CN110420162A - 一种珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，其是采用特殊的低温方法将珍珠母液的蛋白活性成分进行有效的保护。所述珍珠母液经摄氏低温‑20℃，‑40℃，‑80℃的冷冻保存，使生物活性物质获得静止分解的状态；然后经3‑10mPa的真空升华，达到珍珠母液活性成分干燥的目的。所述珍珠母液低温保存方法具有保持活性，迅速溶解的功能。

Description

一种珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法
技术领域
本发明涉及一种珍珠贝母液，属于生物技术制品领域，特别是涉及一种珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法和应用。
背景技术
珍珠母液是珠母贝壳的珍珠层的具有活跃的功能的珍珠母体分泌的活性液体，如图1所示(以白蝶珍珠贝为例)。然而，珍珠母液是孕育珍珠的珍贵物质，是最有价值的珍珠营养物质。
珍珠母液中含有32多种氨基酸，其中精氨酸，蛋氨酸和赖氨酸含量很高，精氨酸具有明显的促进血液循环，调节免疫的功能。蛋氨酸具有促进肌肉萎缩的恢复功能，赖氨酸具有促进细胞生长代谢功能，同时还含有除18种氨基酸外的5种特殊氨基酸，维护珍珠母液的生理功能和生物学效应。因此，珍珠母液具有抗衰老，抗病毒作用，是一种天然的细胞保护剂和细胞修复剂。
目前，主要养殖珍珠的珍珠贝类有：金蝶珍珠贝、白蝶珍珠贝、黑蝶珍珠贝，马氏珍珠贝、企鹅珍珠贝、淡水三角帆蚌珍珠等。不同种类的珍珠贝的母液成分和每种珍珠母液所含有的蛋白质溶度不同。如马氏珍珠贝母液的蛋白质浓度为111.7ng/ul，白蝶珍珠贝母液的蛋白质浓度为418ng/ul。
但是，目前尚没有出现有效的能够干燥保存珍珠贝母液蛋白活性成分的方法，因此，这也是所属领域技术人员急需解决的技术难题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，主要特点是通过特殊低温冷冻，升华，真空，干燥的方法，充分保护了珍珠贝母液的有效成分，提供了最佳的利用效率。
本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。依据本发明提出的一种珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，包括以下步骤：
1)将珍珠贝母液经摄氏低温-20℃，-40℃，-80℃的冷冻保存，使生物活性的蛋白物质获得静止分解的状态；
2)然后经3-10mPa的真空升华，达到珍珠贝母液蛋白活性成分的干燥的目的。
进一步而言，步骤1)中，所述珍珠贝母液蛋白活性成分是通过以下工艺提取制得：
从珍珠贝中抽取20ml的珍珠母液作为原料，经低温离心，8000转/分钟，离心50分钟，分离珍珠母液的蛋白活性成分，调节珍珠母液pH值至6.0-7.2，经0.45nm-0.25nm滤膜过滤，通过细胞法和紫外检测法，HPLC法检测珍珠母液蛋白活性成分含量。
进一步而言，新鲜的珍珠母液用去腥味的过滤材料进行过滤，经多次过滤后，保持零上4℃左右的新鲜珍珠母液作为备用。
进一步而言，所述过滤材料选自活性炭；过滤的次数一般为3次或以上次数。
进一步而言，步骤1)中，新鲜的珍珠母液来源于不同的珍珠贝，所述珍珠贝可选择金蝶珍珠贝、白蝶珍珠贝、黑蝶珍珠贝，马氏珍珠贝、企鹅珍珠贝，淡水三角帆珍珠蚌等可以养殖珍珠的贝类。
进一步而言，步骤1)中，所述生物活性蛋白，是一种获得静止分解的状态的活性蛋白，弃掉沉渣(含珍珠贝肌肉部分)。
进一步而言，步骤2)中，所述真空升华工艺是采用真空冷冻干燥机进行真空冷冻干燥工艺；冷冻干燥之前，先将准备干燥的新鲜珍珠母液蛋白活性成分置于低温冰箱或液氮中，使物品完全冰冻，方可进行冷冻干燥。
进一步而言，所述真空冷冻干燥工艺是将含水物料预先冻结，然后使之在真空状态下升华而获得干燥物品的一种方法。
