CN109833377A - 一种油茶蒲提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种油茶蒲提取物及其制备方法和应用。一种油茶蒲提取物的制备方法，包括以下步骤：采用提取剂对油茶蒲进行超声提取，得到油茶蒲粗提液；所述提取剂包括乙酸乙酯/乙醇混合溶液。本发明所述油茶蒲提取物的黄酮、多酚、多糖等活性物质含量高且自由基清除率高，可应用于药品、保健品、化妆品等领域，具有显著的经济价值；所述提取工艺简单，易实现，成本低，便于实现规模化生产。

Description

一种油茶蒲提取物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种功能成分提取技术领域，具体而言，涉及一种油茶蒲提取物及其制备方法和应用。

背景技术

油茶(Camellia oleifera)是我国特有的茶科山茶属多年生木本油料植物，从油茶果中榨取的茶籽油营养丰富，富含油酸，被誉为“东方橄榄油”。油茶蒲是油茶果的外皮，也叫油茶果壳，占油茶鲜果质量的60％～70％，是油茶加工的重要副产物，年产量达200万吨。

油茶蒲中含有黄酮、多酚、皂苷、多糖等许多有用成分。这些成分具有生物活性，如清除自由基性能等，可作为生物医药原材料。目前提取黄酮类化合物所用提取溶剂主要有甲醇等，甲醇有刺激性气味，不适宜用作保健品、生物医药制品的原料，且现有的提取工艺繁琐，通常是采用分级萃取的方式将油茶蒲中的生物活性物质进行富集，提取率仍不能满足应用需求，无法实现规模化生产。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种油茶蒲提取物，所述油茶蒲提取物的活性成分，包括黄酮、多酚、多糖等含量高，自由基清除性能好，在生物医药领域具有重要的研究意义和应用价值。

本发明的第二目的在于提供一种油茶蒲提取物的制备方法，制备工艺简单，易实现，成本低，便于转化为规模化生产。

本发明的第三目的在于提供一种油茶蒲提取物的应用，本发明所述油茶蒲提取物活性成分含量高、自由基清除性能强，可作为生物医药原材料使用。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种油茶蒲提取物的制备方法，包括以下步骤：

采用提取剂对油茶蒲进行超声提取，得到油茶蒲粗提液；所述提取剂包括乙酸乙酯/乙醇混合溶液。

现有技术通常采用常规的单一溶剂，例如乙醇、1,3～丁二醇、丙酮、甲醇、水等作为提取剂，对油茶蒲进行提取，所得油茶蒲提取物黄酮、多酚、多糖等活性成分的含量较低，自由基清除率低，无法满足生物医药应用所需。此外，丙酮毒性大，甲醇及其代谢产物甲醛、甲酸等对人体的神经系统有一定损害，进一步限制了这两种提取剂的应用。

本发明人经过实验研究出乎意料地发现，采用特定的两种或两种以上的有机溶剂进行复配，作为提取剂，对油茶蒲进行超声提取，可有效提高油茶蒲提取物中黄酮及其他活性成分包括多酚、多糖等的提取率，且所述油茶蒲提取物的自由基清除率也显著提高。

在前述基础上，本发明人发现将乙酸乙酯、乙醇进行复配，制成提取剂，对油茶蒲进行提取，所得油茶蒲提取物中黄酮及其他活性成分的含量高，且自由基清除率也显著提高。乙醇无毒，乙酸乙酯毒性较低，易挥发，残留溶剂量不超过0.5％时对人体无副作用。本发明所述乙酸乙酯/乙醇混合溶液的配制方法包括：将40～80mL乙酸乙酯倒入100mL容量瓶，用无水乙醇定容至刻度；优选地，将60mL乙酸乙酯倒入100mL容量瓶，用无水乙醇定容至刻度，此时得到的提取剂的提取效率及自由基清除性能较好。

油茶蒲是油茶果的外皮，也叫油茶果壳，占油茶鲜果质量的60％～70％，是油茶加工的重要副产物。本发明对油茶蒲的来源及制备方法不作严格限制，可以采用常规方式获得或制备。

在一实施方式中，所述油茶蒲的制备方法，包括以下步骤：

将油茶鲜果去籽、粉碎、过筛，得到油茶蒲；

优选地，所述过筛为过80目筛。

本发明对油茶鲜果去籽、粉碎、过筛，优选过80目筛，可得到粒径不超过0.18mm的油茶蒲，一方面可促进油茶蒲中活性物质的释放及其在提取剂中的溶解，另一方面提高了提取效率，大大减少了提取所需时间，有益于实现工业化生产。

