CN110233020A - 一种用于核酸提取的磁性材料、核酸提取装置以及核酸的提取方法 - Google Patents

一种用于核酸提取的磁性材料、核酸提取装置以及核酸的提取方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种用于核酸提取的磁性材料、核酸提取装置以及核酸的提取方法,涉及核酸提取技术领域。一方面,在该提取装置中,磁性材料直接与吸附核酸的磁珠相接触,该磁性材料能够能显著加快吸附磁珠的效率,避免或减少磁珠在洗涤过程中的损失,从而提高核酸的提取量。另一方面,该提取装置无需使用者购买外部磁场,在提高提取效率的情况下,有效降低提取成本。

Description

一种用于核酸提取的磁性材料、核酸提取装置以及核酸的提 取方法
技术领域
本发明涉及核酸提取技术领域,具体而言,涉及一种用于核酸提取的磁性材料、核酸提取装置以及核酸的提取方法。
背景技术
核酸,是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,为生命最基本的物质之一。核酸广泛存在于所有动植物细胞以及微生物体内,生物体内的核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。核酸大分子可分为两类:脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),在蛋白质的复制和合成中起着储存和传递遗传信息的作用。核酸提取,将样本中的核酸分离纯化富集的过程。
现有的核酸提取技术中,磁珠在试管内完成核酸吸附后,需要通过试管外的磁铁提供磁场将试管内的磁珠富集到试管的某处,才能完成洗涤分散等步骤。而磁珠通常并不具有很强的磁性,特别是吸附核酸后磁性更加削弱,在试管外施加的磁场并不能完全有效、快速地富集磁珠,这对吸附和分离核酸非常不利。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种用于核酸提取的磁性材料,其能够有效提高磁珠法提取核酸的效率,加快核酸的提取时间。
本发明的第二目的在于提供一种用于核酸提取的磁性材料的制备方法,该制备方法能制备出能显著提高磁珠法核酸提取效率的磁性材料。
本发明的第三目的在于提供一种上述磁性材料或上述制备方法制备的磁性材料在核酸提取中的应用。
本发明的第四目的在于提供一种核酸提取装置,该装置能有效加快磁珠法核酸提取的效率,同时,降低磁珠法的提取成本,经济实用。
本发明的第五目的在于提供一种核酸提取试剂盒,该提取试剂盒具有能有效提高磁珠法核酸提取的效率的优点。
本发明的第六目的在于提供一种核酸的提取方法,该提取方法能够提高核酸提取的浓度、纯度,同时显著缩短核酸的提取时间。
本发明是这样实现的:
本发明实施例提供了一种用于核酸提取的磁性材料,其包括磁性颗粒和包覆在磁性颗粒表面的表面处理层;
优选地,表面处理层的材质选自二氧化硅、聚四氟乙烯、PSA以及PVC中的至少一种;
优选地,表面处理层的厚度为10nm~1000μm;
优选地,磁性材料的吸力为3000~6000高斯;
优选地,磁性颗粒的形状为球形、圆柱形、长方体、正方体或类球形;
优选地,磁性颗粒的尺寸为1~10mm。
本发明实施了还提供了一种用于核酸提取的磁性材料的制备方法,其包括:采用处理材料对磁性颗粒进行表面处理,在磁性颗粒的表面形成表面处理层;
优选地,表面处理包括:对磁性材料的表面进行包覆和/或化学修饰;
优选地,处理材料选自二氧化硅、聚四氟乙烯、PSA以及PVC 中的至少一种;
优选地,表面处理层的厚度为10nm~1000μm;
