CN110229246A - 一种青稞酒糟中β-葡聚糖的制备方法 - Google Patents
一种青稞酒糟中β-葡聚糖的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110229246A CN110229246A CN201910616701.0A CN201910616701A CN110229246A CN 110229246 A CN110229246 A CN 110229246A CN 201910616701 A CN201910616701 A CN 201910616701A CN 110229246 A CN110229246 A CN 110229246A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- beta glucan
- highland barley
- vinasse
- added
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 title claims abstract description 77
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 title claims abstract description 75
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 title claims abstract description 55
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 title 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 56
- 241000209219 Hordeum Species 0.000 claims abstract description 55
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 12
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 10
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 32
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 24
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 20
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 17
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 claims description 16
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 15
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 claims description 15
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 claims description 15
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 15
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 14
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 14
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 14
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 14
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 13
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 8
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 claims description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 7
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 7
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 7
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 7
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 6
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 6
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 6
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 6
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 4
- 230000035614 depigmentation Effects 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 4
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 claims description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 claims description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 7
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 6
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 235000019998 barley wine Nutrition 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 1
- 108010001682 Dextranase Proteins 0.000 description 1
- 206010054949 Metaplasia Diseases 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001142 anti-diarrhea Effects 0.000 description 1
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000002361 compost Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000004134 energy conservation Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000001497 healthy food Nutrition 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000015689 metaplastic ossification Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000035900 sweating Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0024—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid beta-D-Glucans; (beta-1,3)-D-Glucans, e.g. paramylon, coriolan, sclerotan, pachyman, callose, scleroglucan, schizophyllan, laminaran, lentinan or curdlan; (beta-1,6)-D-Glucans, e.g. pustulan; (beta-1,4)-D-Glucans; (beta-1,3)(beta-1,4)-D-Glucans, e.g. lichenan; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明涉及青稞酒糟β‑葡聚糖，具体涉及一种青稞酒糟中β‑葡聚糖的制备方法。为解决酒糟中杂质对提取β‑葡聚糖的干扰，本发明针对酒糟中β‑葡聚糖的特点，主要采用多级醇沉结合超滤膜过滤技术纯化多糖，提高了β‑葡聚糖的得率及纯度。本发明提取方法简单，易于工业化生产，有利于进一步推动酒糟的增值化利用。
Description
技术领域
本发明涉及青稞酒糟β-葡聚糖，具体涉及青稞酒糟中β-葡聚糖的制备方法。
背景技术
青稞是禾本科大麦属一年生作物，因内外颖壳分离，籽粒裸露，称为裸大麦，也被称元麦、米大麦。青稞的营养组成符合“三高两低”的饮食结构，是集健康食品和保健食品美誉于一身的绿色天然谷物。据《本草拾遗》记载：青稞，下气宽中、壮精益力、除湿发汗、止泻。藏医典籍《晶珠本草》更把青稞作为一种重要药物，用于治疗多种疾病。因此，青稞是顺应当今人们追求“绿色生态”消费需求的一种重要食品原料。青稞中β-葡聚糖是青稞中主要的功效成分之一，提取β-葡聚糖也是提升青稞精深加工能力和科技含量的重要途径之一。目前，提取青稞β-葡聚糖所使用的原料主要为青稞、青稞麸皮，而针对青稞酒糟中β-葡聚糖的提取方法几乎没有报道。
