CN109884306A - 一种小分子检测试纸条、试剂盒及其检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及分子检测领域，具体而言，涉及一种小分子检测试纸条、试剂盒及其检测方法。一种检测小分子物质的方法，包括以下步骤：待检测物、标记抗体和双功能元件反应，得到混合物，所述标记抗体为抗所述小分子物质的抗体与信号物质的偶联物，所述双功能元件为小分子物质与通用识别性元件的复合物；所述混合物经过检测区和质控区，根据所述检测区与所述质控区的信号强度判断所述待检测物中小分子物质的含量；其中，所述检测区固定设置有抗所述通用识别性元件的抗体；所述质控区固定设置有对应所述标记抗体的二抗。本发明提供的一种检测小分子物质的方法以及试纸条和试剂盒，检测灵敏，通用性强，应用范围广，具有广阔的市场前景。

Description

一种小分子检测试纸条、试剂盒及其检测方法

技术领域

本发明涉及分子检测领域，具体而言，涉及一种小分子检测试纸条、试剂盒及其检测方法。

背景技术

基于色谱分离原理的小分子免疫层析试纸，在小分子检测领域测定原理是将待测物特异性抗原预先固定到试纸测定区。在毛细管力作用下，样品中的待测小分子与释放垫上的标记抗体流动到测定区位置，固定化抗原与待测物竞争结合溶液标记抗体。测定区显色强度或者信号强度与待测小分子含量呈反比。

由于测定迅速、成本低廉、信号响应直观，易于现场使用，层析检测法在食品安全、临床医疗等多个领域已经得到越来越广泛的应用。但是，该类试纸技术上存在一定的不足：1、待测物抗原固定化不利于竞争结合反应充分进行，限制了检测灵敏度。2、在层析试纸检测区发生的竞争结合反应影响条件多，不利于检测灵敏度的发挥。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测小分子物质的方法以及试剂盒，检测灵敏，通用性强，应用范围广，具有广阔的市场前景。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种检测小分子物质的方法，包括以下步骤：

待检测物、标记抗体和双功能元件反应，得到混合物，所述标记抗体为抗所述小分子物质的抗体与信号物质的偶联物，所述双功能元件为小分子物质与通用识别性元件的复合物；

所述混合物经过检测区和质控区，根据所述检测区与所述质控区的信号强度判断所述待检测物中小分子物质的含量；

其中，所述检测区固定设置有抗所述通用识别性元件的抗体；

所述质控区固定设置有对应所述标记抗体的二抗。

本发明采用通用识别性元件作为与检测区结合的要素，使得检测区不因待测物的改变而改变，应用范围广。

本发明中，若待检测中含有小分子物质，则得到的混合物为标记抗体-小分子物质和标记抗体-小分子物质-识别性元件；若待检测中不含有小分子物质，则得到的混合物为标记抗体-小分子物质-识别性元件。本发明中的识别性元件-小分子物质作为竞争性反应的原料，通过检测区和质控区的信号强度判断待检测物中小分子物质的含量，更准确，更灵敏。

进一步地，所述信号物质包括但不限于荧光物质、量子点、荧光量子点、生物素、放射性同位素、电子致密物质、胶体金或酶中的任一种。

进一步地，所述荧光物质包括荧光染料、磷光材料、磁性纳米材料、碳纳米材料、有机染料、无机染料。

如：Alexa系列染料、氨基吖啶、BODIPY荧光染料类如BODIPY 650/665、BODIPY-FL、BODIPY-R6G等，荧光素及其衍生物、邻苯二酚类荧光染料等。

现有小分子物质的检测方法多种，其中，相应的检测试纸条一般在样品区设置小分子物质的识别结合元件，然后再经过后续的检测区和质控区，实现小分子物质的检测。而在实际应用中，存在检测灵敏度以及准确性的问题，经研究发现，由于待检测物质在试纸条上预设的样品区反应不够充分，使得待检测物质中的小分子物质不能与样品区设置的识别结合元件反应充分，进而影响其检测灵敏度以及准确性。

本发明将待检测物、标记抗体和复合物预孵育，采用预孵育的方式进行竞争结合反应，不仅提高信号可比性，同时使得竞争反应进行更充分，测定灵敏度更高。并且，本发明中孵育条件根据相应的物质反应做出，提高反应的可控性，检测应用范围更广。

