CN114376951B - 一种抗糖化肤用组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种抗糖化肤用组合物及其应用。所述抗糖化肤用组合物包括肌肽、麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物。所述抗糖化肤用组合物能够用于制备精华液,所述精华液的制备方法简单,有利于实现产业化。所述抗糖化肤用组合物通过肌肽、麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物搭配使用,能够协同提高抗糖化、抗氧化的功效。同时搭配乙酰化透明质酸、卡瓦提取物和腺苷使用,具有保湿、镇静舒缓、抗炎抗菌的效果,能够促进肌肤合成弹性蛋白以恢复肌肤活力,增强皮肤弹性,减少皱纹,延缓衰老。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域,具体涉及一种抗糖化肤用组合物及其应用。
背景技术
随着年龄的增加,人体代谢逐渐减缓,导致人体内集聚的糖分无法及时代谢出去,多余的糖分通过非酶促糖基化反应,粘合到蛋白质的氨基酸基团上形成糖化蛋白质,即蛋白质高度糖化终产物。胶原蛋白和弹性蛋白作为皮肤的支架,一旦与糖分结合就会使得本身饱满且富有弹性的蛋白硬化,进而断裂、受损,导致皮肤塌陷,失去弹性,紧致度下降,同时随着糖化蛋白质在皮肤的积累,皱纹也会慢慢显现,皮肤逐渐黯淡无光。因此,针对抗糖化妆品的开发与制备是目前研究的重点与热点。目前市售的抗糖化妆品较少,且普遍存在功效单一,见效缓慢的缺点,无法满足人们日常生活中全面改善皮肤问题的需求。
CN111568791A公开了一种抗糖化组合物及其制备方法与应用,所述抗糖化组合物包括金线莲提取物、银杏叶提取物、羟基酪醇和泛醇,通过在特定配比下复配,使得黄酮、多酚等有效成分能更好地渗透皮肤,更好地发挥抗糖化作用。但所述抗糖化组合物存在着功效单一,不能满足改善皮肤弹性或肤色的要求。
CN108812948A公开了一种抗糖化红茶提取物及其制备方法,所述抗糖化红茶提取物的制备方法包括:(1)萎凋;(2)揉捻;(3)发酵;(4)干燥;(5)提取,得到的抗糖化红茶提取物营养物质丰富,香气浓郁,具有显著的抗糖化效果及抗氧化效果,可用于制备保健食品或作为化妆品原料。但是抗糖化红茶提取物存在着成分单一,功效单一的缺点。
CN109673900A公开了一种抗糖化运动饮料及其制备方法。所述抗糖化运动饮料由二氢大麻酚、维生素、火麻蛋白大豆磷脂、糊精、色素、香精、甜味剂和水制备而成,具有显著的抗糖化肤用组合物,适用于作为日常食品饮用。但该研究没有公开所述抗糖化运动饮料的原料在化妆品中的应用。
基于以上研究可以看到,抗糖化产品普遍存在着功效单一的局限性,不能全面改善皮肤问题。因此,有必要找到一种抗糖化组合物,通过组分之间的配合,改善皮肤弹性,提亮肤色,减少皱纹,对日化产品技术领域具有重要的意义。
发明内容
针对现有技术的不足和现实实际的需求,本发明的目的在于提供一种抗糖化肤用组合物及其应用。所述抗糖化肤用组合物,通过各组分之间的配合,能够协同增效组分的抗糖化效果,提亮肤色,恢复肌肤弹性,减少皱纹。
为达到此发明目的,本发明采用以下技术方案:
第一方面,本发明提供一种抗糖化肤用组合物,所述抗糖化肤用组合物包括:肌肽、麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物。
所述抗糖化肤用组合物可以通过简单混合而制备得到。
肌肽能与人体非酶糖基化反应的中间产物羰基化合物反应,保护蛋白质不被糖基化,同时还可以与已经发生糖基化的蛋白质产物作用,阻止糖基化蛋白质的进一步交联,麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物可以清除自由基。通过将肌肽,麦角硫因,富勒烯,葡萄多酚和黑枸杞提取物搭配使用,能够协同提高其抗氧化、抗糖化的效果,减少色斑,有效延缓衰老。
所述抗糖化肤用组合物按重量份计包括:肌肽0.1-1份,麦角硫因0.1-1份,富勒烯0.1-3份,葡萄多酚0.1-1份,黑枸杞提取物1-10份。
所述0.1-1份,例如可以是0.1份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。
所述0.1-3份,例如可以是0.1份、0.3份、0.6份、0.9份、1.2份、1.5份、1.8份、2.1份、2.6份、2.7份或3份等。
所述1-10份,例如可以是1份、2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份、10份等。
上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择,在此便不再一一赘述。
本发明中,所述抗糖化肤用组合物还包括乙酰化透明质酸、腺苷和卡瓦提取物。