目前在青藏高原地区青稞除了作为藏区的主食外，也是青稞酒的主要生产原料，作为当地特色饮品，酒味酸甜，酒香浓郁。以一家青稞酒生产企业为例，年产青稞酒近2万吨，消耗青稞占青稞产量的1/3，年产酒糟近2万吨。酒糟富含大量营养物质如粗淀粉、粗纤维、粗蛋白等，酒糟大量的囤积及露天堆放，极易发生腐败变质，造成周边环境污染。目前处理酒糟的方法，主要以饲料和堆肥出售，价格低廉，若利用青稞酒糟提取β-葡聚糖，既能减少成本又能废物利用。鉴于此，特提出一种青稞酒糟中β-葡聚糖的制备方法，以提高酒糟高值化综合利用，对青稞产业化和青藏地区经济水平的提升，具有重要的社会和经济效益。
发明内容
本发明的目的是提供一种青稞酒糟中β-葡聚糖的制备方法，该方法解决了酒糟中杂质对提取β-葡聚糖的干扰，提高了β-葡聚糖提取率及纯度，提取方法简单，易于工业化生产，有利于进一步推动酒糟的增值化利用。
青稞酒糟中杂质多，β-葡聚糖分子量较小，杂质会干扰β-葡聚糖的提取，影响提取纯度。目前纯化β-葡聚糖的方法主要通过硫酸铵沉降多糖，此方法有助于纯化分子量较大的β-葡聚糖，但对分子量较小的β-葡聚糖纯化效果较差。本发明针对酒糟中β-葡聚糖的特点，主要采用多级醇沉结合超滤膜过滤技术纯化多糖，提高了β-葡聚糖的得率及纯度。
为实现上述目的，本发明采取如下技术方案：
一种青稞酒糟中β-葡聚糖的制备方法，包括如下步骤：
1)提供粉碎至20-100目的青稞酒糟粉；
2)向步骤1)所述青稞酒糟粉至加入适量70-90％乙醇，煮沸回流，过滤，取滤渣烘干；
3)向步骤2)中烘干的酒糟滤渣中加入适量水，调节pH至8-11，于50-95℃加热搅拌2-6h，过滤或离心，制得β-葡聚糖粗提液；
4)调节步骤3)所得β-葡聚糖粗提液pH至5-7，加入适量高温α-淀粉酶，于90-98℃酶解以去除粗提液中的淀粉；然后降温至50-70℃，调节pH至6.5-9，加入适量碱性蛋白酶，酶解以去除粗提液中的蛋白质；酶解完成后调节pH至4-5，沉降蛋白，离心收集上清液，浓缩；
5)向步骤4)所得浓缩液中加入适量95％乙醇，于4-20℃静置沉降多糖，离心收集沉淀1；然后加入适量50％乙醇洗涤，离心收集沉淀2；
6)将步骤5)所得沉淀2加水复溶，通过大孔树脂XAD-7吸附脱色；
7)将步骤6)脱色所得溶液用截留分子量1000-10000Da的超滤膜过滤去除小分子，浓缩，干燥，制得β-葡聚糖干粉。
上述制备方法中，
步骤1)通常，可将青稞酒糟烘干，然后粉碎至20-100目，得青稞酒糟粉。
一般可将青稞酒糟烘干至含水量15％以下，例如通常烘干至含水量10％-15％尤其是12.5％；一般在烘干后还需要去除碎石等杂质，再进行粉碎。
研究发现，将青稞酒糟粉碎至20-100目尤其是30目更有利于提取β-葡聚糖，从而提高其提取率。
步骤2)中，优选地，煮沸回流时间为1-4h为佳，更优选为2h。
步骤2)中，优选地，以g/ml计，所述青稞酒糟粉与70-90％乙醇的重量体积比为1:8-12，更优选为1:10；更优选采用80％乙醇；研究发现，在上述条件下更有利于使物料中β-葡聚糖酶失活，稳定物料性质，从而提高β-葡聚糖的提取率。
步骤2)中，优选地，将所述滤渣烘干至含水量7％以下为佳；通常烘干温度以30-50℃为佳，一般需要烘干10-16h。
步骤3)中，优选地，以g/ml计，所述烘干的酒糟滤渣与水的重量体积比为1:8-20，更优选为1:10；研究发现，在该比例范围内更有利于提高β-葡聚糖的提取率。
步骤3)中，优选地，所述加热搅拌时间以4-5h为佳。
步骤4)高温α-淀粉酶酶解步骤中，优选地，高温α-淀粉酶的加入量为0.5％-3％，更优选为2％(此处加入量是指高温α-淀粉酶与步骤2)中烘干的酒糟滤渣重量比)；
优选地，酶解在400-800r/min转速搅拌条件下进行；在该搅拌条件下更有利于提高β-葡聚糖的提取率。优选地，高温α-淀粉酶酶解1-4h。
步骤4)碱性蛋白酶酶解解步骤中，优选地，碱性蛋白酶的加入量为0.5％-3％，更优选为2％(此处加入量是指碱性蛋白酶与步骤2)中烘干的酒糟滤渣重量比)；优选地，酶解在400-800r/min搅拌条件下进行，碱性蛋白酶酶解优选为1-3h；
步骤4)中，所述沉降蛋白的时间通常为10-18h；离心转速以4000-8000r/min为佳。
步骤4)中，一般可将上清液浓缩至原体积的1/2-1/5。
步骤5)中，优选地，95％乙醇的用量为所得浓缩液体积的2-4倍；沉降多糖时间一般为10-16h。
步骤5)中，优选地，50％乙醇溶液的用量为沉淀1体积的1-3倍。
步骤5)中，离心转速以4000-8000r/min为佳。
步骤6)的主要目的是以去除色素及其他蛋白类杂质。
步骤7)中，所用超滤膜的截留分子量优选为5000-10000Da，更优选为5000Da。
步骤7)一般可浓缩至原体积的1/2-1/5；可采用喷雾干燥或冷冻干燥。
本发明中，一般可采用本领域常规pH调节剂，例如氢氧化钠、盐酸等。
本发明可用本领域常规青稞酒糟，通常将其烘干至水分含量为12.5％时测得β-葡聚糖含量为1.0-2.2％，例如具体为1.1％。
