CN110066326B - 调控植物花青素合成的盐芥转录因子EsMYB41及其编码基因和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及调控植物花青素合成的盐芥转录因子EsMYB41及其编码基因和应用。调控植物花青素合成的盐芥转录因子EsMYB41，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明构建含有EsMyb41过表达载体，转化烟草、拟南芥，得到EsMYB41转基因烟草和拟南芥，结果发现，转基因植株出现几乎整株紫红色的表型；转基因植株不同组织的花青素含量以及花青素合成结构基因的表达均显著高于野生型，同时，盐胁迫下转基因植株的抗氧化酶能力显著提升。

Description

调控植物花青素合成的盐芥转录因子EsMYB41及其编码基因 和应用

技术领域

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及调控植物花青素合成的盐芥转录因子EsMYB41及其编码基因和应用。

背景技术

花青素是植物新陈代谢过程中产生的类黄酮物质，决定被子植物花、果实、种皮、茎、叶和根等的颜色。在观赏植物品种中，花青素赋予植株花色不可替代的作用。同时，花青素可提高传粉媒介的吸引力，有利于种子传播。因此，对于很多果实和花卉来说，花青素是其重要的品质特征，也是育种的重要依据。鉴于花青素能够清除细胞内产生的氧自由基，因而具有抗氧化活性。花青素的抗氧化活性取决于B环羟基化(hydroxylation)、酰化(acylation)和糖基化(glycosylation)的程度。

花青素不仅是植物果实、花等颜色的贡献者，而且也有利于人体的健康。研究表明，花青素有预防癌症、炎症、心脏病等功能，例如，紫色番茄皮提取物富含的大量花青素对人的结肠癌和卵巢癌细胞系的增殖具有抑制作用；马铃薯花青素可抑制胃癌和前列腺癌细胞系的繁殖，茄科蔬菜中富含的大量花青素可减少血管炎症并预防血栓的形成。

花青素合成的结构基因主要受调控复合体MBW(MYB–bHLH–WD40)在转录水平上的调控，其中MYB转录因子在调控花青素生物合成过程中起核心作用。拟南芥PAP1和PAP2及其直系同源物均在花青素生物合成中起关键调控作用。拟南芥Myb75/PAP1、Myb90/PAP2、AtMYB113/PAP3和AtMYB114/PAP4均能调控原花色素和花青素合成途径。其中，拟南芥早期花青素生物合成基因CHS、CHI、F3H和F3’H的表达受Myb12/PFG1、Myb11/PFG2和Myb111/PFG3的调控，晚期花青素生物合成基因DFR、LDOX和ANR则受Myb75/PAP1、Myb90/PAP2、Myb113和Myb114的调控。苹果MdMyb10的表达与果实和叶片中的花青素合成相关，MdMyb1和MdMybA的表达则与果皮中花青素合成相关。另外，甜樱桃(Prunus aviumL.)花青素合成受特定转录因子MYB和bHLH家族相互作用的调控。杨梅(Myrica rubra)MrMyb1和MrbHLH1共同作用调控其花青素的合成，并诱导花青素生物合成基因的表达。柿子(Diospyros Kaki)DkMyb2、DkMyb4与WD40蛋白相互作用调控原花色素的合成。玉米中调控花青素途径的R2R3-MYBZmC1蛋白与bHLH转录因子相互作用以激活花青素合成结构基因DFR启动子，因此ZmC1蛋白属于bHLH依赖性蛋白；而玉米中吡咯烷途径的R2R3MYB蛋白可在无bHLH情况下激活相同的DFR启动子，其属于bHLH非依赖性P蛋白。沙梨(Pyrus pyrifolia)花青素的生物合成受R2R3-MYB类转录因子PyMYB10的调控。因此，调控复合体MBW发挥作用的机理较为复杂，其中，有些MYB必须同时与bHLH和/或WD40共表达才能发挥作用，也有MYB可以独自诱导花青素的积累。

盐芥(Eutrema Salsugineum)是一种典型盐生植物，它能适应盐胁迫环境，短时间内可抵抗500mM NaCl的胁迫，对冷、干旱、氧化胁迫以及氮素缺乏均具较高的耐受性，现有技术使用盐芥进行与耐逆性相关的生理、代谢和分子机制包括离子运输、基因表达等方面的研究，但盐芥MYB转录因子在花青素生物合成中的重要调控作用尚无研究报导。

