KR101628769B1 - 프락토올리고당이 포함된 혼합 당 조성물의 제조 방법 - Google Patents

프락토올리고당이 포함된 혼합 당 조성물의 제조 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 프락토올리고당 함량이 높은 혼합 당 조성물의 제조 방법에 대한 것이다.

Description

프락토올리고당이 포함된 혼합 당 조성물의 제조 방법{PREPARATION METHOD OF SUGAR MIXTURE COMPOSITION CONTAINING FRUCTOOLIGOSACCHARIDES}
본 발명은 프락토올리고당이 포함된 혼합 당 조성물의 제조 방법에 대한 것이다.
프락토올리고당은 국내에서 1983년도에 최초로 개발/생산되어 현재까지 사용중에 있는 기능성 올리고당으로서, 특히 유제품이나 기타 건강기능식품의 기능성 소재로서 널리 사용되고 있다. 또한 프락토올리고당은 현재 물엿 대체용 감미료로서 소비자용 소포장 형태의 제품들이 일반 소비자를 상대로 판매되고 있다.
프락토올리고당은 현재 개발되어 시판중인 올리고당 중에서 각종 연구논문이나 제품의 판매량에 있어서 1위 자리를 계속 유지하고 있으며, 전세계 시장규모도 조금씩 성장하는 추세에 있다. 특히, 프락토올리고당은 유아용 유제품의 기능성 식품소재로 주로 사용되는데, 정장작용과 변비개선, 혈당 저하작용, 미네랄 흡수촉진 작용, 충치예방작용, 혈당상승 억제 작용 및 비만예방 작용 등이 있어 인기가 높다. 또한 프락토올리고당은 다양한 식품분야에서 사용되는 생리기능성이 우수한 올리고당 제품으로서 주목받고 있으며, 전세계적으로 프락토올리고당의 생리기능 효과에 대한 연구들이 활발히 진행 중에 있다. 예컨대, 한국공개특허 10- 1993-0000024호는 프락토올리고당 함유 커피음료에 대하여 기재하고 있으며, 한국공개특허 10-2014-0078317호는 프락토올리고당을 함유한 기능성 젤리에 대하여 기재하고 있다.
현재 국내에서 시판되는 프락토올리고당은 프락토올리고당이 포함된 당액의 형태로 제조되어 시판되는데, 이는 베타-프락토실퓨라노시다제(β-Fructosylfuranosidase)(프락토스(fructose) 전이효소)를 이용하여 제조된다. 그러나 이러한 베타-프락토실퓨라노시다제(프락토스 전이효소)를 이용하여 제조한 당액은 프락토올리고당 함량이 높지 않을 뿐 아니라, 상기 효소의 수급이 자유롭지 않은 문제가 있다.
이에 본 발명자들은 프락토올리고당 제조 방법에 대하여 연구하던 중, 아스퍼질러스 아큐레아투스(Aspergillus aculeatus) 유래의 베타-글루카나제(endo-1,3(4))(β-glucanase(endo-1,3(4)))를 이용하는 경우, 프락토올리고당 함량이 높은 혼합 당 조성물을 높은 수율 및 적은 비용으로 생산할 수 있는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 프락토올리고당 함량이 높고, 제조 비용 및 소요 시간이 절감된 혼합 당 조성물의 제조 방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기와 같은 제조 방법을 제공한다:
당 원료에 물을 혼합하여 1차 당액을 제조하는 단계;및
상기 1차 당액에 베타-글루카나제를 첨가하는 단계를 포함하는,
프락토올리고당이 포함된 혼합 당 조성물의 제조 방법.
또한 본 발명은 하기와 같은 제조 방법을 제공한다:
당 원료에 열수를 혼합하여 1차 당액을 제조하는 단계;
상기 1차 당액에 베타-글루카나제를 첨가하는 단계;
상기 베타-글루카나제가 첨가된 1차 당액을 효소 반응 시켜, 2차 당액을 제조하는 단계;및
상기 2차 당액을 1차 여과시키는 단계를 포함하는,
프락토올리고당이 포함된 혼합 당 조성물의 제조 방법.
본 발명은 혼합 당 조성물 내 프락토올리고당 함량이 높은 혼합 당 조성물을, 제조 비용 및 소요 시간이 절감된 방법으로 생산할 수 있다.
