生育酚、β-葡聚糖、烟酰胺、马齿苋提取物、积雪草提取物、泛醇在常温洁净的环境进行混合成膏状物，从而使得冻肽眼霜达到有效改善眼部细纹、保湿以及淡化色斑的功效。

具体实施方式

为了使本技术领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明。

实施例1：

一种冻肽眼霜，按体积份数比，包括15份间充质干细胞冻肽溶液以及85份混合植物提取物溶液，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括20份提取物冻干粉以及60份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括0.3份尿囊素、0.3份精氨酸、0.3份苏氨酸、0.3瓜氨酸、0.3份甘草酸二钾、0.5份生育酚、0.5份β-葡聚糖、0.5份烟酰胺、0.3份马齿苋提取物、0.3份积雪草提取物、0.5份泛醇以及95.9份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，饥饿培养的时间为16小时，所述间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞，按照正常培养的方法进行培养得到，培养时间为64小时。

实施例2：

一种冻肽眼霜，按体积份数比，包括25份间充质干细胞冻肽溶液以及75份混合植物提取物溶液，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括40份提取物冻干粉以及60份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括1.5份尿囊素、2份精氨酸、1.8份苏氨酸、2份瓜氨酸、2份甘草酸二钾、2.5份生育酚、2份β-葡聚糖、2份烟酰胺、2.5份马齿苋提取物、2份积雪草提取物、3份泛醇以及76.7份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，饥饿培养的时间为16小时，所述间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞，按照正常培养的方法进行培养得到，培养时间为64小时。

实施例3：

一种冻肽眼霜，按体积份数比，包括20份间充质干细胞冻肽溶液以及80份混合植物提取物溶液，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括30份提取物冻干粉以及70份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括0.5份尿囊素、0.5份精氨酸、0.5份苏氨酸、0.5份瓜氨酸、1份甘草酸二钾、1份生育酚、1份β-葡聚糖、1份烟酰胺、1份马齿苋提取物、1份积雪草提取物、1.5份泛醇以及90.5份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，饥饿培养的时间为16小时，所述间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞，按照正常培养的方法进行培养得到，培养时间为64小时。

根据上述技术方案，优选地，提取物冻干粉中包含有的干细胞因子成分为冻干状态，并且提取物冻干粉置于-20℃保存，该温度环境下，能够有效延长提取物冻干粉中干细胞因子的活性和保存时间。

根据上述实施例，优选地，其主要用于制备眼部皮肤损伤修复的眼霜，该种功效能够通过测试结果进行清晰结论。

一种冻肽眼霜的制备方法，包括以下步骤：

间充质干细胞的培养：从羊胎盘中分离出间充质干细胞，用无酚红DMEM/F12和体积比浓度为10％胎牛血清做完全培养基，放入T75细胞培养瓶在37℃、5％CO2条件下进行培养，培养时间为48-72小时；

提取物冻干粉的制备：待间充质干细胞生长程度达到70％-80％，使用生理盐水清洗间充质干细胞2次，用复方电解质注射液对间充质干细胞进行饥饿培养12-24小时，待细胞生长程度达到90％-95％后，对间质干细胞进行离心处理，离心完成后收取细胞培养上清液获取干细胞因子，并采用提取物提取试剂盒对间充质干细胞提取物进行提取，其中间充质干细胞提取物主要为外泌体，然后将提取的干细胞因子和外泌体混合均匀后放入冻干机中进行冻干，形成提取物冻干粉；

间充质干细胞冻肽溶液的制备：按质量分数比，称取相应配比的提取物冻干粉以及蒸馏水，并在16-25℃条件下搅拌均匀成间充质干细胞冻肽溶液；

混合植物提取物溶液的制备：按质量份数比，首先量取相应配比的尿囊素、精氨酸、苏氨酸、瓜氨酸、甘草酸二钾、生育酚、β-葡聚糖、烟酰胺、马齿苋提取物、积雪草提取物、泛醇以及蒸馏水，在常温下加入搅拌设备内，搅拌均匀成混合植物提取物溶液；

