CN110331176A - 一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法 - Google Patents

一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110331176A
CN110331176A CN201910533027.XA CN201910533027A CN110331176A CN 110331176 A CN110331176 A CN 110331176A CN 201910533027 A CN201910533027 A CN 201910533027A CN 110331176 A CN110331176 A CN 110331176A
Authority
CN
China
Prior art keywords
oligofructose
raw sugar
added
raw
obtains
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201910533027.XA
Other languages
English (en)
Inventor
宋建民
王德海
宛荣生
张琴
王颂
黄祥君
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Anhui Min Zhen Biotechnology Co Ltd
Original Assignee
Anhui Min Zhen Biotechnology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Anhui Min Zhen Biotechnology Co Ltd filed Critical Anhui Min Zhen Biotechnology Co Ltd
Priority to CN201910533027.XA priority Critical patent/CN110331176A/zh
Publication of CN110331176A publication Critical patent/CN110331176A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
    • C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0051—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid beta-D-Fructofuranans, e.g. beta-2,6-D-fructofuranan, i.e. levan; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/12—Disaccharides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/18—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a glycosyl transferase, e.g. alpha-, beta- or gamma-cyclodextrins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/24—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of an isomerase, e.g. fructose

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，以粗糖为原料，通过加入果糖基转移酶，可将粗糖中的蔗糖转化为低聚果糖；再加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶可将粗糖中的葡萄糖转化为葡萄糖酸、果糖，再将得到的低聚果糖粗液依次通过陶瓷膜、超滤膜、纳滤膜、离子交换树脂可有效除去葡萄糖酸和果糖，提高低聚果糖的纯度。实验结果表明，低聚果糖的纯度可达96.37％，收率最高可达到65.48％。