도 1은 프락토올리고당의 성분 및 화학식을 나타낸다.
도 2는 실시예 1 및 비교예 1의 HPLC 분석 결과를 나타낸다.
본 발명은,
당 원료에 물을 혼합하여 1차 당액을 제조하는 단계;및
상기 1차 당액에 베타-글루카나제를 첨가하는 단계를 포함하는,
프락토올리고당이 포함된 혼합 당 조성물의 제조 방법에 대한 것이다.
또한 본 발명은,
당 원료에 열수를 혼합하여 1차 당액을 제조하는 단계;
상기 1차 당액에 베타-글루카나제를 첨가하는 단계;
상기 베타-글루카나제가 첨가된 1차 당액을 효소 반응 시켜, 2차 당액을 제조하는 단계;및
상기 2차 당액을 1차 여과시키는 단계를 포함하는,
프락토올리고당이 포함된 혼합 당 조성물의 제조 방법에 대한 것이다.
이하, 본 발명을 자세히 설명한다.
당 원료
상기 당 원료는 원당(raw sugar)이며, 이는 설탕일 수 있다. 바람직하게는 상기 원당은 설탕 함량이 99.5 중량% 이상인 것이 바람직하다.
1차 당액 제조 단계
본 발명의 혼합 당 조성물의 제조 방법은 당 원료에 물 또는 열수를 혼합하여 1차 당액을 제조하는 단계을 포함한다. 상기 1차 당액은 당액의 농도가 55 내지 60 중량%인 것이 바람직하다. 1차 당액의 농도가 55 중량% 미만인 경우 효소가 원당으로부터 프락토올리고당을 충분히 높은 비율로 생산하기 어렵다.
베타- 글루카나제
본 발명의 혼합 당 조성물의 제조 방법은 상기 1차 당액에 베타-글루카나제를 첨가하는 단계를 포함한다.
상기 베타-글루카나제는 아스퍼질러스 아큐레아투스(Aspergillus aculeatus) 유래인 것일 수 있으며, 합성 효소일 수도 있다. 또한 상기 베타-글루카나제는 아스퍼질러스 아큐레아투스로부터 분리하여 사용할 수 있으며(Purification and kinetic characterization of a fructosyltransferase from Aspergillus aculeatus, Ghazi et al., J Biotechnol. 2007 Jan 30;128(1)) 시판되는 베타-글루카나제(endo-1,3(4))를 구입하여 사용할 수도 있다.
상기 베타-글루카나제는 1차 당액의 고형분 대비 0.01 내지 20 %(W/V)의 함량으로 첨가하며, 바람직하게는 0.02 내지 10.0 %(W/V)의 함량으로 첨가하고, 더욱 바람직하게는 0.02 내지 5.0 %(W/V)의 함량으로 첨가한다.
2차 당액 제조 단계
본 발명의 혼합 당 조성물의 제조 방법은 베타-글루카나제가 첨가된 1차 당액을 효소 반응 시켜, 2차 당액을 제조하는 단계를 포함한다. 상기 효소 반응은 24 시간 내지 72 시간 동안 수행하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 24 시간 내지 48 시간 동안 수행한다. 효소 반응이 24시간 미만인 경우 프락토올리고당이 충분히 생산되기 전에 반응이 종료되어, 최종 산물인 혼합 당 조성물 내 프락토올리고당 함량이 낮아지게 된다. 한편, 효소 반응이 72시간을 초과하는 경우 생성된 프락토올리고당의 분해가 일어나는 문제가 있다.
또한 상기 효소 반응의 진행 도중 당액 내 프락토올리고당 함량을 측정하면서 효소 반응을 수행하는 것이 바람직하다. 또한 상기 효소 반응은 당액 내 프락토올리고당 함량이 미리 정한 함량에 도달할 때까지 수행하는 것이 바람직하다. 상기 미리 정한 함량은 원하는 혼합 당 조성물 내 프락토올리고당 함량을 고려하여 정할 수 있으며, 예컨대, 45% 이상, 바람직하게는 50% 이상, 더욱 바람직하게는 52% 이상이 될 수 있다.
이렇게 당액 내 프락토올리고당 함량을 체크하면서 효소 반응을 시행함로써 시행착오를 거치거나 불필요한 시간을 소비하지 않고 원하는 프락토올리고당 함량을 갖는 혼합 당 조성물을 제조할 수 있다.