发明内容

本发明的目的在于提供一种调控植物花青素合成的盐芥转录因子EsMYB41。

本发明的再一目的在于提供上述盐芥转录因子EsMYB41的编码基因。

本发明的再一目的在于提供含有上述编码基因的重组表达载体。

本发明的再一目的在于提供含有上述编码基因的重组菌株。

本发明的再一目的在于提供上述盐芥转录因子EsMYB41的应用。

本发明的再一目的在于提供上述编码基因的应用。

根据本发明具体实施方式的盐芥转录因子EsMYB41，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示：

本发明的EsMYB41蛋白由250个氨基酸残基组成。自SEQ ID No.1的氨基末端第5-61和62-112氨基酸均包含HTH myb结构域，其中第33-57和85-108氨基酸是HTH的DNA结合结构域，在EsMyb41的N-末端区域中存在高度保守的R2和R3MYB结构域。

根据本发明具体实施方式的盐芥转录因子EsMYB41基因的基因组序列如SEQ IDNo.2所示：

ATGGAGGGCTCGTCCAAAGGGTTGAGAAAAGGTGCTTGGACTGCTGAAGAAGATAGTCTCTTGAGGCAATGCATTGATAAGTATGGAGAAGGCAAATGGCATCAAGTTCCTTTAAGAGCTGGTATGTTATTTACACACACACACACAAACTATCTTTTTTAAGAAAAACATGAATCAACGAATCGAAAACTAATTAATATATATATATATATATATATATATATAATTAATCACTACAAACACACACACTATATATATATATATATAAATATATATATATATATATAATTAATCACTACGAATATTTTCTTTCTGTATATCTACTTCAGCAAATCAATCAACAACGTGGACAAATCAATGTTTTCTTTTTTGTTTTCAAATTGTTGATTCATGCTTTTTAAGGTTGTTCATGAAAAATCAAATGTTAAACTTAAACGAAGACCTGTATTCAAGACTAAAGATGTAAAAGGAAATTTAAAAGAAAATACTATTTTACTTACGTTGCATTTTGCTAGTTTCTTGTTGACAAGACGAAAAGATGCCGACTCTTTTATTTGTTTGTCTTTTAGTAAATGAACTCAGTGAAATTTTCTGTTCGAACACGTGTGTTTGAGTGTAAAAAAAGTACATTATTTCTATTGGTGTGCATAGATTCTTCATGATAAAATTTTAGAAGACACGAAAGCAGTCATAGTACGTTCATTTAATAGAGTTATTGTCAATTATTGGTTTTGTAGGGCTAAATCGGTGCAGGAAGAGTTGTAGATTAAGATGGTTGAACTACCTGAAGCCAAGTATCAAAAGAGGAAAACTTAGCTCTGATGAGGTTGATCTTCTTCTTCGCCTTCATAAGCTTCTAGGAAACAGGTTTGTTTTCTTGAGACACAATTCCAACTTTATTCTTATGTAATGATCCAATACTAAATCATATATTCAAATCGTTCAAAATGAATGTTTAGGTGGTCCTTAATTGCTGGTAGATTACCCGGTCGTACTGCTAATGATGTCAAGAATTACTGGAACACCCATTTGAGTAAGAAGCATGAACCATGTTGTAAGACAAAGATGAAAAATAGAAACATTCCTTGCTCTTCTACCGCACCAGCCAAAAAAATCGACGTTTTCAAACCTCGACCTCGATCCTTCACTGTTAACAACGGCTGCAGTCGTCATCCGCATGGCCTGCCAGAAGCTGACGTTAGTCCTCCATGCCTTGGACCCAAAAGCATCAGTAATTTTTGTGAAAATATTATCACATGTAGAAAAGATGAGGAGAAATATGAGCTTGTTAGTAATTTAATGGTTAATGGAGAGAAGTGGTGGGAGAATTTGTTAGATGAGAGCCAAGAGCCAGATTCGCTCGTTCCAGAAGCCACGGTAGCAGAAAAGGGGGCAACTTCCGCTTTTGACGTTGAGGAACTTTGGAGTTTGTTGGATGGGGACACTGTGGAACTTGATTAG

根据本发明具体实施方式的盐芥转录因子EsMYB41的编码基因，其cDNA核苷酸序列如SEQ ID No.3所示：

根据本发明具体实施方式的重组表达载体，其包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等。所述植物表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3’端，如农杆菌冠瘿瘤诱导(Ti)质粒基因(如胭脂合成酶Nos基因)、植物基因3’端转录的非翻译区均具有类似功能。