油茶蒲粗提液中还残留一些残渣，不能溶于提取剂，可经固液分离去除，并通过多次洗涤滤渣的方法回收滤渣表面的活性物质，减少活性物质的损失。具体地，本发明油茶蒲提取物的制备方法，还包括：对油茶蒲粗提液进行固液分离，再对分离液依次进行干燥、粉碎，得到油茶蒲提取物；优选地，所述固液分离包括将油茶蒲粗提液趁热抽滤，用提取剂洗涤滤渣2～3次，再进行合并，得到分离液；本发明采取冷冻干燥的方式对油茶蒲提取液进行干燥，在低温下，提取剂挥发，冷冻干燥不会使油茶蒲提取物中活性物质变性、失活。

本发明油茶蒲提取物的制备方法，所述油茶蒲与提取剂的料液比为1g:12～18mL，优选为1g:15mL。在本发明中，料液比1g:12～18mL指的是每1g油茶蒲采用12～18mL提取剂进行提取。本发明人经过大量实验研究发现，上述料液比范围适宜于活性成分在提取剂中充分释放、扩散，进一步提高活性物质的提取率，也大幅度节省了原料，在实际生产应用中既保证了生产效益，又节约资源，便于实现规模化生产。

本发明所述一种油茶蒲提取物的制备方法中，所述超声提取的超声频率为30～50kHz，优选为40kHz；优选地，所述超声提取的提取温度为50～65℃，优选为60℃。本发明人经过多次实验研究发现，上述超声工艺能够最大程度地辅助油茶蒲中活性物质的提取过程，辅助提高了黄酮及多酚、多糖等其他活性物质的提取率，并进一步提高油茶蒲提取物的DPPH·自由基清除能力。

本发明油茶蒲中活性组分的含量用％来表示，含义为每100g的油茶蒲提取物中含有的活性组分的克数。其中，所述油茶蒲提取物中黄酮的质量含量为≥3.0％，优选为3.24％～4.13％；优选地，所述油茶蒲提取物中多酚的质量含量≥2.5％，更优选为2.65％～2.88％；优选地，所述油茶蒲提取物中多糖的质量含量≥9％，更优选为9％～11％。

其中，黄酮是一种很强的抗氧剂，可有效清除体内的氧自由基，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。另外，黄酮也可以改善血液循环，降低胆固醇，这些作用大大降低了心脑血管疾病的发病率，同时也可减轻心脑血管疾病的症状。黄酮还可以抑制炎性生物酶的渗出，可以增进伤口愈合和止痛。多酚是很强的抗氧化剂，可以保护身体免受自由基的伤害，从而避免因细胞功能被破坏，患上癌症、心脏病和老年痴呆症等疾病。活性多糖大多数可以刺激免疫活性，能增强网状内皮系统吞噬肿瘤细胞的作用，促进淋巴细胞转化，激活T细胞和B细胞，并促进抗体的形成，从而在一定程度上具有抗肿瘤的活性。活性多糖能降低甲基胆蒽诱发肿瘤的发生率，对一些易发生广泛转移，不宜采取手术治疗和放射疗法的白血病，淋巴瘤等，特别有价值。

本发明所述油茶蒲提取物的DPPH·自由基清除率大于90％；特别是，当100mL提取剂中，乙酸乙酯的体积为40～80mL时，油茶蒲提取物的DPPH·自由基清除率大于92％；优选地，当100mL提取剂中，乙酸乙酯的体积为60mL时，油茶蒲提取物的DPPH·自由基清除率最高，为92.69％。

本发明还提供所述油茶蒲提取物在制备抗氧化产品中的应用，所述产品为药品、食品、保健品或化妆品。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明采用一定体积配比的乙酸乙酯/乙醇混合溶液作为提取剂对油茶蒲进行超声提取，所述油茶蒲提取物中黄酮及多酚、多糖等其他生物活性成分含量高，且具有较强的DPPH·自由基清除性能；本发明提取工艺简洁，提取效率高，易于实现规模化生产。本发明所述油茶蒲提取物能够应用于药品、保健品及化妆品等领域，具有潜在的市场价值。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为芦丁标准曲线图；

