CN110051932A - 一种抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带，束腹带分上下两部分，上部长为5‑25cm，主要为胯骨以上及腰的受力区，包括柔软束带和弹力挂扣带两部分，下部则为胯骨至小腹保护区，为3‑15cm；为双层柔软设计，夹层中在对应女性人体卵巢位置缀连有磁片，且N极向内，产生磁场区域深度约为每个磁场组6cm，磁组距离可根据不同身材进行微调整。本发明直观反应了磁场对卵巢癌细胞的抑制作用，为磁疗在医学临床中的应用提供了事实依据。本发明中反应条件可控，制作方法简单，可操作性强，充分证明了该磁疗束腹带的科学性。

Description

一种抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带

技术领域

本发明涉及一种抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带，具体验证方法为将卵巢癌细胞传代同种密度后，在有外加稳态磁场的培养箱中培养一定时间，外加稳态磁场抑制了卵巢癌细胞的生长，发明了该实用型磁疗束腹带。本发明属于医学生物学领域。

背景技术

稳态磁场（SMF，也叫静磁场，恒定磁场等）的强度不随时间变化，生活中最常见的稳态磁场是家用的磁铁，医院中的磁共振成像仪的核心部件以及微弱但广泛存在的地磁场，都是强度不同的稳态磁场。人们接触到的磁场强度从地磁场0.05mT到接近10T不等。

科学家们进行了很多关于磁场在分子、细胞、动物以及人体水平影响的研究，证明了磁场的生物学效应。尽管磁疗目前还不被主流医学所接受，但是作为替代或辅助治疗手段被广泛应用。诸多相关报道已经证实磁场对人体细胞的生物学效应依赖于多个因素，包括频率、强度、曝磁时间和动态学因素，但更为重要的是细胞类型，稳态磁场可以抑制多种癌细胞的生长，却对大多数正常细胞没有影响，即稳态磁场可以差向异性地影响癌细胞和正常细胞。已证实细胞所产生的由肽键组成的一定的组织结构，如α-螺旋等赋予了蛋白质的抗磁各向异性；组织结构良好的微管蛋白构成的微管表现出较强的抗磁各向异性。当然，基于特定蛋白水平的差异，使得不同细胞具有不同的磁化率。一些研究表明，一定强度的稳态磁场和化疗药物的联合，与稳态磁场单独处理或化疗药物单独处理相比，稳态磁场与化疗药物联合可以提高多种药物的抑瘤效果。稳态磁场可以引起多种细胞效应，对人类细胞取向、增殖、微管与细胞分裂、肌动蛋白、细胞活力、粘附、形态、迁移、细胞膜、细胞周期、染色体和DNA、细胞内活性氧簇（ROS）和钙的变化都有一定影响。

现有的“磁疗”中最大的一部分属于自制一类，主要是使用各种类型的永磁铁来提供“持续开放”的静态磁场来治疗各种疾病。比如，磁性床垫、磁铁嵌入式枕头、磁疗鞋垫、磁性背带、磁性手环等等，这些磁疗产品可以用于身体的不同部位，其磁场强度范围为几十到几百高斯，这些磁场主要依赖磁场的穿透作用影响生命组织或器官。

目前，稳态磁场的的理疗原理仍然缺乏足够的理论支撑，不被主流医学所接受，这是由于缺乏科学系统的方法去分离与磁场相关的其他因素。虽然还有很多问题暂时无法解决，但本发明通过科学可信的实验设计证实了稳态磁场对卵巢癌细胞的抑制效果，并据此设计了卵巢癌磁疗束腹带用于卵巢癌的防治。

发明内容

针对现有技术的不，本发明目的在于提供一种抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带。

本发明的再一目的在于，提供一种上述磁疗束腹带抑制卵巢癌细胞增殖的验证方法。

本发明目的通过下述方案实现：一种抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带，包括磁场组和束腹带，所述的束腹带分上下两部分，上部长为5-25cm，主要为胯骨以上及腰的受力区，包括柔软束带和弹力挂扣带两部分；下部则为胯骨至小腹保护区，为3-15cm，为双层柔软设计，夹层中在对应女性人体卵巢位置缀连有磁片，且N极向内，产生磁场区域深度为每个磁场组6cm，根据不同身材，所述的磁组距离可进行微调整。

