CN109796277A - 一种复合微生物肥料及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种复合微生物肥料及其应用，按所述复合微生物肥料的总质量为100％计，该复合微生物肥料包括以下质量百分比的原料：哈茨木霉发酵副产物30～90％、防病害活性成分0.1～5％、惰性填料2～15％、第一营养成分0～35％、第二营养成分0～30％、第三营养成分0～0.1％、芽孢杆菌0～40％和植物生长调节剂0～15％。本发明的复合微生物肥料综合利用哈茨木霉发酵副产物、营养成分、防病害活性成分、芽孢杆菌、惰性填料和植物生长调节剂的相互协同作用，使得到的复合微生物肥料营养全面，杀虫、防病害和促植物生长效果显著，尤其在促番茄幼苗生长、抑制黄瓜立枯病以及草莓死棵烂苗的防治上具有良好的效果。
Description
技术领域
本发明涉及肥料技术领域，具体而言，涉及一种复合微生物肥料及其应用。
背景技术
随着化肥农药使用带来的生态环境问题的日益凸显，例如土壤酸化、重茬障碍、农药残留、水体污染等，生物防治因为能够部分或全部代替化学农药和肥料投入而得到关注，且在某些植物病害方面生物防治相对于化学投入品具有更好的防治效果，相对化学农药具有更低廉的价格等优势，得到越来越多的关注。在植物病虫害的防治中占到越来越重要的地位。
木霉属真菌Trichoderma spp.是迄今为止研究最深入、应用最广泛的生防菌，早在1932年木霉属真菌的生防功能就被Weindling发现，木霉属真菌适应性强、杀菌谱广、多种作用机理、生长快速和对营养要求低，且对于土壤有益菌(例如根瘤菌等)没有不良作用，对人畜安全等特点。木霉属真菌已经被成功应用于作物土传病害的防治，例如防治由立枯丝核菌Rhizactonia solani、齐整小核菌Sclerotium rolfsii、镰刀菌Fusarium及疫霉属Phytophthora等病原菌引起的土传病害。
哈茨木霉属于一种木霉属真菌，传统的哈茨木霉的发酵工艺主要采用固态发酵，发酵结束后机械分离孢子和其余发酵副产物，真菌孢子用于生产各种产品，而发酵副产物则被当做低端产品出售，或者灭菌后进行二次发酵。其表面残留的孢子未能得到有效利用，造成了浪费。
发明内容
有鉴于此，本发明提供的一种复合微生物肥料及其应用，更好的克服了上述现有技术存在的问题和缺陷，该复合微生物肥料将哈茨木霉发酵副产物、营养成分、防病害活性成分、芽孢杆菌、惰性填料和植物生长调节剂复配，其中，营养成分能够均衡营养，并为哈茨木霉提供良好的生长条件，植物生长调节剂能够有效调节植物生长，防病害活性成分能对哈茨木霉发酵副产物发挥作用起到协同增效作用，芽孢杆菌具有良好的生防和杀虫作用，惰性填料能够保证哈茨木霉发酵副产物的活性成分，延长有效期，通过综合利用哈茨木霉发酵副产物、营养成分、防病害活性成分、芽孢杆菌、惰性填料和植物生长调节剂的相互协同作用，使得到的复合微生物肥料营养全面，杀虫、防病害和促植物生长效果显著，尤其在促番茄幼苗生长、抑制黄瓜立枯病以及草莓死棵烂苗的防治上具有稳定良好的效果；并且该复合微生物肥料成本低廉，对生态环境友好无毒副作用，长期使用能够起到对改良土壤微生物环境的作用，有效解决化学农药农残高、容易引起抗性的缺点。
本发明提供技术方案如下：
一种复合微生物肥料，按所述复合微生物肥料的总质量为100％计，包括以下质量百分比的原料：哈茨木霉发酵副产物30～90％、防病害活性成分0.1～5％、惰性填料2～15％、第一营养成分0～35％、第二营养成分0～30％、第三营养成分0～0.1％、芽孢杆菌0～40％和植物生长调节剂0～15％；所述第一营养成分为磷酸氢二钾；所述第二营养成分为水溶性氨基酸；所述第三营养成分为黄腐酸钾、钼酸铵、硼酸、腐殖酸及腐殖酸钾中的一种；所述防病害活性成分为鱼蛋白、壳寡糖、壳聚糖、紫草素、雷公藤提取物中的一种；所述惰性填料为白炭黑、膨润土、淀粉、小麦粉、高粱粉、碳酸钙、黏土、云母、滑石粉、合成沸石和硅镁土中的一种；所述植物生长调节剂为云苔素内酯、赤霉素和吲哚乙酸中的一种。