实验表明，上述方法制备的β-葡聚糖干粉中β-葡聚糖纯度为5-40％，得率为3％-15％；其平均分子量为(2-30)×104。在本发明一个具体实施例中，所制备的β-葡聚糖干粉中β-葡聚糖平均分子量为7.84×104。
本发明还包括上述方法制备的β-葡聚糖干粉。
本发明还包括上述方法制备的β-葡聚糖干粉在食品、保健食品或药品中的应用。
本发明方法具有如下优点：
1)以青稞酒糟为原料制备β-葡聚糖，变废为宝，提高了酒糟高值化综合利用；
2)克服了青稞酒糟杂质对于β-葡聚糖提取的干扰，提高了β-葡聚糖提取率；
3)该方法简单易行，成本低，节能环保，适合大规模工业化生产。
附图说明
图1表示实施例1制得的β-葡聚糖分子量测定结果；
图2表示是否脱色处理对于溶液吸光度的影响(实施例1及对比例6)。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。
以下纯度及得率检测方法：
以下采用AOAC995.16的方法测定样品中的β-葡聚糖含量。
以下所用青稞酒糟来自青海互助青稞酒股份有限公司，烘干至水分含量为12.5％时测得β-葡聚糖含量为1.1％。
实施例1
青稞酒糟中β-葡聚糖的制备方法，包括如下步骤：
1)将青稞酒糟烘干至水分含量12.5％，去除杂质(碎石等)后，粉碎，过30目筛，得到青稞酒糟粉；
2)称取300g上述青稞酒糟粉，加入3000ml的80％乙醇，充分混匀，煮沸回流2h后，过滤，取滤渣于40℃烘干12h；
3)称取步骤2)中烘干的酒糟滤渣120g，加入1200mL水，搅拌均匀，用氢氧化钠溶液调节pH至8.0，70℃加热搅拌4h后，6000r/min离心5min，去除沉淀，获得β-葡聚糖粗提液。
4)高温α-淀粉酶酶解：
调节步骤3)中β-葡聚糖粗提液pH至6.0，加入2.4g高温α-淀粉酶，于95℃、600r/min转速搅拌条件下酶解1h，以去除粗提液中的淀粉。
碱性蛋白酶酶解：
将高温α-淀粉酶后的溶液降温至55℃，用氢氧化钠溶液调节溶液pH值至8.0，加入2.4g碱性蛋白酶，于55℃、600r/min转速搅拌条件下酶解1h，以去除粗提液中的蛋白质。酶解完成后调节溶液pH值至4.5，6000r/min离心去除沉淀，收集上清液，浓缩上清液至原体积的1/4。
5)向步骤4)所得浓缩液中加入2.5倍体积的95％乙醇，4℃静置12h沉降多糖，6000r/min离心收集沉淀1；向该沉淀1中加入1倍体积50％乙醇洗涤，6000r/min离心去除上清液，收集沉淀2。
6)将步骤5)所得沉淀2加水复溶后，通过大孔树脂XAD-7吸附脱色，去除色素及其他蛋白类杂质。
7)将步骤6)大孔树脂XAD-7吸附脱色处理后的溶液用截留分子量5000Da的超滤膜过滤，去除小分子后，浓缩至原体积1/4，冷冻干燥，制得β-葡聚糖干粉(即提取物)。
将检测，本实施例制得的β-葡聚糖干粉中，β-葡聚糖纯度为20％，β-葡聚糖得率为13.09％，淀粉含量为13.66％，蛋白质含量为18.978％。
通过高效凝胶色谱法测定本实施例制得的β-葡聚糖干粉，结果见图1，其中β-葡聚糖的平均分子量为7.84×104。图1中，横坐标表示出峰时间，纵坐标表示分子量大小。
文献中报道的青稞β-葡聚糖的分子量一般为(5-8)×105。
对比例1
与实施例1的区别仅在于：步骤2)将80％乙醇替换为以等量的水回流处理。
最终所制得的β-葡聚糖干粉中，β-葡聚糖得率为4.56％。
对比例2
与实施例1的区别仅在于：步骤4)省略高温α-淀粉酶酶解的步骤。
最终所制得的β-葡聚糖干粉中，β-葡聚糖得率为6.069％，淀粉含量为24.4％。
对比例3
与实施例1的区别仅在于：步骤4)省略碱性蛋白酶酶解的步骤。
最终所制得的β-葡聚糖干粉中，β-葡聚糖得率为6.290％，蛋白质含量为28.795％。
对比例4
与实施例1的区别仅在于：步骤5)省略将沉淀1用50％乙醇洗涤的步骤。
最终所制得的β-葡聚糖干粉中，β-葡聚糖纯度为10.09％。
对比例5
与实施例1的区别仅在于：步骤5)省略将沉淀1用50％乙醇洗涤的步骤，而是将沉淀1加水复溶后，加入30％的硫酸铵，静置12h沉降多糖，6000r/min离心获得沉淀3。
最终所制得的β-葡聚糖干粉中，β-葡聚糖纯度为2.26％。
对比例6
与实施例1的区别仅在于：步骤6)不采用大孔树脂XAD-7吸附脱色。
最终所制得的β-葡聚糖干粉中，β-葡聚糖纯度为18.90％。
另外，是否脱色处理对于溶液吸光度影响也较大，由图2可见，脱色处理后吸光度下降58.29％。结果表明，脱色处理可以去除色素及其他蛋白等杂质，还可以提高产品纯度。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种青稞酒糟中β-葡聚糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)提供粉碎至20-100目的青稞酒糟粉；
2)向步骤1)所述青稞酒糟粉至加入适量70-90％乙醇，煮沸回流，过滤，取滤渣烘干；
3)向步骤2)中烘干的酒糟滤渣中加入适量水，调节pH至8-11，于50-95℃加热搅拌2-6h，过滤或离心，制得β-葡聚糖粗提液；
