CN110082471A - 一种桔梗冬花片的检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种桔梗冬花片的检测方法，属于中药成分检测技术领域，该方法采用薄层色谱法试验对桔梗和丝石竹进行成分鉴别、采用薄层色谱法试验对远志和白薇根进行成分鉴别、采用薄层色谱法试验对甘草进行成分鉴别，保证了药品中含有桔梗、远志、甘草的成份，同时也能监测药品中是否含有丝石竹和白薇根的成份，从而使药品的质量得到更加全面的监测，这不仅能更好更全面地反映桔梗冬花片的质量，而且能有效地控制不法厂商生产伪劣桔梗冬花片，保证群众用药安全有效。

Description

一种桔梗冬花片的检测方法

技术领域

本发明属于中药成分检测技术领域，特别涉及一种桔梗冬花片的检测方法。

背景技术

桔梗冬花片是《卫生部药品标准》中药成方制剂第七册收载的品种，标准编号为WS3-B-1409-93，处方为桔梗、款冬花、远志(制)、甘草，是纯中药的片剂，它具有镇咳祛痰的作用，临床用于支气管炎，咳嗽痰多等呼吸道疾病的治疗，是目前市场上用于治疗急、慢性支气管炎、咳嗽、哮喘、多痰等呼吸道疾病的常用药品，但是原标准中没有对处方中的几种中药材成份进行任何质量检测，既没有质量指标，也没有这些质量指标的鉴别检测方法，不法厂商在生产药品时不严格按照处方的剂量配料，肆意减少价格高的原料，致使药品的疗效明显下降，影响药品的安全有效，严重损害患者的利益，另外，处方中用量较大的桔梗，容易混入形状相近的丝石竹，丝石竹又名霞草、山蚂蚱，为石竹科植物丝石竹的干燥根，虽然形状与桔梗相近，但是其功效和用途与桔梗不同，如果混入，必将影响药品的疗效，再有，处方中有药材远志，容易混入形状相近的白薇根，白薇根为萝蘑科植物直立白薇或蔓生白薇的根，虽然其形状与远志相近，但是其功效和用途与桔梗不同，如果混入，也会影响药品的疗效。

发明内容

本发明的目的是提供一种桔梗冬花片的检测方法，该方法增加了桔梗、远志和甘草的成分鉴别，也对容易发生混淆的药材丝石竹和白薇根进行了检测，从而能有效地监测桔梗冬花片的质量，使该药品安全有效，进而保证该制剂的临床疗效，维护患者的利益。

本发明的技术方案如下：

一种桔梗冬花片的检测方法，包括性状、鉴别、检查项目，其中，鉴别包括对桔梗冬花片中桔梗、远志和甘草的鉴别，还包括对容易发生混淆的药材丝石竹和白薇根的鉴别。

（1）桔梗和丝石竹的鉴别：以桔梗对照药材和丝石竹对照药材为对照品，用薄层色谱法试验，用同一硅胶G薄层板，以体积比计的三氯甲烷∶乙醚=0.5～1.5∶0.5～1.5为展开剂；

（2）远志和白薇根的鉴别：以远志对照药材和白薇根对照药材为对照品，照薄层色谱法试验，用同一硅胶G薄层板，以体积比计的苯∶乙酸乙酯∶乙酸=7～15∶1～5∶0.5～1.5为展开剂；

（3）甘草的鉴别：以甘草苷为对照品，照薄层色谱法试验，用同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板，以体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=3～7∶1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5为展开剂。

上述桔梗冬花片的检测方法的具体步骤如下：

（1）桔梗和丝石竹的鉴别：取本品研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加硫酸乙醇-水混合液，加热回流，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，合并三氯甲烷液，加水洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材和丝石竹对照药材，分别加10%硫酸乙醇-水混合液，加热回流，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，合并三氯甲烷液，加水洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的三氯甲烷∶乙醚=0.7～1.3∶0.7～1.3为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与桔梗对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与丝石竹对照药材色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；

（2）远志和白薇根的鉴别：取本品研细，加10%盐酸无水乙醇溶液，超声处理，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材和白薇根对照药材，分别加10%盐酸无水乙醇溶液，超声处理，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的苯∶乙酸乙酯∶乙酸=9～13∶2～4∶0.7～1.3为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与远志对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与白薇根对照药材色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；

（3）甘草的鉴别：取本品研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，用盐酸调pH值，用乙酸乙酯振摇提取2次，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取甘草苷对照品，加甲醇制成对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=4～6∶2～4∶0.7～1.3∶0.7～1.3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，在供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

所述桔梗冬花片的检测方法的进一步步骤如下：

（1）桔梗和丝石竹的鉴别：取本品，研细，称取1g，加乙醇60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加以体积比计的10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20 ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材和丝石竹对照药材各1g，分别加以体积比计的10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取所述3种供试品溶液和对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的三氯甲烷∶乙醚=1∶1为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，与桔梗对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与丝石竹对照药材色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；