作为上述技术方案的进一步改进，按所述复合微生物肥料的总质量为100％计，包括以下质量百分比的原料：哈茨木霉发酵副产物40～70％、防病害活性成分0.2～1％、惰性填料6～9％、第一营养成分10～25％、第二营养成分5～15％、第三营养成分0.001～0.01％、芽孢杆菌5～20％和植物生长调节剂3～10％。
作为上述技术方案的进一步改进，所述哈茨木霉发酵副产物通过以下方法制备得到：
将哈茨木霉菌株移至PDA培养基进行平板培养，待平板产孢后，将哈茨木霉孢子接种于固体发酵底物上进行发酵，再将得到的发酵产物分离为真菌孢子和哈茨木霉发酵副产物；所述发酵过程中：发酵湿度为40～60％，发酵温度为25～35℃，发酵时间为4～8天。
作为上述技术方案的进一步改进，所述固体发酵底物包括纤维类物质和淀粉类物质；所述纤维类物质包括麦麸、甘蔗渣、茶叶渣、咖啡渣、甜菜粕和玉米秸秆中的一种或几种；所述淀粉类物质包括籼米、粳米、糯米、高粱米和小米中的一种或几种；所述纤维类物质和所述淀粉类物质的质量比为1：(3～5)；所述哈茨木霉孢子在所述固体发酵底物上的接种量为0.08～0.12％。
作为上述技术方案的进一步改进，所述第三营养成分为钼酸铵。
作为上述技术方案的进一步改进，所述防病害活性成分为鱼蛋白。
作为上述技术方案的进一步改进，所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌的混合菌。
作为上述技术方案的进一步改进，所述惰性填料为膨润土。
作为上述技术方案的进一步改进，所述植物生长调节剂为云苔素内酯。
本发明还提供了一种上述的复合微生物肥料在促番茄幼苗生长、防治黄瓜立枯病和草莓死棵烂苗中的应用。
与现有技术相比，本发明的一种复合微生物肥料及其应用的有益效果是：
(1)本发明的复合微生物肥料将哈茨木霉发酵副产物、营养成分、防病害活性成分、芽孢杆菌、惰性填料和植物生长调节剂复配，其中，营养成分能够均衡营养，并为哈茨木霉提供良好的生长条件，植物生长调节剂能够有效调节植物生长，防病害活性成分能对哈茨木霉发酵副产物发挥作用起到协同增效作用，芽孢杆菌具有良好的生防和杀虫作用，惰性填料能够保证哈茨木霉发酵副产物的活性成分，延长有效期，通过综合利用哈茨木霉发酵副产物、营养成分、防病害活性成分、芽孢杆菌、惰性填料和植物生长调节剂的相互协同作用，使得到的复合微生物肥料营养全面，杀虫、防病害和促植物生长效果显著，尤其在促番茄幼苗生长、抑制黄瓜立枯病以及草莓死棵烂苗的防治上具有稳定良好的效果。
(2)本发明的复合微生物肥料使用安全，对生态环境友好无毒副作用，长期使用能够起到对改良土壤微生物环境的作用，有效解决化学农药农残高、容易引起抗性的缺点；且该复合微生物肥料的原料及制备成本低，市场前景广阔，适合规模化生产。
为使本发明的上述目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，作详细说明如下。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面结合实施例的方式对本发明的技术方案做详细说明，在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。
但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。
除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。
如本文所用之术语：
“由……制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
连接词“由……组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由……组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。