4)调节步骤3)所得β-葡聚糖粗提液pH至5-7，加入适量高温α-淀粉酶，于90-98℃酶解以去除粗提液中的淀粉；然后降温至50-70℃，调节pH至6.5-9，加入适量碱性蛋白酶，酶解以去除粗提液中的蛋白质；酶解完成后调节pH至4-5，沉降蛋白，离心收集上清液，浓缩；
5)向步骤4)所得浓缩液中加入适量95％乙醇，于4-20℃静置沉降多糖，离心收集沉淀1；然后加入适量50％乙醇洗涤，离心收集沉淀2；
6)将步骤5)所得沉淀2加水复溶，通过大孔树脂XAD-7吸附脱色；
7)将步骤6)脱色所得溶液用截留分子量1000-10000Da的超滤膜过滤去除小分子，浓缩，干燥，制得β-葡聚糖干粉。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)所述青稞酒糟粉的粒度为30目；和/或，所述青稞酒糟粉的含水量为15％以下，优选含水量为10％-15％，更优选为12.5％。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中，
所述煮沸回流时间为1-4h，优选为2h；和/或，
以g/ml计，所述青稞酒糟粉与70-90％乙醇的重量体积比为1:8-12，优选为1:10；更优选采用80％乙醇；和/或，
将所述滤渣烘干至含水量7％以下；优选地，烘干温度以30-50℃。
4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，
以g/ml计，所述烘干的酒糟滤渣与水的重量体积比为1:8-20，优选为1:10；和/或，
所述加热搅拌时间为4-5h。
5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤4)中，
高温α-淀粉酶酶解步骤中，高温α-淀粉酶的加入量为0.5％-3％，优选为2％；
进一步优选地，酶解在400-800r/min转速搅拌条件下进行；更优选地，高温α-淀粉酶酶解1-4h；和/或，
步骤4)碱性蛋白酶酶解解步骤中，碱性蛋白酶的加入量为0.5％-3％，优选为2％；进一步优选地，酶解在400-800r/min搅拌条件下进行，更优选地，碱性蛋白酶酶解优选为1-3h。
6.根据权利要求1-5任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤5)中，95％乙醇的用量为所得浓缩液体积的2-4倍；沉降多糖时间优选为10-16h；和/或，50％乙醇溶液的用量为沉淀1体积的1-3倍；和/或，
步骤7)中，所用超滤膜的截留分子量优选为5000-10000Da，更优选为5000Da。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)将青稞酒糟烘干至水分含量12.5％，去除杂质后，粉碎，过30目筛，得到青稞酒糟粉；
2)称取300g所述青稞酒糟粉，加入3000ml的80％乙醇，充分混匀，煮沸回流2h后，过滤，取滤渣于40℃烘干12h；
3)称取步骤2)中烘干的酒糟滤渣120g，加入1200mL水，搅拌均匀，用氢氧化钠溶液调节pH至8.0，70℃加热搅拌4h后，6000r/min离心5min，去除沉淀，获得β-葡聚糖粗提液；
4)高温α-淀粉酶酶解：
调节步骤3)中β-葡聚糖粗提液pH至6.0，加入2.4g高温α-淀粉酶，于95℃、600r/min转速搅拌条件下酶解1h；
碱性蛋白酶酶解：
将高温α-淀粉酶后的溶液降温至55℃，用氢氧化钠溶液调节溶液pH值至8.0，加入2.4g碱性蛋白酶，于55℃、600r/min转速搅拌条件下酶解1h，以去除粗提液中的蛋白质；酶解完成后调节溶液pH值至4.5，6000r/min离心去除沉淀，收集上清液，浓缩上清液至原体积的1/4；
5)向步骤4)所得浓缩液中加入2.5倍体积的95％乙醇，4℃静置12h沉降多糖，6000r/min离心收集沉淀1；向该沉淀1中加入1倍体积50％乙醇洗涤，6000r/min离心去除上清液，收集沉淀2；
6)将步骤5)所得沉淀2加水复溶后，通过大孔树脂XAD-7吸附脱色，去除色素及其他蛋白类杂质；
7)将步骤6)大孔树脂XAD-7吸附脱色处理后的溶液用截留分子量5000Da的超滤膜过滤，去除小分子后，浓缩至原体积1/4，冷冻干燥，制得β-葡聚糖干粉。
8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法，其特征在于，当所述青稞酒糟中水分含量为12.5％时，其中β-葡聚糖含量为1.0-2.2％，优选为1.1％。
9.权利要求1-8任一项所述方法制备的β-葡聚糖干粉；
优选地，所述β-葡聚糖干粉中β-葡聚糖纯度为5-40％；和/或，
所述β-葡聚糖平均分子量为(2-30)×104，或者为7.84×104。
10.权利要求9所述β-葡聚糖干粉在食品、保健食品或药品中的应用。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910493253X | 2019-06-06 | ||
