CN109984997A

CN109984997A - 甲酸注射液及其在治疗心脑血管疾病中的应用

Info

Publication number: CN109984997A
Application number: CN201910276619.8A
Authority: CN
Inventors: 王玉璞
Original assignee: Gansu Yupu Cancer And Cardiovascular Disease Research Institute
Current assignee: Gansu Yupu Cancer And Cardiovascular Disease Research Institute
Priority date: 2019-04-08
Filing date: 2019-04-08
Publication date: 2019-07-09

Abstract

本发明提供了一种甲酸注射液及其在治疗心脑血管疾病中的应用。以0.1‑0.6%的硝酸铵注射液为载体，加入80‑200ppm的甲酸则为甲酸注射液。其通过静脉滴注给药，可用于治疗高血压、高血脂、动脉硬化等心脑血管疾病。药理学试验表明，本发明甲酸注射液的治病机理为：将一个17碳以上的硬脂肪酸化解成2个或2个以上的软脂肪酸，从而可以治疗由硬脂肪酸及其盐类引起的一系列心脑血管疾病。本发明采用性质稳定的硝酸铵注射液为载体，且利用其在人体湿度和温度发生变化时，药代动力学曲线也会发生变化，用以迎合人体旋转酶和引发酶的活性规律，可以防止药物毒副作用的发生，帮助负载的治疗药物发挥更有效作用的特点，使得甲酸注射液药理作用强，具有良好的药用前景。

Description

甲酸注射液及其在治疗心脑血管疾病中的应用

技术领域

本发明属于医药制剂技术领域，涉及一种甲酸注射液，本发明同时还涉及该甲酸注射液在治疗心脑血管疾病中的应用。

背景技术

硝酸铵为无色斜方或单斜晶体，极易溶于水，工业上由硝酸与氢氧化铵作用制得，通常用于制造炸药、烟火、冷冻剂、氧化氮吸收剂、无碱玻璃等。公开号为CN 1292266的中国发明专利提供了硝酸铵的新用途，即其在制药、食品和保健品中的应用，尤其是硝酸铵注射液在制药中的应用。该硝酸铵注射液由分析纯硝酸铵溶于注射用水，然后经过滤、灌装、密封、消毒制备而成，急性和长期毒性试验未见任何毒副作用，具有清除人体血液杂质，降低血脂，增强人体细胞活性的作用，能够抗人体衰老，治疗心脑血管疾病。

甲酸又名蚁酸，为无色透明液体，能与水、乙醇、乙醚、甘油以任意比例混溶。其呈强酸性，可以作为强还原剂使用，在动植物体中具有一定含量。在化学工业中，甲酸常被用于橡胶、医药、染料、皮革制造中。但其在医药领域的应用主要是作为溶剂使用，而将其单独进行药物制剂用于治疗疾病的作用尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种甲酸的医药新用途，即提供一种甲酸注射液及其在治疗心脑血管疾病中的应用。

本发明中各溶液的百分浓度均以g/100ml计。

一、甲酸注射液的制备及使用

以0.1-0.6%的硝酸铵注射液为载体，加入80-200ppm的甲酸则为本发明的甲酸注射液，记为降压注射液。具体制备方法为：采用CN 1292266A中实施例1的方法制备得到0.1-0.6%的硝酸铵注射液，然后取分析纯甲酸溶于该硝酸铵注射液中，使其浓度为80-200ppm，最后经常规的过滤、灌装、密封、消毒工序后即得。

作为本发明技术方案的优选，上述甲酸注射液为以0.1-0.2%的硝酸铵注射液为载体，加入80ppm的甲酸制备而成的注射液，或以0.3%的硝酸铵注射液为载体，加入120ppm的甲酸制备而成的注射液，或以0.4%的硝酸铵注射液为载体，加入160ppm的甲酸制备而成的注射液，或以0.5-0.6%的硝酸铵注射液为载体，加入200ppm的甲酸制备而成的注射液。