使用EsMyb41构建重组植物表达载体时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型启动子或组成型启动子，如花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子、玉米的泛素启动子(Ubiquitin)，以及胚乳特异性启动子Dx2，它们可单独使用或与其它植物启动子结合使用；此外，使用本发明的基因构建植物表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。

为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除莠剂基因)等。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。

利用任何一种可以引导外源基因在植物中表达的载体，将本发明所提供的EsMyb41基因导入植物细胞，可获得提高植物花青素等类黄酮合成并提高植物的抗氧化能力的转基因细胞系及转基因植株。携带有编码基因的表达载体可通过使用Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化植物细胞或组织，并将转化的植物组织培育成植株。被转化的植物宿主既可以是单子叶植物，也可以是双子叶植物，如：拟南芥、小麦、玉米、黄瓜、番茄、土豆、苜宿等。

本发明还提供上述盐芥转录因子EsMYB41及其编码基因的应用，尤其是在提高植物花青素含量及抗氧化能力方面的应用。

本发明还提供一种显著提高植物花青素含量的培育方法，该方法中包括将上述任一种含有EsMyb41基因的重组表达载体导入植物细胞中，即得到花青素显著提高的植物。

本发明以对盐芥为实验材料，得到EsMyb41蛋白及其编码基因，并将该编码基因导入拟南芥和烟草，显著提高了植物的花青素等类黄酮物质的合成，同时显著提高植物的抗氧化能力。本发明的EsMyb41蛋白及其编码基因对改良、增强转基因植株包括小麦、土豆、黄瓜和番茄等经济作物的花青素等类黄酮的合成，提高植物的抗氧化能力，并加速植物颜色改良的分子育种进程具有十分重要的理论和实践意义。

附图说明

图1显示EsMyb41转基因烟草分子检测结果；M：DNA marker DL2000；1-11：不同转基因烟草株系；N：阴性对照；WT：野生型；P：阳性对照；

图2显示EsMyb41转基因拟南芥分子检测结果；M：DNA marker DL2000；1-9：不同转基因拟南芥株系；N：阴性对照；WT：野生型；P：阳性对照；

图3显示转基因烟草和野生型颜色相关表型比较，其中A：移苗3周；B：移苗7周开花期；C：叶片；D：花；E：花的不同发育阶段；F：果荚的不同发育阶段；L1、L2、L4表示转基因烟草的不同株系；

图4显示L1、L2、L4转基因烟草与野生型花青素水平比较情况；

图5显示L1、L2、L4转基因株系烟草与野生型花青素合成基因表达水平比较情况；

图6显示转基因烟草与野生型抗氧化活性分析比较情况；

图7显示转基因拟南芥与野生型花青素含量比较，其中A：萌发7天；B：移苗15天；C：根；D：叶；E：茎；F：花；G：果荚；H：果荚解剖；I：种子；

图8显示L1、L2、L3转基因株系的拟南芥与野生型花青素水平比较情况。

具体实施方式

供试材料为盐芥(Eutrema salsugineum)，烟草和拟南芥。收集盐芥、EsMyb41异源表达植物和相应野生型植株的叶、花、茎、果荚和种子等用于花青素的定量分析和花青素合成结构基因的表达分析。在所有情况下，叶、花、茎、果荚和种子等样品立即于液氮中冷冻并置于-80℃待用，用于提取DNA、RNA或花青素、类黄酮等，以及基因的表达分析。

以下实施例中未作具体说明的分子生物学实验方法，均参照《分子克隆实验指南》(第三版)J.萨姆布鲁克一书中所列的具体方法进行，或者按照试剂盒和产品说明书进行。

实施例1盐芥花青素合成调控EsMYB41基因的cDNA克隆

对生长20天左右的盐芥幼苗，用Trizol提取盐芥总RNA。用Superscript II(Invitrogen)反转录酶反转录得到cDNA。根据EsMYB41基因编码区序列设计引物P1和P2。以反转录得到的cDNA为模板，用引物P1和P2进行PCR扩增。引物P1和P2的序列如下：

P1：5'TTTAGAATACTTATTGGTCC 3'

P2：5'ATCAGAGACAGATATTAGTTGG 3'

对PCR产物进行0.8％琼脂糖凝胶电泳检测，得到分子量约为0.86kb的条带，该片段包括EsMYB41的编码区和约110bp的5’和3’-UTR区域，大小与预期结果相符。