当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1～5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1～4”、“1～3”、“1～2”、“1～2和4～5”、“1～3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
“和/或”用于表示所说明的情况的一者或两者均可能发生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)。
本发明提供了一种复合微生物肥料，按所述复合微生物肥料的总质量为100％计，包括以下质量百分比的原料：
哈茨木霉发酵副产物30～90％，如30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％等；
防病害活性成分0.1～5％，如0.1％、0.2％、0.5％、0.8％、1％、1.2％、1.5％、1.8％或2％等；
惰性填料2～15％，如2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、12％、14％或15％等；
第一营养成分0～35％，如0、1％、3％、5％、8％、10％、12％、15％、20％、25％、28％、30％或35％等；
第二营养成分0～30％，如0、0.5％、2％、5％、8％、10％、12％、15％、18％、20％、25％或30％等；
第三营养成分0～0.1％，如0％、0.001％、0.003％、0.005％、0.01％、0.03％、0.05％或0.1％等；
芽孢杆菌0～40％，如0、1％、3％、5％、8％、10％、15％、20％、25％、30％、35％或40％等；
植物生长调节剂0～15％，如0、0.5％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、12％、14％或15％等。
所述防病害活性成分为鱼蛋白、壳寡糖、壳聚糖、紫草素、雷公藤提取物中的一种；优选地，所述防病害活性成分为鱼蛋白。
所述惰性填料为白炭黑、膨润土、淀粉、小麦粉、高粱粉、碳酸钙、黏土、云母、滑石粉、合成沸石和硅镁土中的一种；优选地，所述惰性填料为膨润土。
所述第一营养成分为磷酸氢二钾。
所述第二营养成分为水溶性氨基酸。
所述第三营养成分为黄腐酸钾、钼酸铵、硼酸、腐殖酸及腐殖酸钾中的一种；优选地，所述第三营养成分为钼酸铵。
优选地，所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌的混合菌，更优选地，枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌的质量比为1：1。
所述植物生长调节剂为云苔素内酯、赤霉素和吲哚乙酸中的一种；优选地，所述所述植物生长调节剂为云苔素内酯。
本发明的复合微生物肥料将哈茨木霉发酵副产物、营养成分、防病害活性成分、芽孢杆菌、惰性填料和植物生长调节剂复配，其中，营养成分能够均衡营养，并为哈茨木霉提供良好的生长条件，植物生长调节剂能够有效调节植物生长，防病害活性成分能对哈茨木霉发酵副产物发挥作用起到协同增效作用，芽孢杆菌具有良好的生防和杀虫作用，惰性填料能够保证哈茨木霉发酵副产物的活性成分，延长有效期，通过综合利用哈茨木霉发酵副产物、营养成分、防病害活性成分、芽孢杆菌、惰性填料和植物生长调节剂的相互协同作用，使得到的复合微生物肥料营养全面，杀虫、防病害和促植物生长效果显著，尤其在促番茄幼苗生长、抑制黄瓜立枯病以及草莓死棵烂苗的防治上具有稳定良好的效果。
优选地，按所述复合微生物肥料的总质量为100％计，所述复合微生物肥料包括以下质量百分比的原料：哈茨木霉发酵副产物40～70％、防病害活性成分0.2～1％、惰性填料6～9％、第一营养成分10～25％、第二营养成分5～15％、第三营养成分0.001～0.01％、芽孢杆菌5～20％和植物生长调节剂3～10％。
优选地，所述哈茨木霉发酵副产物通过以下方法制备得到：
将哈茨木霉菌株移至PDA培养基进行平板培养，待平板产孢后，将哈茨木霉孢子接种于固体发酵底物上进行发酵，至绿色孢子覆满发酵底物表面，再将得到的发酵产物通过机械震动分离为真菌孢子和哈茨木霉发酵副产物。