本发明甲酸注射液采用静脉滴注方式给药。

本发明的甲酸注射液可以用于治疗高血压、高血脂、动脉硬化、血栓、梗塞、脉管炎、左心室肥厚或脂肪肝中的一种或几种心脑血管疾病。

二、甲酸注射液在治疗心脑血管疾病方面的药理试验

以下试验均分为5组进行，分别是：0.3%的硝酸铵注射液为阴性对照组，0.9%生理盐水为空白对照组，0.1%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为80ppm的注射液为低剂量治疗组，0.3%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为120ppm的注射液为中剂量治疗组，0.6%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为200ppm的注射液为高剂量治疗组。

1、家兔血检试验

取本申请人兔场繁殖的平均体重为2±0.1Kg 的8月龄公兔10只，每组2只。各组输液前抽第1次血，然后每日静脉滴注药品50±5mL，连续输液10日，第11日抽第2次血，结果如表1所示（测定结果为2只的平均值）。表中结果说明甲酸注射液具有治疗高血脂、血栓、梗塞以及脂肪肝的作用，且以中剂量治疗组效果最佳。

表1 家兔血检试验结果

2、抗氧化试验

取本申请人兔场繁殖的平均体重为2±0.1Kg 的8月龄公兔15只，每组3只。各组输液前抽第1次血，然后每日静脉滴注药品50±5mL，连续输液10日，第15日抽第2次血，结果如表2所示（测定结果为3只的平均值）。表中结果显示甲酸注射液具有抗氧化的作用，可以用于治疗高血压、高血脂、动脉硬化、血栓、梗塞、脉管炎、左心室肥厚和脂肪肝等心脑血管疾病。

表2抗氧化试验结果

三、甲酸注射液的静脉滴注适用性试验

以下试验中所述家兔为大耳白家兔，由中国农科院兽医研究所提供。生理盐水的浓度为0.9%，供试品为0.3%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为120ppm的注射液。

1、溶血试验

取家兔一只自心脏取血6mL，置烧杯中，用竹签搅拌去除纤维蛋白，然后将血移入两只刻度离心管内，每只离心管加入生理盐水5mL，混匀后，离心5min（2500r/min），去除上清液，再加生理盐水混匀离心，反复洗4次，至上清夜无色透明，将所得红细胞按其容积，用生理盐水稀释成2%的混悬液备用。

取试管7支，编号排列于试管架上，按表3加入各种溶液，第6管不加供试品溶液，作为空白对照管，第7管仍不加供试品溶液，并用蒸馏水代替生理盐水，作为溶血的阳性对照管，将各管摇匀，在37℃水浴中保温，观察记录不同时间供试品对红细胞的影响，结果见表4。

表3 各种溶液比例

表4 供试品对红细胞的影响^*

上述结果显示，经试验观察，整个试验过程未见溶血和凝集反应，1-6号试管在1小时后未出现溶血现象，表明其适合作静脉注射。因此，本实验表明本发明的甲酸注射液在静脉注射时不会出现溶血反应。

2、血管刺激性试验

取家兔三只，体重2.0-2.7kg，雌雄兼用，每日分别给兔右耳静脉注射供试品4.0mL/Kg三次，于第四天以左耳为对照，肉眼观察右耳注射部位血管的差异，然后处死家兔。在注射部位下左右耳相同部位取材做病理切片观察。

对在体兔耳血管肉眼观察，可见给药兔耳血管较未给药血管明显，未见组织变性或坏死等显著刺激反应。病理切片用He染色法，置于10×40倍显微镜下观察。未给药兔耳静脉组织正常，给药兔耳静脉血管壁内皮层、内皮细胞和纤维组织正常，但与未给药兔耳静脉血管壁内皮层比较有轻度增厚。由肉眼观察和病理切片观察结果表明，本发明的甲酸注射原液对静脉血管壁内皮层有轻度刺激。