回收该片段，将该回收片段与pMD18-T(Takara)连接，然后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，根据pMD18-T载体上的氨卞青霉素抗性标记筛选阳性克隆，得到含有回收片段的重组质粒。

以该重组质粒载体上的M13F(-47)和M13R(-48)序列为通用引物对其进行核苷酸序列测定，测序结果表明扩增到的EsMYB41基因的开放阅读框(ORF)为SEQ ID No.3的自5’末端第1至750位脱氧核糖核苷酸，编码氨基酸序列是SEQ ID No.1的蛋白质。将含序列SEQID No.3所示EsMYB41基因的重组载体命名为pMD18-T-EsMYB41。

EsMYB41基因进一步用引物P1和P2在盐芥因组中进行扩增，结果显示该基因的基因组序列为1461bp，由三个外显子和两个内含子组成。第一个外显子和第二个外显子的序列较短，分别为121bp和130bp，第三个外显子的序列较长，为502bp，CDS序列为750bp。

实施例2用EsMYB41基因提高植株的花青素合成和抗氧化能力

2.1重组表达载体的构建

以盐芥的总RNA反转录得到的cDNA为模板，用含有EcoRI和BamHI接头序列的特异引物进行PCR扩增；然后EcoRI和BamHI双酶切PCR产物回收，将酶切产物正向插入载体pCAMBIA3301H的35S启动子之后的EcoRI和BamHI酶切位点之间，得到重组载体35S::EsMYB41。引物序列如下：

35S-EsMYB41[EcoRI]：5'CCGGAATTCTTTAGAATACTTATTGGTCC 3'

35S-EsMYB41[BamHI]：5'CGCGGATCCATCAGAGACAGATATTAGTTGG 3'

2.2用EsMYB41基因增强植物的花青素合成

1)获得转基因烟草和拟南芥材料

将上述构建的重组表达载体35S::EsMYB41转化到根癌农杆菌GV3101中，转化烟草和拟南芥，用含100mg/L Basta的MS培养基进行筛选，得到21棵阳性转基因烟草植株和18棵阳性转基因拟南芥植株。将筛选得到的阳性转基因植株用PCR做进一步鉴定筛选，PCR所用的一对引物为P3和P4。

P3(上游引物):5’-TTAGAATACTTATTGGTCC-3’，

P4(下游引物):5’-ATCAGAGACAGATATTAGTTGG-3’。

对35S::EsMYB41转基因烟草和拟南芥进行PCR鉴定，如图1、2所示，阳性转基因植株经PCR扩增可获得860bp左右条带，其中，获得转35S::EsMYB41烟草18株，获得转35S::EsMYB41拟南芥15株。

2)EsMYB41转基因烟草花青素合成鉴定

如图3中A、B、C所示，较之于野生型，EsMyb41转基因烟草几乎整株，包括叶片、茎、花和果荚，均呈现紫红色或深红色。如图3中D、E、F所示，转基因植株的花萼和花冠在花发育早期阶段呈现深红色，花盛开期的转基因植株花冠呈紫红色，而野生型烟草的花冠为浅粉红色。表型观察发现，EsMyb41转基因烟草的花青素积累明显高于野生型，可见EsMyb41的异源表达促进了烟草叶、茎、花和果荚的色素沉着，表明烟草中花青素的合成增强。

本发明对烟草L1，L2，L4转基因株系处于开花期的茎、幼叶、成熟叶、花、果荚和种子，进行了花青素的提取，并用分光光度法检测花青素的相对含量。每种样品共9棵单株，每3棵为一个重复。

结果如图4所示，转基因烟草的茎、幼叶、成熟叶、花和果荚中花青素的含量显著高于野生型，其中EsMyb41-4株系在各组织中的花青素含量最高，其茎、幼叶、成熟叶、花、果荚和种子中花青素的含量分别是野生型的48.7、95.0、46.0、4.9、12.8和2.6倍。

烟草花青素合成的结构基因主要包括编码苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮合成酶(CHS)、查尔酮异构酶(CHI)、黄烷酮3-羟化酶(F3H)、类黄酮3'-羟化酶(F3'H)、二氢黄酮醇还原酶(DFR)，隐色花青素双加氧酶(LDOX)和UDP-葡萄糖：类黄酮3-O-葡糖基转移酶(UFGT)等花青素合成酶的基因。为了研究EsMYB41对转基因烟草花青素合成结构基因表达的调控作用，本发明检测了烟草PAL、CHS、CHI、F3H、F3'H、DFR、LDOX和UFGT等花青素合成结构基因的表达。