乙酰化透明质酸具有高效保湿,增强皮肤弹性的功效,将其加入到抗糖化肤用组合物中,能够有效提高抗糖化肤用组合物增强皮肤弹性,减少皱纹的功效。腺苷和卡瓦提取物具有舒敏、抗炎和抗敏的作用,通过将二者搭配使用,加入到抗糖化肤用组合物中,能够协同提高抗糖化肤用组合物的抗炎、抗敏效果。
所述抗糖化肤用组合物按重量份计包括:肌肽0.1-1份,麦角硫因0.1-1份,富勒烯0.1-3份,葡萄多酚0.1-1份,黑枸杞提取物1-10份,乙酰化透明质酸0.1-1份,腺苷0.05-2份,卡瓦提取物2-10份;。
所述0.1-1份,例如可以是0.1份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。
所述0.1-3份,例如可以是0.1份、0.3份、0.6份、0.9份、1.2份、1.5份、1.8份、2.1份、2.6份、2.7份或3份等。
所述1-10份,例如可以是1份、2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份、10份等。
所述0.05-2份,可以是0.05份、0.1份、0.3份、0.5份、0.7份、0.9份、1份、1.2份、1.4份、1.6份、1.8份或2份等。
所述2-10份,例如可以是2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份、10份等。
上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择,在此便不再一一赘述。
上述重量份数均以市售原料中实际的肌肽、麦角硫因、富勒烯份、葡萄多酚、黑枸杞提取物、乙酰化透明质酸、腺苷和卡瓦提取物来计,市售原料中还可选择性的含有溶剂、填充剂、稀释剂、稳定剂、pH调节剂、抗菌剂、抗氧化剂或允许范围内的杂质中的任意一种或至少两种的组合,组合例如可以是填充剂与稀释剂的组合或稀释剂与稳定剂的组合等,其余任意组合的方式均可选择,在此便不再一一赘述。
第二方面,本发明提供一种如第一方面所述的抗糖化肤用组合物在制备化妆品中的应用。
所述化妆品可以是乳液、精华液、爽肤水、面霜或面膜中的任意一种。
所述化妆品包括抗糖化肤用组合物,所述抗糖化肤用组合物的添加质量为所述化妆品质量的3-29%,例如可以是3%、6%、9%、12%、15%、18%、21%、24%、27%或29%等,该数值范围内的其他具体点值均可选择,在此便不再一一赘述。
第三方面,本发明提供一种精华液,所述精华液包括如第一方面所述的抗糖化肤用组合物、pH调节剂、增稠剂、防腐剂和溶剂。
优选地,所述精华液还包括保湿剂、螯合剂或抗氧化剂中的任意一种或至少两种的组合,所述至少两种的组合可以是保湿剂与螯合剂的组合或抗氧化剂与螯合剂的组合等,其余任意的组合方式均可选择,在此便不再一一赘述。
本发明所涉及的精华液能够用于日常护肤,可以有效提亮肤色,减少色斑,增强皮肤弹性,减少皱纹,延缓衰老。
优选地,所述pH调节剂包括三乙醇胺、氨甲基丙醇、柠檬酸或乳酸中的任意一种或至少两种的组合,所述至少两种的组合可以是三乙醇胺与柠檬酸的组合或氨甲基丙醇与乳酸的组合等,其余任意组合的方式均可选择,在此便不再一一赘述。
优选地,所述增稠剂包括卡波姆、聚丙烯酸钠、黄原胶或羟乙基纤维素中的任意一种或至少两种的组合,所述至少两种的组合可以是卡波姆与黄原胶的组合或聚丙烯酸钠与羟乙基纤维素的组合等,其余任意组合的方式均可选择,在此便不再一一赘述。
优选地,所述防腐剂包括羟苯甲酯、羟苯丙酯、羟苯丁酯、对羟基苯乙酮或苯氧乙醇中的任意一种或至少两种的组合,所述至少两种的组合可以是羟苯甲酯与对羟基苯乙酮的组合或苯氧乙醇与对羟基苯乙酮的组合等,其余任意组合的方式均可选择,在此便不再一一赘述。
第四方面,本发明提供一种如第三方面所述的精华液的制备方法,所述制备方法包括以下步骤:将增稠剂与溶剂混合,加热溶解,随后一次降温,加入pH调节剂与防腐剂,二次降温,加入抗糖化肤用组合物,溶解,得到所述精华液。
优选地,所述一次降温至温度为50-60℃。
优选地,所述二次降温至温度为35-45℃。
所述50-60℃,可以是50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃或60℃等,该数值范围内的其他具体点值均可选择,在此便不再一一赘述。
所述35-45℃,可以是35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃或45℃等,该数值范围内的其他具体点值均可选择,在此便不再一一赘述。
优选地,所述制备方法包括以下步骤:将增稠剂与溶剂混合,加热溶解,随后一次降温,加入pH调节剂与防腐剂,二次降温,加入保湿剂、螯合剂、抗氧化剂和抗糖化肤用组合物,溶解,得到所述精华液。
优选地,所述一次降温至温度为50-60℃。
优选地,所述二次降温至温度为35-45℃。
所述50-60℃,可以是50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃或60℃等,该数值范围内的其他具体点值均可选择,在此便不再一一赘述。