优选地，所述反应以预孵育的方式进行。

本发明的预孵育，各反应物是在液态形式并且可控的方式进行反应。

进一步地，所述通用识别性元件为蛋白类物质，优选为OVA、KLH、BSA、THY、HAS中的任一种或多种。

进一步地，所述小分子物质包括毒素类小分子物质、抗生素类小分子物质、农药小分子物质中的任一种或多种。

进一步地，所述毒素类小分子物质包括黄曲霉毒素、T2毒素、玉米赤霉醇、伏马菌素中的任一种或多种。

进一步地，所述抗生素类小分子物质包括磺胺药物、喹诺酮药物、阿维菌素类药物、聚醚类药物、氯霉素类药物、四环素类药物、大环内酯类药物、氨基糖苷类药物、青霉素类药物、链霉素药物中的任一种或多种。

优选地，所述小分子物质为黄曲霉毒素或氯霉素。

进一步地，所述孵育的温度为25-40℃，优选为35-37℃。

进一步地，所述孵育的时间为5-20min。

进一步地，所述孵育的溶液的组分如下：

以0.05±0.01mol/L磷酸盐缓冲液为基准，添加以下重量百分数的物质：蔗糖2％±0.5％，果糖5％±1％，PEG 1％±0.2％，Tween-20 3％±0.5％。

本发明还提供了一种小分子物质检测试纸条，所述试纸条包括样品垫、反应垫、吸水垫和底板；

所述样品垫用于承载待检测物、标记抗体和双功能元件的孵育物，所述标记抗体为抗所述小分子物质的抗体与信号物质的偶联物，所述双功能元件为小分子物质与通用识别性元件的复合物；

所述反应垫设置有检测区和质控区；

所述检测区固定设置有抗所述通用识别性元件的抗体；

所述质控区固定设置有对应所述标记抗体的二抗。

本发明提供的该试纸条通过在质控区形成二抗-标记抗体-小分子物质(待检测物中存在)与检测区形成标记抗体-小分子物质-通用识别性元件-抗通用识别性元件的抗体，然后经信号物质在检测物和质控区的信号强度实现待检测物中小分子物质的含量。

在对待检测物质检测时，含有小分子物质的待检测物、标记抗体和复合物进行孵育，得到的混合物加入样品垫，经吸水垫的吸水力，混合物进入反应垫，若待检测中含有小分子物质，得到的混合物为标记抗体-小分子物质和标记抗体-小分子物质-识别性元件，标记抗体-小分子物质-识别性元件与检测区的抗识别性元件的抗体结合，而标记抗体-小分子物质与质控区的对应标记抗体的二抗结合，通过检测区和质控区的信号强度判断待检测物中小分子物质的含量；而若待检测中不含有小分子物质，则得到的混合物只有标记抗体-小分子物质-识别性元件，则标记抗体-小分子物质-识别性元件与检测区的抗识别性元件的抗体结合，而质控区未见结合物质，因此，质控区没有信号强度，而检测区有信号强度。本发明提供的小分子物质检测试剂盒，检测区设置通用识别性元件的抗体，使得该检测区不因待测物的改变而改变，应用范围更广。

进一步地，所述信号物质包括荧光物质、量子点、地高辛标记探针、生物素、放射性同位素、电子致密物质、胶体金或酶中的任一种。

进一步地，所述荧光物质包括荧光染料、磷光材料、磁性纳米材料、碳纳米材料、有机染料、无机染料。

如：Alexa系列染料、氨基吖啶、BODIPY荧光染料类如BODIPY 650/665、BODIPY-FL、BODIPY-R6G等，荧光素及其衍生物、邻苯二酚类荧光染料等。

作为优选，所述反应物以预孵育的方式得到。也即本发明通过孵育的方式替代了现有的试纸条反应区的反应，时间可控性强，并且更充分的暴露抗原表位，更充足的反应时间与更充分的表位暴露，竞争反应可以更充分的进行，使得该竞争结合反应灵敏度更高。另外，结合上述的通用元件，使得试纸条的通用性强，即通过更换预孵育的物质即可达到检测不同小分子的目的。