（2）远志和白薇根的鉴别：取本品，研细，称取2g，加10%盐酸无水乙醇溶液30ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水20ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材和白薇根对照药材各1g，分别加10%盐酸无水乙醇溶液20ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水30ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取所述3种供试品溶液和对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的苯∶乙酸乙酯∶乙酸=11∶3∶1为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与远志对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与白薇根对照药材色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；

（3）甘草的鉴别：取本品，研细，称取3g，加乙醇20 ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液和对照品溶液各10μl，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=5∶3∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

本发明的有益效果：本桔梗冬花片通过增加桔梗和丝石竹的鉴别、远志和白薇根的鉴别、甘草的鉴别，可确保桔梗冬花片药品中含有桔梗、远志和甘草的成份，从而也能保证药品中不含有丝石竹和白薇根的成份，进而使药品的质量得到更加全面的监测，这不仅能更好更全面地反映桔梗冬花片的质量，而且能有效地控制不法厂商生产伪劣桔梗冬花片，从而保证群众用药安全有效。

具体实施方式

实施例1

处方：桔梗300g 款冬花37g 远志（制）63g 甘草20g

制法：以上四味，取桔梗50g粉碎成细粉，剩余桔梗与款冬花、远志（制）和甘草三味加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，静置，取上清液浓缩成稠膏，加入桔梗细粉及淀粉90g，混匀，干燥，研细，制粒，压制成1000片，包糖衣，即得。

性状：本品为糖衣片，除去糖衣后显灰白色，味微甜。

鉴别：（1）桔梗和丝石竹的鉴别：取本品20片，研细，称取1g，加乙醇60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20 ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材和丝石竹对照药材各1g，分别加10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的三氯甲烷∶乙醚=1∶3为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与桔梗对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与丝石竹对照药材色谱相应的位置上，未显相同颜色的斑点；

（2）远志和白薇根的鉴别：取本品20片，研细，称取2g，加10%盐酸无水乙醇溶液30ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水20ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材和白薇根对照药材各1g，分别加10%盐酸无水乙醇溶液20ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水30ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的苯∶乙酸乙酯∶乙酸=9∶2∶0.7为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与远志对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与白薇根对照药材色谱相应的位置上，未显相同颜色的斑点；

（3）甘草的鉴别：取本品20片，研细，称取3g，加乙醇20 ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=3∶1∶0.5∶1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

检查：应符合片剂项下有关的各项规定（《中国药典》2015年版）

功能与主治：镇咳祛痰。用于咳嗽痰多，支气管炎。

用法与用量：口服，一次 6～8 片，一日 3次 。

贮藏：密封。

实施例2

除桔梗和丝石竹的鉴别、远志和白薇根的鉴别和甘草的鉴别不同之外，其他方法均与实施例1相同。

鉴别：（1）桔梗和丝石竹的鉴别：取本品20片，研细，称取1g，加乙醇60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20 ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材和丝石竹对照药材各1g，分别加10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的三氯甲烷∶乙醚=3∶1为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与桔梗对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与丝石竹对照药材色谱相应的位置上，未显相同颜色的斑点；

（2）远志和白薇根的鉴别：取本品20片，研细，称取2g，加10%盐酸无水乙醇溶液30ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水20ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材和白薇根对照药材各1g，分别加10%盐酸无水乙醇溶液20ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水30ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的苯∶乙酸乙酯∶乙酸=13∶4∶1.3为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与远志对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与白薇根对照药材色谱相应的位置上，未显相同颜色的斑点；

（3）甘草的鉴别：取本品20片，研细，称取3g，加乙醇20 ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=7∶5∶1.5∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实施例3

除桔梗和丝石竹的鉴别、远志和白薇根的鉴别和甘草的鉴别不同之外，其他方法均与实施例1相同。

鉴别：（1）桔梗和丝石竹的鉴别：取本品20片，研细，称取1g，加乙醇60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20 ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材和丝石竹对照药材各1g，分别加10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的三氯甲烷∶乙醚=0.7∶1.3为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与桔梗对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与丝石竹对照药材色谱相应的位置上，未显相同颜色的斑点；

（2）远志和白薇根的鉴别：取本品20片，研细，称取2g，加10%盐酸无水乙醇溶液30ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水20ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材和白薇根对照药材各1g，分别加10%盐酸无水乙醇溶液20ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水30ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的苯∶乙酸乙酯∶乙酸=7∶1∶0.5为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与远志对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与白薇根对照药材色谱相应的位置上，未显相同颜色的斑点；

（3）甘草的鉴别：取本品20片，研细，称取3g，加乙醇20 ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=4∶2∶0.7∶1.3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实施例4