所述35-45℃,可以是35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃或45℃等,该数值范围内的其他具体点值均可选择,在此便不再一一赘述。
本发明所涉及的精华液的制备方法简单,有利于实现产业化。
相对于现有技术,本发明具有以下有益效果:
本发明采用具有抗糖化能力的肌肽,搭配具有优异抗氧化能力的麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物使用,能够协同增效其抗糖化、抗氧化的功效,同时能够改善肤色。另外,搭配使用的乙酰化透明质酸、卡瓦提取物和腺苷起保湿、镇静舒缓、抗炎抗菌的效果,同时促进肌肤合成弹性蛋白以恢复肌肤活力,增强皮肤弹性,减少皱纹,延缓衰老。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了,所述实施例仅仅是帮助理解本发明,不应视为对本发明的具体限制。
下述涉及的肌肽、麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚、黑枸杞提取物、乙酰化透明质酸、腺苷和卡瓦提取物的重量份数均以市售原料中含有的实际功效成分含量来计,市售原料中还可选择性的含有溶剂、填充剂、稀释剂、稳定剂、pH调节剂、抗菌剂、抗氧化剂或允许范围内的杂质中的任意一种或至少两种的组合。
下述实施例、对比例、应用例、对比应用例中涉及的肌肽来源于购自浙江湃肽有限公司,型号为L-Carnosine的肌肽产品;麦角硫因来源于购自广州荣道化工有限公司,型号为Intencfy的麦角硫因产品;富勒烯来源于购自百好博有限公司,型号为C60的富勒烯产品;乙酰化透明质酸来源于购自山东福瑞达有限公司,型号为HymagicTM-AcHA的乙酰化透明质酸产品;葡萄多酚来源于购自广州科骐华有限公司,型号为Grape extract with aguaranteed content in polyphenols的葡萄多酚产品;黑枸杞提取物来源于购自广州慕香有限公司,型号为黑枸杞提取液的黑枸杞提取物产品;卡瓦提取物来源于购自广州誉金有限公司,型号为AXIAFLUID KAVA EXTRACT UP的卡瓦提取物产品;腺苷来源于购自华瑞宝生物科技有限公司,型号为腺苷的腺苷产品。其余材料和原料无特殊说明,均可从商业途径获得。
实施例1
本实施例提供一种抗糖化肤用组合物,所述抗糖化肤用组合物按重量份计包括如下有效成分:肌肽0.3份,麦角硫因0.5份,富勒烯1份,乙酰化透明质酸0.1份,葡萄多酚0.1份,黑枸杞提取物5份,腺苷0.1份,卡瓦提取物5份。所述抗糖化肤用组合物将各市售原料产品以物理混合的方法制备得到。
实施例2
本实施例提供一种抗糖化肤用组合物,所述抗糖化肤用组合物按重量份计包括如下有效成分:肌肽0.1份,麦角硫因0.1份,富勒烯0.1份,乙酰化透明质酸0.1份,葡萄多酚0.1份,黑枸杞提取物1份,腺苷0.05份,卡瓦提取物2份。所述抗糖化肤用组合物将各市售原料产品以物理混合的方法制备得到。
实施例3
本实施例提供一种抗糖化肤用组合物,所述抗糖化肤用组合物按重量份计包括如下有效成分:肌肽1份,麦角硫因1份,富勒烯3份,乙酰化透明质酸1份,葡萄多酚1份,黑枸杞提取物10份,腺苷2份,卡瓦提取物10份。所述抗糖化肤用组合物将各市售原料产品以物理混合的方法制备得到。
实施例4
本实施例提供一种抗糖化肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述抗糖化肤用组合物不包括乙酰化透明质酸、腺苷和卡瓦提取物。所述肌肽、麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物的质量比保持不变,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例1
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述抗糖化肤用组合物不包括肌肽,将其减少的质量由麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物补足,所述麦角硫因,富勒烯,葡萄多酚和黑枸杞提取物的质量比保持不变,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例2
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述肤用组合物不包括麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物,将其减少的质量由肌肽补足,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例3