进一步地，所述通用识别性元件为蛋白类物质，优选为OVA、KLH、BSA、THY、HAS中的任一种或多种。

进一步地，所述小分子物质包括毒素类小分子物质、抗生素类小分子物质、农药小分子物质中的任一种或多种。

进一步地，所述毒素类小分子物质包括黄曲霉毒素、T2毒素、玉米赤霉醇、伏马菌素中的任一种或多种。

进一步地，所述抗生素类小分子物质包括磺胺药物、喹诺酮药物、阿维菌素类药物、聚醚类药物、氯霉素类药物、四环素类药物、大环内酯类药物、氨基糖苷类药物、青霉素类药物、链霉素药物中的任一种或多种。

优选地，所述小分子物质为黄曲霉毒素或氯霉素。

本发明还提供了包括上述试纸条的试剂盒。

进一步地，所述试剂盒还包括孵育液和/或检测试剂，所述孵育液的组分如下：

以0.05±0.01mol/L磷酸盐缓冲液为基准，添加以下重量百分数的物质：蔗糖2％±0.5％，果糖5％±1％，PEG 1％±0.2％，Tween-20 3％±0.5％；

所述检测试剂包括标记抗体和双功能元件；

所述标记抗体为抗所述小分子物质的抗体与信号物质的偶联物，所述双功能元件为小分子物质与通用识别性元件的复合物。

本发明提供的试剂盒可以根据试验情况，制备标准曲线图，以最后根据信号强度判断小分子物质的含量，也可以试剂盒携带标准曲线图，便于参照标准曲线图得到小分子物质的含量。

进一步地，所述试剂盒还包括标准曲线图。

本发明中，OVA-卵清蛋白，KLH-血蓝蛋白，BSA-牛血清白蛋白，HAS-人血清白蛋白，THY-鸡卵白蛋白。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明中，竞争结合反应在预孵育步骤进行，时间可控性强，并且更充分的暴露抗原表位，更充足的反应时间与更充分的表位暴露，竞争反应可以更充分的进行，使得该竞争结合反应灵敏度更高。

(2)本发明检测区固定的是通用性识别元件的抗体，不因待测物的改变而改变，因此，本发明提供的检测方法及其试纸条，适用范围更广。

(3)本发明实现了免疫反应的灵敏度、特异性与通用性的有机融合，实现待检测物的高灵敏度定量检测。

(4)本发明可用于食品安全、临床诊断、检验检疫等诸多领域，具有广阔的市场前景。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1为本发明实施例1涉及的小分子物质检测试纸条的原理示意图；

图2为本发明实施例2中的标准曲线图。

具体实施方式

本发明针对现有免疫层析产品的不足，提供一种通用性小分子检测方法以及高灵敏免疫层析试纸，实现信号响应的灵敏度的提高。

为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

第一方面，本发明提供一种检测小分子物质的方法，包括以下步骤：

待检测物、标记抗体和双功能元件反应，得到混合物，所述标记抗体为抗所述小分子物质的抗体与信号物质的偶联物，所述双功能元件为小分子物质与通用识别性元件的复合物；

所述混合物依次经过检测区和质控区，根据所述检测区与所述质控区的信号强度判断所述待检测物中小分子物质的含量；

其中，所述检测区固定设置有抗所述通用识别性元件的抗体；

所述质控区固定设置有对应所述标记抗体的二抗。

反应步骤，即将待测样品与标记抗体及小分子物质与通用识别性元件的衍生物相混合，在一定环境条件下进行竞争结合反应并形成免疫复合物。

本发明检测区固定的是识别元件的抗体，具有较好的通用性，不因待测物的改变而改变，通用性程度高。

进一步地，上述反应以孵育的方式进行。

相比现有的技术中，在检测区固定化抗原与待测物竞争结合标记抗体反应，本发明中竞争结合反应在预孵育步骤已经充分进行，具有更加充分的反应时间。并且，小分子的识别元件衍生物在溶液中而非固定化，可以更充分的暴露抗原表位，竞争反应可以更充分的进行。更充足的反应时间与更充分的表位暴露，使得该竞争结合反应灵敏度更高。

本发明通过预孵育的形式，结合上述的通用元件，使得试纸条的通用性强，即通过更换预孵育的物质即可达到检测不同小分子的目的。

另一方面，本发明提供一种小分子物质检测试纸条；

所述试纸条包括样品垫、反应垫、吸水垫和底板；

所述样品垫用于承载待检测物、标记抗体和双功能元件的孵育物，所述标记抗体为抗所述小分子物质的抗体与信号物质的偶联物，所述双功能元件为小分子物质与通用识别性元件的复合物；

