CN108159120A - 一种中药透皮剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种中药透皮剂,所述透皮剂由包括如下体积份的原料组成:鸦胆子油1‑4份、白油4份、丙二醇2份、茶树精油1‑4份;并提供了其制备方法。与现有驱虫药物相比,本发明的中药透皮剂具有以下优点:驱虫成分为中药提取物,使用安全,不会使牲畜中毒;使用涂擦方式,直接作用于体表,驱虫效果好,给药方便,剂量容易控制;透皮剂使用后在乳汁和肉中几乎无药物残留,无休药期和弃奶期;还能够有效杀灭胃肠道线虫以及蜱、螨等外寄生虫,适于在牧区推广使用。
Description
技术领域
本发明属于兽药技术领域,具体涉及一种中药透皮剂及其制备方法。
背景技术
耗牛享有“高原之舟”的美誉,藏区牧民的衣、食、住、行、毛皮、燃料等都离不开牦牛,牦牛是青藏高原地区牧民的经济和生活支柱,对藏区经济发展的重要性不言而喻。由于传统的游牧形式,使得耗牛寄生虫病和传染病在牦牛群中危害严重。由于现有的口服和注射剂型的驱虫药给药后常引起牦牛较大的应激反应,加上牦牛的野性大给药不方便等因素使现有的驱虫药很难让牧民接受。加上牧民对耗牛寄生虫病的防控意识低,使得牦牛寄生虫病得不到很好的控制,造成严重的经济损失,也严重威胁牧民的健康。因此配制一种高效、低毒、使用方便、不需要休药期的适用于牦牛驱虫的驱虫药具有重要意义。
体外寄生虫也对耗牛造成相当大的危害,损伤牦牛皮肤,传染其他寄生虫病,严重影响牦牛的生产性能,造成巨大经济损失。牛皮蝇蛆病是由体外寄生虫牛皮蝇的幼虫寄生在耗牛的皮肤中引起的,在青海省广泛流行,每年到了高发季节对牦牛生产性能危害严重,平均感染率达64.78%,青海省大通种牛场牦牛的牛皮蝇蛆病感染率达95.40%-99.14%。据青海省家畜寄生虫病调查研究工作统计,在青海危害耗牛的主要寄生虫病是牛皮蝇蛆病、胎生网尾线虫病和莫尼茨绦虫病。仅牛皮蝇蛆病造成的产奶量减少,产肉量下降,死亡率增高以及皮张制革的损失高达4520.67万元之巨。
牦牛牛皮蝇蛆病在我国牦牛产区广泛发生,危害严重。目前,防治牦牛牛皮蝇蛆病的药物有拟除虫菊酯、有机磷和阿维菌素、伊维菌素等大环内酯类药物。在这些药物中有的毒性很大,如拟除虫菊酯和有机磷,当通过体表喷洒或者涂抹等给药时,剂量不易掌握,稍不注意会造成动物中毒,在实际生产中也常有使用不当引起中毒的报道,影响了这些药物在藏区的使用。阿维菌素、伊维菌素等大环内酯类药物可以有效驱除牛皮蝇幼虫,但目前给药方法主要是口服和注射,口服剂量牧民不易掌握,且过瘤胃会影响这些药物的效用,由于牦牛的野性很大,注射剂虽然也能有效驱杀牦牛牛皮蝇幼虫,但操作起来费时费力,在实际生产中应用很困难,从而影响了牦牛牛皮蝇蛆病的防治效果,且阿维菌素、伊维菌素这些药物由于在奶中分布较多,用药时要有一定的弃奶期。
发明内容
本发明的第一个目的是为了克服上述缺陷,提供一种中药透皮剂。
本发明的第二个目的是提供上述透皮剂的制备方法。
本发明的第三个目的是提供上述透皮剂在防治牛羊体外寄生虫病中的应用。
本发明的目的通过以下技术方案来具体实现:
一种中药透皮剂,所述透皮剂由包括如下体积份的原料组成:
鸦胆子油1-4份、白油4份、丙二醇2份、茶树精油1-4份。
作为优选方案,所述透皮剂由如下体积份的原料组成:
鸦胆子油3份、白油4份、丙二醇2份、茶树精油1份。
进一步的,所述白油为医用级,丙二醇为医药级。
上述中药透皮剂的制备方法,所述方法包括如下步骤:
(1)按体积份称取鸦胆子油1-4份、白油4份、丙二醇2份;
(2)将步骤(1)称取的鸦胆子油、白油和丙二醇混合,加热、搅拌,使其充分溶解;