图2为没食子酸标准曲线图；

图3为总糖标准曲线图；

图4为单糖标准曲线图。

具体实施方式

下面将结合附图和具体实施方式对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，但是本领域技术人员将会理解，下列所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

实验材料、试剂和设备如下：

油茶鲜果：由湖南浏阳聚康油茶种植专业合作社于2018年提供；

芦丁标准品：纯度为≥98％，购自中国医药上海化学试剂公司；

1,1～二苯基～2～苦基苯肼自由基(DPPH·)：分析纯，购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司；

没食子酸、葡萄糖、无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、1,3～丁二醇均为分析纯试剂，购自国药集团化学试剂有限公司。

UV 5200型紫外可见分光光度计：购自上海元析仪器有限责任公司；

XH～2008DE型智能温控双频超声波萃取仪：购自北京祥鹄科技发展有限公司。

实施例1

一种油茶蒲的制备方法，包括以下步骤：

1.将油茶鲜果室内干燥，待其自然开裂后依次进行人工去籽、粉碎；

2.将粉碎的油茶鲜果过80目筛，得到油茶蒲，装瓶密封备用。

实施例2

一、提取剂的配制方法

量取40mL乙酸乙酯，倒入100mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀即得。

二、油茶蒲提取物的制备方法

1.配料：准备5g实施例1的油茶蒲，按料液比1：12(g/mL)向其中加入提取剂，随后置于超声波萃取仪中进行超声提取，得到油茶蒲粗提液；其中超声频率为40kHz，超声温度为60℃，超声提取时间为40min；

2.分离：趁热对油茶蒲粗提液进行抽滤，用提取剂洗涤滤渣，洗涤2次，合并滤液，得到油茶蒲提取液；

3.干燥：将油茶蒲提取液进行冷冻干燥，粉碎，得到油茶蒲提取物。

实施例3

一、提取剂的配制方法

量取60mL乙酸乙酯，倒入100mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀即得。

二、油茶蒲提取物的制备方法

1.配料：准备5g实施例1的油茶蒲，按料液比1：15(g/mL)向其中加入提取剂，随后置于超声波萃取仪中进行超声提取，得到油茶蒲粗提液；其中，超声频率为40kHz，超声温度为60℃，超声提取时间为45min；

2.分离：趁热对油茶蒲粗提液进行抽滤，用提取剂洗涤滤渣，洗涤2次，合并滤液，得到油茶蒲提取液；

3.干燥：将油茶蒲提取液进行冷冻干燥，粉碎，得到油茶蒲提取物。

实施例4

一、提取剂的配制方法

量取80mL乙酸乙酯，倒入100mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀即得。

二、油茶蒲提取物的制备方法

1.配料：准备5g实施例1的油茶蒲，按料液比1：15(g/mL)向其中加入提取剂，随后置于超声波萃取仪中进行超声提取，得到油茶蒲粗提液；其中超声频率为40kHz，超声温度为50℃，超声提取时间为60min；

2.分离：趁热对油茶蒲粗提液进行抽滤，用提取剂洗涤滤渣，洗涤3次，合并滤液，得到油茶蒲提取液；

3.干燥：将油茶蒲提取液进行冷冻干燥，粉碎，得到油茶蒲提取物。

对比例1

提取剂的配制：量取40mL乙酸乙酯，倒入100mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度，摇匀即得。

除提取剂组成不同外，其余操作与实施例3均相同。

对比例2

提取剂的配制：量取40mL的1,3-丁二醇，倒入100mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度，摇匀即得。

除提取剂组成不同外，其余操作与实施例3均相同。

对比例3

提取剂的配制：量取20mL的1,3-丁二醇，倒入100mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度，摇匀即得。

除提取剂组成不同外，其余操作与实施例3均相同。

对比例4

提取剂的配制：量取40mL的甲醇，倒入100mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度，摇匀即得。

