CN109790500A

CN109790500A - 包含珍珠发酵物的用于改善皮肤状况的组合物

Info

Publication number: CN109790500A
Application number: CN201780058463.5A
Authority: CN
Inventors: 白恩种; 郑刚喜; 全钟恩; 崔龙虎; 许炳石; 刘正镇; 姜承贤; 南缜姝; 卢鈗花; 金延俊; 千知恩; 阴炳旭
Original assignee: Cosmax China Inc; Sempio Foods Co
Current assignee: Cosmax China Inc; Sempio Foods Co
Priority date: 2016-09-23
Filing date: 2017-09-25
Publication date: 2019-05-21
Also published as: EP3517599B1; EP3517599A4; EP3517599A1; WO2018056778A1; US20200016063A1

Abstract

本发明涉及一种包含珍珠发酵物的用于改善皮肤状况的组合物，更具体而言，本发明提供使用如氨基酸、多酚及有机钙含量等成分显着增加的珍珠发酵物来与现有的珍珠提取物相比如抑制黑色素形成、促进角质细胞分化和促进角质脱落的活性等皮肤状况改善效果显著得到改善的用于改善皮肤状况的组合物。

Description

包含珍珠发酵物的用于改善皮肤状况的组合物

技术领域

背景技术

珍珠含有大量的钙，这是由贝壳表皮膜的上皮细胞分泌的碳酸钙，当异物进入壳中时，贝壳硬朊蛋白将其用作为碳酸钙的结晶的文石晶体的小晶体形成为几层，从而形成珍珠层。因此，珍珠的主要成分由90至95％碳酸钙(CaCO₃)、约5％蛋白质(贝壳硬朊(conchiolin))以及其他约20种矿物质和各种生理活性物质即氨基酸构成。由于这些组成成分，珍珠被广泛用作保健品或皮肤美容材料。已知当作为钙的供应源摄取珍珠粉或为了防止皮肤老化和美白效果而使用珍珠时，皮肤保持在弱酸性状态以增加皮肤免疫力。

然而，珍珠粉具有因不易于溶解在水中而有益成分很难被体内吸收的缺点，因此，在现有技术中，为了改善这一点，使用通过用乙酸等处理珍珠粉来转化成水溶性形式的珍珠提取物。

但现有的珍珠提取物只是具有珍珠的碳酸钙转换为离子化状态的水溶性珍珠粉的形式而已，目前尚未报告过以珍珠的有益成分和其他附加成分复合作用于皮肤来在改善皮肤状况方面表示出更优异效果的方式制备的组合物。

另一方面，决定人体肤色的因素包括黑色素、角质层厚度、外周血管、血红蛋白及胡萝卜素等。其中，黑色素是决定肤色的最重要因素。产生黑色素的黑色素生成细胞的数量与种族或肤色无关地恒定，但根据黑色素化程度、黑色素体的大小、数量及分布状态以及角质形成细胞中黑色素体的分解性能等的不同而出现肤色差异。尤其，在白色皮肤中富有Ⅰ、Ⅱ期黑色素体(melanosome)，而在黑色皮肤中富有Ⅲ、Ⅳ期黑色素体(Seungheon Lee等，皮肤屏障学，丽文阁，2010)。由于前黑素体蛋白17(pre-melanosomal protein 17，PMEL17)参与上述黑色素的成熟，因此黑色素的生成效率可以用作美白的主要因素。

皮肤最重要的功能之一是作为屏障的功能。直接暴露于外部环境的皮肤是防止体液损失并保护身体免受有害环境影响的最重要的第一次防线。位于皮肤的最外层并与外部直接接触的角质层虽然处于无核状态，但在皮肤屏障的功能中起到最重要的作用。也就是说，角质层作为从外部刺激保护皮肤并防止皮肤中水分蒸发的皮肤保护膜在皮肤健康中起到关键作用。

角质细胞在基底层产生，然后成熟并角质化，结果，细胞形状变平，在经过细胞内小器官消失、纤维蛋白的产生、脱水和细胞膜增厚之后脱落。该过程经过表皮增殖、分化、脱落的过程，且对于维持皮肤再生稳态是最重要的。尤其，在角质形成细胞分化的过程中，表皮基底层中产生的角质细胞到达颗粒层时，细胞内器官开始消失，钙离子进入细胞内部，以激活转谷氨酰胺酶(transglutaminase)，从而导致如外皮蛋白(involucrin)、兜甲蛋白(loricrin)和角质蛋白(cornifin)等构成角质细胞膜的蛋白质的不可逆结合。通过该过程正常发生的表皮分化过程在皮肤屏障功能中起到重要作用。

