CN109876136B - 一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂及其制备方法，其中醋酸奥曲肽冻干粉针剂中包括羧甲基壳聚糖和羟丙基‑β‑环糊精，PH缓冲剂为乙酸和甘氨酰胺。羧甲基壳聚糖可抑制产品中细菌生长；羟丙基‑β‑环糊精可提高产品复溶性，又能与甘露醇共同起到冻干保护剂的作用，提高制品稳定性；此外，羧甲基壳聚糖和羟丙基‑β‑环糊精在溶液中又能形成微弱的凝胶，起到缓释醋酸奥曲肽的作用。本发明得到的醋酸奥曲肽冻干粉针剂中细菌和杂质含量较低，稳定性和复溶性也优于传统的产品。

Description

一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂及其制备方法。

背景技术

冻干粉针剂是在无菌的环境下将原料药加入一些辅料和溶剂中，经过一系列加工处理使其溶解，随后对溶液进行冷冻干燥，得到干燥无菌的粉状制剂，能够最大限度地保持原料药的性能；用作皮下注射，又能避免口服时由于病人胃肠环境带来的药物稳定性下降和药物降低的缺陷，因此在医药领域中得到广泛的应用。

醋酸奥曲肽冻干粉针剂通常是将醋酸奥曲肽溶解在水中，加入冻干保护剂、PH调节剂等溶解后，经过冷冻干燥得到的一类药物，使用时将冻干粉针剂复溶，用于皮下注射，可抑制生长激素的分泌和释放；还可以通过抑制肿瘤生长因子或激素分泌，起到抑制肿瘤细胞增殖的作用；此外，对于某些类似肿瘤的病症，奥曲肽也可以抑制高胃泌素血症和肠嗜铬细胞样细胞声场，抑制肿瘤细胞的生长。而目前能够临床使用的奥曲肽药品是诺华公司的善宁，是一种奥曲肽的醋酸盐注射液，呈液体状，因此保质期较短，仅为两周，且稳定性差，无法实现长距离的运输，使用极其不便。将醋酸奥曲肽制成冻干粉针剂是解决其稳定性差的一种有效解决方法。

中国发明专利(CN102526700A，一种注射用醋酸奥曲肽冻干组合物及其制备方法)公开了一种采用甘露醇作冻干保护剂、乳酸和碳酸氢钠或者酒石酸和酒石酸钠作为缓冲物质，经冷冻干燥得到醋酸奥曲肽冻干组合物的制备方法，产品的稳定性得到了明显的提升。中国发明专利(CN107510837A，一种注射用醋酸奥曲肽的冻干粉针剂及其制备方法)采用甘露醇和海藻糖作为冻干保护剂、乳酸和碳酸氢钠作为缓冲剂，并添加抗氧剂L-半胱氨酸，经过冷冻干燥得到了醋酸奥曲肽冻干粉针剂，并在冷冻干燥前对溶液进行脱氧处理，得到的药品复溶性和稳定性明显提高。但是对于冻干粉针剂，最常见的问题是灭菌等级低、异物超标和冻干粉不均匀等问题，上述醋酸奥曲肽冻干粉针剂在制备过程中未进行专门的灭菌处理，且制备过程用活性炭进行吸附以脱除热源，又会引入活性炭杂质，因此易引起细菌含量和异物超标等问题。

发明内容

本发明欲解决的问题是现有的醋酸奥曲肽冻干粉针剂中易出现的细菌和杂质含量超标等技术问题。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂，按重量份计，包括如下组分：

