CN110438048A - 利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，包括以下的步骤：S1：预处理酒糟；S2：将多黏芽孢杆菌经活化和扩大培养，得到多黏芽孢杆菌发酵液；S3：向所得预处理酒糟中补充质量比为10％的膨化玉米粉，混合均匀后，按预处理酒糟总量计，添加质量比1‑5％的所述多黏芽孢杆菌发酵液，混合成发酵基料，然后堆积发酵72‑96h，得到发酵产物；其中，发酵过程中保持发酵物料的含水量在45％；S4：将所得发酵产物进行干燥、粉碎过筛，制成多黏芽孢杆菌添加剂。本发明还公开了该添加剂在动物饲料及农作物种植中的应用；该添加剂可提高动物的免疫力及生长速度，也能提高土壤中的全氮全磷含量、农作物产量及减少病害。

Description

利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法及其应用
技术领域
本发明属于添加剂制备技术领域，具体涉及一种利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法及其应用。
背景技术
酒糟是酿酒产业的主要副产物，酒糟是指谷物酿酒之后的副产物，主要包括白酒糟、啤酒糟和酒精糟。我国作为白酒生产和消费大国，白酒酿造副产物白酒糟的产量也连年增多，据报道，近几年我国的白酒产量达到了1.4×107t，白酒糟的产量也达到了5.5×107t。白酒酿造一般以高粱、小麦、稻谷为原料发酵蒸馏而成，在酒曲微生物的作用下，原料中大量的可溶性碳水化合物经发酵产生醇、酸、酮等各种物质，而原料中的粗蛋白、纤维素、矿物质和未能蒸发的有机酸以及其他有机物残留在酒糟中，因此酒糟中的营养成分除了碳水化合物之外、蛋白质、纤维素以及矿物质等均比原料中的含量高，但是由于酿酒白酒糟的酸度较高，若处理不及时，极易腐烂变质，发酸发臭，造成严重的环境污染的同时，也造成了资源的浪费。近年来发酵工艺逐渐被应用到白酒糟的加工上来，为白酒糟的合理应用提供了思路。
多黏芽孢杆菌以芽孢形式存在，耐温性好，质量稳定，通过发酵可以产生多肽、脂肽、多糖、蛋白、酚类、生物抗生素(如多黏菌素B)等物质，并且多数活性物质稳定存在；另外，多黏芽孢杆菌本身可以用于防治青枯病、枯萎病、根腐病、软腐病等土传病害，已经被美国环境保护署(EPA)列为可商业上应用的微生物种类之一，目前，主要有直接将该菌制备的菌剂用于蔬菜或水果病害防治上，对于农作物上的应用少有报道，并且对于在动物饲料中的应用更是鲜有报道。现有的利用白酒酒糟发酵微生物多采用混合菌的形式，但是由于各种菌种发酵的适宜条件各有差异，导致发酵过程繁琐、时间长，并且发酵产物的营养价值并没有明显的提高，活菌数也没有因为多种菌种的存在而有较高的活菌数量，以导致投入成本相对较高。
本发明是以白酒酒糟为发酵原料，通过预处理酒糟后，补充适宜的碳源和氮源，为多黏芽孢杆菌提供最佳的发酵环境，并且通过改变常规简单覆膜升温的结构，大大减少了发酵时间，并使得菌种能快速进入营养生长和代谢产物的增长，有效的提高了活菌量及营养物质。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌的方法，通过预处理排出鲜酒糟中多余的酸、醇、醛等物质，并通过补充碳源和氮源以为多黏芽孢杆菌提供适宜的生长环境和充足的营养物物质，利于菌种的快速生长和代谢。
本发明还有一个目的是提供一种利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌的方法制备的多黏芽孢杆菌，其在动物饲料中的应用，可以有效提高动物免疫力，以及促进快速生长。