优选地,磁性材料的吸力为3000~6000高斯。
本发明实施例还提供了一种上述磁性材料或上述制备方法制备的磁性材料在核酸提取中的应用。
本发明实施例还提供了一种核酸提取装置,其包括有反应容器、磁珠以及上述磁性材料或按照上述制备方法制备的磁性材料,磁珠和磁性材料均置于反应容器中。
本发明实施例还提供了一种核酸提取试剂盒,其包括反应容器、磁珠以及上述磁性材料或按照上述制备方法制备的磁性材料。
本发明实施例还提供了一种核酸的提取方法,采用上述磁性材料、按照上述制备方法制备的磁性材料、上述核酸提取装置或上述核酸提取试剂盒进行提取。
优选地,在一些实施例中,该提取方法包括:采用磁性材料对吸附有核酸的磁珠进行吸附。
优选地,在一些实施例中,提取方法包括有以下步骤:
在反应容器内,将待提取样本、磁珠以及磁性材料混合,混合后弃去反应容器中的溶液,得到吸附有核酸的磁珠以及吸附磁珠的磁性材料;对吸附有核酸的磁珠以及吸附磁珠的磁性材料进行洗涤、洗脱,得到提取的核酸。
本发明具有以下有益效果:
本发明实施例提供了一种核酸提取装置,其采用放置于反应容器内的磁性材料取代外部磁场,一方面,在该提取装置中,磁性材料直接与吸附核酸的磁珠相接触,该磁性材料能够能显著加快吸附磁珠的效率,避免或减少磁珠在洗涤过程中的损失,从而提高核酸的提取量。另一方面,该提取装置无需使用者购买外部磁场,在提高提取效率的情况下,有效降低提取成本。
此外,本发明实施例还提供了一种用于核酸提取的磁性材料、其制备方法、核酸提取试剂盒以及核酸的提取方法,采用该磁性材料或其制备方法制备的材料制备的核酸提取试剂盒进行核酸提取,能够显著降低提取成本,提高核酸的提取效率。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例的提取装置进行具体说明。
本发明实施例提供了一种用于核酸提取的磁性材料,其包括有磁性颗粒和包覆在磁性颗粒表面的表面处理层。
本发明人经研究发现:现有的磁珠法提取核酸有很大的缺陷,其施加的外部磁场必然位于反应容器壁以外,但是磁场是随着距离的增加而减弱的,磁铁离得越远,其磁性越弱,这样会造成一个后果,处于反应容器里磁铁的远端的溶液中的磁珠富集到磁铁附近的时间会比较长,从而导致整个提取操作过程时间变长,特别是一些磁性较弱的磁珠来不及富集到磁铁附近就被移液器吸走,造成最终核酸提取量减少。
且由于移液式核酸提取的过程中,需要磁珠分散的过程中,只能依靠液体的震荡来震散吸附了大量物质的磁珠,但效果欠佳,因为磁珠吸附的物质本身具有粘连性质,加上磁珠本身的磁性的两两吸附,磁珠的分散的效果不好,磁珠不能有效分散,从而导致洗涤和洗脱步骤不能达到预期效果。此外,还需要说明的是,现在有技术需要购买外部磁分离装置,通常价格都不菲。
本发明的发明人针对上述缺点,提供了一种用于核酸提取的磁性材料,发明人发现采用该磁性材料放置于反应容器内,取代外部磁场,使磁性材料直接与用于吸附核酸的磁珠相互接触、吸附,能够有效缩短吸附磁珠的时间。因为是磁性材料直接吸附磁珠,使得磁珠的富集时间显著缩短,且磁性材料在反应容器内部,几乎没有吸附磁珠的死角,在进行洗涤步骤的时候能有效避免或减少磁珠的损失。另一方面,磁性材料位于反应容器中,在分散磁珠的过程时,该磁性材料能够起到搅拌的作用,有利于磁珠的分散。
优选地,在本发明提供的磁性材料中,磁性材料的粒径为 1~50mm,优选为1~10mm。磁性材料的表面经过特殊处理,覆盖有至少一层用于降低吸附力的处理层。
处理层使磁珠在用于吸附核酸的步骤时,使磁珠能够快速吸附于磁性材料的表面,在洗涤和洗脱步骤时,吸附于磁性材料表面的磁珠能够在震荡的作用下,分散,利于杂质的洗涤以及核酸的提取。