(3)步骤(2)得到的混合料降温,加入按体积份计的茶树精油1-4份,搅拌混合均匀,即得。
进一步的,所述步骤(2)中,加热的温度为87℃,搅拌速率为600r/min,搅拌时间为10min。
进一步的,所述步骤(3)中,所述混合料降温至30℃后加入茶树精油,搅拌时间为10min。
上述中药透皮剂用于防治牛羊体外寄生虫。
鸦胆子油(Bruceae Fructus oil,BFO)是从苦木科鸦胆子属植物鸦胆子成熟果实中提取而得的油脂类物质,主要存在于鸦胆子仁中。鸦胆子油是鸦胆子在成熟过程中由糖类转化而成,一般呈球状脂类体存在于籽仁细胞中,是由多种甘油三酯,少量游离脂肪酸以及一些脂溶性物质组成的混合物。经试验测定鸦胆子的含油率为20%左右,含仁率为36.1%,种仁含油约56.23%,油中不皂化物1.36%。其脂肪酸组成为:油酸81.87%、亚油酸3.37%。八十年代初起,国内学者对鸦胆子油抗肿瘤活性及效果做了大量研究,证实鸦胆子油中油酸和亚油酸为抗肿瘤活性成分,并开发出鸦胆子油乳辅助治疗癌症,现已投入临床应用。现代药理学研究表明BFO具有抗癌、抗病原体、抗氧化、抗胃溃疡等作用。临床上将其制成10%BFO乳剂,作为辅助抗肿瘤药物,用于治疗消化系统肿瘤。
植物精油是目前研究最活跃的广谱抗寄生虫药,这类药物在牛奶中分布系数最低,对牛、羊的体内外寄生虫均能有效防治,用于泌乳牛后无需休药期。由于牦牛奶对藏族牧民生活至关重要,因此,植物精油用于牦牛驱虫具有很大的优势。桃金娘科白千层属的一些植物中含有丰富的互叶白千层油。茶树精油是用互叶白千层树的新鲜枝叶经过水蒸汽蒸馏而得到的。茶树精油呈无色或浅黄色,气味怡人,由上百种物质组成,成分十分复杂,其主要成分有松油烯-4-醇、α-松油醇、1,8-桉叶油素、γ-松油烯、对异丙基甲苯、α松油烯、芳樟醇等,其中松油烯-4-醇的含量约为30%-45%,经分馏提纯,其纯度可达99%以上。
透皮给药是指在皮肤表面给药,使药物穿过皮肤进入血液或者局部组织产生全身或者局部治疗作用的一种给药方式,相应的剂型为透皮剂。透皮给药在我国中医中有着悠久的历史,我国传统的洗剂、搽剂、糊剂、油膏剂就属于透皮剂的范畴,但由于相关技术的限制,传统的透皮剂选择性和专一性差,药的透皮率以及透皮速率都比较低,治疗作用有限,常需要长时间的用药和反复用药,因此使用范围不是很广泛。随着技术的改进,发展成了现代的透皮剂,如膏剂、霜剂等,用于兽医临床的常为绕拨剂、涂抹剂等。
本发明透皮剂的中药成分为鸦胆子油和茶树精油,加入白油和丙二醇,产品用于牦牛比较安全,驱杀牛皮蝇幼虫效果良好,且涂擦剂使用方便,有效期长,使用后牲畜的乳中以及肉中几乎无药物残留,牧民易于掌握,可作为牦牛牛皮蝇幼虫病防治的首选药。同时,由于植物精油驱虫谱较广,不仅驱杀牛皮蝇幼虫,也能够有效杀灭胃肠道线虫以及蜱、螨等外寄生虫,适宜于在广大牧区,特别是牦牛养殖地区普及和推广使用。
本发明具有以下有益效果:
与现有驱虫药物相比,本发明的中药透皮剂具有以下优点:
(1)驱虫成分为中药提取物,使用安全,不会使牲畜中毒;
(2)使用涂擦方式,直接作用于体表,驱虫效果好,给药方便,剂量容易控制;
(3)透皮剂使用后在乳汁和肉中几乎无药物残留,无休药期和弃奶期;
(4)还能够有效杀灭胃肠道线虫以及蜱、螨等外寄生虫,适于在牧区推广使用。
附图说明
图1为鸦胆子苦醇对照品(A)、空白样品(B)、鸦胆子油(C)和本发明中药透皮剂(D)的HPLC图。
具体实施方式
为了更加突出本发明的目的、技术方案及优点,结合以下实施例,对本发明进行进一步说明,但并不因此将本发明限制在实施例范围之内。
一、鸦胆子油的提取
1材料与方法
1.1材料与溶剂
鸦胆子(市售);溶剂:石油醚(沸程60-90℃),分析纯。
1.2主要仪器
恒温水浴锅、索氏提取装置、旋转蒸发仪、烘箱、分析天平、粉碎机、分离筛等。
1.3鸦胆子的前处理
取市售鸦胆子置烘箱,90℃恒温2h,干燥后取出,用粉碎机粉碎,然后过20目筛分,备用。
1.4鸦胆子油的提取
精确称量一定量过筛后的鸦胆子粉末,用滤纸包好,将滤纸包放入索氏提取器的浸提管内,连接已恒重的接受瓶,加入石油醚,于90℃水浴加热回流6h,然后用旋转蒸发仪回收溶剂,将油脂中的溶剂赶尽,使接受瓶恒重,称量,计算鸦胆子油得率。
1.5鸦胆子油残余量的计算
精确称取一定量脱脂后的鸦胆子粉末,参照方法1.4提取鸦胆子油,最后称量计算粉末中残余的鸦胆子油量。
2结果
索氏提取法提取鸦胆子油,出油率为20.4%,萃取时间6h,固液比g/g为1:5,提取温度90℃,因石油醚对色素也可溶解,故鸦胆子油呈绿色。对脱脂鸦胆子进行二次提取时,得到的出油率为0.57%,结果表明上述提取方法对鸦胆子油的提取率达到了97.28%,己基本提取完全。
二、中药透皮剂的制备及实验
1中药透皮剂的制备
1.1材料
原料鸦胆子油,自提(方法采用上述的索氏提取法);茶树精油,天津中澳嘉喜诺生物科技有限公司;丙二醇,医药级,兰州三金化工有限责任公司;白油,医用级,南京新源化工有限公司。
根据鸦胆子油、茶树精油的理化特性、促渗特性、生物学特性等,选择鸦胆子油、茶树精油为核心成分,同时也是皮肤渗透剂。
1.2中药透皮剂的制备
称取鸦胆子油1-4份(V/V)、白油4份(V/V)、丙二醇2份(V/V)放入烧杯中,将其混合并加热至87℃,在机械搅拌(600r/min)10min,使其充分溶解,等温度降至30℃时,加入茶树精油1-4份(V/V),搅拌10min,使其混匀即得中药透皮剂。中药透皮剂中鸦胆子油和茶树精油的配比见表1。
表1 精油的配比(V/V)
试验编号 | 鸦胆子油 | 茶树精油 |
1 | 2 | 2 |
2 | 3 | 1 |
3 | 1 | 3 |
4 | 0 | 4 |
5 | 4 | 0 |
有效成分含量 | 油酸:98% | 松油烯-4-醇:30-48%,α-松油烯:10-28 |
2体外透皮实验
2.1离体鼠皮的制备
将6周龄的昆明小白鼠,断颈处死,用10wt%硫化钠溶液去毛,剥离腹部皮肤,除去皮下脂肪选取完整皮肤用生理盐水洗净,浸于生理盐水中,4℃保存备用。
2.2透皮实验方法
将备用的昆明小白鼠的皮肤固定在YB-P6智能透皮试验仪的扩散池与接受池之间,皮肤内层面向接受池。在接受池中充满乙腈作接受液(排除里面的气泡,使接受液与皮肤紧密接触),然后将按上述表1配比制得的透皮剂样品充满整个扩散池。接受液温度维持30±0.5℃,电磁搅拌器转速维持在600rpm/min。分别在第1、2、4、6、8、10小时取0.5mL接收液,同时用乙腈将接受池补满。在同样的条件下,依次对上述5个透皮剂样品做透皮实验。
3测定
3.1HPLC定量测定方法的建立
(1)色谱条件:色谱柱为Symmetry C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(5:5),体积流量为0.8mL/min,柱温为(25±5)℃,进样量40μL,检测波长为220nm。
(2)鸦胆子苦醇对照品溶液的配制:精密称取鸦胆子苦醇对照品4mg,溶于10mL甲醇,配制成0.4mg/mL鸦胆子苦醇的对照品储备液。
(3)线性关系考察:精密吸取鸦胆子苦醇对照品储备液,用甲醇稀释至质量浓度分别为0.4、0.2、0.1、0.05、0.025mg/mL,分别进样40μL,记录色谱图及峰面积。以质量浓度为横坐标(X),峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归,得鸦胆子苦醇标准曲线方程:Y=1×107X+987534,r=0.9998,表明鸦胆子苦醇在0.025-0.4mg/mL线性关系良好。
3.2样品HPLC谱图
(1)鸦胆子油BFO溶液的配制:精密称取按上述索氏提取的5gBFO于10mL量瓶中,甲醇定容至刻度,得0.5g/mL的鸦胆子油BFO供试品溶液。
(2)按照3.1的色谱条件对鸦胆子苦醇对照品(A)、空白样品(B)、鸦胆子油BFO溶液(C)及本发明的中药透皮剂(D)进行HPLC色谱测定,谱图见表1。
4最佳处方的筛选
用3.1的色谱条件,对2体外透皮试验的样品进行色谱分析,将第10小时的峰面积带入标准曲线方程,得到第10小时的累积渗透浓度见表2,由表2结果可以得试验组2为最佳配比,以下试验均考察2组。
表2 不同配比的透皮剂的透皮效果
样品编号 | 检测浓度μg/mL |
1 | 0.35 |
2 | 0.43 |
3 | 0.38 |
4 | 0.18 |
5 | 0.20 |
5稳定性试验
取制备好的中药透皮剂,于室温(25℃)条件下贮存100d,结果无分层现象。
6家兔皮肤刺激实验
6.1实验方法
动物分组及实验前处理:取健康白色家兔16只,普通级,体重2.0~2.5kg,公母各半,实验前饲养5d并观察饮食和行为,若正常则按性别、体重随机分为4组,每组4只。一组给药前24h将家兔背部脊柱两侧被毛剪去,随后用8vt%硫化钡脱毛,脱毛区皮肤以消毒针头划成小“#”形,至渗血为度,作为破损皮肤组,另一组为完整皮肤组,两组都设赋形剂对照组。
给药方法:两组动物都在右侧脱毛区涂以本发明的透皮剂2g,左侧涂赋形剂(制备方法与透皮剂相同,只是没有加鸦胆子油和茶树精油)2g作对照。给药后局部覆盖纱布和保鲜薄膜,并以胶布固定,保持药物与皮肤接触4h后去除纱布和保鲜薄膜,然后以温水洗去残留药物。每天给药1次,连续5d。完整皮肤组以同样方法给药。每次去除药物后1h及再次给药前观察皮肤状态。末次给药及去除药物后1、24、48和72h再次观察并记录涂抹部位有无红斑和水肿及恢复情况,其评价标准见表3、表4。
表3 皮肤刺激反应程度评分标准
表4 皮肤刺激强度评价
分值 | 评价 |
0.0~0.5 | 无刺激性 |
0.5~2.0 | 轻度刺激性 |
2.0~6.0 | 中度刺激性 |
6.0~8.0 | 强度刺激 |
6.2结果
通过实验给药和观察得知,完整皮肤组在每次去除药物后1h和再次给药前以及末次给药后1、24、48和72h,肉眼观察均无明显红斑、水肿等皮肤刺激反应症状。破损皮肤组给药后第1d给药侧和对照侧均可见划伤部位有轻微红肿,至第4天完全恢复正常,其后每次去除药物后1h及再次给药前以及末次给药后1、24、48和72h,肉眼观察均无明显红斑、水肿等皮肤刺激性反应症状,各项分值均为零。
三、中药透皮剂驱杀牦牛牛皮蝇幼虫的应用
1材料与方法
1.1药物
药物成分选用第二部分1.2第2组配比的透皮剂,规格为10mL/瓶,每瓶含鸦胆子油0.3mL。
1.2试验动物
山南地区某牦牛养殖户,共饲养不同年龄阶段的牦牛50头,牦牛营养状况一般,经摸背法检查,牦牛牛皮蝇皮绳蛆感染率为100%。
1.3试验设计
从牦牛群中随机挑选年龄3-4岁牦牛20头,体重150-200kg,分为试验组和对照组,每组各10头,并作标记。对照组牦牛不给药,试验组牦牛给予中药透皮剂。给药方法:分开牦牛脊柱一侧的被毛,药物涂布于皮肤上。操作中要使药物的瓶口紧贴皮肤,均匀涂布,勿使药物滴撒。
1.4驱杀效果判定