所述的磁场组为稳态磁场，由2片0.2T-0.6T和12-18片0.2T-0.6T磁片组成，且N极向内，两个磁场区分别对应左右两卵巢的位置。

本发明提供一种根据上述磁疗束腹带抑制卵巢癌细胞增殖的验证方法，包括如下步骤：

同期复苏人宫颈癌细胞（Hela）、人肺癌细胞（A549）、人卵巢癌细胞（A2780）、人卵巢癌细胞（SKOV-3）四种细胞，同一培养环境中，分别传3代细胞，使细胞生长增殖趋于稳定，然后传入四分皿，其中，传代时，对所传代细胞严格计数，确保四种细胞的传代浓度及生长活力，分为对照组和实验组，实验组为0.2T、0.4T、和/或0.6T稳态磁场N极培养组，0.2T、0.4T、0.6T稳态磁场N极培养组，四分皿每格传入浓度为40000个/mL的细胞200μL，在合适培养条件下，将对照组细胞置于距离实验组细胞50cm以上的同一培养环境中，培养24h后，用4%多聚甲醛固定细胞30min，PBS缓冲液清洗3次，然后，用荧光染料DAPI染色15min，PBS缓冲液洗3次，在激光共聚焦显微镜下拍摄，激光范围360nm～480nm；

同时，传入96孔板，分控制组和实验组，传代浓度均为3000个/mL，每孔100μL，每种细胞6个复孔，对照组远离实验组，在同一培养环境中培养24h后，每孔加入2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐（CCK-8）指示剂10μL，继续按照各自条件孵育4h至孔中液体变为橙色时用酶标仪检测，记录结果并进行统计学分析。

实验组外加梯度稳态磁场，强度分别为0.2T、0.4T、0.6T。

本发明根据稳态磁场对卵巢癌细胞的影响，发现一定场强的稳态磁场对卵巢癌细胞的抑制程度明显高于其他癌细胞。该方法通过将不同癌细胞在相同的磁场强度、方向和曝磁时间下培养一段时间，运用表观分析以及统计学分析得出结论证明了稳态磁场对于卵巢癌细胞具有不同程度的抑制效果。

本发明以 Hela（人宫颈癌细胞）、A549（人肺癌细胞）、A2780（人卵巢癌细胞）SKOV-3（人卵巢癌细胞）为实验细胞，对照组正常培养，实验组外加梯度稳态磁场，强度分别为0.2T、0.4T、0.6T，培养相同时间24h，激光共聚焦表征结果互为对照得出具有统计学意义的数据。为磁疗能够在癌症特别是卵巢癌预防治疗中应用提供事实依据，并且设计出了有效的卵巢癌防治磁疗束腹带。

本发明的优点在于：

（1）本发明直观反应了磁场对卵巢癌细胞的抑制作用，为磁疗在医学临床中的应用提供了事实依据。

（2）本发明运用数理统计学原理客观科学的反应了该磁疗束腹带的功能性。

（3）本发明中反应条件可控，制作方法简单，可操作性强，充分证明了该磁疗束腹带的科学性。

（4）本发明合理运用实验结果设计了实用型磁疗防治卵巢癌的束腹带，有良好的市场价值。

附图说明

图1为磁疗束腹带模型图，其中磁片位置对应女性人体卵巢位置；

图2为对照组的激光共聚焦图；

图3为实施例1实验组激光共聚焦图；

图4为实施例1细胞存活率实验结果统计图，**P≤0.01，*P≤0.05；

图5为实施例2所得激光共聚焦图；

图6为实施例3所得激光共聚焦图；

图1中标号说明：

1、2——上、下束腹带；

11——柔软束带；12——弹力挂扣带；

3、4——左、右0.6T磁片。

具体实施方式

以下通过具体的实施例对本发明的技术方案作进一步描述。以下的实施例是对本发明的进一步说明，而不限制本发明的范围。

实施例1

一种抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带，包括磁场组和束腹带，如附图1所示，分为上、下束腹带1、2，上部长为25cm，主要为胯骨以上及腰的受力区，包括柔软束带11和弹力挂扣带12两部分；下部则为胯骨至小腹保护区，为15cm，为双层柔软设计，夹层中在对应女性人体卵巢位置缀连有2片0.6T和16片0.2T磁片，且N极向内，产生磁场区域深度约为每个磁场组6cm，磁组距离10cm。左右0.6T磁片3、4外周，都各加0.2T磁片8个，磁场形态呈辐射状，中心0.6T稳态磁场防治，边缘0.2T稳态磁场强化磁疗效果。