Description

一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法
技术领域
本发明涉及低聚果糖领域，尤其是一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法。
背景技术
低聚果糖是一种天然活性物质。甜度为蔗糖的0.3-0.6倍。既保持了蔗糖的纯正甜味性质，又比蔗糖甜味清爽，被誉为继抗生素时代后最具潜力的新一代添加剂——促生物质。
低聚果糖除具有一般功能性低聚糖的物理化学性质外，最引人注目的生理特性是它能明显改善肠道内微生物种群比例，它是肠内双歧杆菌的活化增殖因子，可减少和抑制肠内腐败物质的产生，抑制有害细菌的生长，调节肠道内平衡；能促进微量元素铁、钙的吸收与利用，以防止骨质疏松症；可减少肝脏毒素，能在肠中生成抗癌的有机酸，有显著的防癌功能；且口味纯正香甜可口，具有类似脂肪的香味和爽口的滑腻感。近几年低聚果糖的产品风靡日、欧、美等保健品市场。
目前普通低聚果糖中通常含有蔗糖、葡萄糖等杂糖，其必然会对低聚果糖的生理功效、营养价值以及应用等方面大大折扣，因而高纯度低聚果糖的制备越来越受到人们的关注。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的是提供一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，能够提高低聚果糖的纯度。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，包括以下步骤：
1)将粗糖加水配制成质量浓度为40～60wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在30～40℃下反应5～7h，并在100～120℃下灭酶，得到酶解液；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为35～50℃下反应3～4h，并在100～120℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用陶瓷膜、超滤膜和纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经离子交换树脂除盐脱色，洗脱流速均为1～2ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
优选地，步骤2)中，果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入300～500U的果糖基转移酶。
优选地，步骤3)中，葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入80～120U的葡萄糖氧化酶。
优选地，步骤3)中，葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入50～80U的葡萄糖异构酶。
优选地，步骤4)中，陶瓷膜的孔径为100～200nm。
优选地，步骤4)中，超滤膜的截留分子量为600～800Da。
优选地，步骤4)中，纳滤膜的截留分子量为200～300Da。
优选地，步骤5)中，离子交换树脂包括强碱性阴离子交换树脂和强酸性阳离子交换树脂。
优选地，强酸性阴离子交换树脂为D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂；
强碱性阳离子交换树脂为D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂。
本发明提供的一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，以粗糖为原料，通过加入果糖基转移酶，可将粗糖中的蔗糖转化为低聚果糖；再加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶可将粗糖中的葡萄糖转化为葡萄糖酸、果糖，有效除去葡萄糖，再将得到的低聚果糖粗液依次通过陶瓷膜、超滤膜、纳滤膜、离子交换树脂可有效除去葡萄糖酸和果糖，提高低聚果糖的纯度。实验结果表明，低聚果糖的纯度可达96.37％，收率最高可达到65.48％。
具体实施方式
本发明提供的一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，包括以下步骤：
1)将粗糖加水配制成质量浓度为40～60wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在30～40℃下反应5～7h，并在100～120℃下灭酶，得到酶解液；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为35～50℃下反应3～4h，并在100～120℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用陶瓷膜、超滤膜和纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经离子交换树脂除盐脱色，洗脱流速均为1～2ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
将粗糖加水配制成质量浓度为40～60wt％的粗糖溶液。
向粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在30～40℃下反应5～7h，并在100～120℃下灭酶，得到酶解液；上述粗糖在果糖基转移酶的作用下生成低聚果糖。。在本发明的实施例中，果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入300～500U的果糖基转移酶。
向酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为35～50℃下反应3～4h，并在100～120℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶能够将酶解液中葡萄糖进行酶解，便于将其从低聚果糖中分离出去，提高低聚果糖的纯度。在本发明的实施例中，葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入80～120U的葡萄糖氧化酶；葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入50～80U的葡萄糖异构酶。
将低聚果糖粗液依次使用陶瓷膜、超滤膜和纳滤膜进行过滤，得到过滤液；在本发明的实施例中，陶瓷膜的孔径为100～200nm；超滤膜的截留分子量为600～800Da；纳滤膜的截留分子量为200～300Da。
需要说明的是，低聚果糖粗液经过陶瓷膜、超滤膜和纳滤膜依次过滤，可有效提高低聚果糖的纯度。
将过滤液经离子交换树脂除盐脱色，洗脱流速均为1～2ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；在本发明的实施例中，强酸性阴离子交换树脂为D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂；强碱性阳离子交换树脂为D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂。
需要说明的是，过滤液经强酸性阴离子交换树脂、强碱性阳离子交换树脂进行洗脱，可有效除去过滤液中的盐，同时还能够进行脱色，提高低聚果糖的透明度和纯度。
将洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
本发明以粗糖为原料，通过加入果糖基转移酶，可将粗糖中的蔗糖转化为低聚果糖；再加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶可将粗糖中的葡萄糖转化为葡萄糖酸、果糖，有效除去葡萄糖，再将得到的低聚果糖粗液依次通过陶瓷膜、超滤膜、纳滤膜、离子交换树脂可有效除去葡萄糖酸和果糖，提高低聚果糖的纯度。实验结果表明，低聚果糖的纯度可达96.37％，收率最高可达到65.48％。
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
1)将粗糖加水配制成质量浓度为40wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在30℃下反应7h，并在100℃下灭酶，得到酶解液；果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入300U的果糖基转移酶；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为35℃下反应4h，并在100℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入80U的葡萄糖氧化酶；葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入50U的葡萄糖异构酶；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用孔径为100nm的陶瓷膜、截留分子量为600Da的超滤膜和截留分子量为200Da的纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂、D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂依次进行洗脱，洗脱流速均为1ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
实施例2
1)将粗糖加水配制成质量浓度为60wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在40℃下反应5h，并在120℃下灭酶，得到酶解液；果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入500U的果糖基转移酶；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为50℃下反应3h，并在120℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入120U的葡萄糖氧化酶；葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入80U的葡萄糖异构酶；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用孔径为200nm的陶瓷膜、截留分子量为800Da的超滤膜和截留分子量为300Da的纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂、D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂依次进行洗脱，洗脱流速均为2ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
实施例3
1)将粗糖加水配制成质量浓度为50wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在35℃下反应6h，并在100℃下灭酶，得到酶解液；果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入400U的果糖基转移酶；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为45℃下反应3.5h，并在110℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入100U的葡萄糖氧化酶；葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入60U的葡萄糖异构酶；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用孔径为200nm的陶瓷膜、截留分子量为700Da的超滤膜和截留分子量为200Da的纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂、D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂依次进行洗脱，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