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述肤用组合物不包括麦角硫因,将其减少的质量由富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物补足。所述富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物的质量比保持不变,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例4
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述肤用组合物不包括富勒烯,将其减少的质量由麦角硫因、葡萄多酚和黑枸杞提取物补足。
所述麦角硫因、葡萄多酚和黑枸杞提取物的质量比保持不变,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例5
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述肤用组合物不包括葡萄多酚,将其减少的质量由麦角硫因、富勒烯和黑枸杞提取物补足。
所述麦角硫因、富勒烯和黑枸杞提取物的质量比保持不变,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例6
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述肤用组合物不包括黑枸杞提取物,将其减少的质量由麦角硫因、富勒烯和葡萄多酚补足,所述麦角硫因、富勒烯和葡萄多酚的质量比保持不变,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例7
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述肤用组合物不包括富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物,将其减少的质量由麦角硫因补足,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例8
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述肤用组合物不包麦角硫因、葡萄多酚和黑枸杞提取物,将其减少的质量由富勒烯补足,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例9
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述肤用组合物不包括麦角硫因、富勒烯和黑枸杞提取物,将其减少的质量由葡萄多酚补足,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例10
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述肤用组合物不包括麦角硫因、富勒烯和葡萄多酚,将其减少的质量由黑枸杞提取物补足,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例11
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述肤用组合物不包括腺苷,将其减少的质量由卡瓦提取物补足,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
对比例12
本对比例提供一种肤用组合物,与实施例1的区别在于,所述肤用组合物不包括卡瓦提取物,将其减少的质量由腺苷补足,其余参数和步骤与实施例1保持一致。
应用例1
本应用例提供一种精华液,所述精华液按质量百分含量计包括:实施例1制备的抗糖化肤用组合物12.1%、甘油5%、生物糖胶-1 1.5%、EDTA-二钠0.05%、对羟基苯乙酮0.2%、生育酚乙酸酯0.8%、卡波姆0.2%、、氨甲基丙醇0.05%、羟苯甲酯0.15%、苯氧乙醇0.6%,余量为去离子水。其制备方法如下:
按配方量称取卡波姆与去离子水混合,搅拌加热至83℃溶解完全;随后降温至55℃时,边搅拌边依次加入配方量的氨甲基丙醇、对羟基苯乙酮、羟苯甲酯和苯氧乙醇;降温至40℃时,加入配方量的甘油、生物糖胶-1、EDTA-二钠、生育酚乙酸酯和实施例1制备的抗糖化肤用组合物,搅拌13min,溶解,得到所述精华液。
应用例2
本应用例提供一种精华液,所述精华液按质量百分含量计包括:实施例2制备的抗糖化肤用组合物3.55%、甘油5%、生物糖胶-1 1.5%、EDTA-二钠0.05%、对羟基苯乙酮0.2%、生育酚乙酸酯0.8%、卡波姆0.2%、氨甲基丙醇0.05%、羟苯甲酯0.15%、苯氧乙醇0.6%,余量为去离子水。其制备方法如下:
按配方量称取卡波姆与去离子水混合,搅拌加热至82℃溶解完全;随后降温至58℃时,边搅拌边依次加入配方量的氨甲基丙醇、对羟基苯乙酮、羟苯甲酯和苯氧乙醇;降温至42℃时,加入配方量的甘油、生物糖胶-1、EDTA-二钠、生育酚乙酸酯和实施例2制备的抗糖化肤用组合物,搅拌10min,溶解,得到所述精华液。