其中，羧甲基壳聚糖的数均相对分子量为700-2000；所述羟丙基-β-环糊精的数均相对分子量为1100-2500。

进一步地，所述醋酸奥曲肽冻干粉针剂的PH缓冲剂为乙酸和甘氨酰胺。

作为进一步地，所述羧甲基壳聚糖的数均相对分子量为1400，羧甲基壳聚糖易溶于水，具有较好的稳定性和抑菌性能，羧甲基壳聚糖是一种聚电解质，能与细菌的细胞膜(通常带负电荷)作用，从而透过细胞膜进入细胞内部，破坏细菌的新陈代谢，从而达到抗菌效果，分子量对羧甲基壳聚糖的抗菌作用有较大影响，试验发现，数均相对分子量为1400的羧甲基壳聚糖抑菌效果最优。羟丙基-β-环糊精易溶于水，生物相容性好，对肌肉无刺激，与甘露醇联用，可共同作为醋酸奥曲肽冻干粉针剂的冻干保护剂，提高制品稳定性；同时羟丙基-β-环糊精还可以增加冻干粉针剂的复溶性。

羧甲基壳聚糖的分子结构中带有羧基，羟丙基-β-环糊精的分子结构中带有羟基，在冻干粉使用过程中，首先将冻干粉加入生理盐水或葡萄糖溶液中进行复溶，此时羧甲基壳聚糖的羧基和羟丙基-β-环糊精的羟基会产生一定的氢键相互作用，形成微弱的羧甲基壳聚糖的/羟丙基-β-环糊精凝胶，醋酸奥曲肽负载在该凝胶上，将冻干粉针剂注射入人体内后，该凝胶可以在一定程度上起到缓释醋酸奥曲肽的作用，可以降低人体对醋酸奥曲肽的吸收速率，得到更好的治疗效果；同时，羧甲基壳聚糖/羟丙基-β-环糊精凝胶是由氢键形成的，强度减弱，又不会影响针剂的注射过程。羧甲基壳聚糖和羟丙基-β-环糊精易于被人体吸收，不会产生任何副作用。

进一步地，选取羧甲基壳聚糖与羟丙基-β-环糊精的质量比为1:1.5-5，更进一步为1:2，使羟丙基-β-环糊精的量稍多于羧甲基壳聚糖，可增大冻干粉针剂的复溶性。

进一步地，所述醋酸奥曲肽冻干粉针剂的PH为4.0-5.0。

本发明同时还保护了一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)将甘露醇加入水中，搅拌溶解均匀后，加入羧甲基壳聚糖、羟丙基-β-环糊精，搅拌溶解均匀，得溶液Ⅰ；

(2)将醋酸奥曲肽加入溶液Ⅰ中，搅拌溶解均匀后，加入乙酸和甘氨酰胺，调节溶液的PH为4.0-5.0，得溶液Ⅱ；

(3)将溶液Ⅱ用10nm的超滤膜进行过滤，随后灌装入西林瓶中，冷冻干燥。

上述步骤(1)和(2)中用到的水均为注射用水。

选用乙酸和甘氨酰胺作为PH缓冲剂，是因为：乙酸是一种有机酸，是天然代谢的产物，生物相容性好；甘氨酰胺是氨基酸类缓冲液，醋酸奥曲肽分子中也含有氨基酸基团，相容性好，又可以为人体细胞组分和各种提取液提供更接近的天然环境，对人体的刺激作用小。

醋酸奥曲肽冻干粉对氧敏感，因此，步骤(1)和步骤(2)均在氮气保护下进行。进一步地，步骤(3)中过滤和灌装过程也在氮气保护下进行，可以减少溶液中的氧含量，提高醋酸奥曲肽冻干粉的稳定性。

进一步地，冷冻干燥过程在真空条件下进行。进一步地，冷冻干燥过程包括预冷冻、一次干燥和二次干燥过程；所述预冷冻的温度为-50℃；所述一次干燥过程温度为-15℃；所述二次干燥过程的温度为28℃。

与现有技术相比，本发明的醋酸奥曲肽冻干粉针剂及其制备方法具有以下优点：

1、加入羧甲基壳聚糖，可抑制醋酸奥曲肽冻干粉针剂中的细菌含量。

2、羟丙基-β-环糊精可提高醋酸奥曲肽冻干粉针剂的复溶性；与甘露醇联用，可作为冻干保护剂，提高产品稳定性；与羧甲基壳聚糖联用，可形成凝胶，对醋酸奥曲肽具有一定的缓释作用。

