CN110403186A - 一种蚯蚓酶解技术 - Google Patents
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Abstract
本技术涉及一种水解蚯蚓获取蚓激酶、多肽(抗菌肽、脑啡肽、内啡肽等)、SOD、氨基酸的技术,该方法完整地保留了蚓激酶、多肽的活性,制成品为液体,该液体能长时间(5年)常温储存仍保持活性,芳香无异味。该液体可直接作为外用药、口服药、保健品使用,也可进一步采用膜分离等方式获取不同分子量的成分;该液体还可以制作保健酒、功能饮料、化妆品。本方法是一种复合酶解法:用大蒜、丁香、香叶、木瓜蛋白酶制作的复合酶解液对洗净消毒后的蚯蚓在50℃下恒温水解2至3小时,巴氏灭菌后用酵母35℃发酵7小时,然后再巴氏灭菌。
Description
技术领域
本发明属生物化学技术
背景技术
蚯蚓的医药、保健、美容价值,已经被广泛的研究证实。蚓激酶等已经进入国家药典,制成了治疗血栓、哮喘的胶囊、口服液、注射液,蚯蚓蛋白粉、蚓激酶粉的提取方法、蚯蚓氨基酸液的提取方法也有不少的专利。
本技术涉及一种水解蚯蚓获取蚓激酶、多肽(抗菌肽、脑啡肽、内啡肽等)、SOD、氨基酸的技术,该方法完整地保留了蚓激酶、多肽的活性,制成品为液体,该液体能长时间(5年)常温储存仍保持活性,芳香无异味。该液体可直接作为外用药、口服药、保健品使用,也可进一步采用膜分离等方式获取不同分子量的成分;该液体还可以制作保健酒、功能饮料、化妆品。
发明内容
本方法是一种复合酶解法,包含以下步骤:
1.蚯蚓准备:方法一,将蚯蚓洗净,用0.1%食盐水浸泡10到20分钟,再用无菌水清洗,沥干待用;方法二,将蚯蚓洗净,对蚯蚓体表进行巴氏灭菌,沥干待用。
2.复合酶解液制作:
大蒜经巴氏灭菌后捣碎取汁,丁香、香叶煎汁。将大蒜汁、丁香香叶汁与木瓜蛋白酶混合。
3.水解:
将复合酶解液与蚯蚓混合,料液比1∶2,大蒜汁与蚯蚓比例50ml/1000g,丁香香叶与蚯蚓比例5%。水解温度50℃,时间2至3小时。过滤,过滤过程保证蚯蚓不被折断,滤液供下一步发酵,蚯蚓体则按上述步骤再行二次水解。二次水解之后蚯蚓体腔基本被水解完毕,而肠道不被水解、保持原状,再行过滤,过滤过程仍然保证蚯蚓肠道不被扭曲、折断,防止蚯蚓肠道细菌逸出感染水解液。
4.将两次水解液混合或单独进行巴氏灭菌。
5.发酵:
在蚯蚓水解液中加1%酵母,在35℃条件下发酵7小时。
6.灭菌灭酶:
连续巴氏灭菌
本方法的主要特征在于:1.利用蚯蚓肠道难于酶解的事实,对蚯蚓进行整体酶解,在保证蚯蚓体各种成分不变性的前提下进行体表灭菌,让肠道内的细菌始终被肠道封闭而不逸出。2.利用蚓激酶的失活温度高于一般蛋白水解酶失活温度和大多数细菌灭活温度的事实,用连续巴氏灭菌法进行蚯蚓水解液的灭菌和灭酶活处理,这样既保持了蚯蚓水解液中各类蚓激酶的活性,又可充分灭菌,还可让蛋白水解酶失活,防止蛋白水解酶将水解液中的蚓激酶、多肽等药效物质进一步分解成氨基酸。3.用中药掩盖和消除蚯蚓的部分腥味。4.用发酵法消除部分腥臭物质、产生芳香物质。
本发明的有益效果是:所制成的蚯蚓水解液芳香无异味;可常温储存5年不会腐败;保留了各类多肽、蛋白质的活性;可进一步制作化妆品、保健酒、功能饮料以及提取蚓激酶、多肽。
具体实施方式
实施例一
1.取大小均匀的蚯蚓,洗净;用0.1%食盐水浸泡10到20分钟,料液比1∶2;再用无菌水清洗;过滤后加入磨成粉末的白砂糖腌制20分钟。
2.将剥皮后大蒜装进能快速沥水的容器,将装了大蒜的容器放入沸水中(大蒜全部被淹没)20秒,迅速提出沥干水分,将灭菌后的大蒜用捣碎机捣碎,过滤取汁;取待处理蚯蚓重量1%的丁香、香叶加蚯蚓重量2倍的水煎汁,滤去药渣冷却至50℃以下;称取蚯蚓重量1.5%的木瓜蛋白酶加入丁香汁搅拌溶解,量取大蒜汁(50ml/kg蚯蚓)加入丁香汁搅拌分散,制成酶解液。
3.将腌制后的蚯蚓与酶解液放入恒温反应罐,50℃酶解2至3小时(根据蚯蚓大小调整时间)。在不折损蚯蚓肠道的前提下小心过滤。过滤后的蚯蚓体再按上面方法进行二次水解、过滤。
4.将蚯蚓酶解液放回恒温反应罐升温至62℃保温30分钟灭菌。
5.称取蚯蚓重量1%的酒酵母撒入降温到35℃的蚯蚓酶解液中,保温7小时。
6.将发酵后的蚯蚓酶解液再升温至62℃保温30分钟灭菌灭酶活。降温到35℃以下,放置一天后再升温到62℃保温30分钟灭菌,降温冷却即成。
本实施例的产品适合做酒。
实施例二
1.取大小均匀的蚯蚓,洗净后装进能快速沥水的容器,入沸水中(蚯蚓全部被淹没)20秒,迅速提出沥干水分。
2.将剥皮后大蒜装进能快速沥水的容器,将装了大蒜的容器放入沸水中(大蒜全部被淹没)20秒,迅速提出沥干水分,将灭菌后的大蒜用捣碎机捣碎,过滤取汁;取待处理蚯蚓重量1%的丁香、香叶加蚯蚓重量2倍的水煎汁,滤去药渣冷却至50℃以下;称取蚯蚓重量1.5%的木瓜蛋白酶加入丁香汁搅拌溶解,量取大蒜汁(50ml/kg蚯蚓)加入丁香汁搅拌分散,制成酶解液。
3.将高温灭菌后的蚯蚓与酶解液放入恒温反应罐,50℃酶解2至3小时(根据蚯蚓大小调整时间)。在不折损蚯蚓肠道的前提下小心过滤。过滤后的蚯蚓体再按上面方法进行二次水解、过滤。
4.将蚯蚓酶解液放回恒温反应罐升温至62℃保温30分钟灭菌。
5.称取蚯蚓重量1%的活性干酵母酵母撒入降温后的蚯蚓酶解液中,保温7小时。
6.将发酵后的蚯蚓酶解液再升温至62℃保温30分钟灭菌灭酶活。降温到35℃以下,放置一天后再升温到62℃保温30分钟灭菌,降温冷却即成。
本实施例的产品适合做化妆品。
Claims (1)
1.一种蚯蚓水解技术其特征在于:蚯蚓体表灭菌,整体酶解,酶解及过滤过程保持蚯蚓肠道完整;巴氏灭菌灭酶活;用中药掩臭增香、发酵增香。
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- 2018-04-26 CN CN201810389050.1A patent/CN110403186A/zh active Pending
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