本发明还有一个目的是提供一种利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌的方法制备的多黏芽孢杆菌，其在农作物种植中的应用，可以明显提高土壤氮磷用量，提高农作物产量。
为了实现本发明的这些目的和其它优点，提供了一种利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，包括以下的步骤：
S1：将新鲜的白酒酒糟排酸、干燥、去稻壳后，得到预处理酒糟；
S2：将多黏芽孢杆菌经活化和扩大培养，得到多黏芽孢杆菌发酵液；
S3：向所得预处理酒糟中补充质量比为10％的膨化玉米粉，混合均匀后，按预处理酒糟总量计，添加质量比1-5％的所述多黏芽孢杆菌发酵液，混合成发酵基料，然后堆积发酵72-96h，得到发酵产物；其中，发酵过程中保持发酵物料的含水量在45％；
S4：将所得发酵产物进行干燥、粉碎过筛，制成多黏芽孢杆菌添加剂。
优选的是，S1中排酸和干燥具体的操作方法包括：将新鲜的白酒酒糟置于搅拌机中，设置初始温度为100℃，搅拌速度500rpm，保持30min后，将搅拌速度降至200-300rpm，并设定一降温条件，两小时内由100℃降温至45℃，45℃保温至酒糟含水量20-25％；
当酒糟含水量降至20-25％时，去除酒糟中的稻壳，以得到所述预处理酒糟。
优选的是，S2还包括：所述多黏芽孢杆菌的活化培养基，包括以下重量份的原料：蛋白胨10-15份、酵母膏5-8份、葡萄糖10-15份、磷酸二氢钾1-2份、七水合硫酸镁0.5-0.8份、碳酸钙3-5份，水1000份，pH为7.2-7.5；活化条件：35-37℃、150rpm，培养16-20h；
所述多黏芽孢杆菌的发酵培养基，包括以下重量份的原料：豆粕20-25份、麦麸35-40份、糖蜜3-5份、磷酸二氢钾1-2份、七水合硫酸镁0.5-0.8份、碳酸钙1-3份、水1000份、pH为7.2-7.5；发酵条件：35-37℃、180rpm，培养72-96h。
优选的是，S3的发酵条件为：于35-37℃，湿度控制在45-50％下有氧发酵。
优选的是，S2中所述发酵基料发酵至48h时补充硫酸铵，所述硫酸铵添加量为所述预处理酒糟的0.5-1％。
优选的是，所述发酵基料堆积为厚度为15-20cm方形结构，堆积后的发酵基料上方覆盖由花胶布制成的快速升温装置；
其中，所述快速升温装置包括由花胶布制成的一端开口的方形袋，所述方形袋中装有生石灰粉，所述开口设置拉链；所述方形袋的其中一面中部设置连通所述方形袋内部的水管，所述水管远离所述方形袋的一端可拆卸的外接水源。
优选的是，所述方形袋的大小和所述发酵基料的堆积体积相匹配，以将所述发酵基料完全覆盖；
所述水管采用软管，所述水管上设置阀门。
优选的是，所述发酵基料堆积完成后，通过所述水管向所述快速升温装置内按生石灰和水质量比1:1-2注水，并在所述发酵基料升温至40℃时，去除快速升温装置，翻拌一次，堆积成15-20cm继续发酵，待温度升到50℃，每3-4h翻料一次。
本发明还提供一种所述的方法制备的多黏芽孢杆菌添加剂在动物饲料中的应用，所述多黏芽孢杆菌添加剂与动物日用饲料混合使用，可替代5-10％的动物日用饲料。
本发明还提供一种所述的方法制备的多黏芽孢杆菌添加剂在农作物种植中的应用，其特征在于，所述多黏芽孢杆菌添加剂以每亩1-1.5kg的用量和无机化肥配合使用。
本发明至少包括以下有益效果：