在分化过程的最后，角质细胞在最上层脱落并从皮肤剥离。角质层的正常脱落过程使皮肤保持光泽和健康。角质脱落过程在同时除去角质与外部产生的有害微生物和病毒方面也是有意义的。各种蛋白酶参与该过程中，在弱酸性状态下，这些蛋白酶被正常激活。激肽释放酶相关的肽酶(Kallikrein-related peptidase)5和7作为皮肤角质层剥离的调节子起重要作用。因此，表皮层的分化和脱落的正常化使皮肤的最外层保持健康并顺利执行皮肤屏障功能，从而降低水分蒸发量。

发明内容

技术问题

本发明的发明人发现通过向苹果发酵醋加入珍珠粉来进行后发酵的方法所得的珍珠发酵物呈现优异的皮肤状况改善效果，从而完成了本发明。

本发明的包含珍珠发酵物的组合物包含苹果发酵醋的有效成分和对生物体的吸收率高的来源于珍珠粉的高浓度钙，当将上述组合物给予皮肤时，通过这些成分的复合作用抑制黑色素生成且促进角质细胞分化，以在如皮肤美白和皮肤保湿等皮肤状况改善方面表现出卓越的效果。

因此，本发明的目的在于提供一种包含珍珠发酵物的用于改善皮肤状况的组合物。

从下面将描述的具体实施方式、所附的权利要求书和附图中，本发明的其它目的和优点将更加显而易见。

解决问题的方案

根据本发明的一实施方式，本发明提供一种用于改善皮肤状况的组合物，其特征在于，包括珍珠发酵物，上述珍珠发酵物通过向苹果发酵醋加入0.05至20％(w/v)范围内的珍珠粉并将该珍珠粉后发酵(after-fermentation)来制备。

在本发明的组合物中，上述苹果发酵醋的多酚含量可以为50至1000ppm,氨基酸含量可以为50至500ppm，且可以具有鲜味的特征。

在上述苹果发酵醋中所用的苹果可以是选自早熟品种、中熟品种、晚熟品种等品种中的一种以上，但本发明不限于此。

在本发明的用于改善皮肤状况的组合物中所用的苹果发酵醋通过与珍珠粉混合并经过后发酵，从而不仅有效地提取珍珠的钙、贝壳硬朊及氨基酸等的有益成分，而且苹果发酵醋本身的有益成分与珍珠的有益成分一起复合作用，从而能够提供与现有珍珠提取物相比显著改善的皮肤状况改善效果。

根据本发明的一优选实施例，上述珍珠发酵物的总多酚含量可以为100至1,000ppm，总氨基酸含量可以为300至1,000ppm，总钙含量可以为1,000至20,000ppm。

根据本发明的一优选实施例，可以在20至40℃下进行上述后发酵3至7天。

在本发明的一优选实施例中，在本发明中使用的珍珠粉的加入量基于苹果发酵醋的容量可以为约0.01至30％(w/v)，具体而言，可以为约0.03至25％(w/v)，更具体而言，可以在0.05至20％(w/v)的范围内。

在本发明的用于改善皮肤的组合物中，当珍珠发酵物含有上述范围内的珍珠粉时，在与发酵醋的氨基酸和多酚成分一起提供最佳皮肤状况改善效果方面更有效。若珍珠粉的使用量超出上述范围，则使用不必要的过量珍珠粉，因此存在不溶解的珍珠粉，导致经济效率差。

钙不仅是有助于骨骼组织生长的骨和牙齿的组成成分，而且是如体内各种酶的激活、神经兴奋的调节、肌肉收缩和放松、心脏的规律跳动和血液凝固等在身体的生理调节功能中也很重要的无机物，但不容易被体内吸收。经过上述后发酵步骤获得的珍珠发酵物含有源自珍珠粉的各种矿物质和氨基酸、尤其是离子化的高浓度钙离子。因此，本发明中最终得到的珍珠发酵物可以用作包含苹果发酵醋的有益成分和钙成分的化妆品原料。