除提取剂组成不同外，其余操作与实施例3均相同。

对照例1

除了提取剂组成为无水乙醇外，其余操作与实施例3均相同。

对照例2

除了提取剂组成为1,3-丁二醇外，其余操作与实施例3均相同。

对照例3

除了提取剂组成为丙酮外，其余操作与实施例3均相同。

对照例4

除了提取剂组成为甲醇外，其余操作与实施例3均相同。

试验例1

一、油茶蒲提取液中黄酮含量的测定

(一)、芦丁标准品的测定及其标准曲线的绘制

1.准确称取0.0153g芦丁标准品，用乙醇溶解并定容至50mL，得到306μg/mL芦丁标准液。

2.精确吸取芦丁标准液0、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL分别放入10mL比色管中，加入5％(w/w)亚硝酸钠水溶液0.3mL，摇匀静置6min；再加入10％(w/w)硝酸铝水溶液0.3mL，摇匀静置6min，加入4％(w/w)氢氧化钠水溶液4.0mL，摇匀，用蒸馏水定容至10mL刻度线，静置15min，用510nm波长光测定其吸光值。

3.以芦丁标准品浓度(C)为横坐标、吸光度值(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得到吸光度值A与芦丁标准品浓度C(μg/mL)之间的回归方程。图1为芦丁标准曲线图。

(二)、油茶蒲提取液中黄酮含量的测定

1.精确吸取油茶蒲提取液1.0mL置于10mL比色管中，加入5％(w/w)亚硝酸钠水溶液0.3mL，摇匀静置6min；再加入10％(w/w)硝酸铝水溶液0.3mL，摇匀静置6min，加入4％(w/w)氢氧化钠水溶液4.0mL，摇匀，用蒸馏水定容至10mL刻度线，静置15min，用510nm波长光测定其吸光度值A_i，以蒸馏水做空白对照测定吸光度值A₀。

2.根据图1-芦丁标准曲线及其回归方程计算测定液中的总黄酮浓度C_i(μg/mL)，再根据相应稀释倍数计算油茶蒲提取液的总黄酮质量和油茶蒲提取物的总黄酮含量。

3.油茶蒲提取液的总黄酮浓度＝10C_i(μg/mL)；油茶蒲提取液的总黄酮质量＝100×10C_i(μg)。

油茶蒲提取物中黄酮含量的计算公式为：

二、油茶蒲提取液中多酚含量的测定

(一)、没食子酸标准品的测定及其标准曲线的绘制

1.准确称取0.0129g没食子酸，用蒸馏水溶解、定容至100mL，得到129μg/mL母液，再准确移取10mL母液，定容至100mL，得到使用液浓度为12.9μg/mL。

2.准确移取0、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL、7mL使用液分别放入25mL比色管中，加入2mL的0.5mol/L福林酚试剂，摇匀静置3min，再加入2mL 10％(w/w)碳酸钠水溶液，摇匀，用蒸馏水定容至25mL刻度线，避光反应60min，用510nm波长光测定其吸光度值。

3.以没食子酸浓度(C)为横坐标、吸光度值(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得到吸光度值A与没食子酸浓度C(μg/mL)之间的回归方程。图2为没食子酸标准曲线图。

(二)、油茶蒲提取液中多酚含量的测定

1.精确吸取油茶蒲提取液1.0mL置于25mL比色管中，加入2mL的0.5mol/L福林酚试剂，摇匀静置3min，再加入2mL 10％(w/w)碳酸钠水溶液，摇匀，用蒸馏水定容至25mL刻度线，避光反应60min，用510nm波长光测定其吸光度值A_i，以蒸馏水做空白对照测定吸光度值A₀。

2.根据图2-没食子酸标准曲线及其回归方程计算测定液中的多酚浓度C_i(μg/mL)，再根据相应稀释倍数计算油茶蒲提取液中的多酚质量和油茶蒲提取物的多酚含量。

3.油茶蒲提取液的总多酚浓度＝25C_i(μg/mL)；油茶蒲提取液的总多酚质量＝100×25C_i(μg)。

油茶蒲提取物中多酚含量的计算公式为：

三、油茶蒲提取液中总糖含量的测定

(一)、葡萄糖标准品的测定及总糖标准曲线的绘制

1.准确称取干燥恒重的葡萄糖0.1000g，加入少量水溶解后，再加入0.8mL的12mol/L的浓盐酸，以蒸馏水定容至100mL，得到0.1g/L葡萄糖标准使用液。

2.准确移取0、0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL、0.8mL的葡萄糖标准使用液置于20mL具塞玻璃管，用蒸馏水补充至1mL。向试液中加入1mL 5％(w/w)苯酚水溶液，快速加入5.0mL浓硫酸，静置10min，使用涡旋振荡器充分混合，然后将试管置于30℃水浴反应20min，用490nm波长光测定其吸光度值。