白酒酒糟酿酒过程中产生的主要副产物，价格低，而且供应量十分充足，目前，作为动物饲料使用，多数是直接烘干后饲喂牛、羊等动物，但是由于酒糟中含有大量的稻壳，纤维含量高、适口性差，饲喂动物的效果欠佳，并且还可能影响动物的消化甚至是健康状况，而本申请针对现有技术中的缺点，对新鲜的白酒酒糟先进行排酸、干燥，可降低含酸量，以及一些剩余的醇、醛等物质，再将干燥后的酒糟去稻壳，可大大减少纤维素含量，公知，粮食经酿酒发酵后产生的酒糟，绝大部分的糖类物质被分解，而含有20％左右的蛋白质未被利用，由于菌种的发酵也需要充足完全的营养物质，才能进行营养生长及营养物质的累积，因此，本申请接种之前向预处理酒糟中补充膨化玉米粉，以为多黏芽孢杆菌提供充足的营养物质，并且膨化玉米粉疏松多孔，利于多黏芽孢杆菌的有氧发酵。
本发明制备的多黏芽孢杆菌添加剂含有的活菌数最高可达4.0×1010cfu/g，饲喂动物后通过改变肠道功能，平衡有益菌和有害菌，促进进食量，有效提高免疫力，进而促进生长并减少疾病发生；与无机化肥混合使用后，有益菌的增加，改变了土壤的微生态环境，增加了土壤中有机质、全氮、全磷的含量，还提高了农作物含量。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
附图1为本发明所述的快速升温装置结构示意图。
具体实施方式
下面对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
本发明提供一种利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，包括以下的步骤：
S1：将新鲜的白酒酒糟排酸、干燥、去稻壳后，得到预处理酒糟；
S2：将多黏芽孢杆菌经活化和扩大培养，得到多黏芽孢杆菌发酵液；
S3：向所得预处理酒糟中补充质量比为10％的膨化玉米粉，混合均匀后，按预处理酒糟总量计，添加质量比1-5％的所述多黏芽孢杆菌发酵液，混合成发酵基料，然后堆积发酵72-96h，得到发酵产物；其中，发酵过程中保持发酵物料的含水量在45％；
S4：将所得发酵产物进行干燥、粉碎过筛，制成多黏芽孢杆菌添加剂。
一个优选方案中，S1中排酸和干燥具体的操作方法包括：将新鲜的白酒酒糟置于搅拌机中，设置初始温度为100℃，搅拌速度500rpm，保持30min后，将搅拌速度降至200-300rpm，并设定一降温条件，两小时内由100℃降温至45℃，45℃保温至酒糟含水量20-25％；
当酒糟含水量降至20-25％时，去除酒糟中的稻壳，以得到所述预处理酒糟。
在上述方案中，初始温度设施100℃，转速500rpm，保持30min，可以使得高温有氧条件下，快速去除剩余的水分、酸、醇、醛等物质，还能进行干燥减少粘度，之后以等温不断降低(如12℃/20min)或者梯度降温形式(如：每20min降温一次，依次为5℃、10℃、15℃……)，并在两小时内由100℃降到45℃，是为了防止酒糟表面水分干燥到一定程度高温下就产生焦糊、碳化等现象，影响营养价值,而一直处于搅拌状态开始主要是为了减小粘度、提高通风通氧量，之后调低是在粘度已经降低的情况下，一方面可以使得颗粒减小利于发酵，并且对于酒糟中残余的耐高温酵母菌复苏后搅拌帮助菌体破碎，释放营养物质；另一方面，还能减少由于通风量过大导致外干内潮的情况；后续温度保持不变也是为了防止外干内潮水分不均匀的情况，并且在45℃下保持持续的搅拌更有利于含水量均匀下降。
酒糟干燥至含水量20-25％时，稻壳和酒糟之间能用分选筛将两者分开，去除绝大部分的稻壳，减少纤维含量，提高多黏芽孢杆菌添加剂添加到动物饲料中的适口性。