上述发酵过程中：发酵湿度为40～60％，如40％、45％、50％、55％或60％；发酵温度为25～35℃，如25℃、30℃或35℃；发酵时间为4～8天，如4天、5天、6天、7天或8天。
需要说明的是，上述哈茨木霉菌株优选采用命名为Trichoderma harzianum，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.15679，保藏日期为2018年5月21日的哈茨木霉菌株。
当然，上述哈茨木霉菌株亦可采用保藏在中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为ACCC 30588，保藏日期为2001年07月21日的哈茨木霉菌株，还可以采用保藏在中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为ACCC 30371，保藏日期为2001年01月01日的哈茨木霉菌株等。
优选地，上述固体发酵底物包括纤维类物质和淀粉类物质；所述纤维类物质包括但不限于麦麸、甘蔗渣、茶叶渣、咖啡渣、甜菜粕和玉米秸秆中的一种或几种的混合物；所述淀粉类物质包括但不限于籼米、粳米、糯米、高粱米和小米中的一种或几种的混合物。所述纤维类物质和所述淀粉类物质的质量比为1：(3～5)，如1：3、1：4或1：5等。
优选地，所述哈茨木霉孢子在所述固体发酵底物上的接种量为0.08～0.12％，如0.08％、0.09％、0.1％、0.11％或0.12％。
本发明还提供了一种上述的复合微生物肥料的制备方法，包括：将各原料混合均匀。
本发明还提供了一种上述的复合微生物肥料在促番茄幼苗生长、防治黄瓜立枯病和草莓死棵烂苗中的应用。
为了便于理解本发明，下面结合实施例来进一步说明本发明的技术方案。申请人声明，本发明通过以下实施例来说明本发明的详细工艺流程，但本发明并不局限于这些具体的工艺流程，即不意味着本发明应依赖下述详细工艺流程才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
实施例1
(1)哈茨木霉发酵副产物的制备：将哈茨木霉菌株移至PDA培养基进行平板培养，待平板产孢后，将哈茨木霉孢子按0.08％的接种量接种于固体发酵底物上，在湿度为40％和温度为25℃条件下发酵8天，至绿色哈茨木霉孢子覆满发酵底物表面，有效活菌数约达到1.5×1010cfu/g；再将得到的发酵产物通过机械震动分离为真菌孢子和哈茨木霉发酵副产物；其中，所述固体发酵底物由纤维类物质(包括麦麸、甘蔗渣、茶叶渣及玉米秸秆)和淀粉类物质(包括籼米、粳米、糯米、高粱米及小米)按1：3的质量比混合得到。
(2)复合微生物肥料的制备：按重量份取步骤30份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、2份壳寡糖、15份白炭黑、3份磷酸氢二钾、8份水溶性氨基酸、40份芽孢杆菌和2份赤霉素，混合均匀得到复合微生物肥料。
实施例2
(1)哈茨木霉发酵副产物的制备：将哈茨木霉菌株移至PDA培养基进行平板培养，待平板产孢后，将哈茨木霉孢子按0.08％的接种量接种于固体发酵底物上，在湿度为50％和温度为30℃条件下发酵6天，至绿色哈茨木霉孢子覆满发酵底物表面，有效活菌数约达到1.5×1010cfu/g；再将得到的发酵产物通过机械震动分离为真菌孢子和哈茨木霉发酵副产物；其中，所述固体发酵底物由纤维类物质(包括麦麸、甘蔗渣、茶叶渣及玉米秸秆)和淀粉类物质(包括籼米、粳米、糯米、高粱米及小米)按1：4的质量比混合得到。
(2)复合微生物肥料的制备：按重量份取步骤35份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、1.5份壳聚糖、10份碳酸钙、14.499份水溶性氨基酸、0.001份钼酸铵、35份芽孢杆菌和5份赤霉素，混合均匀得到复合微生物肥料。
实施例3