四、甲酸注射液的急性毒性实验

（1）药物：0.3%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为120ppm的注射液，经水浴浓缩至原注射液浓度的40倍备用。

（2）实验动物：昆明种小白鼠，体重18-20g，兰州生物制品所动物室提供。

（3）实验方法与结果

取昆明种小白鼠30只，雌雄各半，随机分为3组，通过常规的预试实验得出最大致死量为10mL/Kg，最小致死量为5mL/Kg，因此由10mL/Kg开始，按1:0.75的比例用注射用水等比稀释，分别给3组小鼠于上午8时一次性尾静脉注射0.25mL/10g，然后连续观察7天，记录逐日的小鼠毒性反应及死亡数。小鼠死亡仅发生在当日，用改进寇氏法（徐叔云等主编《药理实验方法学》，北京人民卫生出版社）计算小鼠的半数致死量，结果见表5。

表5 小鼠尾静脉注射给药的急性毒性

i=0.125

LD₅₀=log^-1[X_m-i(∑p-0.5)]=7.4989 mL/Kg

LD₅₀的95%可信限=9.1544-6.1428 mL/Kg

LD₅₀的平均可信限=7.4989 ±1.5058 mL/Kg

上述结果表明，本药小鼠静脉注射的半数致死量为7.4989 mL/Kg，相当于原甲酸注射液300mL/Kg。

三、甲酸注射液的形状、鉴别及检查试验

本发明的甲酸注射液（0.3%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为120ppm的注射液）由兰州市药品监督检验所检定证明符合《中国药典》和《中药注射液研制指导原则》中有关注射剂的相关规定，具体试验操作如下：

1、性状

本发明甲酸注射液为无色或微黄色的澄明液体。

2、鉴别

（1）取本品数滴，点于滤纸上，晾干。滴加茚三酮试液，加热显蓝紫色。

（2）取本品按照分光光度法测定，在303±3nm波长处有最大吸收。

3、检查

pH值应为3.5-5.5（《中药注射液研制指导原则》）。

蛋白质取本品1mL，加新鲜配制的含30%磺基水杨酸试液1mL，混合放置5分钟不得出现浑浊（《中药注射液研制指导原则》）。

鞣质取本品1mL，加新鲜配制的含1%鸡蛋清的生理盐水5mL，放置10min，不得出现浑浊和沉淀（《中药注射液研制指导原则》）。

重金属应在百万分之五以下（《中药注射液研制指导原则》）。

砷盐应在百万分之二以下（《中国药典》）。

草酸盐取本品2mL，加3%氯化钙试液2-3滴，放置10min，不得出现浑浊或沉淀（《中药注射液研制指导原则》）。

钾离子应在1.0g/mL以下（《中国药典》）。

热原注射剂量为10mL/Kg，应符合药典中有关注射剂热原的规定（《中国药典》）。

无菌应符合药典中有关注射剂无菌的规定（《中国药典》）。

澄明度按卫生部标准WS-362-(B-121)澄明度检查细则和判断标准检查，应符合规定。

不溶性微粒应符合药典中有关注射剂不溶性微粒的规定（《中国药典》）。

综上，本发明的优点在于：

1、本发明甲酸注射液只能以硝酸铵注射液为载体进行使用，以其他注射液，如氯化钠注射液和葡萄糖注射液为载体使用时，会因氯化钠或葡萄糖与甲酸反生反应而产生剧毒，使实验动物死亡。而硝酸铵注射液性质稳定，只和氢氧化钠、氢氧化钾发生化学反应，与其他物质可混合存在的特性，使其具备了作为甲酸注射液载体的条件。与此同时，所述硝酸铵注射液在人体湿度和温度发生变化时，其药代动力学曲线也会发生变化，用以迎合人体旋转酶（Gyase）和引发酶（Primase）的活性规律，可以防止药物毒副作用的发生，帮助负载的治疗药物发挥更有效的作用。