一个优选方案中，S2还包括：所述多黏芽孢杆菌的活化培养基，包括以下重量份的原料：蛋白胨10-15份、酵母膏5-8份、葡萄糖10-15份、磷酸二氢钾1-2份、七水合硫酸镁0.5-0.8份、碳酸钙3-5份，水1000份，pH为7.2-7.5；活化条件：35-37℃、150rpm，培养16-20h；
所述多黏芽孢杆菌的发酵培养基，包括以下重量份的原料：豆粕20-25份、麦麸35-40份、糖蜜3-5份、磷酸二氢钾1-2份、七水合硫酸镁0.5-0.8份、碳酸钙1-3份、水1000份、pH为7.2-7.5；发酵条件：35-37℃、180rpm，培养72-96h。
在上述方案中，活化培养基培养的多黏芽孢杆菌的种子液，在OD600为1-1.2时，按体积比5.3％接种到发酵培养基中进行发酵培养，以获得发酵液，发酵液含菌量的数量级为108cfu/mL。
一个优选方案中，S3的发酵条件为：于35-37℃，湿度控制在45-50％下有氧发酵。
一个优选方案中，S2中所述发酵基料发酵至48h时补充硫酸铵，所述硫酸铵添加量为所述预处理酒糟的0.5-1％。
一个优选方案中，在发酵至48h时已经是出于发酵的中后期，温度较高，多黏芽孢杆菌的消耗量很大，此时补充一定量的硫酸铵，有助于防止酒糟中的氮源不足的情况，避免影响菌种的菌种的营养代谢产物积累。
一个优选方案中，所述发酵基料堆积为厚度为15-20cm方形结构，堆积后的发酵基料上方覆盖由花胶布制成的快速升温装置；
其中，所述快速升温装置包括由花胶布制成的一端开口101的方形袋100，所述方形袋100中装有生石灰粉，所述开口101设置拉链102；所述方形袋100的其中一面中部设置连通所述方形袋100内部的水管103，所述水管103远离所述方形袋100的一端可拆卸的外接水源。
在上述方案中，花胶布是由如聚四氟乙烯支撑的耐高温又防水材质的塑料产品，用花胶布支撑方形袋状，目的是为和发酵基料堆积的形状相匹配，一端开口设置拉链方面装入和取出生石灰粉，生石灰粉的用量根据发酵基料的堆积面积装入，一般平铺方形袋生石灰的厚度为1-2cm即可，使用时将方形袋内的生石灰铺设均匀，覆盖到发酵基料上以完全覆盖为基准，方形袋其中一面中部(优选发酵基料正中心对应方形袋的位置，并且在其远离发酵基料的一面中部设置)设置水管，可以通过注水与生石灰粉反应产热使得发酵基料快速升温达到多黏芽孢杆菌生长的适宜温度35-37℃，可大大减少缓慢升温所消耗的时间，并且在较低温度下，菌种只消耗营养满足自身的需要，不利于积累产物，而快速升温不但减少总发酵时间，还利于菌种生长及产物的快速积累。
一个优选方案中，所述方形袋100的大小和所述发酵基料的堆积体积相匹配，以将所述发酵基料完全覆盖；
所述水管103采用软管，所述水管103上设置阀门104。
在上述方案中，根据需要制备和发酵基料堆积体积相匹配的方形袋，既能满足覆盖要求，还不浪费材料；水管设置软管，可便于收纳，阀门设计一方面利于控制进水量，另一方面利于水和生石灰粉反应时热量的保存。
一个优选方案中，所述发酵基料堆积完成后，通过所述水管103向所述快速升温装置内按生石灰和水质量比1:1-2注水，并在所述发酵基料升温至40℃时，去除快速升温装置，翻料一次，堆积成15-20cm继续发酵，待温度升到50℃，每3-4h翻料一次。
在上述方案中，由于发酵基料的堆积厚度为15-20cm，经过试验证明，生石灰和水质量比为1:1-2时既能满足放热量使得发酵基料在30-60min就能上升至35-37℃，又不会由于快速放出大量的热量导致贴近方形袋的菌种部分死亡。