| CN201910493253 | 2019-06-06 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110229246A true CN110229246A (zh) | 2019-09-13 |
Family
ID=67856685
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910616701.0A Pending CN110229246A (zh) | 2019-06-06 | 2019-07-09 | 一种青稞酒糟中β-葡聚糖的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110229246A (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111378055A (zh) * | 2020-03-26 | 2020-07-07 | 南昌大学 | 一种从青稞中连续提取和制备非淀粉多糖的方法 |
| CN115518131A (zh) * | 2022-10-11 | 2022-12-27 | 青海互助天佑德青稞酒股份有限公司 | 一种含青稞酒糟提取物的药物组合物及其制备方法 |
| CN115651093A (zh) * | 2022-11-07 | 2023-01-31 | 西藏天虹科技股份有限责任公司 | 青稞β-葡聚糖的提取方法 |
| CN115669995A (zh) * | 2022-11-01 | 2023-02-03 | 云南中烟工业有限责任公司 | 一种源自酒糟大分子的烟草保润剂的制备方法及应用 |
| CN115812832A (zh) * | 2022-11-28 | 2023-03-21 | 青海华实科技投资管理有限公司 | 一种青稞软糖及制备方法 |
| CN117188038A (zh) * | 2023-09-06 | 2023-12-08 | 西藏自治区农牧科学院农产品开发与食品科学研究所 | 一种醇溶蛋白纳米纤维膜及其制备方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104004111A (zh) * | 2014-06-01 | 2014-08-27 | 东北农业大学 | 一种燕麦β-葡聚糖脱蛋白和脱色的方法 |
| CN106117389A (zh) * | 2016-08-23 | 2016-11-16 | 上海交通大学 | 从青稞谷粒中提取和纯化β‑葡聚糖的方法 |
| CN107011460A (zh) * | 2017-04-26 | 2017-08-04 | 上海交通大学 | 一种以黑青稞麸皮为原料提取β‑葡聚糖的方法 |
| CN107216405A (zh) * | 2017-05-26 | 2017-09-29 | 苏州大学 | 一种青稞β‑葡聚糖的制备工艺及其结构序列 |
| CN109206535A (zh) * | 2018-10-08 | 2019-01-15 | 江苏沿江地区农业科学研究所 | 一种从元麦麸皮中制备高纯度β-葡聚糖的方法 |
-
2019
- 2019-07-09 CN CN201910616701.0A patent/CN110229246A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104004111A (zh) * | 2014-06-01 | 2014-08-27 | 东北农业大学 | 一种燕麦β-葡聚糖脱蛋白和脱色的方法 |
| CN106117389A (zh) * | 2016-08-23 | 2016-11-16 | 上海交通大学 | 从青稞谷粒中提取和纯化β‑葡聚糖的方法 |
| CN107011460A (zh) * | 2017-04-26 | 2017-08-04 | 上海交通大学 | 一种以黑青稞麸皮为原料提取β‑葡聚糖的方法 |
| CN107216405A (zh) * | 2017-05-26 | 2017-09-29 | 苏州大学 | 一种青稞β‑葡聚糖的制备工艺及其结构序列 |
| CN109206535A (zh) * | 2018-10-08 | 2019-01-15 | 江苏沿江地区农业科学研究所 | 一种从元麦麸皮中制备高纯度β-葡聚糖的方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| HUI ZHANG等: ""Structural characterization and rheological properties of beta-D-glucan from hull-less barley (Hordeumvulgare L. var. nudum Hook. f.)"", 《PHYTOCHEMISTRY》 * |
| 单虎 等: "《现代兽医兽药大全 动物生物制品分册》", 30 April 2011, 中国农业大学出版社 * |
| 游茂兰 等: ""β-葡聚糖对传统青稞酒发酵的影响"", 《食品与发酵工业》 * |