冻肽眼霜的制备：按体积份数比，依次量取间充质干细胞冻肽溶液以及混合植物提取物溶液放入混合装置内，常温下搅拌均匀制得膏状物。

过敏性试验

第一步试验首先在100只小白鼠背面刮毛并涂抹实施例1-3配比生成的冻肽眼霜，检测人员三天内观察小白鼠背面没有产生红肿、起痘等不良反应；第二步试验，选取60名20-45周岁的成年志愿者进行试验，60名试验人员分为3组每组20人，分别进行上述3组实施例的产品过敏性检测，所有测试人员的眼部涂抹相应实施例的冻肽眼霜，检测人员随时检测测试人员的眼部变化，经测试人员和检测人员鉴定所有测试者的脸部均没有出现红肿或者起痘等不良反应，并且即使眼霜接触眼睛，眼霜也不会对眼睛造成伤害和刺激，因此该冻肽眼霜不会对人体产生不良反应或者刺激反应。

疗效测试

鉴于女性对于化妆品的鉴别能力，因此选取27-35岁、36-40岁以及41-45岁各60名女性进行测试，三组年龄段的女性再分成3组分别使用实施例1-3的20人测试单元，测试人员领取对比溶液以及眼霜，分别在左脸眼部涂抹对比溶液，右脸眼部涂抹相应实施例的眼霜，并且测试人员对左右眼做相同轻揉等步骤，对比溶液采用蒸馏水，并且测试人员并不知道对比溶液的成分，每天睡前涂抹一次，脸部左右两侧分别轻揉20分钟，持续使用一个月后，测试人员比对左脸的眼部，然后测试人员分别比对左脸眼部并对使用该眼霜的右脸的眼部细纹、保湿以及淡化色斑三项进行评分，A-效果非常显著，B-效果明显，C-效果一般，D-无效果，然后工作人员核对每组选项的评分人数，得到如表1的测试结果：

表1

经过对表1的数据分析，该冻肽眼霜对于眼部细纹、保湿以及淡化色斑此类皮肤特征具有明显功效，由于年轻人的脸部皮肤相较于年龄较大的中年人而言，眼部细纹相对较少，因此随着年龄的增长，该眼霜对于改善眼部细纹效果越好；而对于保湿以及淡化色斑的评定结果，各个年龄段的测试效果较为接近，相较于左脸涂抹蒸馏水具有明显功效，并且通过对比实施例1-3的评定，得出实施例3的三项评定明显优于其他两组实施例；因此结合表1能够轻易得出实施例3为最佳实施例的结果。

案例分析1：

姓名:孙小姐 年龄：31 肤质：经常熬夜，因此黑眼圈以及眼部细纹明显

使用周期：每天睡前涂抹该眼霜，并轻揉10分钟，坚持1个月

效果：滋润，淡化黑眼圈效果明显，眼部提拉紧致效果明显

案例分析2：

姓名:杜小姐 年龄：35 肤质：黑眼圈、眼袋以及细纹

使用周期：每天睡前涂抹该眼霜，并轻揉15分钟，坚持1个月

效果：滋润易吸收，质地轻薄不黏腻，细纹明显减淡，眼部肌肤细腻度有改善

案例分析3：

姓名:侯女士 年龄：42 肤质：黑眼圈以及眼角的鱼尾纹明显

使用周期：每天睡前涂抹该眼霜，并轻揉15分钟，坚持1个月

效果：适合眼部肌肤干燥的人，质地水润，补水效果明显，提拉紧致效果明显。

本发明的有益效果是：将间充质干细胞分泌的所有细胞因子多肽以及提取物等有效成分全部高效提取并进行冻干，提取物冻干粉使得干细胞提取物的活性及功能得到了保存和利用，而且存活的时间可以更长，能够延长其作用效果，并且通过与相应配比的尿囊素、精氨酸、苏氨酸、瓜氨酸、甘草酸二钾、生育酚、β-葡聚糖、烟酰胺、马齿苋提取物、积雪草提取物、泛醇在相应环境进行混合成膏状物，从而使得冻肽眼霜有效改善眼部细纹、保湿以及淡化色斑的功效。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (4)