3.以葡萄糖质量(m)为横坐标、吸光度值(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得到吸光度值A与葡萄糖质量m(mg)之间的回归方程。图3为总糖标准曲线图。

(二)、油茶蒲提取液中总糖含量的测定

1.精确吸取油茶蒲提取液1.0mL置于20mL具塞比色管中，向试液中加入1mL 5％(w/w)苯酚水溶液，快速加入5.0mL浓硫酸，静置10min，使用涡旋振荡器充分混合，然后将试管置于30℃水浴反应20min，用490nm波长光测定其吸光度值A_i，以蒸馏水做空白对照测定吸光度值A₀。

2.根据图3-总糖标准曲线及其回归方程计算测定液中的多糖质量m(mg)，再根据相应稀释倍数计算油茶蒲提取液中的多糖质量和油茶蒲提取物的多糖含量。

3.油茶蒲提取液的多糖质量＝100m(mg)。

油茶蒲提取物中总糖含量的计算公式为：

四、油茶蒲提取物中单糖含量的测定

(一)、葡萄糖标准品的测定及单糖标准曲线的绘制

1.准确称取干燥恒重的葡萄糖0.1000g，加入少量水溶解后，再加入0.8mL 12mol/L的浓盐酸，以蒸馏水定容至100mL，得到1g/L葡萄糖标准液。

2.准确移取1mL、2mL、3mL、4mL、5mL的1g/L葡萄糖标准液分别置于大试管中，分别加入9mL、8mL、7mL、6mL、5mL蒸馏水，配成最终浓度分别为：100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL、400μg/mL、500μg/mL的葡萄糖溶液。

3.取6支试管，第1管加入蒸馏水1mL，另外5支分别加入上述不同梯度葡萄糖溶液1mL，然后各管再加入DNS试剂1mL，沸水浴加热5min，取出冷却后加入蒸馏水8mL，摇匀，以第1管作为空白，用540nm波长光测定其吸光度值。

4.以葡萄糖质量浓度(C)为横坐标、吸光度值(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得到吸光度值A与葡萄糖质量浓度C(μg/mL)之间的回归方程。图4为单糖标准曲线图。

(二)、油茶蒲提取物中单糖含量的测定

1.精确吸取油茶蒲提取液1.0mL置于试管中，然后各管再加入DNS试剂1mL，沸水浴加热5min，取出冷却后加入蒸馏水8mL，摇匀，以1.0mL蒸馏水做空白对照，用540nm波长光测定吸光度值A₀。

2.根据图4-单糖标准曲线图及其回归方程计算测定液中的单糖浓度C_i(μg/mL)，再根据相应稀释倍数计算油茶蒲提取液中的单糖质量和油茶蒲提取物的单糖含量。

3.油茶蒲提取液的单糖质量＝100C_i(μg)。

油茶蒲提取物中单糖含量的计算公式为：

五、油茶蒲提取物中多糖含量的测定

油茶蒲提取物中多糖含量的计算公式为：

多糖含量(％)＝0.9×(总糖(％)-单糖(％))........(5)

采用上述黄酮含量的测试方法对实施例2-4、对比例1、3及对照例1-3的油茶蒲提取液的黄酮含量进行了测试，并按照公式(1)计算了各组油茶蒲提取物的黄酮含量，测试结果见表一。

表一

采用上述多酚含量的测试方法对实施例2～4、对比例1、对照例1的油茶蒲提取液的多酚含量进行了测试，并按照公式(2)计算了各组油茶蒲提取物的多酚含量，测试结果见表二。

表二

采用上述总糖含量、单糖含量的测试方法对实施例2-4，对照例1-4油茶蒲提取液的总糖、单糖含量进行了测试，并按照公式(3)至(5)计算了各组油茶蒲提取物的多糖含量，测试结果见表三。

表三

试验例2

油茶蒲提取液的DPPH·自由基清除率测定

DPPH·是一种性质稳定、以氮为中心的脂溶性自由基。其乙醇溶液呈紫色，其最大吸收波长是517nm。当紫色的DPPH·乙醇溶液与自由基清除剂相互作用时，会生成无色物质，从而使试液的颜色变为无色或浅黄色。因此，用517nm波长光测定试液的吸光值可以确定样品清除DPPH·自由基的能力。