优选地,表面处理层的材料为二氧化硅,聚四氟乙烯,PSA,PVC 中的一种或多种。表面处理层的厚度优选为10nm~1000μm。
进一步优选地,磁性材料为球形、圆柱形、长方体、正方体、类球形或不规则图形的磁性颗粒。
优选地,反应容器为1.5ml反应管时,磁性材料优选为3×3× 10mm柱形磁性材料;反应容器为3ml反应管时,磁性材料优选为直径为6mm类球形磁性材料(球形磁性材料),或直径5mm,长度10mm 的圆柱形磁性材料。
优选地,上述磁珠为表面修饰有硅羟基或羟基的磁性颗粒。磁珠的粒径为几纳米到几百纳米。磁珠为提取核酸用的通用磁珠,根据需要选择使用。
本发明实施了还提供了一种用于核酸提取的磁性材料的制备方法,包括:采用处理材料对磁性颗粒进行表面处理,在磁性颗粒的表面形成表面处理层;
优选地,表面处理包括对磁性颗粒表面进行包覆和化学修饰;
优选地,处理材料选自二氧化硅、聚四氟乙烯、PSA以及PVC 中的至少一种;
优选地,表面处理层的厚度为10nm~1000μm;
优选地,磁性材料的吸力为3000~6000高斯。
本发明实施例还提供了上述磁性材料或按照上述制备方法制备的磁性材料在核酸提取中的应用。
优选地,核酸提取包括DNA提取或RNA提取。
本发明实施例还提供了一种核酸提取装置,其包括有反应容器、磁珠以及上述磁性材料或按照上述制备方法制备的磁性材料,磁珠和磁性材料均置于反应容器中。
本发明实施例还提供了一种核酸提取试剂盒,其包括反应容器、磁珠以及上述的磁性材料或按照上述的制备方法制备的磁性材料。
优选地,在该核酸提取试剂盒中,磁珠和/或磁性材料置于反应容器中。
优选地,核酸提取试剂盒还包括有以下溶剂中的一种或多种:裂解液、洗涤液以及洗脱液。进一步优选地,该核酸提取试剂盒由裂解液、洗涤液、洗脱液以及上述提取装置组成。
本发明实施例还提供了一种核酸的提取方法,采用上述磁性材料、按照上述制备方法制备的磁性材料、上述核酸提取装置或上述核酸提取试剂盒进行提取。
优选地,提取方法包括:采用磁性材料对吸附有核酸的磁珠进行吸附;该磁性材料的性质和形状同上述磁性材料,在此不再赘述。
优选地,该提取方法包括有以下步骤:
在反应容器内,将待提取样本、磁珠以及磁性材料混合,混合后弃去反应容器中的溶液,得到吸附有核酸的磁珠以及吸附磁珠的磁性材料;对吸附有核酸的磁珠以及吸附磁珠的磁性材料进行洗涤、洗脱,得到提取的核酸。
进一步地,在进行洗涤前,吸附包括将混合后的反应容器震荡后静置5~30s;优选地,静置5~15s。
洗涤为采用洗涤液对吸附有核酸的磁珠以及吸附磁珠的磁性材料进行洗涤,震荡后,将反应容器静置5~15s,而后将反应容器内的溶液弃去,得到洗涤产物;
洗脱为采用洗脱液对洗涤产物进行洗脱,将反应容器静置5~ 15s,得到提取的核酸。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种用于核酸提取额磁性材料的制备方法,其包括以下步骤:
采用聚四氟乙烯材料对磁性颗粒进行表面处理,先将磁性材料表面清洁打毛,并用刷涂的方法将30%的聚四氟乙烯乳液涂到磁性材料表面,放入80℃烘箱烘干,同样方法反复刷涂烘干6次,待水份蒸发干后,放置于马弗炉400℃烧结。在磁性颗粒的表面形成表面处理层,表面处理层的厚度约为500μm。
磁性材料的吸力为6000高斯。
实施例2
本实施例提供一种用于核酸提取额磁性材料的制备方法,其包括以下步骤:
采用二氧化硅对磁性颗粒进行表面处理,先用正硅酸乙酯、无水乙醇、盐酸、水以20:90:0.15:10的比例混匀,并静置于37摄氏度1天,制备出二氧化硅凝胶液。然后将磁性材料表面清洁打毛,在正硅酸乙酯、无水乙醇、盐酸制备的二氧化硅凝胶液中浸泡10秒后,固液分离并放入80℃烘箱烘干,待水分蒸发干后,放置于马弗炉中500℃烧结。在磁性颗粒的表面形成二氧化硅表面处理层,表面处理层的厚度为700nm。