对比例1
1)将粗糖加水配制成质量浓度为50wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在35℃下反应6h，并在100℃下灭酶，得到酶解液；果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入400U的果糖基转移酶；
3)向步骤2)得到的酶解液依次使用孔径为200nm的陶瓷膜、截留分子量为700Da的超滤膜和截留分子量为200Da的纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
4)将步骤3)得到的过滤液经D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂、D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂依次进行洗脱，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
5)将步骤4)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
对比例2
1)将粗糖加水配制成质量浓度为50wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在35℃下反应6h，并在100℃下灭酶，得到酶解液；果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入400U的果糖基转移酶；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶，在温度为45℃下反应3.5h，并在110℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入100U的葡萄糖氧化酶；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用孔径为200nm的陶瓷膜、截留分子量为700Da的超滤膜和截留分子量为200Da的纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂、D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂依次进行洗脱，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
对比例3
1)将粗糖加水配制成质量浓度为50wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在35℃下反应6h，并在100℃下灭酶，得到酶解液；果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入400U的果糖基转移酶；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖异构酶，在温度为45℃下反应3.5h，并在110℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入60U的葡萄糖异构酶；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用孔径为200nm的陶瓷膜、截留分子量为700Da的超滤膜和截留分子量为200Da的纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂、D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂依次进行洗脱，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
对比例4
1)将粗糖加水配制成质量浓度为50wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在35℃下反应6h，并在100℃下灭酶，得到酶解液；果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入400U的果糖基转移酶；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为45℃下反应3.5h，并在110℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入100U的葡萄糖氧化酶；葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入60U的葡萄糖异构酶；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用孔径为200nm的陶瓷膜、截留分子量为200Da的纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂、D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂依次进行洗脱，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
对比例5
1)将粗糖加水配制成质量浓度为50wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在35℃下反应6h，并在100℃下灭酶，得到酶解液；果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入400U的果糖基转移酶；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为45℃下反应3.5h，并在110℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入100U的葡萄糖氧化酶；葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入60U的葡萄糖异构酶；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用孔径为200nm的陶瓷膜、截留分子量为700Da的超滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂、D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂依次进行洗脱，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
对比例6
1)将粗糖加水配制成质量浓度为50wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在35℃下反应6h，并在100℃下灭酶，得到酶解液；果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入400U的果糖基转移酶；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为45℃下反应3.5h，并在110℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入100U的葡萄糖氧化酶；葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入60U的葡萄糖异构酶；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液使用孔径为200nm的陶瓷膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂、D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂依次进行洗脱，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
对比例7
1)将粗糖加水配制成质量浓度为50wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在35℃下反应6h，并在100℃下灭酶，得到酶解液；果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入400U的果糖基转移酶；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为45℃下反应3.5h，并在110℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入100U的葡萄糖氧化酶；葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入60U的葡萄糖异构酶；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用孔径为200nm的陶瓷膜、截留分子量为700Da的超滤膜和截留分子量为200Da的纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂依次进行洗脱，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
对比例8
1)将粗糖加水配制成质量浓度为50wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在35℃下反应6h，并在100℃下灭酶，得到酶解液；果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入400U的果糖基转移酶；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为45℃下反应3.5h，并在110℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入100U的葡萄糖氧化酶；葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入60U的葡萄糖异构酶；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用孔径为200nm的陶瓷膜、截留分子量为700Da的超滤膜和截留分子量为200Da的纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂、进行洗脱，洗脱流速均为1.5ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
测量实施例1～3和对比例1～8得到的低聚果糖的收率和纯度，结果见表1。
表1实施例1～3和对比例1～8的实验结果
从表1可以看出，实施例1～3相比于对比例1～8，采用本发明的提供的方法制得的低聚果糖具有高的收率和纯度；且根据实施例3与对比例1相比，葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶的加入可显著提高低聚果糖的收率和纯度；对比例2与实施例3相比，省去葡萄糖异构酶，会对低聚果糖的收率产生影响，降低低聚果糖的收率；对比例3与实施例3相比，省去葡萄糖氧化酶，会对低聚果糖的收率产生影响，降低低聚果糖的收率；对比例4与实施例3相比，省去截留分子量为700Da的超滤膜过滤步骤，会影响低聚果糖的收率；对比例5与实施例3相比，过滤步骤中省去截留分子量为200Da的纳滤膜，会影响低聚果糖的收率；对比例6与实施例3相比，过滤步骤中省去截留分子量为700Da的超滤膜和截留分子量为200Da的纳滤膜，会影响低聚果糖的收率；对比例7与实施例3相比，过滤步骤中省去D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂，会影响低聚果糖的收率；对比例8与实施例3相比，过滤步骤中省去D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂，会影响低聚果糖的收率。
上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖性特点相一致的最宽的范围。