应用例3
本应用例提供一种精华液,所述精华液按质量百分含量计包括:实施例3制备的抗糖化肤用组合物29%、甘油5%、生物糖胶-1 1.5%、EDTA-二钠0.05%、对羟基苯乙酮0.2%、生育酚乙酸酯0.8%、卡波姆0.2%、氨甲基丙醇0.05%、羟苯甲酯0.15%、苯氧乙醇0.6%,余量为去离子水。其制备方法如下:
按配方量称取卡波姆与去离子水混合,搅拌加热至85℃溶解完全;随后降温至50℃时,边搅拌边依次加入配方量的氨甲基丙醇、对羟基苯乙酮、羟苯甲酯和苯氧乙醇;降温至35℃时,加入配方量的甘油、生物糖胶-1、EDTA-二钠、生育酚乙酸酯和实施例3制备的抗糖化肤用组合物,搅拌15min,溶解,得到所述精华液。
应用例4
本应用例提供1种精华液,与应用例1相比,将实施例1制备的抗糖化肤用组合物等量替换为实施例4制备的抗糖化肤用组合物,其余参数和步骤与应用例1保持一致。制备方法参考应用例1。
对比应用例1-12
本对比应用例提供12种精华液,与应用例1相比,将实施例1制备的抗糖化肤用组合物等量替换为对比例1-12制备的肤用组合物,其余参数和步骤与应用例1保持一致。制备方法参考应用例1。
测试例1
本测试例对实施例1-4制备的抗糖化肤用组合物进行稳定性测试。一般稳定性试验是指在设定的温度、湿度、光照条件下,将化妆品静置一定时间,观察测定样品状态的变化,从而判断化妆品的稳定性。本实验以实施例1-4制备的抗糖化肤用组合物为样品,每个实施例的样品分为4份,分别放置于-16℃、4℃、48℃和自然光照射,保存3个月后,观察样品的外观变化和气味变化。
测试结果统计如下表1所示:
表1
由上表数据可知,实施例1-4制备的抗糖化肤用组合物均具有良好的稳定性测试。
测试例2
本测试例以实施例1-4制备的抗糖化肤用组合物为样品进行刺激性测试。绒毛尿囊膜是一个呼吸性膜,包围在鸡胚周围。由于鸡胚尿囊膜表面血管丰富,可以看作一个完整的生物体,本试验利用孵化的鸡胚中期绒毛尿囊膜血管系统完整、清晰和透明的特点,将一定量样品直接与鸡胚尿囊膜接触,作用规定时间之后观察绒毛尿囊膜毒性效应指标(如:出血、凝血和血管融解)的变化,给予评分,计算数学平均值用于评估样品的刺激性。
测试方法如下:
(1)鸡胚准备:选择白莱杭鸡(White Leghorn chicken)品种的受精鸡胚,鸡胚重量50-60g,优先选用无特定病原(Specific Pathogen Free,SPF)鸡胚放在孵蛋器中孵化,温度控制在37.5℃±0.5℃,相对湿度55%-70%,翻蛋频率3次/h。孵化至第8日用照蛋器照蛋检查,丢弃未受精、无活性的鸡胚,选取血管发育良好的鸡胚,在蛋壳表面标记气室位置;
(2)测试过程:每组6只鸡胚,每一次试验均设置有阴性对照组和阳性对照组。第9日开始试验,用牙科弯镊小心剥去气室蛋壳部分,在蛋壳膜表面滴几滴生理盐水使充分润湿,倾出后,用镊子小心除去蛋壳膜,保证暴露的尿囊膜完整不受任何损伤。按0.3mL/0.3g(样品体积/尿囊膜重量)的比例,称取样品直接作用于尿囊膜。尽量涂布开,确保覆盖面积达到至少50%。作用3min后,用双蒸水轻轻冲洗尿囊膜表面,冲洗30s后,倾出液体,立即在体视显微镜下观察每种毒性效应变化程度,根据毛细血管出血、凝血、血管融解情况给予评分(ES);
(3)结果观察:
出血:血液从尿囊膜的血管或毛细血管流出。根据无出血、轻度出血、中度出血、重度出血分别判予0分、1分、2分、3分;
凝血:指血管内外蛋白变性,表现为血栓、管壁肿胀、血管内外的凝血点出现或血管外乳浊状浑浊等状况。根据无凝血、轻度凝血、中度凝血、重度凝血分别判予0分、1分、2分、3分;
血管融解:指尿囊膜上血管消融。根据无血管融解、轻度血管融解、中度血管融解、重度血管融解分别判予0分、1分、2分、3分;
(4)结果计算和评价
按以下公式计算ES分值:
ES=6只鸡胚观察到出血、凝血、血管融解的分数总和/3;
按下表2判断刺激分类:
表2
ES分值 | 刺激性分类 |
ES≤12 | 无/轻刺激性 |
12<ES<16 | 中度刺激性 |
ES≥16 | 严重刺激性 |
测试结果统计如下表3所示:
表3
组别 | ES分值 | 刺激性等级 |
实施例1 | 5 | 无/轻刺激性 |
实施例2 | 5 | 无/轻刺激性 |
实施例3 | 8 | 无/轻刺激性 |
实施例4 | 7 | 无/轻刺激性 |
由上表数据可知,实施例1-4制备的抗糖化肤用组合物无刺激性或具有轻微刺激性。
测试例3
本测试例以实施例1-4和对比例1-12制备的组合物为样品进行抗糖化能力测试。糖基化反应是皮肤衰老的重要机制,发生在皮肤内部的还原糖与基质蛋白之间。非酶糖基化是一系列复杂的非酶促反应,蛋白质和葡萄糖在体内发生非酶促反应形成席夫碱和早期糖基化产物,进而经过氧化、重排、交联等过程,形成不可逆的非酶糖基化终产物(Advancedglycation end products,AGEs)。通过对非酶糖基化反应研究,可反应出肤用组合物对抗糖化的能力。AGEs可自发荧光,在特定波长下检测荧光强度,可以得到肤用组合物的抗糖基化效果。