温度上升到40℃，再继续升高多黏芽孢杆菌的生长变得缓慢，不利于大量菌体的形成，次级代谢产物的积累也就减少，因此，此时去除快速升温装置，翻料一次，可以帮助由于密封环境下发酵，菌种的生长消耗大量的氧造成的无氧环境不利于菌种继续发酵，用常规机械(铲车或铁锹)翻拌一次，以增加通氧量，也能是温度稍有下降，利于恢复至适宜发酵温度，同时还能促使菌体量的积累；继续发酵，待温度升到50℃，每3-4h翻料一次，可以使形成的大量菌体积累代谢产物，又不至于温度过高菌体死亡，造成菌体和代谢产物的双重损失。
本发明还提供一种所述的方法制备的多黏芽孢杆菌添加剂在动物饲料中的应用，所述多黏芽孢杆菌添加剂与动物日用饲料混合使用，可替代5-10％动物日用饲料。
本发明还提供一种所述的方法制备的多黏芽孢杆菌添加剂在农作物种植中的应用，所述多黏芽孢杆菌添加剂以每亩1-1.5kg的用量和无机化肥配合使用。
以下是实施例所用菌种的培养：
多黏芽孢杆菌按3-5％接种量接种到液体的活化培养基中，在37℃、180rpm、下，培养16h，得到种子液；活化培养基，包括以下重量份的原料：蛋白胨10份、酵母膏5份、葡萄糖15份、磷酸二氢钾1份、七水合硫酸镁0.5份、碳酸钙3份，水1000份，pH为7.2；
测得种子液的OD600为1，此时按体积比接种于发酵培养基中，37℃、180rpm，培养96h，得到多黏芽孢杆菌发酵液；发酵培养基，包括以下重量份的原料：豆粕25份、麦麸35份、糖蜜5份、磷酸二氢钾1份、七水合硫酸镁0.5份、碳酸钙1.5份、水1000份、pH为7.2。
多黏芽孢杆菌购自江苏绿科生物技术有限公司。
实施例1
一种利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，包括以下的步骤：
(1)将新鲜的白酒酒糟置于搅拌机中，设置初始温度为100℃，搅拌速度500rpm，保持30min后，将搅拌速度降至200rpm，以梯度降温形式(每20min降温一次，依次为5℃、10℃、15℃……)，两小时内由100℃降温至45℃，45℃保温至酒糟含水量20％，然后去除酒糟中的稻壳，以得到预处理酒糟；
(2)向所得预处理酒糟中补充质量比为10％的膨化玉米粉，混合均匀后，按预处理酒糟总量计，添加质量比1％的所述多黏芽孢杆菌发酵液，混合成发酵基料，然后堆积成15cm的方形结构，在35℃，湿度控制在45％下有氧发酵，待温度上升到40℃时，翻料一次，上升到50℃时每3h翻料一次，共发酵72h，得到发酵产物；其中，发酵过程中保持发酵物料的含水量在45％；
(3)将所得发酵产物进行45℃干燥至含水量12％以下、粉碎过60目筛，制成多黏芽孢杆菌添加剂。
用PCA计数法测含菌量，上述实施例的制备的多变芽孢杆菌添加剂含菌量为2.0×1010cfu/g，可溶性蛋白含量相比原料(包含酒糟和膨化玉米粉)中的可溶性蛋白含量提高10％。
实施例2
一种利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，包括以下的步骤：
(1)同实施例1的(1)；
(2)向所得预处理酒糟中补充质量比为10％的膨化玉米粉，混合均匀后，按预处理酒糟总量计，添加质量比3％的所述多黏芽孢杆菌发酵液，混合成发酵基料，然后堆积成15cm的方形结构，在37℃，湿度控制在50％下有氧发酵，待温度上升到40℃时，翻料一次，上升到50℃时每3h翻料一次，共发酵72h，得到发酵产物；其中，发酵过程中保持发酵物料的含水量在50％；
(3)同实施例1的(3)。
用PCA计数法测含菌量，上述实施例的制备的多变芽孢杆菌添加剂含菌量为2.1×1010cfu/g，可溶性蛋白含量相比原料(包含酒糟和膨化玉米粉)中的可溶性蛋白含量提高10.3％。