一种根据上述磁疗束腹带抑制卵巢癌细胞增殖的验证方法，按如下步骤：

同期复苏Hela、A549、A2780、SKOV-3四种细胞，同一培养环境中，分别传3代细胞，使细胞生长增殖趋于稳定，然后传入四分皿，传代时，对所传代细胞严格计数，确保四种细胞的传代浓度及生长活力。分为两组，分别是对照组和0.6T稳态磁场N极培养组，四分皿每格传入浓度为40000个/mL的细胞200μL，在合适培养条件下，将对照组细胞置于距离实验组细胞50cm以上的同一培养环境中，培养24h后，用4%多聚甲醛固定细胞30min，PBS缓冲液清洗3次，然后，用荧光染料DAPI染色15min，PBS缓冲液洗3次，在激光共聚焦显微镜下拍摄，激光范围360nm～480nm。

同时传入96孔板，分控制组和实验组，传代浓度均为3000个/mL，每孔100μL，每种细胞6个复孔，对照组远离实验组，在同一培养环境中培养24h后，每孔加入CCK-8指示剂10μL，继续按照各自条件孵育4h至孔中液体变为橙色，用酶标仪检测，记录结果并进行统计学分析。

附图2、附图3为对照组和实验组激光共聚焦结果的对比图，重复试验选取具有普遍代表性的对比图，图中明显可以看出0.6T稳态磁场对四种癌细胞都有明显的生长抑制作用，抑制效果A2780＞SKOV-3＞A549＞Hela，且0.6T稳态磁场对两种卵巢癌细胞A2780、SKOV-3的增殖抑制明显强于A549和Hela。

附图4为对照组和实验组CCK-8统计学结果对比图，同样显示，0.6T稳态磁场培养条件下，对细胞存活率的抑制：A2780＞SKOV-3＞Hela＞A549，且0.6T稳态磁场对两种卵巢癌细胞A2780（87.7%）和SKOV-3（90.1%）的存活率影响明显大于A549（97.1%）和Hela（96.8%）。控制组复孔结果（p = 0.0124），数据具有统计学意义。

实施例2

一种抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带，包括磁场组和束腹带，与实施例1近似，参阅附图1，只是磁片结构与实施例1不同。束腹带分上下两部分，上部长为15cm，主要为胯骨以上及腰的受力区，包括柔软束带和弹力挂扣带两部分；下部则为胯骨至小腹保护区，为6cm，为双层柔软设计，夹层中在对应女性人体卵巢位置缀连有2片0.4T和14片0.2T磁片，且N极向内，产生磁场区域深度约为每个磁场组6cm，磁组距离14cm。

一种根据上述磁疗束腹带抑制卵巢癌细胞增殖的验证方法，按如下步骤：

同期复苏Hela、A549、A2780、SKOV-3四种细胞，同一培养环境中，分别传3代细胞，使细胞生长增殖趋于稳定。然后传入四分皿，传代时，对所传代细胞严格计数，确保四种细胞的传代浓度及生长活力。分为两组，分别是对照组和0.4T稳态磁场N极培养组，四分皿每格传入浓度为40000个/mL的细胞200μL，在合适培养条件下，将对照组细胞置于距离实验组细胞50cm以上的同一培养环境中，培养24h后，用4%多聚甲醛固定细胞30min，PBS缓冲液清洗3次，后用DAPI染色15min，PBS缓冲液洗3次，在激光共聚焦显微镜下拍摄，激光范围360nm～480nm。

附图2、附图5为对照组和实验组激光共聚焦结果的对比图，多次重复试验选取具有普遍代表性的对比图，图中明显可以看出0.4T稳态磁场对四种癌细胞均有明显的生长抑制作用。抑制效果A2780＞SKOV-3＞Hela＞A549，且0.4T稳态磁场对两种卵巢癌A2780、SKOV-3的增殖抑制明显强于A549和Hela。

实施例3

一种抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带，包括磁场组和束腹带，如附图1所示，分为上、下束腹带1、2，上束腹带为10cm，主要为胯骨以上及腰的受力区，包括柔软束带11和弹力挂扣带12两部分；下部则为胯骨至小腹保护区，为10cm，为双层柔软设计，夹层中在对应女性人体卵巢位置缀连有2片0.2T和16片0.2T磁片，且N极向内，产生磁场区域深度约为每个磁场组6cm，磁组距离15cm。