1차 여과 단계
본 발명의 혼합 당 조성물의 제조 방법은 상기 2차 당액을 1차 여과시키는 단계를 포함한다.
상기 1차 여과는 상기 2차 당액을 나노여과막 필터(NF) 또는 한외여과막 필터(UF)에 통액시켜 수행하며, 바람직하게는 상기 1차 여과는 상기 2차 당액을 나노여과막 필터(NF) 및 한외여과막 필터(UF)에 순차적으로 통액시켜 수행한다.
상기 1차 여과 공정을 거침으로써 상기 2차 당액 내 이온성 물질이 제거된다. 만약 1차 여과 공정을 수행하지 않는 경우, 2차 당액 내 이온성 물질이 그대로 잔존하게 된다. 이 경우 당액 농축 시 농축물의 색상이 노란색을 띠게 되는 문제가 있다 농축물의 색상이 노란색이라도 인체에는 해가 없으나 관능 면에서 수요자의 기호도가 낮아져 상업성이 감소하게 된다.
한편, 상기 2차 당액을 제조하고, 상기 2차 당액의 이미 및 이취를 제거한 후에, 상기 1차 여과를 수행할 수도 있다. 이로써 혼합 당 조성물의 이미 및 이취가 제거되어 제품의 품질이 향상된다.
농축 단계
본 발명의 혼합 당 조성물의 제조 방법은 상기 2차 당액을 1차 여과시킨 후 이를 농축시키는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 상기 농축은 당액의 농도가 75 중량% 이상, 바람직하게는 78 중량% 이상, 더욱 바람직하게는 80 중량% 이상이 되도록 수행할 수 있다.
2차 여과
상기 2차 당액을 1차 여과시킨 후 2차 여과를 거친 다음에 농축 공정을 수행할 수도 있다. 상기 2차 여과는 제균 공정이며, 이는 제균 필터를 이용하여 간단하면서도 효율적으로 수행할 수 있다. 이로써 당액 내 잔존할 수 있었던 미생물이 제거되어, 최종 산물인 혼합 당 조성물의 안전성이 증진된다.
혼합 당 조성물
본 발명의 혼합 당 조성물은 조성물 내 총 당 중 프락토올리고당 함량이 50중량% 이상이며, 바람직하게는 조성물 내 총 당 중 프락토올리고당 함량이 52 중량% 이상이고, 가장 바람직하게는 조성물 내 총 당 중 프락토올리고당 함량이 54 중량% 이상이다.
상기 혼합 당 조성물은 프락토올리고당 외 다른 당들도 포함한다. 즉, 본 발명의 혼합 당 조성물은 프락토스, 글루코스 및 수크로스를 포함할 수 있다.
본 발명의 프락토올리고당은 1-케스토스, 나이스토스 및 프락토실나이토스를 포함한다(도 1). 1-케스토스는 프락토올리고당들 중 생리 기능성이 가장 우수한 성분으로 알려져 있다. 본 발명의 혼합 당 조성물 내 프락토올리고당은 1-케스토스 함량이 나이스토스 및 프락토실나이토스의 함량의 합보다 큰 것이 바람직하다.
본 발명은 베타-글루카나제를 이용함으로써, 베타-프락토실퓨라노시다제를 이용하는 경우보다 프락토올리고당의 함량이 더 높은 혼합 당 조성물을 제조할 수 있다.
상기 혼합 당 조성물은 액체, 즉 당액의 형태일 수도 있고, 고체, 즉 분말 또는 고형분의 형태일 수도 있다. 혼합당 조성물의 형태는 당업자가 적절히 선택하여 결정할 수 있다. 그러나 당액의 형태인 것이 실제 판매 및 사용 시 널리 적용되므로, 바람지직하다.
혼합 당 조성물의 제조 방법
본 발명의 혼합 당 조성물 제조 방법은 혼합 당 조성물 내 프락토올리고당 함량이 높은 혼합 당 조성물을, 제조 비용 및 소요 시간이 절감된 방법으로 생산할 수 있다. 특히, 본 발명의 혼합 당 조성물은 이온성 물질의 제거를 위하여 초기 설치 비용뿐 아니라 유지 비용도 많이 드는, 이온 교환 수지가 충진된 수지탑(ion-exchange column)을 사용하지 않는바, 소요 시간 및 비용 면에서도 유리하다.