根据本发明的一优选实施例，通过本发明的珍珠发酵物的皮肤状况改善可以为皮肤再生、皮肤美白、皮肤保湿、皮肤弹性、皮肤老化或皱纹改善，但本发明不限于。

本发明的发明人通过下述实验例1至4已经确认，当氨基酸和多酚与钙一起存在时，即使少量也在皮肤状况改善方面显示出优异效果。

具体而言，本发明的珍珠发酵物不仅含有对生物体的吸收率高的源自珍珠粉的高浓度钙，还含有源自苹果发酵蜡的氨基酸和多酚成分，这些成分以复合形式作用于皮肤，从而与单独使用相同量的珍珠提取物和发酵醋的情况相比显示出显著优异的皮肤状况改善效果。该效果是由于钙、氨基酸和多酚同时应用于皮肤而引起的复合协同效应(synergistic effect)。

如图2所示，当对色素细胞给予本发明的珍珠发酵物时，其与发酵醋和珍珠提取物相比诱导更优异的黑色素生成抑制活性。并且，如图3a和图3b所示，本发明的珍珠发酵物与发酵醋和珍珠提取物相比使IVL和LOR的表达量显著增加，呈现良好的皮肤更新效果，且如图3c、图3d及图4所示，使KLK-5和KLK-7的表达量增加，以提供与珍珠提取物相比改善的皮肤屏障强化效果和皮肤保湿功能。

这些结果表明，与珍珠提取物相比，本发明的珍珠发酵物的抑制黑素生成、促进角质细胞分化和促进角质层去除的活性非常优异，并且显示出与珍珠提取物相比更好的皮肤状况改善效果。

在本发明的一具体实施例中，本发明的用于改善皮肤状况的组合物可以为包含(a)上述珍珠发酵物的化妆品学有效量(cosmetically effective amount)；以及(b)化妆品学上接受的载体的化妆品组合物。

在本说明文中，术语“化妆品学有效量”意味着充分达成上述本发明的组合物的皮肤改善功效的量。

本发明的化妆品组合物以在本领域中通常制造的任何剂型都能制造，例如，上述剂型可以为溶液、悬浮液、乳浊液、糊剂、凝胶、乳霜、洗液、粉、肥皂、含有表面活性剂的卸妆油、油、粉状粉底、乳液状粉底、蜡状粉底和喷雾剂等，但本发明不限于此。更具体而言，本发明的化妆品组合物可以以柔软化妆水、营养化妆水、营养霜、按摩霜、精华、眼霜、清洁霜、清洁泡沫、清洁水、面膜、喷雾剂和粉末的剂型制造。

在本发明的剂型为糊剂、乳霜或凝胶的情况下，作为载体成分，可以使用动物脂肪、植物脂肪、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、二氧化硅、滑石或氧化锌等。

在本发明的剂型为粉或喷雾剂的情况下，作为载体成分，可以使用乳糖、滑石、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉，尤其，在喷雾剂的情况下，还可包含氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚等推进剂。

在本发明的剂型为溶液或乳浊液的情况下，作为载体成分，使用溶剂、增溶剂或乳浊剂，例如有水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁基乙二醇油、甘油脂肪酯、聚乙二醇或山梨糖醇酐的脂肪酸酯。

在本发明的剂型为悬浮液的情况下，作为载体成分，可以使用水、乙醇或丙二醇等液状稀释剂、乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇酯及聚氧乙烯山梨糖醇酐酯等悬浮剂、微晶纤维素、甲基氢氧化铝、膨润土、琼脂或胺黄树胶等。

在本发明的剂型为含有表面活性剂的卸妆油的情况下，作为载体成分，可以使用脂肪醇硫酸盐、脂肪醇醚硫酸盐、磺基琥珀酸单酯、羟乙基磺酸盐、咪唑啉衍生物、甲基牛磺酸盐、肌氨酸盐、脂肪酸酰胺醚硫酸盐、烷基酰胺甜菜碱、脂肪醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物或乙氧基化甘油脂肪酸酯等。

本发明的化妆品组合物除了含有珍珠发酵物和载体成分作为有效成分以外，还可以含有在化妆品组合物中通常使用的成分，例如，可以含有如抗氧化剂、稳定剂、增溶剂、维生素、颜料和香料等常规补助剂。

发明的效果

本发明的特点和优点概括如下：

(a)与一般醋相比，本发明的珍珠发酵物具有更高的氨基酸、多酚等成分含量，且由于离子化而易于被人体吸收的钙离子含量非常高。

(b)本发明的包含珍珠发酵物的组合物具有抑制黑色素生成、促进角质细胞分化和促进角质脱落的活性，从而显着改善皮肤状况。

(c)并且，本发明的珍珠发酵物提供与现有珍珠提取物相比显著得到改善的皮肤状况改善效果。

(d)因此，本发明的组合物可以简便有效地应用于化妆品组合物。

附图说明

图1示出本发明的珍珠发酵物的制备工序图。

图2为分别处理酒精醋、苹果发酵醋、珍珠提取物及珍珠发酵物的小鼠的色素细胞(B16黑色素瘤细胞(B16melanoma cells))中的黑色素含量测定结果。

图3a至图3d为示出通过实时聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)确认的每种基因(IVL、LOR、KLK-5及KLK-7)的表达程度的结果。对于阴性对照组，*:p<0.05，**:p<0.01。