测试方法如下:
(1)制备牛血清白蛋白-葡萄糖溶液:在无菌条件下,向无菌细胞培养瓶中加入用0.2μm除菌膜除菌后的20.00g/L牛血清白蛋白溶液和0.50mol/L葡萄糖溶液各5.00mL,加入10.00mL含l%NaN3的0.20mol/L(pH=7.4)的磷酸盐缓冲液,在60℃下避光反应40h,得到牛血清白蛋白-葡萄糖糖化溶液;
(2)取样:分别准确移取0.5mL的实施例1-4、对比例1-12得到的样品与0.5mL的牛血清白蛋白-葡萄糖溶液混合均匀,避光反应0.8h;
(3)AGEs的检测:AGEs衍生的荧光可以通过酶标仪在370nm/440nm发射波长条件下检测,并计算其抑制率,计算公式如下:
AGEs抑制率(%)=[l-(A-B)/(C-D)]×100%;
其中,A-步骤(2)中添加的实施例1-4或对比例1-12得到的样品在牛血清白蛋白-葡萄糖溶液的荧光强度;
B-步骤(2)中添加的实施例1-4或对比例1-12得到的样品在0.5mL超纯水溶液的荧光强度;
C-单一的牛血清白蛋白-葡萄糖溶液的荧光强度(即将步骤(2)中的0.5mL实施例1-4或对比例1-12得到的样品等量替换为超纯水后得到的牛血清白蛋白-葡萄糖溶液的荧光强度);
D-1mL超纯水溶液的荧光强度。测试结果统计如下表4所示:
表4
组别 | AGEs抑制率(%) |
实施例1 | 70.6 |
实施例2 | 62.8 |
实施例3 | 67.4 |
实施例4 | 64.5 |
对比例1 | 37.8 |
对比例2 | 41.6 |
对比例3 | 52.3 |
对比例4 | 50.6 |
对比例5 | 53.7 |
对比例6 | 52.8 |
对比例7 | 43.4 |
对比例8 | 44.2 |
对比例9 | 43.9 |
对比例10 | 42.5 |
对比例11 | 67.6 |
对比例12 | 68.1 |
由上表数据可知,本发明提供的肤用组合物的AGEs抑制率较高,即具有优异的抗糖化能力。由对比例1-2的数据可知:肌肽与麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物之间具有协同增效作用,搭配使用,能够协同提高所述肤用组合物的抗糖化效果。由对比例3-10的数据可知:麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物,四者之间具有协同增效作用,搭配使用,能够协同提高所述肤用组合物的抗糖化效果。由对比例11-12的数据可知,卡瓦提取物和腺苷对肤用组合物的抗糖化效果的影响不大。
测试例4
本测试例探究实施例1-4和对比例1-12制备的组合物进行抗氧化能力测试。1,1-二苯基-2-三硝基苯腓(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical,DPPH),具有单电子,在517nm处有强吸收,其无水乙醇溶液呈紫色。当有自由基清除剂存在时,由于与其单电子配对而使其颜色逐渐消失,其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系,因而可用分光光度计进行快速的定量分析。清除DPPH自由基能力在一定程度上能够反应物质的抗氧化能力,自由基清除率越大,表明抗氧化能力越强。因此可以通过肤用组合物清除DPPH自由基能力的研究来判断其抗氧化效果。测试方法如下:
(1)制备DPPH-乙醇溶液:称取12mg 1,1-二苯基-2-三硝基苯腓(Macklin,纯度>96%)溶解于无水乙醇中,加入无水乙醇定容至250mL,现配现用;
(2)取样测试:分别移取1mL实施例1-4、对比例1-12的组合物与1mL DPPH-乙醇溶液,加入到5mL棕色容量瓶中,加入3mL的无水乙醇,摇匀,避光反应30min,用比色皿在517nm波长处测吸光度,并计算其自由基清除率,计算公式如下:
自由基清除率(%)=[l-(A-B)/(C-D)]×100%;
其中,A-步骤(2)中添加的实施例1-4或对比例1-12的样品与1mL的DPPH-乙醇溶液反应后在517nm的吸光值;
B-步骤(2)中添加的实施例1-4或对比例1-12的样品在的1mL超纯水溶液中517nm的吸光值;
C-单一的DPPH-乙醇溶液在517nm的吸光值(即将步骤(2)中的1mL实施例1-4或对比例1-12的样品溶液等量替换成超纯水后得到的DPPH-乙醇溶液在517nm的吸光值);
D-2mL超纯水和3mL的无水乙醇混合后的溶液在517nm的吸光值。
测试结果统计如下表5所示:
表5