结果如图5所示，较之于野生型，转基因烟草株系L2和L4花青素生物合成途径的结构基因NtPAL、NtCHS、NtCHI、NtDFR、NtLDOX和NtUFGT在茎、叶和花组织中均表达上调，特别是晚期花青素合成基因NtDFR、NtLDOX和NtUFGT的表达显著上调。其中，EsMyb41-4烟草株系NtDFR基因在茎、叶和花中的表达量分别是野生型的501.5、7132.7和7.1倍，NtLDOX基因在茎、叶和花中的表达量分别是野生型的3795.4、14489.7和4.9倍，NtUFGT基因在茎、叶和花中的表达量分别是野生型的9.9、28.4和4247.9倍。由此可见，EsMyb41显著提高转基因烟草花青素合成结构基因的表达。

野生型和EsMyb41转基因烟草生长至5周时，分别选取生长一致的18棵野生型烟草和18棵转基因烟草，其中9棵野生型烟草和9棵转基因烟草用150mM NaCl处理24小时，另外9棵野生型烟草和9棵转基因烟草不作盐处理。分别进行野生型和转基因烟草的SOD、CAT和APX酶活性检测。每种样品共9棵单株，每3棵为一个重复。

结果如图6所示，在正常生长条件下，转基因株系中SOD、CAT和APX等抗氧化酶的活性分别是野生型植株的2、1.6和1.7倍；在150mM NaCl处理条件下，转基因株系中SOD、CAT和APX的活性分别是野生型植株的1.5、1.4和1.4倍，因此，在正常和盐胁迫条件下，EsMyb41转基因烟草的SOD、CAT和APX等抗氧化酶活性均显著高于野生型，由此可见，EsMyb41不仅显著提高了转基因烟草的花青素积累，也显著增强了转基因植株的抗氧化水平。

3)EsMYB41转基因拟南芥花青素合成鉴定

如图7中A、B、D、E、F、G所示，EsMyb41转基因拟南芥叶片、茎、花、果荚的颜色均不同于野生型，表现为花青素更多的积累，同时转基因拟南芥的果荚较短。如图7中C、D、H、I所示，EsMyb41转基因拟南芥的根和种子呈显著的色素积累。因此，EsMyb41转基因拟南芥的花青素积累明显高于野生型，表明EsMyb41促进了转基因拟南芥花青素的合成。

本发明对抽薹期的拟南芥3个EsMyb41转基因株系L1、L2、L3和野生型的根、茎、叶、花、果荚和种子进行花青素的提取，并分光光度法检测花青素的相对含量。

结果如图8所示，转基因拟南芥根、茎、叶、花、果荚和种子中花青素的含量显著高于野生型，其中转基因拟南芥L3株系的花青素含量最高，其根、茎、叶、花、果荚和种子中花青素的含量分别是野生型的46.8、64.4、34.2、41.4、81.7和36.6倍。由此可见，EsMyb41在拟南芥中的异源表达强烈地增强植株的花青素合成。

序列表

<110> 山东师范大学

<120> 调控植物花青素合成的盐芥转录因子EsMYB41及其编码基因和应用

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 250

<212> PRT

<213> 盐芥(Eutrema salsugineum)