图4为观察人造皮肤中角质层的脱落程度的染色结果。con表示对照组。

图5为示出通过实时PCR确认的1型前胶原基因(type 1procollagen)的表达程度的结果。对于阴性对照组，*:p<0.05，**:p<0.01。

具体实施方式

以下，通过实施例对本发明进行更为详细的说明。这些实施例仅用于更加具体地说明本发明，本发明的范围并不根据本发明的要旨而受这些实施例的限制，这对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说是显而易见的。

[实施例]

实施例1:制备珍珠发酵物

将10％(w/v)的珍珠粉加入到苹果发酵醋原液中，然后在25℃下进行后发酵3至7天。当发酵完成时，通过微滤(孔径：0.1μL)制备含有离子化的高浓度钙的“珍珠发酵物”。

比较例1:酒精醋

在比较例1中使用稀释至1重量百分比的酒精醋。

比较例2:苹果发酵醋

在比较例2中使用稀释至1重量百分比的苹果发酵醋。

比较例3:制备珍珠提取物

为了比较例3的珍珠提取物，将珍珠粉放入合适的容器中，向该容器中加入适量的水以使珍珠粉吸收水，然后加入额外的水。此时，进行清洗和过滤一次至两次。将10％乙酸(CH₃COOH)水溶液缓慢加入到经过上述清洗的1g珍珠固形物中，使得最终重量为90g，并将混合物在室温下以350rpm搅拌。当不产生二氧化碳时，判断反应已经结束，以回收上清液。用稀碱中和上清液，加入水，使得最终产物为100g，然后通过过滤制备1重量百分比的珍珠提取物，将其用于实验例。

实验例1:评价美白-黑色素生成抑制

使用小鼠的色素细胞(B16黑素瘤细胞(B16melanoma cells)，ATCC，CRL-6475^TM)测量通过处理比较例1、2、3及实施例1的组合物的黑色素生成抑制效果，并将其与通过所知为抑制黑色素生成的熊果苷(arbutin；100μg/ml)的黑素生成抑制效果进行比较。

将小鼠色素细胞(B16F10)悬浮于含有10％胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)的DMEM中，并以每孔1×10⁵个细胞接种到6孔板中并培养直至细胞附着于孔底。为了诱导黑色素生成，用0.1μMα-MSH处理，加入样品，然后培养3天。处理材料的浓度为100μg/ml。使用熊果苷作为黑色素生成能力实验的阳性对照组。将培养的细胞用磷酸盐缓冲盐水(Phosphate Buffer solution，PBS)清洗并用胰蛋白酶回收。用血细胞计数器(hematocytometer)计数回收的细胞，并以每个处理组包含1×10⁶个细胞/ml的相同细胞数量的方式聚集，以1,000rpm离心10分钟，从而获得细胞。将回收的上述细胞在60℃下干燥1小时，加入含有10％DMSO的400μl的1M NaOH溶液，从而获得细胞内黑色素。通过使用酶标仪测定上述黑色素溶液在490nm处吸光度来评价黑色素生成抑制率。

由图2可以确认，通过处理比较例1、2、3及实施例1的组合物，小鼠色素细胞的黑色素量减少，尤其，实施例1的珍珠发酵物显示出最佳的黑色素生成抑制活性。

实验例2:分析角质形成细胞系中基因表达

2-1.人皮肤角质形成细胞系HaCaT细胞培养

使用含有10％FBS和抗生素的DMEM培养液中培养作为人皮肤的组成细胞系的角质形成细胞HaCaT(CLS，300493)。使用75T烧瓶作为培养容器，并在37℃下供应5％CO₂的培养基中进行培养。每3至4天更换培养液，并在细胞过量增殖时进行继代培养。将HaCaT分入6孔板(5×10⁵/孔)中，使用DMEM培养24小时，然后用磷酸盐缓冲盐水(PBS)清洗。在不含FBS的无钙DMEM培养基中将1.2mM氯化钙和比较例1、比较例2、比较例3及实施例1的组合物分别稀释至1重量百分比并加入到每个孔中。在经过24小时后，合成cDNA并实施PCR，以评价基因表达程度。