磁性材料的吸力为4000高斯。
实施例3
本实施例提供一种核酸的提取方法,其采用一种新型的核酸提取试剂盒对待提取样本进行提取。
具体地,试剂盒包括有核酸的提取装置,提取装置包括有:反应容器、磁珠以及实施例1提供的磁性材料。具体地,反应容器为1.5ml 的反应管,磁珠为磁珠法提取核酸的通用磁珠。
试剂盒还包括裂解液、第一洗涤液、第二洗涤液以及洗脱液。
裂解液的组成:5~100mol/L的Tris-HCl(pH为7~13)缓冲液中加入1~6mol/L的异硫氰酸胍,2~20g/L月桂酸,2~20g/L十二烷基苯磺酸钠,2~20g/L八烷基肌氨酸钠,10~100ml/L的二硬脂酸聚乙二醇 (类似EMANON 3299RV)。
第一洗涤液:60~75%的乙醇溶液中加入,2~6mol/L的尿素, 2~6mol/L的盐酸胍。
第二洗涤液:60~75%的乙醇溶液。
洗脱液:5~100mmol/L的tris-HCL(pH=7~13)。
提取ABC三例全血样本DNA,提取方法包括以下步骤:
吸附步骤:
在1.5ml反应管(已预先放入3×3×10mm柱形磁性材料)中加入200μl全血样本,然后加入800μl裂解液,5μg磁珠,然后将反应管充分震荡,在震荡过程中,磁珠在磁性材料的搅拌下与反应容器内的液体充分混合,以使待提取样本中的核酸吸附于磁珠的表面。
震荡后静置反应管10s,使原本分散于反应管溶液中的磁珠完全被吸附到磁性材料表面,用移液器弃去溶液。
洗涤步骤:
第一次洗涤:在吸附步骤后的反应管中加入500μl第一洗涤液,然后将反应管充分震荡,震荡时,在磁性材料的搅拌下,磁珠与第一洗涤液充分混合,以最大限度的将杂质从磁珠上洗脱。
震荡后将反应管静置10s,使原本分散在溶液中的磁珠重新吸附于磁性材料表面,然后弃去反应管中的溶液,保留磁性材料以及吸附于磁性材料上的磁珠。
第二次洗涤:将500μl第二洗涤液加入至第一次洗涤步骤得到的反应管中,充分震荡后,将反应管静置10s,然后弃去反应管中的溶液,保留磁珠和磁性材料。
洗脱步骤:
在第二次洗涤步骤后的反应管中,加入洗脱液,充分震荡反应管,使核酸能够从磁珠上洗脱下来得到提取后的核酸。
实施例4
本实施例提供一种核酸的提取方法,与实施例3提供的提取方法类似,其采用一种新型的核酸提取试剂盒对待提取样本进行提取。
试剂盒包括核酸的提取装置、裂解液、第一洗涤液、第二洗涤液以及洗脱液。
提取装置包括有:反应容器、磁珠以及实施例2提供的磁性材料。具体地,反应容器为1.5ml的反应管。
裂解液、第一洗涤液、第二洗涤液以及洗脱液的成分同实施例3。
提取ABC三例全血样本DNA,提取方法包括以下步骤:
吸附步骤:
在1.5ml反应管中加入200μl全血样本,然后,在反应管中加入 800μl裂解液以及5μg磁珠,将反应管充分震荡。在震荡过程中,待提取样本中的核酸吸附于磁珠的表面,然后在反应管中加入磁性材料。
震荡后静置反应管10s,使原本分散于反应管溶液中的磁珠完全被吸附到磁性材料表面,用移液器弃去溶液。
洗涤步骤:
第一次洗涤:在吸附步骤后的反应管中加入500μl第一洗涤液,然后将反应管充分震荡,震荡时,在磁性材料的搅拌下,磁珠与第一洗涤液充分混合,以最大限度的将杂质从磁珠上洗脱。
震荡后将反应管静置10s,使原本分散在溶液中的磁珠重新吸附于磁性材料表面,然后弃去反应管中的溶液,保留磁性材料以及吸附于磁性材料上的磁珠。
第二次洗涤:将500μl第二洗涤液加入至第一次洗涤步骤得到的反应管中,充分震荡后,将反应管静置10s,然后弃去反应管中的溶液,保留磁珠和磁性材料。