<400> 1

Met Glu Gly Ser Ser Lys Gly Leu Arg Lys Gly Ala Trp Thr Ala Glu

1 5 10 15

Glu Asp Ser Leu Leu Arg Gln Cys Ile Asp Lys Tyr Gly Glu Gly Lys

20 25 30

Trp His Gln Val Pro Leu Arg Ala Gly Leu Asn Arg Cys Arg Lys Ser

35 40 45

Cys Arg Leu Arg Trp Leu Asn Tyr Leu Lys Pro Ser Ile Lys Arg Gly

50 55 60

Lys Leu Ser Ser Asp Glu Val Asp Leu Leu Leu Arg Leu His Lys Leu

65 70 75 80

Leu Gly Asn Arg Trp Ser Leu Ile Ala Gly Arg Leu Pro Gly Arg Thr

85 90 95

Ala Asn Asp Val Lys Asn Tyr Trp Asn Thr His Leu Ser Lys Lys His

100 105 110

Glu Pro Cys Cys Lys Thr Lys Met Lys Asn Arg Asn Ile Pro Cys Ser

115 120 125

Ser Thr Ala Pro Ala Lys Lys Ile Asp Val Phe Lys Pro Arg Pro Arg

130 135 140

Ser Phe Thr Val Asn Asn Gly Cys Ser Arg His Pro His Gly Leu Pro

145 150 155 160

Glu Ala Asp Val Ser Pro Pro Cys Leu Gly Pro Lys Ser Ile Ser Asn

165 170 175

Phe Cys Glu Asn Ile Ile Thr Cys Arg Lys Asp Glu Glu Lys Tyr Glu

180 185 190

Leu Val Ser Asn Leu Met Val Asn Gly Glu Lys Trp Trp Glu Asn Leu

195 200 205

Leu Asp Glu Ser Gln Glu Pro Asp Ser Leu Val Pro Glu Ala Thr Val

210 215 220

Ala Glu Lys Gly Ala Thr Ser Ala Phe Asp Val Glu Glu Leu Trp Ser

225 230 235 240

Leu Leu Asp Gly Asp Thr Val Glu Leu Asp

245 250

<210> 2

<211> 1461

<212> DNA

<213> 盐芥(Eutrema salsugineum)

<400> 2

atggagggct cgtccaaagg gttgagaaaa ggtgcttgga ctgctgaaga agatagtctc 60

ttgaggcaat gcattgataa gtatggagaa ggcaaatggc atcaagttcc tttaagagct 120

ggtatgttat ttacacacac acacacaaac tatctttttt aagaaaaaca tgaatcaacg 180

aatcgaaaac taattaatat atatatatat atatatatat atataattaa tcactacaaa 240

cacacacact atatatatat atatataaat atatatatat atatataatt aatcactacg 300

aatattttct ttctgtatat ctacttcagc aaatcaatca acaacgtgga caaatcaatg 360

ttttcttttt tgttttcaaa ttgttgattc atgcttttta aggttgttca tgaaaaatca 420

aatgttaaac ttaaacgaag acctgtattc aagactaaag atgtaaaagg aaatttaaaa 480

gaaaatacta ttttacttac gttgcatttt gctagtttct tgttgacaag acgaaaagat 540

gccgactctt ttatttgttt gtcttttagt aaatgaactc agtgaaattt tctgttcgaa 600

cacgtgtgtt tgagtgtaaa aaaagtacat tatttctatt ggtgtgcata gattcttcat 660

gataaaattt tagaagacac gaaagcagtc atagtacgtt catttaatag agttattgtc 720

aattattggt tttgtagggc taaatcggtg caggaagagt tgtagattaa gatggttgaa 780

ctacctgaag ccaagtatca aaagaggaaa acttagctct gatgaggttg atcttcttct 840

tcgccttcat aagcttctag gaaacaggtt tgttttcttg agacacaatt ccaactttat 900

tcttatgtaa tgatccaata ctaaatcata tattcaaatc gttcaaaatg aatgtttagg 960

tggtccttaa ttgctggtag attacccggt cgtactgcta atgatgtcaa gaattactgg 1020

aacacccatt tgagtaagaa gcatgaacca tgttgtaaga caaagatgaa aaatagaaac 1080

attccttgct cttctaccgc accagccaaa aaaatcgacg ttttcaaacc tcgacctcga 1140

tccttcactg ttaacaacgg ctgcagtcgt catccgcatg gcctgccaga agctgacgtt 1200

agtcctccat gccttggacc caaaagcatc agtaattttt gtgaaaatat tatcacatgt 1260

agaaaagatg aggagaaata tgagcttgtt agtaatttaa tggttaatgg agagaagtgg 1320

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<210> 3

<211> 753

<212> DNA

<213> 盐芥(Eutrema salsugineum)

<400> 3

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ttgaggcaat gcattgataa gtatggagaa ggcaaatggc atcaagttcc tttaagagct 120

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attatcacat gtagaaaaga tgaggagaaa tatgagcttg ttagtaattt aatggttaat 600

ggagagaagt ggtgggagaa tttgttagat gagagccaag agccagattc gctcgttcca 660

gaagccacgg tagcagaaaa gggggcaact tccgcttttg acgttgagga actttggagt 720

ttgttggatg gggacactgt ggaacttgat tag 753

Claims (1)

1.一种提高拟南芥或烟草的花青素含量的方法，其特征在于，所述方法包括向拟南芥或烟草中单独导入盐芥转录因子EsMYB41的编码基因的步骤，其中，所述盐芥转录因子EsMYB41的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示。

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