(1)哈茨木霉发酵副产物的制备：将哈茨木霉菌株移至PDA培养基进行平板培养，待平板产孢后，将哈茨木霉孢子按0.08％的接种量接种于固体发酵底物上，在湿度为60％和温度为35℃条件下发酵4天，至绿色哈茨木霉孢子覆满发酵底物表面，有效活菌数约达到1.5×1010cfu/g；再将得到的发酵产物通过机械震动分离为真菌孢子和哈茨木霉发酵副产物；其中，所述固体发酵底物由纤维类物质(包括麦麸、甘蔗渣、茶叶渣及玉米秸秆)和淀粉类物质(包括籼米、粳米、糯米、高粱米及小米)按1：5的质量比混合得到。
(2)复合微生物肥料的制备：按重量份取步骤40份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、5份鱼蛋白、2份白炭黑、17.995份磷酸氢二钾、0.005份硼酸、30份芽孢杆菌和10份赤霉素，混合均匀得到复合微生物肥料。
实施例4
同实施例2的区别在于：步骤(2)的复合微生物肥料的制备如下：
按重量份取步骤60份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、0.9份壳寡糖、5份膨润土、10份磷酸氢二钾、4份水溶性氨基酸、0.1份硼酸和20份芽孢杆菌，混合均匀得到复合微生物肥料。
实施例5
同实施例2的区别在于：步骤(2)的复合微生物肥料的制备如下：
按重量份取步骤80份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、0.5份壳寡糖、3份膨润土、1.95份磷酸氢二钾、0.5份水溶性氨基酸、0.05份腐殖酸钾和14份赤霉素，混合均匀得到复合微生物肥料。
实施例6
同实施例2的区别在于：步骤(2)的复合微生物肥料的制备如下：
按重量份取步骤35份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、2份壳寡糖、4份白炭黑、6.95份磷酸氢二钾、2份水溶性氨基酸、0.05份腐殖酸钾、35份芽孢杆菌和15份赤霉素，混合均匀得到复合微生物肥料。
实施例7
同实施例2的区别在于：步骤(2)的复合微生物肥料的制备如下：
按重量份取步骤35份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、2份鱼蛋白、4份膨润土、6.95份磷酸氢二钾、2份水溶性氨基酸、0.05份钼酸铵、35份芽孢杆菌和15份云苔素内酯，混合均匀得到复合微生物肥料。
实施例8
同实施例2的区别在于：步骤(2)的复合微生物肥料的制备如下：
按重量份取步骤45份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、0.2份鱼蛋白、8.999份膨润土、10份磷酸氢二钾、5.8份水溶性氨基酸、0.001份钼酸铵、20份芽孢杆菌和10份云苔素内酯，混合均匀得到复合微生物肥料。
实施例9
同实施例2的区别在于：步骤(2)的复合微生物肥料的制备如下：
按重量份取步骤50份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、0.5份鱼蛋白、7份膨润土、15份磷酸氢二钾、10份水溶性氨基酸、0.005份钼酸铵、12.495份芽孢杆菌和5份云苔素内酯，混合均匀得到复合微生物肥料。
实施例10
同实施例2的区别在于：步骤(2)的复合微生物肥料的制备如下：
按重量份取步骤60份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、0.99份鱼蛋白、6份膨润土、15份磷酸氢二钾、10份水溶性氨基酸、0.01份钼酸铵、5份芽孢杆菌和3份云苔素内酯，混合均匀得到复合微生物肥料。
实施例11
同实施例2的区别在于：步骤(2)的复合微生物肥料的制备如下：
按重量份取步骤90份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、0.1份鱼蛋白、2份膨润土、1份磷酸氢二钾、0.5份水溶性氨基酸、0.01份钼酸铵、4.39份芽孢杆菌和2份云苔素内酯，混合均匀得到复合微生物肥料。