1.一种冻肽眼霜，其特征在于，按体积份数比，包括15-25份间充质干细胞冻肽溶液以及75-85份混合植物提取物溶液，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括20-40份提取物冻干粉以及60-80份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括0.3-1.5份尿囊素、0.3-2份精氨酸、0.3-1.8份苏氨酸、0.3-2份瓜氨酸、0.3-2份甘草酸二钾、0.5-2.5份生育酚、0.5-2份β-葡聚糖、0.5-2份烟酰胺、0.3-2.5份马齿苋提取物、0.3-2份积雪草提取物、0.5-3份泛醇以及76.7-95.9份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，所述间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞。

2.根据权利要求1所述一种冻肽眼霜，其特征在于，按体积份数比，包括18-22份间充质干细胞冻肽溶液以及78-82份混合植物提取物溶液，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括23-35份提取物冻干粉以及64-77份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括0.4-1.3份尿囊素、0.4-1.8份精氨酸、0.3-1.5份苏氨酸、0.3-1.6份瓜氨酸、0.5-1.5份甘草酸二钾、0.7-2.2份生育酚、0.6-1.8份β-葡聚糖、0.7-1.6份烟酰胺、0.5-2.2份马齿苋提取物、0.5-1.8份积雪草提取物、0.8-2.5份泛醇以及80.2-94.3份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，所述间充质干细胞为提取自羊胎盘的间充质干细胞。

3.根据权利要求2所述的一种冻肽眼霜，其特征在于，所述提取物冻干粉中包含有的干细胞因子成分为冻干状态。

4.一种冻肽眼霜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

间充质干细胞的培养：从羊胎盘中分离出间充质干细胞，用无酚红DMEM/F12和体积比浓度为8％-12％胎牛血清做完全培养基，放入T75细胞培养瓶在35-38℃、3-6％CO2条件下进行培养，培养时间为48-72小时；

提取物冻干粉的制备：待间充质干细胞生长程度达到70％-80％，使用生理盐水清洗间充质干细胞2-3次，用复方电解质注射液对间充质干细胞进行饥饿培养12-24小时，待细胞生长程度达到90％-95％后，对间质干细胞进行离心处理，离心完成后收取细胞培养上清液获取干细胞因子，并采用提取物提取试剂盒对间充质干细胞提取物进行提取，其中间充质干细胞提取物主要为外泌体，然后将提取的干细胞因子和外泌体混合均匀后放入冻干机中进行冻干，形成提取物冻干粉；

间充质干细胞冻肽溶液的制备：按质量分数比，称取20-40份提取物冻干粉以及60-80份蒸馏水，并在16-25℃条件下搅拌均匀成间充质干细胞冻肽溶液；

混合植物提取物溶液的制备：按质量份数比，首先量取0.3-1.5份尿囊素、0.3-2份精氨酸、0.3-1.8份苏氨酸、0.3-2份瓜氨酸、0.3-2份甘草酸二钾、0.5-2.5份生育酚、0.5-2份β-葡聚糖、0.5-2份烟酰胺、0.3-2.5份马齿苋提取物、0.3-2份积雪草提取物、0.5-3份泛醇以及76.7-95.9份蒸馏水，在常温下加入搅拌设备内，搅拌均匀成混合植物提取物溶液；

冻肽眼霜的制备：按体积份数比，依次量取15-25份间充质干细胞冻肽溶液以及75-85份混合植物提取物溶液放入混合装置内，常温下搅拌均匀制得膏状物。