测定油茶蒲提取液中DPPH·自由基清除率的实验步骤为：

1.用无水乙醇配制1mmol/LDPPH·乙醇溶液，置于4℃冰箱备用。

2.实验前，将1mmol/L DPPH·乙醇溶液用无水乙醇稀释至0.1mmol/L。

3.取油茶蒲提取液2mL于试管中，加入0.1mmol/L DPPH·乙醇溶液2mL，混匀后在室温暗处避光反应30min。

4.用517nm波长光测定其吸光值，以等体积提取溶剂和无水乙醇混合液为空白调零；每组试验重复三次，取平均值。

油茶蒲提取液中DPPH·自由基清除率的计算公式为：

清除率(％)＝[A₀－(A_i－A_j)]/A₀×100％；

其中A₀为等体积无水乙醇代替供试品测得的吸光度值；A_i为试样的吸光度值；A_j为等体积无水乙醇代替DPPH·乙醇溶液测得的吸光度值。

按照上述试验方法对实施例2-4、对比例1-4及对照例3-4中油茶蒲提取液的DPPH·自由基清除率进行了测试，测试结果见表四。

表四

以上数据表明：

实施例2-4油茶蒲提取物中黄酮含量大于3.8％，多酚含量大于2.5％，多糖含量大于9％；同时，每组实施例油茶蒲提取物的DPPH·自由基清除率均高于90％。本发明实施例2-4油茶蒲提取物活性组分黄酮、多酚及多糖的含量高且自由基清除性能好，而对比例1-4油茶蒲提取物的活性组分含量及自由基清除率均不及本发明实施例高。

综上所述：本发明采用特定体积配比的乙酸乙酯/乙醇混合溶液作为提取剂制备油茶蒲提取物，所得油茶蒲提取物中活性物质黄酮、多酚、多糖含量高，同时油茶蒲提取物的自由基清除率显著提高，尤其是，100mL提取剂中含有60mL乙酸乙酯时，活性组分的提取效率及提取物的自由基清除性能较好，所述油茶蒲提取物中黄酮、多酚、多糖的含量分别为4.13％、2.87％、10.78％，DPPH·自由基清除率为92.69％。

Claims (10)

1.一种油茶蒲提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

采用提取剂对油茶蒲进行超声提取，得到油茶蒲粗提液；所述提取剂包括乙酸乙酯/乙醇混合溶液。

2.根据权利要求1所述的一种油茶蒲提取物的制备方法，其特征在于，所述乙酸乙酯/乙醇混合溶液的配制方法包括以下步骤：

将40～80mL乙酸乙酯倒入100mL容量瓶，用无水乙醇定容至刻度。

3.根据权利要求1所述的一种油茶蒲提取物的制备方法，其特征在于，所述乙酸乙酯/乙醇混合溶液的配制方法包括以下步骤：

将60mL乙酸乙酯倒入100mL容量瓶，用无水乙醇定容至刻度。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述油茶蒲的制备方法包括以下步骤：

将油茶鲜果依次去籽、粉碎、过筛，得到油茶蒲；

优选地，将粉碎后的油茶鲜果过80目筛。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还包括：对油茶蒲粗提液进行固液分离，再将所得分离液依次干燥、粉碎，得到油茶蒲提取物；

优选地，所述固液分离包括将油茶蒲粗提液趁热抽滤，用提取剂对滤渣洗涤2～3次，合并滤液，得到分离液。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述干燥包括冷冻干燥。

7.根据权利要求1-6任一项所述的制备方法，其特征在于，油茶蒲与提取剂的料液比为1g:12～18mL，优选为1g:15mL。

8.根据权利要求1-6任一项所述的制备方法，其特征在于，超声频率为30～50kHz，优选为40kHz；

优选地，超声温度为50～65℃，更优选为60℃；

优选地，超声时长为40～60min，更优选为45min。

9.一种油茶蒲提取物，其特征在于，根据权利要求1至8任一所述的制备方法制得；

所述油茶蒲提取物的有效成分包括黄酮、多酚和多糖；

优选地，所述油茶蒲提取物中黄酮的质量含量≥3.0％，更优选为3.24％～4.13％；

优选地，所述油茶蒲提取物中多酚的质量含量≥2.5％，更优选为2.65％～3.05％；

优选地，所述油茶蒲提取物中多糖的质量含量≥9％，更优选为9％～11％。

10.权利要求9所述的油茶蒲提取物在制备抗氧化产品中的应用；

优选地，所述抗氧化产品包括药品、食品、保健品或化妆品。