所述反应垫设置有检测区和质控区；

所述检测区固定设置有抗所述通用识别性元件的抗体；

所述质控区固定设置有对应所述标记抗体的二抗。

本发明提供的通用性免疫层析试纸，检测区设置通用识别性元件的抗体，使得该检测区不因待测物的改变而改变，应用范围更广。

作为优选，所述反应物以预孵育的方式得到。通过引入预孵育步骤实现竞争结合反应，检测区与质控区位于反应垫上，与试纸长轴垂直分布，检测区包被可识别预孵育步骤中形成的免疫复合物的识别性元件抗体，质控区包被对应标记抗体的二抗如羊抗鼠二抗。即若小分子物质为AFM1，则质控区包被对应AFM1抗体的二抗。

本发明通过预孵育的形式，结合上述的通用元件，使得试纸条的通用性强，即通过更换预孵育的物质即可达到检测不同小分子的目的。

本发明还提供了包括上述试纸条的试剂盒，所述试剂盒还包括孵育液和/或检测试剂；

所述孵育液的组分如下：

以0.05±0.01mol/L磷酸盐缓冲液为基准，添加以下重量百分数的物质：蔗糖2％±0.5％，果糖5％±1％，PEG 1％±0.2％，Tween-20 3％±0.5％；

所述检测试剂包括标记抗体和双功能元件；

所述标记抗体为抗所述小分子物质的抗体与信号物质的偶联物，所述双功能元件为小分子物质与通用识别性元件的复合物。

本发明提供的小分子物质检测试剂盒，将免疫反应的灵敏度、特异性与通用性有机的进行了融合，具体见方法说明的内容。

本发明中，底板可以为不吸水材料，PVC或其它硬质材料；样品垫可以为吸滤纸；吸水纸垫可以为吸水纸。

另外，本发明中，检测区和质控区只是对区域的一种限定，可以以检测线和质控线的形式存在，因为检测线和质控线中的线实质上也是一种区域。

以识别元件为BSA为例，在实际检测中，随着层析过程的进行，发生下列反应：

溶液中待测物与待测物的BSA衍生物竞争结合一定含量的标记抗体，溶液中待测物含量越多，所形成的免疫复合物就越多于待测物的BSA衍生物与标记抗体形成的免疫复合物；

检测区的BSA抗体与待测物的BSA衍生物与标记抗体形成的免疫复合物相结合；

质控区的羊抗鼠二抗与待测物与标记抗体的免疫复合物结合；

由于标记抗体含量的多少决定信号响应的强度，而检测区信号的强度与待测物含量呈反比，质控区信号的强度与待测物含量呈正比，通过对比检测区信号的相对强度判断待测物的含量。

本发明可用于食品安全、临床诊断、检验检疫等诸多领域，具有广阔的市场前景。

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

实施例1

试纸条的制备(以检测AFM1为例)，试纸条的反应原理如图1所示，通用识别性元件选用BSA，信号物质选用QBs，试纸条的制备方法包括以下步骤：

1)NC膜检测区包被BSA抗体，包被过程：用0.01mol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液分别将BSA抗体稀释到0.25mg/ml，用Isoflow喷金划膜仪将其包被于硝酸纤维膜上的检测区，包被量为1.0μl/cm；将包被好的反应膜置于37℃条件下干燥2h，备用。

2)NC膜质控区包被AFM1的二抗，浓度0.5mg/mL，用Isoflow喷金划膜仪将其包被于硝酸纤维膜上的检测区，包被量为1.0μl/cm；将包被好的反应膜置于37℃条件下干燥2h，备用。