由上表数据可知,本发明提供的肤用组合物的自由基清除消除率高,即具有优异的抗氧化能力。由对比例1-2的数据可知:肌肽与麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物之间具有协同增效作用,搭配使用,能够协同提高所述肤用组合物的抗氧化能力。由对比例3-10的数据可知:麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物,四者之间具有协同增效作用,搭配使用,能够协同提高所述肤用组合物的抗氧化能力。由对比例11-12的数据可知,卡瓦提取物和腺苷对肤用组合物的抗氧化效果的影响不大。
测试例5
本测试例对实施例1、对比例11和对比例12制备的组合物进行抗炎能力测试。角质形成细胞是一种存在于表皮中的免疫活性细胞,可分泌至少9种白细胞介素(Interleukin,IL),这些因子对淋巴细胞增殖、活化炎症细胞等有重要作用。已有研究发现,紫外线辐射后角质形成细胞分泌的IL-6可促进成纤维细胞产生细胞外基质金属蛋白酶,细胞外基质金属蛋白酶可导致胶原蛋白降解,细胞外基质的损伤而致皮肤老化的产生。此外,紫外线B可促使角质形成细胞分泌更多的IL-8,促使中性粒细胞在皮肤局部的聚集,诱导后续的炎症反应,从而进一步影响皮肤的免疫功能。本试验使用人角质形成细胞(HaCat细胞)为模型,分为实验组、模型组和空白对照组,每组评价实施例1、对比例11和对比例12制备的组合物的抗炎效果。测试方法如下:
(2)试验过程:
细胞培养:将HaCat细胞以密度为2.0-3.0×105个/mL/孔接种于12孔板,返回培养箱培养18-24h,培养基为在2-8℃下保存2周的含10%FBS的MEM培养基;
试验:取出培养板,弃去孔中原培养液,每孔加入1mL测试样品溶液(实施例1、对比例11或对比例12制备的组合物分别用完全培养基(MEM+10%FBS)配置成体积百分5.0%的测试样品溶液),并利用脂多糖(10ug/mL,最终浓度)刺激。同时设置模型组和空白对照组,其中模型组不加入测试样品溶液,只利用脂多糖(10ug/ml,最终浓度)刺激,空白对照组为加入1mL完全培养基(MEM+10%FBS),不加脂多糖刺激。随后每组培养24±1h;
检测:去除原培养液,加入1mL新鲜培养液(含10%FBS的MEM培养基),继续培养24±1h,收集上清液,采用ELISA试剂盒测定细胞因子,测试条件为温度37±0.5℃,湿度>90%,5%CO2浓度;
数据分析:统计分析每组测试样品溶液对炎症因子(IL-6、IL-8)的抗炎活性情况,如果数据为正态分布,则采用t检验方法进行统计分析;如果数据为非正态分布,则采用秩和检验方法进行统计分析,统计方法均采用双尾检验,检验水准α=0.05。
实验结果统计如下表6所示(其中空白对照组测试结果为正常细胞内的IL-6、IL-8炎症因子的含量,模型组测试结果为经脂多糖刺激角质形成细胞后的IL-6、IL-8炎症因子的含量):
表6
由上表数据可知,实施例1、对比11和对比例12对脂多糖诱导的HaCat细胞分泌的炎性细胞因子(IL-6和IL-8)均有抑制作用。通过对比实施例1与对比例11-12的数据可知:实施例1得到的组合物,使IL-6和IL-8炎症因子的含量接近至空白对照组的水平,即实施例1得到的组合物对IL-6和IL-8炎症因子的抗炎活性最好,表明卡瓦提取物和腺苷搭配使用,能够协同提高组合物的抗炎能力。
测试例6
本测试例对应用例1-4和对比应用例1-12制备的精华液进行功效测试。测试方法如下:
(1)分组:招募320名志愿者,年龄为35-55岁,女性,日常有护肤习惯,面部皮肤松弛,符合《化妆品安全技术规范》的受试者纳入和排除标准。将志愿者随机平均分成16组(每组20人),分别使用应用例1-4和应用对比例1-12制备的精华液;
(2)皮肤弹性采用德国CK公司的Cutometer dual MPA 580进行测量。其原理基于吸力和拉伸原理,在被测试的皮肤表面产生一个负压将皮肤吸进一个特定测试探头内,皮肤被吸进测试探头内的深度是通过一个非接触式的光学测试系统测得。通过MPA软件分析来确定皮肤的弹性性能,选取测试指标R2,表示回弹部分的弹塑性总量/拉伸部分的弹塑性总量,两个过程的弹塑性性能相比,数值越大越接近1越好;
(3)测试过程:受试区域为面部颧骨部位。测试前,受试者统一清洁面部,并用无屑吸水干纸巾吸干。在温度20±1℃,相对湿度50±10%的实验室中静坐30min,期间不能喝水和饮料。受试者保持放松,面部暴露,避免触碰。实验室技术员测试受试者皮肤弹性值R2,随后指导受试者使用产品,产品早晚各使用一次,每次使用量约为半个硬币大小的量,期间不再使用其他护肤品。28天后,受试者回访,用洁面产品清洁面部,并用干面巾纸擦干皮肤,在温度21±1℃,相对湿度50±10%的实验室中静坐30min,实验室技术员测试受试者皮肤弹性值R2,计算受试者测试区域使用前和使用28天产品后测量值之间的差值ΔR2(使用28天产品后的皮肤弹性值R2-使用前的皮肤弹性值R2),然后利用此差值,统计分析每组受试者的使用产品前后的差别,如果数据为正态分布,则采用t检验方法进行统计分析;如果数据为非正态分布,则采用秩和检验方法进行统计分析,统计方法均采用双尾检验,检验水准α=0.05,弹性测试结果如下表7所示(其中,ΔR2为正值代表弹性增加,值越大代表弹性增长越大):