3、PH缓冲剂选用乙酸和甘氨酰胺，制得产品的生物相容性更好。

4、冷冻干燥前用超滤膜对溶液进行过滤，可降低产品中的杂质含量。

具体实施方式：

下面通过具体实施例进行详细阐述，说明本发明的技术方案。

实施例1-4

一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂及其制备方法，包括如下步骤：

(1)在氮气保护下，将甘露醇加入水中，搅拌溶解均匀后，加入羧甲基壳聚糖、羟丙基-β-环糊精，搅拌溶解均匀，得溶液Ⅰ；

(2)在氮气保护下，将醋酸奥曲肽加入溶液Ⅰ中，搅拌溶解均匀后，加入乙酸和甘氨酰胺，调节溶液的PH为4.5，得溶液Ⅱ；

(3)在无菌室内，氮气保护下将溶液Ⅱ用10nm的超滤膜进行过滤，随后在氮气保护下灌装入西林瓶中，真空条件下冷冻干燥：在-50℃下预冷冻2h，-15℃下一次干燥6h，28℃下二次干燥8h，即得到醋酸奥曲肽冻干粉针剂。

采用同样的制备方法，制备了4组醋酸奥曲肽冻干粉针剂产品，分别记为S1-S4，每组醋酸奥曲肽冻干粉针剂产品的原材料和配比、溶液Ⅱ的过滤用膜如下表1所示。

对比例1

制备了一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂产品，与上述实施例S1的不同之处在于醋酸奥曲肽冻干粉针剂组分中不使用羟丙基-β-环糊精，制得的产品编号为B1。

对比例2

制备了一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂产品，与上述实施例S1的不同之处在于醋酸奥曲肽冻干粉针剂组分中不使用羧甲基壳聚糖，制得的产品编号为B2。

对比例3

制备了一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂产品，与上述实施例S1的不同之处在于醋酸奥曲肽冻干粉的制备过程中溶液Ⅱ不用超滤膜进行过滤，而用0.22μm的微孔滤膜进行过滤，制得的产品编号为B3。

对比例4

制备了一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂产品，与上述实施例S1的不同之处在于醋酸奥曲肽冻干粉针剂组分中既不使用羟丙基-β-环糊精，也不使用羧甲基壳聚糖，用海藻糖代替，制得的产品编号为B4。

上述对比例1-4的原材料和配比、溶液Ⅱ的过滤用膜也如下表1所示。

表1实施例和对比例中产品S1-S4和B1-B4的组分和配比及过滤用膜

对上述8组产品S1-S4、B1-B4进行产品稳定性、复溶性、无菌检查和细菌内毒素含量的性能测试，具体测试方法如下：

(1)产品的杂质含量：按照《中国药典》2015年版二部第1546页所收载的注射用醋酸奥曲肽中的有关物质检查方法和含量测定方法以及其他检测指标，分别测试醋酸奥曲肽冻干粉针剂中有关物质和含量，测试结果见表2。

(2)复溶性：将醋酸奥曲肽冻干粉针剂加入5％葡萄糖溶液中，分散复溶后观察产品溶解性能，测试结果见表2。

(3)细菌内毒素含量：细菌内毒素含量是多种病原性细菌产生的毒素，可间接反映出产品中的细菌含量。按照《中国药典》2015年版二部第1546页所收载的注射用醋酸奥曲肽中细菌内毒素检测方法，取1mg醋酸奥曲肽冻干粉针剂进行检测，测试结果见表2。

(4)产品稳定性：对产品S1进行稳定性检测，分别测试在30℃、RH60％的条件下，保存不同时间后测试醋酸奥曲肽冻干粉针剂中有关物质和含量、细菌内毒素含量，可表征产品S1的稳定性，测试结果见表3。

表2产品S1-S4和B1-B4的性能测试结果

表3产品S1的稳定性测试结果

如上表2所示，实施例1-4中得到的醋酸奥曲肽冻干粉针剂产品S1-S4的整体性能优于对比例的产品B1-B4，说明采用本发明羧甲基壳聚糖和羟丙基-β-环糊精组合使用、且用10nm的超滤膜进行过滤的方法得到的醋酸奥曲肽冻干粉针剂产品性能更好。