洗脱步骤:
在第二次洗涤步骤后的反应管中,加入洗脱液,充分震荡反应管,使核酸能够从磁珠上洗脱下来得到提取后的核酸。
实施例5
本实施例提供一种核酸的提取方法,与实施例3~4提供的提取方法类似,其采用一种新型的核酸提取试剂盒对待提取样本进行提取。
试剂盒包括有核酸的提取装置、裂解液、第一洗涤液、第二洗涤液以及洗脱液。裂解液、第一洗涤液、第二洗涤液以及洗脱液的成分同实施例3或4。
本实施例提供的提取装置包括有:反应容器、磁珠以及实施例1 磁性材料。具体地,反应容器为1.5ml的反应管。
提取ABC三例全血样本DNA,提取方法包括以下步骤:
吸附步骤:
在1.5ml反应管1中加入200μl全血样本,然后,在反应管1中加入800μl裂解液以及5μg磁珠,将反应管1充分震荡。在震荡过程中,待提取样本中的核酸吸附于磁珠的表面。用移液器将反应管1 中的液体移动到预先放置有一颗磁性材料的反应管2中。
震荡后静置反应管10s,使原本分散于反应管溶液中的磁珠完全被吸附到磁性材料表面,用移液器弃去溶液。
洗涤步骤:
第一次洗涤:在吸附步骤后的反应管中加入500μl第一洗涤液,然后将反应管充分震荡,震荡时,在磁性材料的搅拌下,磁珠与第一洗涤液充分混合,以最大限度的将杂质从磁珠上洗脱。
震荡后将反应管静置10s,使原本分散在溶液中的磁珠重新吸附于磁性材料表面,然后弃去反应管中的溶液,保留磁性材料以及吸附于磁性材料上的磁珠。
第二次洗涤:将500μl第二洗涤液加入至第一次洗涤步骤得到的反应管中,充分震荡后,将反应管静置10s,然后弃去反应管中的溶液,保留磁珠和磁性材料。
洗脱步骤:
在第二次洗涤步骤后的反应管中,加入洗脱液,充分震荡反应管,使核酸能够从磁珠上洗脱下来得到提取后的核酸。
对比例1
提取全血样本,采用本发明实施例1~3提供的提取方法对样本进行核酸的提取,对比设置两组对比例,对比例采用现有的磁珠提取法。
对比例1的实施方法如下。
提取ABC三例全血样本DNA:
吸附步骤:
在1.5ml反应管中加入200μl全血样本,然后,在反应管中加入 800μl裂解液以及5μg磁珠,将反应管充分震荡,使样本中的核酸吸附于磁珠的表面。
震荡后将反应管放置于磁力架上静置2min,使原本分散于反应管溶液中的磁珠完全被吸附到磁力架附近,然后弃去溶液(弃去的溶液中,可观察到有一些悬浮颗粒)。
洗涤步骤:
第一次洗涤:在吸附步骤后的反应管中加入500μl第一洗涤液,然后将反应管充分震荡,使杂质从磁珠上洗脱。
震荡后将反应管放置在磁力架上静置2min,使原本分散在溶液中的磁珠重新吸附于磁力架附近,弃去反应管中的溶液,可以观察到弃去溶液中有一些悬浮颗粒。
第二次洗涤:将500μl第二洗涤液加入至第一次洗涤步骤得到的反应管中,充分震荡后,将反应管放在磁力架上静置2min,然后弃去反应管中的溶液,可以观察到弃去溶液中有一些悬浮颗粒。
洗脱步骤:
在第二次洗涤步骤后的反应管中,加入洗脱液,充分震荡反应管后静置2min,洗脱液中分散的磁珠被吸附到磁力架附近,所得溶液中含有DNA,可用于后续实验。
对比例2的实施方法与对比例1类似,区别在于对比例2采用了 8μg磁珠。
对实施例1~3以及对比例1~2提取得到的核酸进行紫外吸收法定量检测,检测结果如表1所示。
表1核酸的检测结果
由表1可以看出,相对于现有技术,本申请采用的提取方法提取的核酸浓度相对更高,纯度也更高,可见磁性材料与磁珠协同作用,促进了核酸的提取,显著提高了核酸提取的浓度,大大缩短了实验时间,提高了核酸提取的工作效率。