表7
由上表数据可知,采用本发明提供的肤用组合物制备得到的精华液能够增强皮肤弹性。对比应用例1与应用例4的结果可知:当精华液中缺少乙酰化透明质酸、卡瓦提取物和腺苷时,精华液的功效会受到影响。由对比应用例1-2的数据可知:肌肽与麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物之间具有协同增效作用,搭配使用,能够协同提高精华液的功效。由对比应用例3-10的数据可知:麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物,四者之间具有协同增效作用,搭配使用,能够协同提高精华液的功效。由对比应用例11-12的数据可知:卡瓦提取物和腺苷搭配使用,能够协同提高精华液的功效。
综上所述,本发明提供了一种抗糖化肤用组合物,通过采用具有抗糖化能力的肌肽,搭配麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物使用,能够协同增效其抗糖化、抗氧化的功效,同时能够改善肤色。另外,搭配使用的乙酰化透明质酸、卡瓦提取物和腺苷起保湿、镇静舒缓、抗炎抗菌的效果,同时促进肌肤合成弹性蛋白以恢复肌肤活力,增强皮肤弹性,减少皱纹,延缓衰老。所述抗糖化服用组合物可以用于制备化妆品,方法简单,有利于实现产业化。
申请人声明,以上所述仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,所属技术领域的技术人员应该明了,任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到的变化或替换,均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (16)
1.一种抗糖化肤用组合物,其特征在于,所述抗糖化肤用组合物包括:肌肽、麦角硫因、富勒烯、葡萄多酚和黑枸杞提取物;
所述抗糖化肤用组合物按重量份计包括:肌肽0.1-1份,麦角硫因0.1-1份,富勒烯0.1-3份,葡萄多酚0.1-1份,黑枸杞提取物1-10份。
2.根据权利要求1所述的抗糖化肤用组合物,其特征在于,所述抗糖化肤用组合物还包括乙酰化透明质酸、腺苷和卡瓦提取物。
3.根据权利要求2所述的抗糖化肤用组合物,其特征在于,所述抗糖化肤用组合物按重量份计包括:肌肽0.1-1份,麦角硫因0.1-1份,富勒烯0.1-3份,葡萄多酚0.1-1份,黑枸杞提取物1-10份,乙酰化透明质酸0.1-1份,腺苷0.05-2份,卡瓦提取物2-10份。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的抗糖化肤用组合物在制备化妆品中的应用,其特征在于,所述化妆品包括乳液、精华液、爽肤水、面霜或面膜中的任意一种。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述抗糖化肤用组合物的添加质量为所述化妆品质量的3-29%。
6.一种精华液,其特征在于,所述精华液包括如权利要求1-3中任一项所述的抗糖化肤用组合物、pH调节剂、增稠剂、防腐剂和溶剂。
7.根据权利要求6所述的精华液,其特征在于,所述精华液还包括保湿剂、螯合剂或抗氧化剂中的任意一种或至少两种的组合。
8.根据权利要求6所述的精华液,其特征在于,所述pH调节剂包括三乙醇胺、氨甲基丙醇、柠檬酸或乳酸中任意一种或至少两种的组合。
9.根据权利要求6所述的精华液,其特征在于,所述增稠剂包括卡波姆、聚丙烯酸钠、黄原胶或羟乙基纤维素中的任意一种或至少两种的组合。
10.根据权利要求6所述的精华液,其特征在于,所述防腐剂包括羟苯甲酯、羟苯丙酯、羟苯丁酯、对羟基苯乙酮或苯氧乙醇中的任意一种或至少两种的组合。
11.根据权利要求6~10中任一项所述的精华液的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
将增稠剂与溶剂混合,加热溶解,随后一次降温,加入pH调节剂与防腐剂,二次降温,加入抗糖化肤用组合物,溶解,得到所述精华液。
12.根据权利要求11所述的制备方法,其特征在于,所述一次降温至温度为50-60℃。
13.根据权利要求11所述的制备方法,其特征在于,所述二次降温至温度为35-45℃。
14.根据权利要求11所述的精华液的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:将增稠剂与溶剂混合,加热溶解,随后一次降温,加入pH调节剂与防腐剂,二次降温,加入保湿剂、螯合剂、抗氧化剂和抗糖化肤用组合物,溶解,得到所述精华液。
15.根据权利要求14所述的精华液的制备方法,其特征在于,所述一次降温至温度为50-60℃。
16.根据权利要求14所述的精华液的制备方法,其特征在于,所述二次降温至温度为35-45℃。
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