步骤2)中，所述真空冷冻工艺包括：低温冷冻，真空升华，低温干燥等步骤；将珍珠母液蛋白活性成分制备成白色粉末状物质。
进一步而言，步骤2)中，所述珍珠贝母液原液采用海水和淡水的珍珠母液，其有效成份为活性蛋白质，蛋白浓度为100mg/ml-400mg/ml，以此活性的珍珠母液蛋白活性成分为原料制备珍珠母液蛋白固体粉末。
由上述技术方案，本发明具有如下优点和有益技术效果：
1、本发明的工艺方法所得到的珍珠母液蛋白活性成分固体粉末产品，该成品迅速溶解，有利于身体消化吸收的特点，可作为化妆品及食品的天然原材料组成成分。
2、本发明制得的珍珠母液蛋白活性成分粉末有效地保留了珍珠母液里的营养成份的活性，便于长期保存；具有保持活性，迅速溶解的功能。
3、珍珠母液为珍珠贝生理活动的最活跃的粘液成分，是取珍珠形成的主要物质，也是在珍珠培育过程中获得的宝贵物质。
4、本发明使得珍珠母液通过制备获得蛋白活性成分，经低温递减方法真空干燥，获得一种新的产品形式，扩大珍珠产业的发展和珍珠产品的深度开发和应用，具有重要的社会价值和应用价值，增加经济效益。
附图说明
图1为白蝶珍珠贝的贝壳内部示意图。
图2为冻干机结构和程序图。
图3为白蝶珍珠贝珍珠母液蛋白活性成分冻干曲线图。
具体实施方式
本发明首次采用特殊的低温方法将珍珠贝母液的蛋白活性成分进行有效的保护。如图3所示，所述珍珠母液经摄氏低温-20℃，-40℃，-80℃的冷冻保存，使生物活性物质获得静止分解的状态。然后经10-40Pa的真空升华，达到珍珠母液蛋白活性成分的干燥的目的，制得蛋白活性成分利用率高的珍珠母液固体粉末产品。
本发明利用冷冻干燥的方法处理珍珠母液，获得珍珠母液的蛋白活性成分，包括蛋白质，氨基酸及矿物质及多种维生物素。本发明特殊的珍珠母液保存方法，留住珍珠母液的精华，达到保护珍珠母液有效成分的目的。本发明所述珍珠母液低温保存方法具有保持活性，迅速溶解的功能。
以下通过具体较佳实施例结合效果试验例对本发明作进一步详细说明，但本发明并不仅限于以下的实施例。
如图2所示，珍珠母液蛋白活性成分的递减真空干燥法，采用冷冻干燥机，型号：美国Labconco型号的冻干机，具有超低温冷冻，真空升华，升温干燥功能。该冷冻干燥机其结构及程序主要包括：压缩机、低温制冷系统、水环式真空泵、冷凝器-真空系统、真空升华、干燥箱、真空干燥系统，最后得到冻干产品。
实施例1
一种珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，包括以下步骤：
1)金蝶贝珍珠母液蛋白活性成分的提取
收取金蝶贝珍珠母液的液体作为原料，经低温离心，设置转述5000-10000转/分钟，离心50分钟，分离珍珠母液的活性蛋白成分，调节珍珠母液pH值至6.0-7.2，经0.45nm-0.25nm滤膜过滤，通过细胞法和紫外检测法，HPLC法检测珍珠母液蛋白活性成分的含量。
如图3所示，分装2ml小瓶，均匀摆放在低温冷冻箱内，调节温度为-20度，保存2小时——-40度保存2小时——-80度保存2小时进行低温真空升华干燥，将真空泵设置3mPa，5mPa，10mPa——真空升华——-40度1小时——-30度30分钟——-20度30分钟——-10度40分钟——0度50分钟——冻干产品。
2)将检验合格的珍珠母液蛋白活性成分产品分次置于-20℃，-40℃，-80℃梯度低温冷冻，改变冷冻的温度和冷冻的真空度3-10mpa。
3)以-40℃低温真空逐步释放温度的方法达到产品升华，然后在真空条件下使物品中的固态水份(冰)直接升华成水蒸气，从珍珠母液中排除，使珍珠母液蛋白活性成分干燥，得到固体粉末状成品。
本实施例1制得的珍珠母液蛋白活性成分固体粉末状成品，冻干后珍珠母液蛋白活性成分产品标准：
白色或灰白色的疏松体，无融化迹象。溶解后应为略黏稠、白黄色澄明液体，无异物、浑浊或沉淀。水分含量低于1.0％。加入规定量的20～25℃灭菌注射用水后轻轻摇动，应在15分钟内完全溶解。pH值应为6.0～7.4。活性蛋白总量的96.0％；100-200mg/ml。