2、从药理试验中可以得出，本发明甲酸注射液的治病机理为：将一个17碳以上的硬脂肪酸化解成2个或2个以上的软脂肪酸，从而可以治疗由硬脂肪酸及其盐类引起的一系列疾病。如：高血压、高血脂、动脉硬化、血栓、梗塞、脉管炎等。

3、本发明开拓了已知化合物甲酸的新的医药用途，扩大了其应用范围。

4、本发明甲酸注射液药理作用强，具有良好的药用前景。

5、本发明所用原料来源丰富、成本低廉，制备工艺简单，使用方便，无溶血反应，静脉注射使用安全。

具体实施方式

下面描述本发明的几个实施例，该实施例仅用于说明本发明，并不限制本发明的保护范围。

以下实施例所采用的甲酸、硝酸铵均为分析纯产品，购于化学试剂商店。

按照CN 1292266A中实施例1的方法，分别制备浓度为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6%的硝酸铵注射液。

实施例1

取10L 浓度为0.1%的硝酸铵注射液，加入800mg的甲酸，搅拌混合均匀后，经常规的过滤、灌装、密封、消毒工序后得到0.1%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为80ppm的甲酸注射液。将该甲酸注射液静脉滴注，可以用于治疗高血压、高血脂。

实施例2

取10L浓度为0.2g/L的硝酸铵注射液，加入800mg的甲酸，搅拌混合均匀后，经常规的过滤、灌装、密封、消毒工序后得到0.2%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为80ppm的甲酸注射液。将该甲酸注射液静脉滴注，可以用于治疗高血压、高血脂。

实施例3

取10L浓度为0.3%的硝酸铵注射液，加入1.2g的甲酸，搅拌混合均匀后，经常规的过滤、灌装、密封、消毒工序后得到0.3%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为120ppm的甲酸注射液。将该甲酸注射液静脉滴注，可以用于治疗动脉硬化。

实施例4

取10L浓度为0.4%的硝酸铵注射液，加入1.6g的甲酸，搅拌混合均匀后，经常规的过滤、灌装、密封、消毒工序后得到0.4%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为160ppm的甲酸注射液。将该甲酸注射液静脉滴注，可以用于治疗血栓和梗塞。

实施例5

取10L浓度为0.5%的硝酸铵注射液，加入2g的甲酸，搅拌混合均匀后，经常规的过滤、灌装、密封、消毒工序后得到0.5%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为200ppm的甲酸注射液。将该甲酸注射液静脉滴注，可以用于治疗脉管炎。

实施例6

取10L浓度为0.6%的硝酸铵注射液，加入2g的甲酸，搅拌混合均匀后，经常规的过滤、灌装、密封、消毒工序后得到0.6%的硝酸铵注射液中甲酸浓度为200ppm的甲酸注射液。将该甲酸注射液静脉滴注，可以用于治疗左心室肥厚和脂肪肝。

Claims

1.一种甲酸注射液，其特征在于：以0.1-0.6%的硝酸铵注射液为载体，加入80-200ppm的甲酸则为甲酸注射液，记为降压注射液。

2.如权利要求1所述的一种甲酸注射液，其特征在于：所述甲酸注射液为以0.1-0.2%的硝酸铵注射液为载体，加入80ppm的甲酸制备而成的注射液，或以0.3%的硝酸铵注射液为载体，加入120ppm的甲酸制备而成的注射液，或以0.4%的硝酸铵注射液为载体，加入160ppm的甲酸制备而成的注射液，或以0.5-0.6%的硝酸铵注射液为载体，加入200ppm的甲酸制备而成的注射液。

3.如权利要求1或2所述的甲酸注射液在治疗心脑血管疾病中的应用，其特征在于：所述甲酸注射液采用静脉滴注方式给药。

4.如权利要求3所述的甲酸注射液在治疗心脑血管疾病中的应用，其特征在于：所述的心脑血管疾病为高血压、高血脂、动脉硬化、血栓、梗塞、脉管炎、左心室肥厚或脂肪肝中的一种或几种。