其中，产品S1的性能最优。可见，羧甲基壳聚糖的数均相对分子量为1400，且羧甲基壳聚糖和羟丙基-β-环糊精的质量比为1:2时，产品中的杂质含量最低，对产品的抑菌性能最好；当羧甲基壳聚糖的数均相对分子量较低(例如S2中为700)或较高(例如S3中为2000)时，会增大产品中的细菌内毒素含量，说明抑菌作用稍差。对于S4中羧甲基壳聚糖和羟丙基-β-环糊精的质量比为1:5时，羟丙基-β-环糊精的用量稍多，增大了产品中的杂质含量。

对于B1，产品中未添加羟丙基-β-环糊精，仅有甘露醇一种冻干保护剂，会对冻干过程产生影响，降低冻干粉针剂的含量，降低了产品的复溶性。

对于B2，产品中未使用羧甲基壳聚糖，产品中的细菌内毒素含量明显增加，说明抑菌效果较差。

对于B3，制备过程中未用10nm的超滤膜，仅用0.22μm的微孔滤膜进行过滤，溶液中大部分的热源和细菌无法去除，导致产品中杂质含量高、细菌含量和细菌内毒素含量超标，并且产品的复溶性也较差。

对于B4，产品中不使用羧甲基壳聚糖和羟丙基-β-环糊精，杂质含量较高，且复溶效果差，由于无羧甲基壳聚糖起到抑菌作用，因此细菌内毒素含量较高。

因此，可看出羧甲基壳聚糖的分子量，及其与羟丙基-β-环糊精的质量比和制备过程中使用的过滤方法对醋酸奥曲肽冻干粉针剂的性能具有较大的影响。

对产品S1进行稳定性测试，将其置于30℃、RH60％的条件下，如表3所示，可看出在放置6个月后，产品的性能仍无明显变化，说明产品的稳定性较好。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用于限制发明，凡在本发明的设计构思之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种醋酸奥曲肽冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将甘露醇加入水中，搅拌溶解均匀后，加入羧甲基壳聚糖、羟丙基-β-环糊精，搅拌溶解均匀，得溶液Ⅰ；

（2）将醋酸奥曲肽加入溶液Ⅰ中，搅拌溶解均匀后，调节溶液的pH为4.5，得溶液Ⅱ；

（3）将溶液Ⅱ用10nm的超滤膜进行过滤，随后灌装入西林瓶中，冷冻干燥；

所述醋酸奥曲肽冻干粉针剂按重量份计，包括如下组分：

醋酸奥曲肽 1.2份

甘露醇 20份

羧甲基壳聚糖 7.5份

羟丙基-β-环糊精 15份

所述羧甲基壳聚糖的数均相对分子量为1400；所述羟丙基-β-环糊精的数均相对分子量为1100-2500；所述羧甲基壳聚糖与羟丙基-β-环糊精的质量比为1:2。

2.如权利要求1所述的醋酸奥曲肽冻干粉针剂的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）和步骤（2）均在氮气保护下进行。

3.如权利要求1所述的醋酸奥曲肽冻干粉针剂的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中过滤和灌装过程均在氮气保护下进行。

4.如权利要求1所述的醋酸奥曲肽冻干粉针剂的制备方法，其特征在于：所述冷冻干燥过程在真空条件下进行。

5.如权利要求1所述的醋酸奥曲肽冻干粉针剂的制备方法，其特征在于：所述冷冻干燥过程包括预冷冻、一次干燥和二次干燥过程；所述预冷冻的温度为-50℃；所述一次干燥过程温度为-15℃；所述二次干燥过程的温度为28℃。

6.一种采用如权利要求1-5中任一项所述的制备方法得到的醋酸奥曲肽冻干粉针剂。

7.如权利要求6所述的醋酸奥曲肽冻干粉针剂，其特征在于：所述醋酸奥曲肽冻干粉针剂的pH缓冲剂为乙酸和甘氨酰胺。