<제조예 1>
본 발명의 혼합 당 조성물의 제조 방법을 개략적으로 설명한다. 제조원료인 원당(순도 99% 이상)을 반응탱크에 투입한 후, 열수를 가하고 교반기를 가동하여 당액농도가 약 40∼45% 정도가 되도록 용액을 용해/균질화 시킨다.
균질화 된 당액은 효소반응을 위해 반응탱크 온도를 약 55 내지 60 ℃ 정도로 스팀을 사용하여 가온한 후, 탄산나트륨(Na2CO3)을 사용하여 당액 pH를 pH 5.5∼6.0 범위가 되도록 조정한다. 당액의 pH를 조정한 다음, β-glucanase를 당액 고형분 대비 0.4%(w/v) 투입하고 효소반응을 약 24∼48시간 가량 진행시킨다. 이 때 효소반응시 3~ 8시간/1회 주기로 하여 HPLC를 사용하여 당액의 프락토올리고당 함량을 분석하여 수행할 수 있다. 당액의 프락토올리고당 함량이 50% 이상이 되면, 반응탱크내 온도를 75 ℃로 높여서 약 10분간 방치하여 효소활성을 실활(enzyme inactivation) 시킨다. 그리고 효소활성이 실활되면 당액의 색상물질을 제거하기 위하여 반응탱크내에 분말활성탄을 당액고형분 대비 약 1.0%(w/v) 투입한 다음, 약 1시간 정도 교반기를 작동시켜 당액의 색상 및 이미, 이취를 제거한다. 다음 공정으로 당액에 함유되어 있는 분말탄 및 이물질을 제거하기 위하여 필터프레스로 여과를 실시한다. 상기 탈색 및 여과 공정은 70 내지 75 ℃에서 수행될 수 있다. 여과된 당액은 이온성 물질(ionic material)을 제거하기 위해 UF/NF system에 통액시킨다. 이후, 정제당액에 존재할 수 있는 미생물을 제거하기 위하여 제균필터(0.22 μm/absolute)에 통액시킨다. 미생물이 제거된 정제당액은 농축기로 이송하여 당액 농도가 75 중량% 이상이 되도록 당액농축을 실시한다. 원하는 농도로 농축된 당액은 일정 포장용기에 포장하여 냉암소에 보관한다.
<재료 및 방법>
순도 99.5 중량% 이상의 설탕을 함유하는 원당을 구입하여 준비하였다. 베타-글루카나제는 Aspergillus aculeatus 유래의 베타-글루카나제로 시판되는 제품을 구입하여 사용하였다.
HPLC 분석 시료의 전처리 및 조건
시료인 농축당액에 초순수(비전도도값 : 0.05 uS/cm 이하)를 첨가하여 시료의 농도가 약 2.5 내지 3.0 중량%가 되도록 희석한다.(시료농도 분석은 Refrxtometer를 사용한다).
이렇게 시료의 농도를 조정한 다음, 0.2 내지 0.45 μm 필터를 사용하여 시료용액에 함유되어 있는 이물질을 제거한다. 그 후, 상기 시료를 HPLC 분석시료로 사용한다
HPLC 분석 조건
-HPLC 분석용컬럼: Polyamine 계열의 컬럼(YMC-Pack Polyamine-Ⅱ/Japan)
-컬럼 사이즈 및 입도: 250 x 4.6 mm I.D. s-5μm, 12nm
-검출기(Detector): RID (Refractive Index Detector)
-컬럼 온도(Column oven temperature): 25 내지 30 ℃
-용매(Solvent): 64 % Acetontrile
-유량(Flow rate): 1.0 mL/min
-분석시간(Run time): 25분
-시료 주입량(Injection volume): 20 μL
-표준시약: 포도당(Dextrose), 과당(Fructose), 설탕(Sucrose), 1-케스토스(Kestose), 나이스토스(Nystose), 프루코피라노실-나이스토스(Frucopyranosyl-nystose)
<실시예 1>
원당(순도 99% 이상)을 반응탱크에 투입한 후, 열수를 가하고 교반기를 가동하여 당액 농도가 약 48 중량% 정도가 되도록 용액을 용해 및 균질화시켰다.