给药后观察牦牛2d,主要查看试验牦牛的健康状况及精神、采食、饮水、排粪和牦牛背部舔舐情况等临床变化,并详细记录。用药1个月后采用牦牛背部触摸临床检查方法,逐个检查背部有无皮下瘤疱,观察皮肤虫孔,并详细记录瘤疱数,以判定牦牛牛皮蝇幼虫感染强度和药物驱杀疗效。
1.5数据处理
所有数据均用平均值±标准差(X±SD)表示,并用t检验进行分析。
2结果
2.1试验期间牦牛状况观察
经临床观察,试验组牦牛的精神状况、采食、饮水、排粪等均正常。涂药部位皮肤无红、肿以及皮损等异常现象。试验结束时,牦牛健康状况良好,膘情较对照组稍有改善,而对照组的牦牛体况相对稍差。
2.2透皮剂对牦牛牛皮蝇幼虫的防治效果
给药1个月后,逐个触摸检查试验牦牛背部,发现试验组牦牛背部瘤疱和虫孔显著减少,牛皮蝇幼虫死亡较多,皮损较小,而对照组牦牛的背部瘤疱和虫孔无明显变化,牛皮蝇幼虫发育良好,皮损范围大。结果参见表5。
表5 试验前后牦牛皮下牛皮蝇幼虫瘤疱数目
组别 | 用药前 | 用药后 |
对照组 | 24±3.1* | 24±2.2* |
试验组 | 22±2.0* | 3±1.0** |
注:*表示同组实验前后差异不显著;**表示同组实验前后差异显著。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种中药透皮剂,其特征在于,所述透皮剂由包括如下体积份的原料组成:
鸦胆子油1-4份、白油4份、丙二醇2份、茶树精油1-4份。
2.根据权利要求1所述的中药透皮剂,其特征在于,所述透皮剂由如下体积份的原料组成:
鸦胆子油3份、白油4份、丙二醇2份、茶树精油1份。
3.根据权利要求1或2所述的中药透皮剂,其特征在于,所述白油为医用级,丙二醇为医药级。
4.权利要求1-3任一项所述的中药透皮剂的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1)按体积份称取鸦胆子油1-4份、白油4份、丙二醇2份;
(2)将步骤(1)称取的鸦胆子油、白油和丙二醇混合,加热、搅拌,使其充分溶解;
(3)步骤(2)得到的混合料降温,加入按体积份计的茶树精油1-4份,搅拌混合均匀,即得。
5.根据权利要求4所述的中药透皮剂的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,加热的温度为87℃,搅拌速率为600r/min,搅拌时间为10min。
6.根据权利要求4所述的中药透皮剂的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,所述混合料降温至30℃后加入茶树精油,搅拌时间为10min。
7.权利要求1所述的中药透皮剂用于防治牛羊体外寄生虫。
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杨乃华: "《自然疗法大全》", 31 July 2016, 中医古籍出版社 * |
黄晓敏等: "茶树精油对铜绿假单胞杆菌生物膜的抑制作用", 《现代预防医学》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN109568474A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-04-05 | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 | 治疗羊口疮的制剂及其制备方法 |
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