3)商品化试剂盒制备标记抗体，使用羧基化修饰的量子点微球(QB)，并购买待测物的BSA衍生物，制得QBs标记的AFM1抗体。

4)在底板上依次组装玻璃纤维垫、NC膜、吸水纸垫制备成试纸条；在2～8℃的环境中储存，有效期12个月。

实施例2

以乳品中AFM1的检测为例进行说明：

1、制备标准曲线(以实施例1制得的试纸条进行试验)：

AFM1标准品制备不同的浓度：0.5、0.25 0.125、0.0625、0.0313、0.0156、0.0078、0.0039ng/mL；

AFM1-BSA 0.1μg/100μL混合物溶液、QB-mAb(购自北京纳晶生物科技有限公司，产品型号：QBB12117，H07187M)1：3000的稀释比分别与不同浓度的AFM1标准品混合，在37℃条件下与标记抗体及AFM1-BSA孵育11min，形成免疫复合物QB-AFM1抗体-AFM1-BSA；

孵育后溶液加入玻璃纤维垫，经吸水垫的吸力作用，依次经过反应膜(NC膜)检测区和质控区，经过检测区时，QB-AFM1抗体-AFM1-BSA免疫复合物与检测区BSA抗体相结合；经过质控区时，QBs-AFM1抗体-AFM1与羊抗鼠二抗相结合；

孵育后溶液加入免疫层析试纸层析反应进行22min后用读数仪读取数据，在365nm紫外光激发下，通过检测器测定区与质控区显色条带的相对信号强度进行结果定量判读，分析记录结果。

读取的数据得到的拟合方程如下：y＝98.04833-95.90213/(1+(x/0.02298)^1.77823)，见图2，其中，x为检测浓度(ng/mL)，y为抑制信号比率(简称抑制率)。

根据该拟合方程以抑制率为10％(即y值为10)计算理论最低检测限，计算得到其理论最低检测浓度为0.0059ng/mL。

实施例3

对待检测样本进行检测，步骤如下：

待检测样本：纯牛奶加入AFM1；

实施例1制得的试纸平衡至室温；

AFM1加标的纯牛奶混匀后用常见的酸化法进行前处理，酸化法处理步骤：1ml奶样经10mg三氯乙酸固体充分混合后静置1min；3000rpm下离心1min，所得上清液用1mol/LNaOH溶液调整pH至7.0；3000rpm 1min，所得上清液进行免疫层析过程；

奶样经前处理后所获得上清液在37℃条件下与标记抗体及AFM1-BSA孵育11min，形成免疫复合物QB-AFM1抗体-AFM1-BSA；

孵育后溶液加入玻璃纤维垫，经吸水垫的吸力作用，依次经过反应膜(NC膜)检测区和质控区，经过检测区时，QB-AFM1抗体-AFM1-BSA免疫复合物与检测区BSA抗体相结合；经过质控区时，QBs-AFM1抗体-AFM1与羊抗鼠二抗相结合；

在365nm紫外光激发下，通过检测器测定区与质控区显色条带的相对信号强度进行结果定量判读。根据实施例2中的标准曲线，检测结果如表1所示。

表1样品检测结果

^a均数±标准差。

从该检测结果可以看出，本发明提供的试剂盒检测准确度高，符合试纸条有关准确度的要求。

对比例1

与实施例1中的试纸条不同的是，玻璃纤维垫表面含有AFM1-BSA、QBs标记的AFM1抗体。

按照实施例2的方法制备标准曲线，得到最低检测浓度为0.08ng/mL。

另外，需要说明的是，传统奶样前处理包括高速离心，达12000rpm 15min，或者对奶样进行5倍稀释；本发明酸化法处理后，离心可以在低速下实现，并且无需稀释，更利于现场检测中使用，并且避免了稀释带的检测灵敏度下降与假阴性的出现。

以上实施例对本发明所提供的通用性免疫层析试纸制备和一种检测AFM1的方法进行了详细介绍。本发明所述通用性免疫层析试纸主要针对毒素类、抗生素类以及农药等小分子，可用于食品安全、临床诊断等领域。

尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。

Claims (10)

1.一种检测小分子物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：

待检测物、标记抗体和双功能元件反应，得到混合物，所述标记抗体为抗所述小分子物质的抗体与信号物质的偶联物，所述双功能元件为小分子物质与通用识别性元件的复合物；

所述混合物经过检测区和质控区，根据所述检测区与所述质控区的信号强度判断所述待检测物中小分子物质的含量；

其中，所述检测区固定设置有抗所述通用识别性元件的抗体；

所述质控区固定设置有对应所述标记抗体的二抗。

2.根据权利要求1所述的检测小分子物质的方法，其特征在于，所述信号物质包括荧光物质、量子点、荧光量子点、生物素、放射性同位素、电子致密物质、胶体金或酶中的任一种；