효소반응을 위해 반응탱크의 온도를 가온하여, 균질화된 당액의 온도를 약 55 내지 60 ℃ 정도로 조정하였다. 그 후, 탄산나트륨(Na2CO3)을 사용하여 당액의 pH를 pH 5.5 내지 6.0 범위가 되도록 조정하였다.
당액의 pH를 조정한 후, 베타-글루카나제(β-glucanase)를 당액 고형분 대비 0.4%(w/v) 투입하고 효소반응을 약 40 시간 가량 진행시켰다. 그리고, 효소 반응시 6시간/1회 주기로 하여 HPLC를 사용하여 당액의 프락토올리고당 함량을 분석하였다.
당액의 프락토올리고당 함량이 50 중량% 이상이 되자, 반응탱크내 온도를 75℃로 높여서 약 10분간 방치하여 효소활성을 실활(enzyme inactivation) 시켰다.
효소활성이 실활되자, 당액의 색상물질을 제거하기 위하여 분말활성탄을 투입하였다. 구체적으로는, 반응탱크내에 분말활성탄을 당액고형분 대비 약 1.0%(w/v) 투입한 다음, 약 1시간 정도 교반기를 작동시켜 당액의 색상 및 이미, 이취를 제거하였다.
그 후, 당액을 필터프레스로 여과하여, 당액에 함유되어 있는 분말활성탄 및 이물질을 제거하였다.
여과된 당액을 나노여과막 필터(NF) 및 한외여과막 필터(UF) 에 순차적으로 통액시켜, 이온성 물질(ionic material)을 제거하였다. 그 후, 정제당액에 존재할 수 있는 미생물을 제거하기 위하여 제균필터(0.22 μm/absolute)에 통액시켰다.
미생물이 제거된 정제당액을 당액농도가 80 중량%이 되도록 농축시켜, 농축당액을 제조하였다.
<비교예 1>
시판되는 프락토올리고당 농축당액을 구입하여 비교예 1로 사용하였다. 상기 시판 농축당액은 베타-프럭토실트랜스퍼라제(β-fructosyltransferase)를 이용하여 원당으로부터 제조한 제품이다.
<비교예 2>
나노여과막 필터(NF) 시스템을 이용한 여과 공정을 수행하지 않은 점을 제외하면, 실시예 1과 동일한 방법으로, 농축당액을 제조하였다.
<비교예 3>
한외여과막 필터(UF) 시스템을 이용한 여과 공정을 수행하지 않은 점을 제외하면, 실시예 1과 동일한 방법으로, 농축당액을 제조하였다.
<실험예 1>
상기 실시예 1, 비교예 1 내지 3의 농축당액들에 대하여 고속액체크로마토그래피 분석방법(HPLC)를 이용하여 당 조성을 분석하였다.
상기 당 조성 분석방법은 하기와 같이 수행하였다. 먼저, 표준시약들을 HPLC로 분석하여 각 표준시약의 크로마토그램(chromatogram)에 그려진 피크의 머무른 시간(retention time)을 확인하였다. 그 다음, 전처리한 분석 시료들을 HPLC에 주입하여 HPLC 크로마토그램을 구하였다. 그리고 표준시약의 포도당, 과당 및 설탕의 머무른 시간과 시료의 머무른 시간을 비교하여 머무른 시간(retention time)이 일치하면 동일한 성분으로 간주하고 하기 식 1에 따라 프락토올리고당 함량을 구하였다. 이 때, 프락토올리고당 함량(DB%)은 농축 당액 내 포함된 당 100%에 대한, 프락토올리고당의 함량(%)이다.
<식 1>
프락토올리고당 함량(DB%) = 100 중량% - (Fructose + Glucose + Sucrose의 중량%)
* DB% : 무수물 기준(Dry Basis) 중량%.
그 결과, 실시예 1의 농축당액은 베타-프럭토실트랜스퍼라제를 이용한 시판당액 및 비교예 2 및 3보다 프락토스, 글루코스 및 수크로스 함량은 낮고, 프락토올리고당 함량이 높은 것으로 확인되었다(표 1). 실시예 1 및 비교예 1의 HPLC 분석 결과는 하기 도 2와 같다(A: 비교예 1, B: 실시예 1).
실시예 1 비교예 1 비교예 2 비교예 3
프락토스(Fructose) 2.5 5.0 3.7 5.0
글루코스(Glucose) 20.0 20.0 25.0 27.5
수크로스(Sucrose) 20.0 25.0 26.5 28.3
1-케스토스(Kestose) 32.5 25.0 22.0 20.0
나이스토스(Nystose) 20.0 15.0 10.0 15.0
프락토실나이스토스
(Fructosylnystose)		 5.0 10.0 12.8 4.2
총 프락토올리고당 57.5 50.0 44.8 39.2
표 1의 단위: 농축당액 내 포함된 당 100%에 대한 개별 당들의 중량%
<실험예 2>
상기 실시예 1, 비교예 1 내지 3의 농축당액들에 대하여 생산 수율 및 농축당액의 순도를 평가하였다.
그 결과, 실시예 1은 비교예 1에 비하여 생산 수율은 유의한 차이가 없었으나, 제품 순도는 유의하게 높았다. 또한 실시예 1은 초기 설치 비용뿐 아니라 유지 비용도 많이 드는 수지탑을 이용하지 않는바, 생산공정의 효율성 및 경제성이 높은 것으로 평가되었다(표 2).
실시예 1 비교예 1 비교예 2 비교예 3
생산수율(중량%) 90~95 90~95 60~65 60~65
제품순도(중량%) 57.5 50 44.8 39.2
생산수율(중량%): {제품 생산량(중량)/원당 사용량(중량)} X 100
제품순도(중량%): 당액 내 총 당 중 프락토올리고당의 함량

Claims (16)

  1. 원당에 열수를 혼합하여 1차 당액을 제조하는 단계;
    상기 1차 당액에 베타-글루카나제를 첨가하는 단계;
    상기 베타-글루카나제가 첨가된 1차 당액을 효소 반응 시켜, 2차 당액을 제조하는 단계;및
    상기 2차 당액을 1차 여과시키는 단계를 포함하는,
    프락토올리고당이 포함된 혼합 당 조성물의 제조 방법.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 1차 당액은 당액의 농도가 40 내지 45 중량%인 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 베타-글루카나제는 아스퍼질러스 아큐레아투스(Aspergillus aculeatus) 유래인 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 베타-글루카나제는 1차 당액의 고형분 대비 0.01 내지 20 %(W/V)의 함량으로 첨가하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 효소 반응을 24 시간 내지 48 시간 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  6. 제 1항에 있어서,
    효소 반응의 진행 도중 당액 내 프락토올리고당 함량을 측정하면서 효소 반응을 수행하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  7. 제 1항에 있어서,
    상기 효소 반응은 당액 내 프락토올리고당 함량이 미리 정한 함량에 도달할 때까지 수행하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  8. 제 1항에 있어서,
    상기 2차 당액을 제조하고, 상기 2차 당액의 이미 및 이취를 제거한 후, 1차 여과를 수행하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  9. 제 1항에 있어서,
    상기 1차 여과는 상기 2차 당액을 나노여과막 필터(NF) 또는 한외여과막 필터(UF)에 통액시켜 수행하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  10. 제 1항에 있어서,
    상기 혼합 당 조성물은 조성물 내 총 당 중 프락토올리고당 함량이 50% 이상인 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  11. 제 1항에 있어서,
    상기 혼합 당 조성물은 조성물 내 총 당 중 프락토올리고당 함량이 52% 이상인 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  12. 제 1항에 있어서,
    상기 혼합 당 조성물은 프락토스, 글루코스 및 수크로스를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  13. 제 1항에 있어서,
    상기 프락토올리고당은 1-케스토스, 나이스토스 및 프락토실나이토스를 포함하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  14. 제 1항에 있어서,
    상기 프락토올리고당은 1-케스토스 함량이 나이스토스 및 프락토실나이토스의 함량의 합보다 큰 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  15. 제 1항에 있어서,
    상기 2차 당액을 1차 여과시킨 후 이를 농축시키는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 제조 방법.
  16. 원당에 물을 혼합하여 1차 당액을 제조하는 단계;및
    상기 1차 당액에 베타-글루카나제를 첨가하는 단계를 포함하는,
    프락토올리고당이 포함된 혼합 당 조성물의 제조 방법.
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