实施例2
一种珍珠贝母液有效成分的冷冻干燥保存方法，包括以下步骤：
1)黑蝶珍珠贝珍珠母液蛋白活性成分的提取
收取黑蝶贝珍珠母液的液体作为原料，经低温离心，设置转述5000-10000转/分钟，离心50分钟，分离珍珠母液的活性蛋白成分，调节珍珠母液pH值至6.0-7.2，经0.45nm-0.25nm滤膜过滤，通过细胞法和紫外检测法，HPLC法检测珍珠母液蛋白活性成分的含量。
如图3所示，分装2ml小瓶，均匀摆放在低温冷冻箱内，调节温度为-20℃，保存2小时——-40℃，保存2小时——-80℃，保存2小时进行低温真空升华干燥，将真空泵设置3mPa，5mPa，10mPa——真空升华——-40℃，3小时——-30℃，30分钟——-20℃，30分钟——-10℃，40分钟——0℃，50分钟——冻干产品。
2)将检验合格的珍珠母液蛋白活性成分产品分次置于-20℃，-40℃，-80℃梯度低温冷冻，改变冷冻的温度和冷冻的真空度3-10mpa。
3)以-40℃低温真空逐步释放温度的方法达到产品升华，然后在真空条件下使物品中的固态水份(冰)直接升华成水蒸气，从珍珠母液中排除，使珍珠母液蛋白活性成分干燥，得到固体粉末状成品。
从珍珠贝中抽取出20ml的珍珠母液作为原料，经低温离心，5000-10000转/分钟，离心50分钟，分离珍珠母液的蛋白活性成分，调节珍珠母液pH值至6.0-7.2，经0.45nm-0.25nm滤膜过滤，通过细胞法和紫外检测法，HPLC法检测珍珠母液活性蛋白成分。本实施例中，采用黑蝶珍珠贝。
本实施例2制得的珍珠母液活性蛋白固体粉末状成品，白色或灰白色的疏松体，无融化迹象。溶解后应为略黏稠、白黄色澄明液体，无异物、浑浊或沉淀。水分含量低于1.0％。加入规定量的20～25℃灭菌注射用水后轻轻摇动，应在15分钟内完全溶解。pH值应为6.0～7.4。活性蛋白总量的96.0％；110-150mg/ml。
实施例3
一种珍珠贝母液有效成分的冷冻干燥保存方法，包括以下步骤：
1)白蝶珍珠贝珍珠母液蛋白活性成分的提取
收取白蝶贝珍珠母液的液体作为原料，经低温离心，设置转述5000-10000转/分钟，离心50分钟，分离珍珠母液的活性蛋白成分，调节珍珠母液pH值至6.0-7.2，经0.45nm-0.25nm滤膜过滤，通过细胞法和紫外检测法，HPLC法检测珍珠母液蛋白活性成分的含量。
如图3所示，分装2ml小瓶，均匀摆放在低温冷冻箱内，调节温度为-20℃，保存2小时——-40℃保存2小时——-80℃保存2小时进行低温真空升华干燥，将真空泵设置3mPa，5mPa，10mPa——真空升华——-40℃3小时——-30℃，30分钟——-20℃，30分钟——-10℃，40分钟——0℃，50分钟——冻干产品。
2)将检验合格的珍珠母液蛋白活性成分产品分次置于-20℃，-40℃，-80℃梯度低温冷冻，逐渐变化冷冻的温度和冷冻的真空度3-10mpa。
3)以-40℃低温真空逐步释放温度的方法达到产品升华，然后在真空条件下使物品中的固态水份(冰)直接升华成水蒸气，从珍珠母液中排除，使珍珠母液蛋白活性成分干燥，得到固体粉末状成品。
本实施例3制得的珍珠母液活性蛋白固体粉末状成品，白色或灰白色的疏松体，无融化迹象。溶解后应为略黏稠、白黄色澄明液体，无异物、浑浊或沉淀。水分含量低于1.0％。加入规定量的20～25℃灭菌注射用水后轻轻摇动，应在15分钟内完全溶解。pH值应为6.0～7.4。活性蛋白总量的96.0％；200-300mg/ml。
到目前为止，没有本产品的相关工艺报道。
综上所述，本发明采用一种低温冷冻干燥保存珍珠贝母液蛋白活性成分的工艺方法，具有如下优点与效益：
1、经此方法所得到的珍珠母液蛋白活性成分固体粉末产品迅速溶解，有利于身体吸收的特点，可作为化妆品及食品的天然药材料。
2、珍珠母液蛋白活性成分粉末有效地保留了珍珠母液里的营养成份的活性，便于长期保存。