进一步地，所述荧光物质包括荧光染料、磷光材料、磁性纳米材料、碳纳米材料、有机染料、无机染料。

3.根据权利要求1所述的检测小分子物质的方法，其特征在于，所述反应以孵育的方式进行；

进一步地，所述通用识别性元件为蛋白类物质，优选为OVA、KLH、BSA、THY、HAS中的任一种或多种；

进一步地，所述小分子物质包括毒素类小分子物质、抗生素类小分子物质、农药小分子物质中的任一种或多种；

进一步地，所述毒素类小分子物质包括黄曲霉毒素、T2毒素、玉米赤霉醇、伏马菌素中的任一种或多种；

进一步地，所述抗生素类小分子物质包括磺胺药物、喹诺酮药物、阿维菌素类药物、聚醚类药物、氯霉素类药物、四环素类药物、大环内酯类药物、氨基糖苷类药物、青霉素类药物、链霉素药物中的任一种或多种；

优选地，所述小分子物质为黄曲霉毒素或氯霉素。

4.根据权利要求3所述的检测小分子物质的方法，其特征在于，所述孵育的温度为25-40℃，优选为35-37℃；

进一步地，所述孵育的时间为5-20min；

进一步地，所述孵育的溶液的组分如下：

以0.05±0.01mol/L磷酸盐缓冲液为基准，添加以下重量百分数的物质：蔗糖2％±0.5％，果糖5％±1％，PEG 1％±0.2％，Tween-20 3％±0.5％。

5.一种小分子物质检测试纸条，其特征在于，所述试纸条包括样品垫、反应垫、吸水垫和底板；

所述样品垫用于承载待检测物、标记抗体和双功能元件的孵育物，所述标记抗体为抗所述小分子物质的抗体与信号物质的偶联物，所述双功能元件为小分子物质与通用识别性元件的复合物；

所述反应垫设置有检测区和质控区；

所述检测区固定设置有抗所述通用识别性元件的抗体；

所述质控区固定设置有对应所述标记抗体的二抗。

6.根据权利要求5所述的小分子物质检测试纸条，其特征在于，所述信号物质包括荧光物质、量子点、地高辛标记探针、生物素、放射性同位素、电子致密物质、胶体金或酶中的任一种；

进一步地，所述荧光物质包括荧光染料、磷光材料、磁性纳米材料、碳纳米材料、有机染料、无机染料。

7.根据权利要求5所述的小分子物质检测试纸条，其特征在于，所述反应物以预孵育的方式得到；

进一步地，所述通用识别性元件为蛋白类物质，优选为OVA、KLH、BSA、THY、HAS中的任一种或多种。

8.根据权利要求5所述的小分子物质检测试纸条，其特征在于，所述样品垫为吸滤膜，优选为玻璃纤维膜，所述反应垫为NC膜。

9.根据权利要求5所述的小分子物质检测试纸条，其特征在于，所述小分子物质包括毒素类小分子物质、抗生素类小分子物质、农药小分子物质中的任一种或多种；

进一步地，所述毒素类小分子物质包括黄曲霉毒素、T2毒素、玉米赤霉醇、伏马菌素中的任一种或多种；

进一步地，所述抗生素类小分子物质包括磺胺药物、喹诺酮药物、阿维菌素类药物、聚醚类药物、氯霉素类药物、四环素类药物、大环内酯类药物、氨基糖苷类药物、青霉素类药物、链霉素药物中的任一种或多种；

优选地，所述小分子物质为黄曲霉毒素或氯霉素。

10.一种小分子物质检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求5-9任一项所述的小分子物质检测试纸条；所述试剂盒还包括孵育液和/或检测试剂；

所述孵育液的组分如下：

以0.05±0.01mol/L磷酸盐缓冲液为基准，添加以下重量百分数的物质：蔗糖2％±0.5％，果糖5％±1％，PEG 1％±0.2％，Tween-20 3％±0.5％；

所述检测试剂包括标记抗体和双功能元件；

所述标记抗体为抗所述小分子物质的抗体与信号物质的偶联物，所述双功能元件为小分子物质与通用识别性元件的复合物；

进一步地，所述试剂盒还包括标准曲线图。