实施例3
(1)同实施例1的(1)；
(2)向所得预处理酒糟中补充质量比为15％的膨化玉米粉，混合均匀后，按预处理酒糟总量计，添加质量比5％的所述多黏芽孢杆菌发酵液，混合成发酵基料，然后堆积成20cm的方形结构，在37℃，湿度控制在45％下有氧发酵，待温度上升到40℃时，翻料一次，上升到50℃时每3h翻料一次，共发酵96h，得到发酵产物；其中，发酵过程中保持发酵物料的含水量在50％；
(3)同实施例1的(3)。
用PCA计数法测含菌量，上述实施例的制备的多变芽孢杆菌添加剂含菌量为2.2×1010cfu/g，可溶性蛋白含量相比原料(包含酒糟和膨化玉米粉)中的可溶性蛋白含量提高11.2％。
实施例4
(1)同实施例1的(1)；
(2)向所得预处理酒糟中补充质量比为15％的膨化玉米粉，混合均匀后，按预处理酒糟总量计，添加质量比3％的所述多黏芽孢杆菌发酵液，混合成发酵基料，然后堆积成20cm的方形结构，在37℃，湿度控制在45％下有氧发酵，发酵至48h时，按预处理酒糟总量计添加0.5％的硫酸铵，待温度上升到40℃时，翻料一次，上升到50℃时每3h翻料一次，共发酵72h，得到发酵产物；其中，发酵过程中保持发酵物料的含水量在50％；
(3)同实施例1的(3)。
用PCA计数法测含菌量，上述实施例的制备的多变芽孢杆菌添加剂含菌量为3.3×1010cfu/g，可溶性蛋白含量相比原料(包含酒糟、膨化玉米粉和硫酸铵)中的可溶性蛋白含量提高20％。
实施例4
(1)同实施例1的(1)；
(2)向所得预处理酒糟中补充质量比为15％的膨化玉米粉，混合均匀后，按预处理酒糟总量计，添加质量比3％的所述多黏芽孢杆菌发酵液，混合成发酵基料，然后堆积成20cm的方形结构，在37℃，湿度控制在45％下有氧发酵，发酵至48h时，按预处理酒糟总量计添加1％的硫酸铵，待温度上升到40℃时，翻料一次，上升到50℃时每3h翻料一次，共发酵72h，得到发酵产物；其中，发酵过程中保持发酵物料的含水量在60％；
(3)同实施例1的(3)。
用PCA计数法测含菌量，上述实施例的制备的多变芽孢杆菌添加剂含菌量为2.8×1010cfu/g，可溶性蛋白含量相比原料(包含酒糟、膨化玉米粉和硫酸铵)中的可溶性蛋白含量提高15％。
实施例5
(1)同实施例1的(1)；
(2)向所得预处理酒糟中补充质量比为15％的膨化玉米粉，混合均匀后，按预处理酒糟总量计，添加质量比3％的所述多黏芽孢杆菌发酵液，混合成发酵基料，然后堆积成20cm的方形结构，将上面覆盖上快速升温装置，在37℃，湿度控制在45％下有氧发酵，发酵至48h时，按预处理酒糟总量计添加0.5％的硫酸铵，待温度上升到40℃时，翻料一次，上升到50℃时每3h翻料一次，共发酵72h，得到发酵产物；其中，发酵过程中保持发酵物料的含水量在50％；
(3)同实施例1的(3)。
用PCA计数法测含菌量，上述实施例的制备的多变芽孢杆菌添加剂含菌量为4.0×1010cfu/g，可溶性蛋白含量相比原料(包含酒糟、膨化玉米粉和硫酸铵)中的可溶性蛋白含量提高35％。
实施例6
(1)将新鲜的白酒酒糟自然摊晾降至含水量20％，未除稻壳；
(2)同实施例5的(2)；
(3)同实施例5的(3)。
用PCA计数法测含菌量，上述实施例的制备的多变芽孢杆菌添加剂含菌量为2.45×1010cfu/g，可溶性蛋白含量相比原料(包含酒糟、膨化玉米粉和硫酸铵)中的可溶性蛋白含量提高13％。
实施例7
(1)同实施例(1)；
(2)不加膨化玉米粉，其它同实施例5的(2)；
(3)同实施例5的(3)。
用PCA计数法测含菌量，上述实施例的制备的多变芽孢杆菌添加剂含菌量为1×1010cfu/g，可溶性蛋白含量相比原料(包含酒糟和硫酸铵)中的可溶性蛋白含量提高3％，未见明显提高，可见碳氮均衡对于菌种发酵非常重要。
实施例8
2019年3月12日，山东省德州市某养殖厂，选取20日龄的肉鸡150只，随机分成等量的三组，第一组用本申请实施例5制备的多黏芽孢杆菌添加剂按质量比计，替代日用饲料总量5％，第二组只用日用饲料饲喂，第三组用实施例5制备的多黏芽孢杆菌添加剂按质量比计，替代日用饲料总量10％，观察3个月后，结果发现第一组的鸡没有出现任何有病症，平均体重相对于第二组提高45％；第二组，分别在3月底至4月中旬，间断性的先后有10只鸡出现严重程度不同的呼吸道感染，经药物治疗，8只恢复正常，2只症状严重死亡；第三组的鸡没有出现任何病症，相对第二组平均体重提高48％，和第一组没有很大差别。
实施例9
山东省某种植户，选用半亩地，划分成大小相同的两个地块，在2018年10月17日同时播种小麦，根据小麦种植管理方法，同时进行正常管理，不同之处在于，在每次施用无机氮磷肥料时，第一个地块的无机氮磷肥料中添加实施例5制备的多黏芽孢杆菌添加剂，添加量按每亩添加1kg与无机氮磷肥混合，采用同样的方式进行施用；第二个地块仅采用无机氮磷肥，并且使用总量和第一组的多黏芽孢杆菌添加剂及无机氮磷肥料总量相同，在2019年6月5号收获小麦后，分别统计了土壤中氮磷量的状况以及小麦产量状况，其中，相对于第二个地块，土壤中全氮、全磷的含量分别提高了30％和28.7％，而产量提高了15％，同时还发现第一地块的小麦叶锈病明显少于第二个地块。
通过实施例1-7可明显的看出，膨化玉米粉和硫酸铵添加及用量、多黏芽孢杆菌的接菌量、发酵基料的含水量、酒糟的处理情况及如何为菌种发酵快速提供优良的发酵条件等都直接关系到最终活菌含量以及代谢产物中可溶性蛋白的含量，进而直接影响到作为饲料或者肥料使用，对动物或者植物的关键指标(比如体重、产量、免疫力等)的影响，因此，只有配方中的各种原料及条件均处于最佳的状态，才能保证活菌含量及其代谢产物的有效积累，进而对动物或植物才能有应用价值。
通过实施例8和实施例9发现本申请制备的多黏芽孢杆菌添加剂的使用，可以提高鸡的免疫力及体重，利于肉鸡的快速成长，提高经济效益；还能提高土壤中全氮、全磷的含量，也就相应的减少土壤中氮磷的供应，利于保持土壤的营养成分，便于农作物连作，并且还提供了农作物产量及减少病害，可见，利用白酒酒糟生产的多黏芽孢杆菌对于在动物饲料及农作物肥料中的应用具有广阔的前景。
以上实施方式仅用于说明本发明，而非对本发明的限制。尽管参照实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，对本发明的技术方案进行各种组合、修改或者等同替换，都不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (10)

1.一种利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，其特征在于，包括以下的步骤：
S1：将新鲜的白酒酒糟排酸、干燥、去稻壳后，得到预处理酒糟；
S2：将多黏芽孢杆菌经活化和扩大培养，得到多黏芽孢杆菌发酵液；
S3：向所得预处理酒糟中补充质量比为10％的膨化玉米粉，混合均匀后，按预处理酒糟总量计，添加质量比1-5％的所述多黏芽孢杆菌发酵液，混合成发酵基料，然后堆积发酵72-96h，得到发酵产物；其中，发酵过程中保持发酵物料的含水量在45％；
S4：将所得发酵产物进行干燥、粉碎过筛，制成多黏芽孢杆菌添加剂。
2.如权利要求1所述的利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，其特征在于，S1中排酸和干燥具体的操作方法包括：将新鲜的白酒酒糟置于搅拌机中，设置初始温度为100℃，搅拌速度500rpm，保持30min后，将搅拌速度降至200-300rpm，并设定一降温条件，两小时内由100℃降温至45℃，45℃保温至酒糟含水量20-25％；
去除酒糟中的稻壳，以得到所述预处理酒糟。
3.如权利要求1所述的利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，其特征在于，S2还包括：所述多黏芽孢杆菌的活化培养基，包括以下重量份的原料：蛋白胨10-15份、酵母膏5-8份、葡萄糖10-15份、磷酸二氢钾1-2份、七水合硫酸镁0.5-0.8份、碳酸钙3-5份，水1000份，pH为7.2-7.5；活化条件：35-37℃、150rpm，培养16-20h；
所述多黏芽孢杆菌的发酵培养基，包括以下重量份的原料：豆粕20-25份、麦麸35-40份、糖蜜3-5份、磷酸二氢钾1-2份、七水合硫酸镁0.5-0.8份、碳酸钙1-3份、水1000份、pH为7.2-7.5；发酵条件：35-37℃、180rpm，培养72-96h。
4.如权利要求1所述的利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，其特征在于，S3的发酵条件为：于35-37℃，湿度控制在45-50％下有氧发酵。
5.如权利要求1所述的利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，其特征在于，S2中所述发酵基料发酵至48h时补充硫酸铵，所述硫酸铵添加量为所述预处理酒糟的0.5-1％。
6.如权利要求1所述的利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，其特征在于，所述发酵基料堆积为厚度为15-20cm方形结构，堆积后的发酵基料上方覆盖有花胶布制成的快速升温装置；
其中，所述快速升温装置包括由花胶布制成的一端开口的方形袋，所述方形袋中装有生石灰粉，所述开口设置拉链；所述方形袋的其中一面中部设置连通所述方形袋内部的水管，所述水管远离所述方形袋的一端可拆卸的外接水源。
7.如权利要求6所述的利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，其特征在于，所述方形袋的大小和所述发酵基料的堆积体积相匹配，以将所述发酵基料完全覆盖；
所述水管采用软管，所述水管上设置阀门。
8.如权利要求7所述的利用白酒酒糟生产多黏芽孢杆菌添加剂的方法，其特征在于，所述发酵基料堆积完成后，通过所述水管向所述快速升温装置内按生石灰和水质量比1:1-2注水，并在所述发酵基料升温至40℃时，去除快速升温装置，翻料一次，堆积成15-20cm继续发酵，待温度升到50℃，每3-4h翻料一次。
9.一种如权利要求1-8任一项所述的方法制备的多黏芽孢杆菌添加剂在动物饲料中的应用，其特征在于，所述多黏芽孢杆菌添加剂与动物日用饲料混合使用，可替代5-10％动物日用饲料。
10.一种如权利要求1-8任一项所述的方法制备的多黏芽孢杆菌添加剂在农作物种植中的应用，其特征在于，所述多黏芽孢杆菌添加剂以每亩1-1.5kg的用量和无机化肥配合使用。
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