3、珍珠母液为珍珠贝生理活动的最活跃的粘液成分，是取珍珠形成的主要物质，也是在珍珠培育过程中获得的宝贵物质。
本发明使得珍珠母液通过低温递减方法真空干燥，获得一种新的产品形式，扩大珍珠产业的发展和珍珠产品的深度开发和应用，具有重要的社会价值和应用价值，增加经济效益。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，故凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰,均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (10)

1.一种珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将珍珠贝母液经摄氏低温-20℃，-40℃，-80℃的冷冻保存，使生物活性的蛋白物质获得静止分解的状态；
2)然后经3-10mPa的真空升华，达到珍珠贝母液蛋白活性成分的干燥的目的。
2.如权利要求1所述的珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，其特征在于：步骤1)中，所述珍珠贝母液蛋白活性成分是通过以下工艺提取制得：
从珍珠贝中抽取20ml的珍珠母液作为原料，经低温离心，8000转/分钟，离心50分钟，分离珍珠母液的蛋白活性成分，调节珍珠母液pH值至6.0-7.2，经0.45nm-0.25nm滤膜过滤，通过细胞法和紫外检测法，HPLC法检测珍珠母液蛋白活性成分含量。
3.如权利要求2所述的珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，其特征在于：新鲜的珍珠母液用去腥味的过滤材料进行过滤，经多次过滤后，保持零上4℃左右的新鲜珍珠母液蛋白活性成分作为备用。
4.如权利要求1所述的珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，其特征在于：步骤1)中，所述过滤材料选自活性炭；过滤的次数一般为3次或以上次数。
5.如权利要求1所述的珍珠贝母液有效成分的冷冻干燥保存方法，其特征在于：步骤1)中，新鲜的珍珠母液来源于不同的珍珠贝，所述珍珠贝可选择金蝶珍珠贝、白蝶珍珠贝、黑蝶珍珠贝，马氏珍珠贝、企鹅珍珠贝，淡水三角帆珍珠蚌等可以养殖珍珠的贝类。
6.如权利要求1所述的珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，其特征在于：步骤1)中，所述生物活性蛋白，是一种获得静止分解的状态的活性蛋白，弃掉沉渣(含珍珠贝肌肉部分)。
7.如权利要求1所述的珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，其特征在于：步骤2)中，所述真空升华工艺是采用真空冷冻干燥机进行真空冷冻干燥工艺；冷冻干燥之前，先将准备干燥的新鲜珍珠母液蛋白活性成分置于低温冰箱或液氮中，使物品完全冰冻，方可进行冷冻干燥。
8.如权利要求7所述的珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，其特征在于：所述真空冷冻干燥工艺是将含水物料预先冻结，然后使之在真空状态下升华而获得干燥物品的一种方法。
9.如权利要求7所述的珍珠贝母液蛋白活性成分的冷冻干燥保存方法，其特征在于：步骤2)中，所述真空冷冻工艺包括：低温冷冻，真空升华，低温干燥等步骤；将珍珠母液蛋白活性成分制备成白色粉末状物质。
10.如权利要求1所述的珍珠贝母液有效成分的冷冻干燥保存方法，其特征在于：
步骤2)中，所述珍珠贝母液原液采用海水和淡水的珍珠母液，其有效成份为活性蛋白质，蛋白浓度为100mg/ml-400mg/ml，以此活性的珍珠母液蛋白活性成分为原料制备珍珠母液蛋白固体粉末。
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