实施例12
同实施例2的区别在于：步骤(2)的复合微生物肥料的制备如下：
按重量份取步骤90份步骤(1)制备的哈茨木霉发酵副产物、0.1份壳寡糖、2份碳酸钙、1份磷酸氢二钾、0.5份水溶性氨基酸、0.01份硼酸、4.39份芽孢杆菌和2份吲哚乙酸，混合均匀得到复合微生物肥料。
对比例1
同实施例12的区别在于：去掉步骤(2)中的哈茨木霉发酵副产物。
对比例2
同实施例12的区别在于：去掉步骤(2)中的壳寡糖。
对比例3
同实施例12的区别在于：去掉步骤(2)中的碳酸钙。
上述实施例1-12及对比例2-3中的哈茨木霉菌株均采用命名为Trichodermaharzianum，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.15679，保藏日期为2018年5月21日的哈茨木霉菌株。
上述实施例及对比例中的芽孢杆菌均采用枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌按质量比为1：1的混合菌。
一、测试本发明实施例1～12和对比例1～3制备的复合微生物肥料对黄瓜立枯病的抑制效果。
具体实施方法如下：
对在营养土中培育15-20天的黄瓜幼苗进行伤根处理，移栽至无菌的营养土中，从活化4天的立枯丝核菌平板边缘打取7mm菌饼，接种至移栽至无菌的营养土中的黄瓜幼苗根际，将本发明实施例1～12和对比例1～3制备的复合微生物肥料分别稀释300倍后，分别浇灌到接种了黄瓜立枯病病原菌的土壤中。另以只接种病原菌及浇灌清水的处理作为病原对照组(Pathogen)；以只接种空白PDA培养基(培养立枯丝核菌使用)及浇灌清水的处理作为空白对照组(CK)。
将上述接种了所有经处理的黄瓜幼苗放置于温度为29～31℃，湿度为80～85％的环境中培养4天后，进行采收，观察并记录黄瓜幼苗病级，计算发病指数和产品防效。
病级计算方法如下：
0级：植株正常；
1级：茎基部病斑占茎围1/4以下；
2级：茎基部病斑占茎围1/4～1/2；
3级：茎基部病斑占茎围1/2以上；
4级：茎基部病斑占茎围100％，植株死亡。
病情指数(％)＝∑(各级病株数×该病级值)/(调查总株数×最高级值)×100
相对防效(％)＝(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数×100
防治结果如下表1所示。
表1
| 项目 | 病情指数 | 相对防效 | 叶片数 | 叶片展开度 | 茎粗 |
| 实施例1 | 67.22％ | 17.96％ | 2.33±0.33e | 9.27±0.85abcd | 3.25±0.08abcd |
| 实施例2 | 55.00％ | 32.88％ | 3±0b | 9.98±0.38abc | 3.06±0.07cd |
| 实施例3 | 56.39％ | 31.18％ | 2.86±0.14bcd | 10.5±0.49a | 3.11±0.12bcd |
| 实施例4 | 57.78％ | 29.48％ | 2.42±0.19de | 9.33±0.17abcd | 3.06±0.10cd |
| 实施例5 | 67.50％ | 17.62％ | 2.8±0.11bcd | 8.51±0.35bcd | 3.09±0.08bcd |
| 实施例6 | 62.22％ | 24.07％ | 3.00±0b | 9.27±0.44abcd | 3.079±0.07cd |
| 实施例7 | 54.17％ | 33.89％ | 2.92±0.14bc | 10.25±0.35ab | 3.13±0.06bcd |
| 实施例8 | 42.61％ | 48.00％ | 3.5±0.5a | 10.7±2.1a | 3.55±0.09a |
| 实施例9 | 41.67％ | 49.15％ | 3±0.22b | 10.24±0.93ab | 3.21±0.07bcd |