| 谢昊宇 等: ""青稞β-葡聚糖的分离纯化及理化特性研究"", 《食品科技》 * |
| 贾莹: ""青稞麸皮水溶性β-葡聚糖的提取、分离纯化和性质研究"", 《中国优秀硕士学位论文全文刷卡机工程科技Ⅰ辑》 * |
| 陈琼 等: "《中药制剂技术》", 30 November 2014, 中国农业大学出版社 * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111378055A (zh) * | 2020-03-26 | 2020-07-07 | 南昌大学 | 一种从青稞中连续提取和制备非淀粉多糖的方法 |
| CN111378055B (zh) * | 2020-03-26 | 2021-07-20 | 南昌大学 | 一种从青稞中连续提取和制备非淀粉多糖的方法 |
| CN115518131A (zh) * | 2022-10-11 | 2022-12-27 | 青海互助天佑德青稞酒股份有限公司 | 一种含青稞酒糟提取物的药物组合物及其制备方法 |
| CN115518131B (zh) * | 2022-10-11 | 2023-06-20 | 青海互助天佑德青稞酒股份有限公司 | 一种含青稞酒糟提取物的药物组合物及其制备方法 |
| CN115669995A (zh) * | 2022-11-01 | 2023-02-03 | 云南中烟工业有限责任公司 | 一种源自酒糟大分子的烟草保润剂的制备方法及应用 |
| CN115651093A (zh) * | 2022-11-07 | 2023-01-31 | 西藏天虹科技股份有限责任公司 | 青稞β-葡聚糖的提取方法 |
| CN115651093B (zh) * | 2022-11-07 | 2023-11-10 | 西藏天虹科技股份有限责任公司 | 青稞β-葡聚糖的提取方法 |
| CN115812832A (zh) * | 2022-11-28 | 2023-03-21 | 青海华实科技投资管理有限公司 | 一种青稞软糖及制备方法 |
| CN117188038A (zh) * | 2023-09-06 | 2023-12-08 | 西藏自治区农牧科学院农产品开发与食品科学研究所 | 一种醇溶蛋白纳米纤维膜及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110229246A (zh) | 一种青稞酒糟中β-葡聚糖的制备方法 | |
| CN103549234B (zh) | 一种消减谷物重金属的方法 | |
| CN103478400B (zh) | 高纯度米糠蛋白和米糠纤维及它们的制备方法 | |
| CN105037576B (zh) | 一种薏苡仁多种活性成分的提取分离方法 | |
| CN102234671B (zh) | 一种从龙眼果肉中提取多糖的方法 | |
| CN107513476A (zh) | 一种保健半甜黄酒及其生产工艺 | |
| CN107557421A (zh) | 一种从灵芝中提取有效成分的方法 | |
| CN101575381A (zh) | 脱皮甘薯淀粉的无废料生产方法 | |
| CN108653417A (zh) | 一种黑果花楸的提取方法及其提取物 | |
| CN100447250C (zh) | 一种米糠多糖的分离纯化方法 | |
| CN104757564A (zh) | 一种利用花生壳制备膳食纤维的方法 | |
| WO2020093510A1 (zh) | 一种灵芝孢子多糖的分离纯化方法 | |
| CN108794651A (zh) | 百香果果皮中提取果胶的方法 | |
| CN104593441A (zh) | 一种从松茸中同时提取挥发油、多糖和氨基酸的方法 | |
| CN100340180C (zh) | 甘薯蛋白及其生产技术 | |
| CN107373260B (zh) | 一种复合型降血脂保健功能饮料及其制备方法 | |
| CN108913499A (zh) | 一种苦荞提取物及其制备方法、应用与保健酒 | |
| CN109134695A (zh) | 一种醇溶性β-葡聚糖提取物及其制备方法、应用与保健酒 | |
| CN112626150A (zh) | 一种昆布多糖的提取方法及应用 | |
| CN103012614A (zh) | 一种玉米皮活性多糖的提取方法 | |
| CN107857826A (zh) | 一种降血糖香蕉花多糖的分离纯化方法 | |
| CN103275237A (zh) | 一种茄枝多糖的制备方法及其应用 | |
| CN101077851B (zh) | 一种从荞麦麸皮中提取d-手性肌醇的方法 | |
| CN1849931A (zh) | 一种脱脂米糠膳食纤维的制备方法 | |
| CN113694152B (zh) | 一种高稳定性酶解法获取薏苡仁提取液的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190913 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |