CN109893342A - 一种颅脑外伤用敷料及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种颅脑外伤用敷料及其制备方法，所述颅脑外伤用敷料由外至内依次包括：固定层、背衬层、间隔布置于背衬层上的吸水层和药物层，所述药物层包含山奈酚‑3‑O‑鼠李糖苷，所述药物层基质选自：海藻酸盐凝胶、纤维素类凝胶、壳聚糖凝胶等。本发明颅脑外伤用敷料具有促进伤口愈合的效果，当药物层基质为包含壳寡聚糖的壳聚糖凝胶时促进伤口愈合的效果更优。

Description

一种颅脑外伤用敷料及其制备方法

技术领域

本发明属于药物领域，具体涉及一种颅脑外伤用敷料及其制备方法。

背景技术

颅脑外伤是指外界暴力直接或间接作用于头部造成的损伤，包括了头皮损伤、颅骨损伤和脑损伤，按照颅内容物是否与外界连通又分为闭合性颅脑损伤和开放性颅脑损伤。颅脑外伤死亡率在创伤性死因中高居首位，在创伤性死亡中占比超过了50％。

由于头皮的特殊生理构造，导致了头皮撕裂后具有出血量大，伤口张开等特点，且易于引起继发性感染，延缓伤口的愈合，严重者可引起颅内感染，危及患者的生命健康。

医用敷料作为覆盖伤口的医用材料，可以代替皮肤起到暂时的屏障作用，控制伤口的渗出液、阻挡外界病原菌接触伤口、止血、填充伤口、促进伤口，目前在伤口处理中的应用越来越广泛。按照医用敷料材质的种类，目前已有的医用敷料包括了纤维素类医用敷料、海藻酸盐类医用敷料、壳聚糖类医用敷料、氨酯薄膜类医用敷料、泡沫类医用敷料、水胶体类医用敷料、水凝胶类医用敷料、药用类医用敷料等。目前的医用敷料主要作用集中于隔绝伤口、为伤口提供适宜的环境等，虽然壳聚糖类基质具有促进组织再生和皮肤胶原纤维生长的效果，但相关效果仍然较弱，现有的药用类医用敷料也主要集中于在医用敷料中添加抗菌类成分，如银离子，可以一定程度上抑制伤口的继发性细菌感染，从而间接促进伤口的愈合。目前尚未有针对颅脑外伤的医用敷料，特别是可促进颅脑外伤快速愈合的医用敷料的报道。

山奈酚-3-O-鼠李糖苷，又称阿福豆苷，阿福豆碱，属于黄酮类化合物，现代药理学研究显示了山奈酚-3-O-鼠李糖苷具有抗氧化、保肝、抗血栓等多种活性，但未见将山奈酚-3-O-鼠李糖苷应用于颅脑外伤的报道。

本发明即是致力于提供一种颅脑外伤用敷料，特别是可促进颅脑外伤快速愈合的医用敷料。

发明内容

本发明的目的是提供一种颅脑外伤用敷料及其制备方法。

一方面，本发明提供一种颅脑外伤用敷料，所述颅脑外伤用敷料由外至内依次包括：固定层、背衬层、间隔布置于背衬层上的吸水层和药物层。

优选的，所述固定层为带装结构或帽形结构，所述药物层为正方形、长方形、圆形或圆环形，所述吸水层填充于背衬层上药物层以外的区域。

更优选的，所述药物层包含山奈酚-3-O-鼠李糖苷；最优选的，所述药物层以山奈酚-3-O-鼠李糖苷为唯一活性成分。

优选的，所述山奈酚-3-O-鼠李糖苷占药物层总重量的5-30％；更优选的，所述山奈酚-3-O-鼠李糖苷占药物层总重量的8-20％；最优选的，山奈酚-3-O-鼠李糖苷占药物层总重量的15％。

优选的，所述药物层的基质为：海藻酸盐凝胶、纤维素类凝胶、壳聚糖凝胶；更优选的，所述药物层基质为壳聚糖凝胶。

优选的，所述壳聚糖凝胶包含壳寡聚糖，更优选的，所述壳寡聚糖平均分子量<3200Da，脱乙酰度大于80％；最优选的，所述壳寡聚糖平均分子量为2000Da,脱乙酰度为91.6％。

优选的，所述壳聚糖凝胶中壳寡聚糖的含量占壳聚糖凝胶的5-20％；更优选的，所述壳聚糖凝胶中壳寡聚糖的含量占壳聚糖凝胶的8-15％；最优选的，所述壳聚糖凝胶中壳寡聚糖的含量占壳聚糖凝胶的10％。

任选的，所述药物层中还包含抗菌剂、镇痛剂；优选的，所述抗菌剂选自：甲硝唑、环丙沙星、头孢菌素、氨基糖类抗菌药；所述镇痛剂选自：普鲁卡因、利多卡因。

另一方面，本发明提供了一种颅脑外伤用敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备药物层：按量称取山奈酚-3-O-鼠李糖苷及任选抗菌剂、镇痛剂、壳寡聚糖，取适量纯净水，制备药物层基质溶液，然后加入山奈酚-3-O-鼠李糖苷及任选抗菌剂、镇痛剂、壳寡聚糖和剩余的纯净水，搅拌均匀，静置成型后切割成所需形状，待用；

(2)制备敷料：将药物层、吸水层布置于背衬层后，将背衬层固定于固定层，灭菌后包装，即得本发明颅脑外伤用敷料。

再一个方面，本发明提供了山奈酚-3-O-鼠李糖苷在制备颅脑外伤用敷料中的用途。

再一个方面，本发明提供了包含山奈酚-3-O-鼠李糖苷、壳寡聚糖的壳聚糖凝胶在制备颅脑外伤用敷料中的用途；

优选的，所述壳寡聚糖平均分子量<3200Da，脱乙酰度大于80％；最优选的，所述壳寡聚糖平均分子量为2000Da,脱乙酰度为91.6％。

本发明有益效果

本发明提供了一种适于颅脑外伤用的敷料，所述敷料不仅依据头部外形对敷料的固定层进行了适应性改进，还针对颅脑外伤出血量大，伤口张开等特点，在敷料中布置了吸水层，有利于吸收伤口渗出液，有利于维持伤口环境，最重要的是，本发明在敷料的药物层添加了具有促进伤口愈合的山奈酚-3-O-鼠李糖苷，可明显促进颅脑外伤伤口的愈合，且山奈酚-3-O-鼠李糖苷与包含壳寡聚糖的壳聚糖凝胶所组成的药物层具有更优的促进伤口愈合的效果，可广泛应用于各型颅脑外伤的处理，促进伤口愈合。

具体实施方式

在下文中更详细地描述了本发明以有助于对本发明的理解。

实施例1：一种颅脑外伤用敷料

山奈酚-3-O-鼠李糖苷15g、平均分子量为2000，脱乙酰度为91.6％的壳寡聚糖10g、平均分子量为60000，脱乙酰度大于80％的壳聚糖10g，卡波姆2g、甘油6g、冰醋酸适量、30％NaOH适量，加纯净水至100mL，按照以下方法制备：

(1)制备药物层：按量称取山奈酚-3-O-鼠李糖苷及壳寡聚糖、卡波姆和甘油，取80mL纯净水，添加卡波姆，使之充分溶胀后添加壳聚糖及适量的冰醋酸，调节溶液pH为4.0-5.5，搅拌至壳聚糖完全溶解，添加山奈酚-3-O-鼠李糖苷、壳寡聚糖和甘油，加纯净水至100mL，搅拌均匀后，边搅拌边使用30％NaOH调节溶液的pH为6.5-7.5，静置成型后切割成所需形状，待用；

(2)制备敷料：将药物层、吸水层布置于背衬层后，将背衬层固定于固定层，灭菌后包装，即得本发明颅脑外伤用敷料。

实施例2：一种颅脑外伤用敷料

山奈酚-3-O-鼠李糖苷25g、平均分子量为60000，脱乙酰度大于80％的壳聚糖12g，卡波姆2g、甘油8g、冰醋酸适量、30％NaOH适量，加纯净水至100mL，按照实施例1方法制备，即得本发明颅脑外伤用敷料。

实施例3：一种颅脑外伤用敷料

山奈酚-3-O-鼠李糖苷15g、平均分子量为2000，脱乙酰度为91.6％的壳寡聚糖10g、环丙沙星2g、利多卡因1g、平均分子量为60000，脱乙酰度大于80％的壳聚糖10g，卡波姆2g、甘油7g、冰醋酸适量、30％NaOH适量，加纯净水至100mL，按照实施例1方法制备，即得本发明颅脑外伤用敷料

对比例1：一种包含壳寡聚糖的敷料

平均分子量为2000，脱乙酰度为91.6％的壳寡聚糖25g、平均分子量为60000，脱乙酰度大于80％的壳聚糖10g，卡波姆2g、甘油6g、冰醋酸适量、30％NaOH适量，加纯净水至100mL，按照实施例1方法制备，即得。

效果例1：山奈酚-3-O-鼠李糖苷及其与包含壳寡聚糖的壳聚糖凝胶的组合对伤口愈合的影响

1.1试验药物：

实施例1-2、对比例1的敷料，其中所述敷料的药物层均为长约2cm、宽约3cm的长方形。

1.2试验方法：

7周龄雄性SD大鼠15只，体重260-280g，单笼喂养，适应性饲养1d后，使用7％水合氯醛，以0.5mL/100g体重的剂量腹腔注射麻醉，大鼠麻醉后背部两侧备皮，备皮后，备皮区域均使用75％乙醇消毒3次，间隔1min，于两侧备皮部位中间位置，使用手术刀剥除宽约0.5cm,长约1.5cm的皮肤至筋膜层，避免伤及筋膜层，清除伤口残留血液。将手术成功的大鼠随机分为三组，具体为实施例1组、实施例2组，每组5只，各组大鼠使用相应敷料覆盖右侧伤口，使用对比例1敷料覆盖左侧伤口，并固定。每隔1天更换一次敷料，记录各组大鼠伤口愈合所需时间(小时)，其中所述伤口愈合是指结痂脱落且无再次出血，具体实验结果见表1。

1.3实验结果

表1山奈酚-3-O-鼠李糖苷及其组合对伤口愈合的效果

**与左侧愈合时间相比，P<0.01.

表1实验结果显示仅覆盖药物层为壳聚糖凝胶敷料的实施例1-2组大鼠的左侧伤口愈合时间均显著长于包含山奈酚-3-O-鼠李糖苷及其与壳寡聚糖组合的右侧伤口，显示了山奈酚-3-O-鼠李糖苷及其与壳寡聚糖的组合均具有优异的促进伤口愈合的效果，其中尤其以山奈酚-3-O-鼠李糖苷与壳寡聚糖组合的效果最为明显，相对于单独使用山奈酚-3-O-鼠李糖苷，伤口愈合时间进一步缩短了21.9％。

效果例2：山奈酚-3-O-鼠李糖苷对血管内皮细胞增殖的影响

2.1试验药物

山奈酚-3-O-鼠李糖苷、山奈酚，使用无菌PBS配制成50μg/mL，备用。

2.2试验方法

2.2.1人脐静脉内皮细胞的原代培养

脱离母体4小时以内的人脐带15-20cm，于无菌条件下，剪去钳痕，使用无菌PBS溶液冲洗3-5次，至流出液无色透明，固定一端后，于另一端内加入37℃的0.2％胶原酶，37℃下消化10min，收集消化液于离心内，并使用含10％胎牛血清的1640培养液冲洗脐静脉一次，将冲洗液与消化液合并后，1000r/min，离心10min，弃上清，加入1640培养液吹打均匀后制成5×10⁵的细胞悬液接种于细胞培养瓶中，置于37℃，5％CO₂的细胞培养箱中培养，24h后更换培养液一次，以后没隔1d更换培养液一次至细胞生长至80％融合状态。