Claims (9)

1.一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将粗糖加水配制成质量浓度为40～60wt％的粗糖溶液；
2)向步骤1)得到的粗糖溶液中加入果糖基转移酶，在30～40℃下反应5～7h，并在100～120℃下灭酶，得到酶解液；
3)向步骤2)得到的酶解液加入葡萄糖氧化酶和葡萄糖异构酶，在温度为35～50℃下反应3～4h，并在100～120℃下灭酶，得到低聚果糖粗液；
4)将步骤3)得到的低聚果糖粗液依次使用陶瓷膜、超滤膜和纳滤膜进行过滤，得到过滤液；
5)将步骤4)得到的过滤液经离子交换树脂除盐脱色，洗脱流速均为1～2ml/min，流动相为乙醇，得到洗脱液；
6)将步骤5)得到的洗脱液进行浓缩、干燥，即得低聚果糖。
2.如权利要求1所述的以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，其特征在于，步骤2)中，果糖基转移酶的加入量为每100g粗糖中加入300～500U的果糖基转移酶。
3.如权利要求1所述的以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，其特征在于，步骤3)中，葡萄糖氧化酶的加入量为每100g粗糖中加入80～120U的葡萄糖氧化酶。
4.如权利要求1所述的以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，其特征在于，步骤3)中，葡萄糖异构酶的加入量为每100g粗糖中加入50～80U的葡萄糖异构酶。
5.如权利要求1所述的以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，其特征在于，步骤4)中，陶瓷膜的孔径为100～200nm。
6.如权利要求1所述的以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，其特征在于，步骤4)中，超滤膜的截留分子量为600～800Da。
7.如权利要求1所述的以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，其特征在于，步骤4)中，纳滤膜的截留分子量为200～300Da。
8.如权利要求1所述的以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，其特征在于，步骤5)中，离子交换树脂包括强碱性阴离子交换树脂和强酸性阳离子交换树脂。
9.如权利要求8所述的以粗糖为原料制得低聚果糖的方法，其特征在于，强酸性阴离子交换树脂为D001FD大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂；
强碱性阳离子交换树脂为D750大孔强碱性丙烯酸阴离子交换树脂。
CN201910533027.XA 2019-06-19 2019-06-19 一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法 Withdrawn CN110331176A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910533027.XA CN110331176A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910533027.XA CN110331176A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110331176A true CN110331176A (zh) 2019-10-15

Family

ID=68142150

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910533027.XA Withdrawn CN110331176A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110331176A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113549612A (zh) * 2020-04-24 2021-10-26 万华化学集团股份有限公司 一种固定化双酶及其制备方法与应用
WO2022058460A1 (en) * 2020-09-17 2022-03-24 Beneo-Orafti Sa Method for producing a stable fructooligosaccharide composition, fructooligosaccharide composition, and use thereof
CN115109810A (zh) * 2022-07-22 2022-09-27 金建国 一种低聚果糖及其制备方法

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113549612A (zh) * 2020-04-24 2021-10-26 万华化学集团股份有限公司 一种固定化双酶及其制备方法与应用
WO2022058460A1 (en) * 2020-09-17 2022-03-24 Beneo-Orafti Sa Method for producing a stable fructooligosaccharide composition, fructooligosaccharide composition, and use thereof
CN115109810A (zh) * 2022-07-22 2022-09-27 金建国 一种低聚果糖及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110331176A (zh) 一种以粗糖为原料制得低聚果糖的方法
CN101720910B (zh) 一种甜菊糖甙的制备方法
KR100653748B1 (ko) 자일로올리고당의 제조 방법
CN103667392B (zh) 一种高纯度95低聚异麦芽糖的制备方法
CN106947006B (zh) 一种高纯度菊粉的生产方法
CN103382493A (zh) 一种快速生产高纯度低聚甘露糖的方法
CN1556110A (zh) 一种高纯度低聚木糖的生产方法
CN112226474A (zh) 一种d-阿洛酮糖晶体的制备方法
CN103525953B (zh) 一种酸解制备低聚果糖的方法
CN111978423B (zh) 一种高纯度低聚半乳糖的制备方法
KR101628769B1 (ko) 프락토올리고당이 포함된 혼합 당 조성물의 제조 방법
CN1566161A (zh) 一种燕麦β－葡聚糖的制备方法
CN106947000B (zh) 一种高纯度多聚果糖的制备方法
CN102613352A (zh) 一种高γ-氨基丁酸速溶茶粉的制备方法
CN110786443B (zh) 一种甜茶提取物脱苦脱涩的方法
CN101597635B (zh) 高纯度水苏糖的制备方法
CN110241151A (zh) 一种海藻糖的制备方法
CN103204886A (zh) 一种高纯度麦芽三糖醇的制备方法
CN105331655A (zh) 一种茶籽低聚糖及其制备方法
CN109851520A (zh) 一种l-茶氨酸的分离纯化方法
CN105861251B (zh) 一种蓝莓保健酒产品
CN104928332A (zh) 一种高纯度低聚果糖的制备方法
CN108727443A (zh) 提高莱鲍迪苷a1g含量的结晶法、其产品及用途
CN110305922A (zh) 一种高纯度低聚果糖的制备方法
CN114262387A (zh) 一种抗性糊精的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20191015