一种根据上述磁疗束腹带抑制卵巢癌细胞增殖的验证方法，按如下步骤：

同期复苏Hela、A549、A2780、SKOV-3四种细胞，同一培养环境中，分别传3代细胞，使细胞生长增殖趋于稳定。然后传入四分皿，传代时，对所传代细胞严格计数，确保四种细胞的传代浓度及生长活力。分为两组，分别是对照组和0.2T稳态磁场N极培养组，四分皿每格传入浓度为40000个/mL的细胞200μL，在合适培养条件下，将对照组细胞置于距离实验组细胞50cm以上的同一培养环境中，培养24h后，用4%多聚甲醛固定细胞30min，PBS缓冲液清洗3次，后用DAPI染色15min，PBS缓冲液洗3次，在激光共聚焦显微镜下拍摄，激光范围360nm～480nm。

附图2、附图6为对照组和实验组激光共聚焦结果的对比图，多次重复试验选取具有普遍代表性的对比图，图中可以看出0.2T稳态磁场对四种癌细胞均有一定的增殖抑制作用。

实施例4

一种抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带，包括磁场组和束腹带，如附图1所示，束腹带分上下两部分，上部长为20cm，主要为胯骨以上及腰的受力区，包括柔软束带和弹力挂扣带两部分；下部则为胯骨至小腹保护区，为14cm，为双层柔软设计，夹层中在对应女性人体卵巢位置缀连有2片0.6T和12片0.2T磁片，且N极向内，产生磁场区域深度约为每个磁场组6cm，磁组距离12cm。

由附图2、附图3、附图5和附图6对比可知，稳态磁场强度越高对卵巢癌的抑制效果越好，又考虑到磁场强度太大可能造成的不便，所以磁疗束腹带设计以0.6T磁片为主，外周加0.2T磁片为辅，磁场形态呈辐射状，中心0.6T稳态磁场防治，边缘0.2T稳态磁场强化磁疗效果。

Claims (5)

1.一种抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带，包括磁场组和束腹带，其特征在于，

所述的束腹带分上下两部分，上部长为5-25cm，为胯骨以上及腰的受力区，包括柔软束带和弹力挂扣带两部分；下部则为胯骨至小腹保护区，为3-15cm，为双层柔软设计，夹层中在对应女性人体卵巢位置缀连有磁片，且N极向内，产生磁场区域深度为每个磁场组6cm，根据不同身材，所述的磁组距离可进行微调整。

2.根据权利要求1所述抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带，其特征在于，所述的磁场组为稳态磁场，由2片0.2T-0.6T和12-18片0.2T-0.6T磁片组成，且N极向内，两个磁场区分别对应左右两卵巢的位置。

3.根据权利要求2所述抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带，其特征在于，以0.6T磁片为主，外周加0.2T磁片为辅，磁场形态呈辐射状，中心0.6T稳态磁场防治，边缘0.2T稳态磁场强化磁疗效果。

4.一种根据权利要求1至3之任一项所述磁疗束腹带抑制卵巢癌细胞增殖的验证方法，其特征在于，包括如下步骤：

同期复苏人宫颈癌细胞（Hela）、人肺癌细胞（A549）、人卵巢癌细胞（A2780）、人卵巢癌细胞（SKOV-3）四种细胞，同一培养环境中，分别传3代细胞，使细胞生长增殖趋于稳定，然后传入四分皿，其中，传代时，对所传代细胞严格计数，确保四种细胞的传代浓度及生长活力，分为对照组和实验组，实验组为0.2T、0.4T、和/或0.6T稳态磁场N极培养组，四分皿每格传入浓度为40000个/mL的细胞200μL，在合适培养条件下，将对照组细胞置于距离实验组细胞50cm以上的同一培养环境中，培养24h后，用4%多聚甲醛固定细胞30min，PBS缓冲液清洗3次，然后，用荧光染料DAPI染色15min，PBS缓冲液洗3次，在激光共聚焦显微镜下拍摄，激光范围360nm～480nm；

同时，传入96孔板，分控制组和实验组，传代浓度均为3000个/mL，每孔100μL，每种细胞6个复孔，对照组远离实验组，在同一培养环境中培养24h后，每孔加入2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐（CCK-8）指示剂10μL，继续按照各自条件孵育4h至孔中液体变为橙色时用酶标仪检测，记录结果并进行统计学分析。

5.根据权利要求4所述抑制卵巢癌细胞增殖的磁疗束腹带，其特征在于实验组外加梯度稳态磁场，强度分别为0.2T、0.4T、0.6T。