2.2.2山奈酚-3-O-鼠李糖苷对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

取生长至80％融合状态的人脐静脉内皮细胞，弃去培养液，使用无菌PBS洗涤细胞2次，加入0.25％胰蛋白酶溶液消化细胞，至细胞变圆，弃去消化液，加入1640培养液，并反复吹打，得细胞悬液，于显微镜下计数，将细胞悬液稀释成6×10³个/mL的密度接种于96孔板中，每孔100μL，加入含10％胎牛血清的1640培养液，每孔200μL，分为空白组、山奈酚-3-O-鼠李糖苷组和山奈酚组，每组3个复孔。放置于37℃，5％CO₂的细胞培养箱中培养24h，弃去上清液，每孔加入含10％胎牛血清的1640培养液180μL，相应实验药物20μL，其中模型组加入无菌PBS20μL，吹打均匀后，置于37℃，5％CO₂的细胞培养箱中培养48h，每孔加入5mg/mL的MTT溶液20μL，继续培养4h后，弃去上清，每孔加入DMSO 100μL，振摇10min，于酶标仪上检测570nm处的吸光度值，计算细胞增殖促进率(％)，具体结果见表2，其中：

增殖促进率(％)＝(试验组吸光度值-空白组吸光度值)/空白组吸光度值×100％。

2.3实验结果

表2.山奈酚-3-O-鼠李糖苷对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

组别	增殖促进率(％)
		空白组
山奈酚-3-O-鼠李糖苷	42.67
		山奈酚	-15.35

表2实验结果显示了山奈酚-3-O-鼠李糖苷对人脐静脉内皮细胞具有促进增殖的效果，因此，推测山奈酚-3-O-鼠李糖苷促进伤口愈合的作用是通过促进伤口部位的血管新生而实现的。而山奈酚则显示了抑制人脐静脉内皮细胞增殖的效果，显示了山奈酚无法通过促进伤口部位的血管新生而促进伤口的愈合。

以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。

Claims (10)

1.一种颅脑外伤用敷料，其特征在于，由外至内依次包括：固定层、背衬层、间隔布置于背衬层上的吸水层和药物层。

2.根据权利要求1所述的颅脑外伤用敷料，其特征在于，所述固定层为带装结构或帽形结构，所述药物层为正方形、长方形、圆形或圆环形，所述吸水层填充于背衬层上药物层以外的区域。

3.根据权利要求1-2任一所述的颅脑外伤用敷料，其特征在于，所述药物层包含山奈酚-3-O-鼠李糖苷，所述药物层的基质为：海藻酸盐凝胶、纤维素类凝胶、壳聚糖类凝胶；优选的，所述药物层的基质为壳聚糖凝胶。

4.根据权利要求3所述的颅脑外伤用敷料，其特征在于，所述药物层以山奈酚-3-O-鼠李糖苷为唯一活性成分。

5.根据权利要求3所述的颅脑外伤用敷料，其特征在于，所述壳聚糖类凝胶包含壳寡聚糖，优选的，所述壳寡聚糖平均分子量<3200Da，脱乙酰度大于80％；更优选的，所述壳寡聚糖平均分子量为2000Da,脱乙酰度为91.6％。

6.根据权利要求3所述的颅脑外伤用敷料，其特征在于，药物层中还包含了抗菌剂、镇痛剂；优选的，所述抗菌剂选自：甲硝唑、环丙沙星、头孢菌素、氨基糖类抗菌药；所述镇痛剂选自：普鲁卡因、利多卡因。

7.权利要求1-6任一项所述的颅脑外伤用敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备药物层：按量称取山奈酚-3-O-鼠李糖苷及任选抗菌剂、镇痛剂、壳寡聚糖，取适量纯净水，制备药物层基质溶液，然后加入山奈酚-3-O-鼠李糖苷及任选抗菌剂、镇痛剂、壳寡聚糖及剩余的纯净水，搅拌均匀，静置成型后切割成所需形状，待用；

(2)制备敷料：将药物层、吸水层布置于背衬层后，将背衬层固定于固定层，灭菌后包装，即得颅脑外伤用敷料。

8.山奈酚-3-O-鼠李糖苷在制备颅脑外伤用敷料中的用途。

9.包含山奈酚-3-O-鼠李糖苷、壳寡聚糖的壳聚糖凝胶在制备颅脑外伤敷料中的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述壳寡聚糖平均分子量<3200Da，脱乙酰度大于80％；优选的，所述壳寡聚糖平均分子量为2000Da,脱乙酰度为91.6％。