除桔梗和丝石竹的鉴别、远志和白薇根的鉴别和甘草的鉴别不同之外，其他方法均与实施例1相同。

鉴别：（1）桔梗和丝石竹的鉴别：取本品20片，研细，称取1g，加乙醇60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20 ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材和丝石竹对照药材各1g，分别加10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的三氯甲烷∶乙醚=1.3∶0.7为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与桔梗对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与丝石竹对照药材色谱相应的位置上，未显相同颜色的斑点；

（2）远志和白薇根的鉴别：取本品20片，研细，称取2g，加10%盐酸无水乙醇溶液30ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水20ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材和白薇根对照药材各1g，分别加10%盐酸无水乙醇溶液20ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水30ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的苯∶乙酸乙酯∶乙酸=3∶1∶0.3为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与远志对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与白薇根对照药材色谱相应的位置上，未显相同颜色的斑点；

（3）甘草的鉴别：取本品20片，研细，称取3g，加乙醇20 ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=6∶4∶1.3∶0.7为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实施例5

除桔梗和丝石竹的鉴别、远志和白薇根的鉴别和甘草的鉴别不同之外，其他方法均与实施例1相同。

鉴别：（1）桔梗和丝石竹的鉴别：取本品20片，研细，称取1g，加乙醇60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20 ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材和丝石竹对照药材各1g，分别加10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的三氯甲烷∶乙醚=1∶1为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与桔梗对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与丝石竹对照药材色谱相应的位置上，未显相同颜色的斑点；

（2）远志和白薇根的鉴别：取本品20片，研细，称取2g，加10%盐酸无水乙醇溶液30ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水20ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材和白薇根对照药材各1g，分别加10%盐酸无水乙醇溶液20ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水30ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的苯∶乙酸乙酯∶乙酸=11∶3∶1为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与远志对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与白薇根对照药材色谱相应的位置上，未显相同颜色的斑点；

（3）甘草的鉴别：取本品20片，研细，称取3g，加乙醇20 ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=5∶3∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

Claims (3)

1.一种桔梗冬花片的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：

（1）桔梗和丝石竹的鉴别：以桔梗对照药材和丝石竹对照药材为对照品，用薄层色谱法试验，用同一硅胶G薄层板，以体积比计的三氯甲烷∶乙醚=0.5～1.5∶0.5～1.5为展开剂；

（2）远志和白薇根的鉴别：以远志对照药材和白薇根对照药材为对照品，照薄层色谱法试验，用同一硅胶G薄层板，以体积比计的苯∶乙酸乙酯∶乙酸=7～15∶1～5∶0.5～1.5为展开剂；

（3）甘草的鉴别：以甘草苷为对照品，照薄层色谱法试验，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板，以体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=3～7∶1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5为展开剂。

2.根据权利要求1所述的桔梗冬花片的检测方法，其特征在于，所述检测方法进一步步骤为：

（1）桔梗和丝石竹的鉴别：取本品研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加硫酸乙醇-水混合液，加热回流，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，合并三氯甲烷液，加水洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材和丝石竹对照药材，分别加10%硫酸乙醇-水混合液，加热回流，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，合并三氯甲烷液，加水洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的三氯甲烷∶乙醚=0.7～1.3∶0.7～1.3为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与桔梗对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与丝石竹对照药材色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；

（2）远志和白薇根的鉴别：取本品研细，加10%盐酸无水乙醇溶液，超声处理，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材和白薇根对照药材，分别加10%盐酸无水乙醇溶液，超声处理，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的苯∶乙酸乙酯∶乙酸=9～13∶2～4∶0.7～1.3为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与远志对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与白薇根对照药材色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；

（3）甘草的鉴别：取本品研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，用盐酸调pH值，用乙酸乙酯振摇提取2次，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取甘草苷对照品，加甲醇制成对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=4～6∶2～4∶0.7～1.3∶0.7～1.3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，在供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

3.根据权利要求2所述的桔梗冬花片的检测方法，其特征在于，所述检测方法的步骤为：

（1）桔梗和丝石竹的鉴别：取本品，研细，称取1g，加乙醇60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加以体积比计的10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20 ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材和丝石竹对照药材各1g，分别加以体积比计的10%硫酸乙醇∶水=1∶3的混合液20ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用装有1g无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取所述3种供试品溶液和对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的三氯甲烷∶乙醚=1∶1为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，与桔梗对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与丝石竹对照药材色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；

（2）远志和白薇根的鉴别：取本品，研细，称取2g，加10%盐酸无水乙醇溶液30ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水20ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材和白薇根对照药材各1g，分别加10%盐酸无水乙醇溶液20ml，超声处理40分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水30ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取2次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取所述3种供试品溶液和对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的苯∶乙酸乙酯∶乙酸=11∶3∶1为展开剂，展开，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与远志对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与白薇根对照药材色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；

（3）甘草的鉴别：取本品，研细，称取3g，加乙醇20 ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取所述供试品溶液和对照品溶液各10μl，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=5∶3∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。