综上,本发明实施例提供了一种核酸提取装置,其采用放置于反应容器内的磁性材料取代外部磁场,一方面,在该提取装置中,磁性材料直接与吸附核酸的磁珠相接触,该磁性材料能够能显著加快吸附磁珠的效率,避免或减少磁珠在洗涤过程中的损失,从而提高核酸的提取量。另一方面,该提取装置无需使用者购买外部磁场,在提高提取效率的情况下,有效降低提取成本。
此外,本发明实施例还提供了一种用于核酸提取的磁性材料、其制备方法、核酸提取试剂盒以及核酸的提取方法,采用该磁性材料或其制备方法制备的材料制备的核酸提取试剂盒进行核酸提取,能够显著降低提取成本,提高核酸的提取效率。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于核酸提取的磁性材料,其特征在于,其包括磁性颗粒和包覆在所述磁性颗粒表面的表面处理层;
优选地,所述表面处理层的材质选自二氧化硅、聚四氟乙烯、PSA以及PVC中的至少一种;
优选地,所述表面处理层的厚度为10nm~1000μm;
优选地,所述磁性材料的吸力为3000~6000高斯;
优选地,所述磁性颗粒的形状为球形、圆柱形、长方体、正方体或类球形;
优选地,所述磁性颗粒的尺寸为1~10mm。
2.一种用于核酸提取的磁性材料的制备方法,其特征在于,其包括:采用处理材料对磁性颗粒进行表面处理,在所述磁性颗粒的表面形成表面处理层;
优选地,所述表面处理包括:对磁性颗粒进行包覆和/或化学修饰;
优选地,所述处理材料选自二氧化硅、聚四氟乙烯、PSA以及PVC中的至少一种;
优选地,所述表面处理层的厚度为10nm~1000μm;
优选地,所述磁性材料的吸力为3000~6000高斯。
3.权利要求1所述的磁性材料或按照权利要求2所述的用于核酸提取的磁性材料的制备方法制备的磁性材料在核酸提取中的应用。
4.一种核酸提取装置,其特征在于,其包括有反应容器、磁珠以及权利要求1所述的磁性材料或按照权利要求2所述的用于核酸提取的磁性材料的制备方法制备的磁性材料,所述磁珠和磁性材料均置于所述反应容器中。
5.一种核酸提取试剂盒,其特征在于,其包括反应容器、磁珠以及权利要求1所述的磁性材料或按照权利要求2所述的用于核酸提取的磁性材料的制备方法制备的磁性材料。
6.根据权利要求5所述的核酸提取试剂盒,其特征在于,所述磁珠和/或所述磁性材料置于所述反应容器中。
7.根据权利要求6所述的核酸提取试剂盒,其特征在于,所述核酸提取试剂盒还包括有以下溶剂中的一种或多种:裂解液、洗涤液以及洗脱液。
8.一种核酸的提取方法,其特征在于,采用权利要求1所述的磁性材料、按照权利要求2所述的用于核酸提取的磁性材料的制备方法制备的磁性材料、权利要求4所述的核酸提取装置或权利要求5~7任一项所述的核酸提取试剂盒进行提取;
优选地,所述提取方法包括:采用所述磁性材料对吸附有核酸的磁珠进行吸附;
优选地,所述提取方法包括有以下步骤:
在反应容器内,将待提取样本、磁珠以及所述磁性材料混合,混合后弃去反应容器中的溶液,得到吸附有核酸的磁珠以及吸附磁珠的磁性材料;
对吸附有核酸的磁珠以及吸附磁珠的磁性材料进行洗涤、洗脱,得到提取的核酸。
9.根据权利要求8所述的提取方法,其特征在于,在进行洗涤前,所述吸附包括将所述混合后的反应容器震荡后静置5~30s;
优选地,静置5~15s。
10.根据权利要求9所述的提取方法,其特征在于,所述洗涤为采用洗涤液对吸附有核酸的磁珠以及吸附磁珠的磁性材料进行洗涤,震荡后,将反应容器静置5~15s,而后将反应容器内的溶液弃去,得到洗涤产物;
所述洗脱为采用洗脱液对洗涤产物进行洗脱,将反应容器静置5~15s,得到提取的核酸。
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