| 实施例10 | 43.05％ | 47.46％ | 2.85±0.10bcd | 10.14±0.53abc | 3.41±0.07ab |
| 实施例11 | 56.94％ | 30.51％ | 2.46±0.14cde | 9.36±0.28abcd | 3.12±0.05bcd |
| 实施例12 | 59.72％ | 27.12％ | 2.95±0.07bc | 9.91±0.34abcd | 3.15±0.05bcd |
| 对比例1 | 72.13％ | 11.97％ | 2.41±0.23de | 8.58±0.56bcd | 3.13±0.05bcd |
| 对比例2 | 77.76％ | 5.10％ | 2.32±0.25e | 8.55±0.38bcd | 3.05±0.13cd |
| 对比例3 | 69.58％ | 15.08％ | 2.28±0.46e | 8.67±0.28bcd | 3.08±0.06bcd |
| ck | — | — | 1.06±0.06f | 5.12±0.27e | 3.00±0.05cd |
| Pathogen | 81.94％ | — | 1.1±0.1f | 4.99±0.24e | 2.93±0.05d |
由上表1可知，本发明实施例1～12制备的复合微生物肥料较对比例1～3制备的复合微生物肥料对黄瓜立枯病的防治效果更好，而且采用哈茨木霉发酵副产物、鱼蛋白、膨润土、磷酸氢二钾、水溶性氨基酸、钼酸铵、芽孢杆菌和云苔素内酯复配得到的复合微生物肥料对黄瓜立枯病的防治效果最佳。
二、测试本发明实施例1～12和对比例1～3制备的复合微生物肥料对促番茄幼苗生长的效果。
具体实施方法如下：
在番茄幼苗生长至15～20天时，分别将本发明实施例1～12和对比例1～3制备的复合微生物肥料稀释300倍后，对番茄幼苗按2000mL/育苗盆进行浇灌；对本发明实施例8制备的复合微生物肥料另分别稀释100倍、500倍及1000倍后，对番茄幼苗按2000mL/育苗盆进行浇灌；同时对按2000mL/育苗盆用清水浇灌番茄幼苗作为空白对照组(CK)；按2000mL/育苗盆用市售产品浇灌番茄幼苗作为对照组，市售产品预先稀释300倍。
测试结果如下表2所示。
表2
由表2结果可知：(1)在稀释相同倍数的情况下，采用本发明实施例制备的复合微生物肥料浇灌番茄幼苗，相比采用对比例制备的复合微生物肥料及市售产品浇灌番茄幼苗对促番茄幼苗生长作用更明显。
(2)将本发明实施例制备的复合微生物肥料进行100-1000倍稀释均对番茄幼苗有明显的促生长作用；其中采用本发明实施例制备的复合微生物肥料的100倍稀释液浇灌番茄幼苗，对番茄幼苗的促生长作用最明显；而综合考虑成本，采用本发明实施例制备的复合微生物肥料的300倍稀释液浇灌番茄幼苗，能够起到很好的培育番茄壮苗作用。
三、测试本发明实施例1～12和对比例1～3制备的复合微生物肥料对草莓死棵烂苗的防治效果。
具体实施方法如下：
在华南农业大学教学科研基地开展田间试验，试验田前茬作物为红薯，土壤为红土，土壤贫瘠贫瘠，病虫害发生较严重，重茬障碍严重。对土壤进行整地、划分小区、施底肥、覆膜后，移栽草莓，在移栽的同时分区100mL/株浇灌本发明实施例1～12和对比例1～3制备的复合微生物肥料的300倍稀释液，缓苗后(移栽后20天左右)再继续按100mL/株对应浇灌本发明实施例1～12和对比例1～3制备的复合微生物肥料。以按100mL/株用清水浇灌处理作为空白对照组(CK)；以按100mL/株用市售产品的300倍稀释液浇灌处理作为阳性对照组。最后，对每个处理中的草莓死苗率进行统计，结果如下表3所示。
表3
| 项目 | 死苗率 | 防治率 |
| 实施例1 | 11.33％ | 74.25％ |
| 实施例2 | 10.78％ | 75.50％ |
| 实施例3 | 11.89％ | 72.98％ |
| 实施例4 | 10.67％ | 75.75％ |
| 实施例5 | 10.65％ | 75.80％ |
| 实施例6 | 11.78％ | 73.23％ |
| 实施例7 | 11.85％ | 73.07％ |
| 实施例8 | 8.65％ | 80.34％ |
| 实施例9 | 8.98％ | 79.59％ |
| 实施例10 | 9.87％ | 77.57％ |
| 实施例11 | 11.23％ | 74.48％ |
| 实施例12 | 10.57％ | 75.98％ |
| 对比例1 | 18.65％ | 57.61％ |
| 对比例2 | 15.43％ | 64.93％ |
| 对比例3 | 17.16％ | 61.00％ |
| ck | 11.33％ | 74.25％ |
| 市售产品 | 10.78％ | 75.50％ |
由表3结果可知，经本发明实施例制备的复合微生物肥料处理后，草莓的死苗率明显低于经对比例制备的复合微生物肥料处理后的死苗率，且与经市场产品处理后的死苗率相近；本发明实施例制备的复合微生物肥料对草莓死棵烂苗的防治率明显高于对比例制备的复合微生物肥料的对草莓死棵烂苗的防治率，且与市场产品对草莓死棵烂苗的防治率相近。
上述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明配方及制备工艺可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种复合微生物肥料，其特征在于：按所述复合微生物肥料的总质量为100％计，包括以下质量百分比的原料：哈茨木霉发酵副产物30～90％、防病害活性成分0.1～5％、惰性填料2～15％、第一营养成分0～35％、第二营养成分0～30％、第三营养成分0～0.1％、芽孢杆菌0～40％和植物生长调节剂0～15％；所述防病害活性成分为鱼蛋白、壳寡糖、壳聚糖、紫草素、雷公藤提取物中的一种；所述惰性填料为白炭黑、膨润土、淀粉、小麦粉、高粱粉、碳酸钙、黏土、云母、滑石粉、合成沸石和硅镁土中的一种；所述第一营养成分为磷酸氢二钾；所述第二营养成分为水溶性氨基酸；所述第三营养成分为黄腐酸钾、钼酸铵、硼酸、腐殖酸及腐殖酸钾中的一种；所述植物生长调节剂为云苔素内酯、赤霉素和吲哚乙酸中的一种。
2.根据权利要求1所述的复合微生物肥料，其特征在于：按所述复合微生物肥料的总质量为100％计，包括以下质量百分比的原料：哈茨木霉发酵副产物40～70％、防病害活性成分0.2～1％、惰性填料6～9％、第一营养成分10～25％、第二营养成分5～15％、第三营养成分0.001～0.01％、芽孢杆菌5～20％和植物生长调节剂3～10％。
3.根据权利要求1所述的复合微生物肥料，其特征在于：所述哈茨木霉发酵副产物通过以下方法制备得到：
将哈茨木霉菌株移至PDA培养基进行平板培养，待平板产孢后，将哈茨木霉孢子接种于固体发酵底物上进行发酵，再将得到的发酵产物分离为真菌孢子和哈茨木霉发酵副产物；所述发酵过程中：发酵湿度为40～60％，发酵温度为25～35℃，发酵时间为4～8天。
4.根据权利要求3所述的复合微生物肥料，其特征在于：所述固体发酵底物包括纤维类物质和淀粉类物质；所述纤维类物质包括麦麸、甘蔗渣、茶叶渣、咖啡渣、甜菜粕和玉米秸秆中的一种或几种；所述淀粉类物质包括籼米、粳米、糯米、高粱米和小米中的一种或几种；所述纤维类物质和所述淀粉类物质的质量比为1：(3～5)；所述哈茨木霉孢子在所述固体发酵底物上的接种量为0.08～0.12％。
5.根据权利要求1所述的复合微生物肥料，其特征在于：所述第三营养成分为钼酸铵。
6.根据权利要求1所述的复合微生物肥料，其特征在于：所述防病害活性成分为鱼蛋白。
7.根据权利要求1所述的复合微生物肥料，其特征在于：所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌的混合菌。
8.根据权利要求1所述的复合微生物肥料，其特征在于：所述惰性填料为膨润土。
9.根据权利要求1所述的复合微生物肥料，其特征在于：所述植物生长调节剂为云苔素内酯。
10.一种如权利要求1～9任一项所述的复合微生物肥料在促番茄幼苗生长、防治黄瓜立枯病和草莓死棵烂苗中的应用。
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