2-2.使用实时PCR的角质形成细胞分化和角质脱落因子表达影响实验

对合成的cDNA使用引物和作为花青染料的SYBR green master混合物来进行实时(real-time)PCR，以最终评价基因表达水平。将基因的表达与通过根据C_t(阈值循环(threshold cycle))方法对内部对照基因即β-肌动蛋白进行校准定量的相对值进行比较，其中使用的引物序列示于下表1中。

表1

如图3a和图3b所示，通过处理实施例1的1％珍珠发酵物，外皮蛋白(IVL)、兜甲蛋白(LOR)、激肽释放酶相关的肽酶-5(KLK-5)和激肽释放酶相关的肽酶-7(KLK-7)的表达量与其他处理组相比显著增加。更具体而言，IVL和LOR的表达增加意味着通过表皮角质形成细胞分化的促进而正常发生皮肤更新，实施例1的珍珠发酵物的IVL表达量与比较例2的苹果发酵醋和比较例3的珍珠提取物相比显着增加，尤其，在LOR表达量的情况下，珍珠发酵物显示出不能从其他处理组容易地预测的显着协同效应，从而确认可以诱导优异的皮肤更新效果。

并且，KLK-5和KLK-7的增加意味着最外层的角质层正常脱落，如图3c和3d所示，可以确认与珍珠提取物相比，实施例1的珍珠发酵物使表皮分化和角质脱落能力增加，以增强皮肤屏障，在皮肤保湿功能中显示出优异效果。

实验例3:皮肤的组织学观察

3-1.人造皮肤培养

在与人皮肤相似地再现的三维培养皮肤模型(重建人类表皮，ReconstructedHuman Epidermis，RHE)中确认通过上述实施例1的珍珠发酵物的表皮分化和角质脱落因子表达程度。在RHE到达后，为了稳定化在生长培养基中培养24小时，然后用1％的各个1.2mM氯化钙和实施例1的珍珠发酵物进行处理。

3-2:使用H&E染色的角质层脱落效果实验

在培养2天后，将摘除的皮肤组织固定在10％福尔马林溶液中，切割石蜡切片来进行组织免疫染色法。

结果，如图4所示，可以确认处理实施例1的珍珠发酵物的组与对照组(CON)相比，随着时间经过，角质层正常脱落，从而不形成厚的角质层。这些结果表明，实施例1的珍珠发酵物在皮肤组织学上有效地诱导皮肤更新，从而具有改善皮肤屏障功能的效果。

实验例4:分析成纤维细胞中基因表达

4-1.人皮肤成纤维细胞系Hs68细胞培养

使用含有10％FBS和抗生素的DMEM培养基中培养作为人皮肤的组成细胞系的成纤维细胞系Hs68(ATCC，CRL-1635^TM)。作为培养容器使用75T烧瓶，并在37℃下供应5％CO₂的培养基中进行培养。每3至4天更换培养液，并在细胞过量增殖时进行继代培养。将Hs68分入6孔板(4×10⁵/孔)中，使用DMEM培养24小时，然后用磷酸盐缓冲盐水(PBS)清洗。在不含FBS的无钙DMEM培养基中将比较例1、比较例2、比较例3及实施例1的组合物分别稀释至1重量百分比并加入到每个孔中。在经过24小时后，合成cDNA并实施PCR，以评价基因表达程度。

4-2.使用实时PCR确认成纤维细胞中前胶原生成

对合成的cDNA使用引物和作为花青染料的SYBR green master混合物来进行实时(real-time)PCR，以最终评价前胶原基因表达水平。将基因的表达与通过根据C_t(阈值循环(threshold cycle))方法对内部对照基因即β-肌动蛋白进行校准定量的相对值进行比较，其中使用的引物序列示于下表2中。

表2

如图5所示，确认通过处理实施例1的1％珍珠发酵物而1型前胶原基因的表达量与其他处理组相比显著增加。更具体而言，1型前胶原基因的表达增加作为在成纤维细胞主要产生的1型胶原的前体且成为决定皮肤真皮层厚度的主要因素，就意味着抑制皱纹形成。从以上结果可以看出，上述实施例1的珍珠发酵物可以增加在真皮中用作支持物的1型胶原蛋白生成，以能够诱导抑制作为皮肤老化的代表性样态的皱纹和下垂现象的效果。

前文详细记载了本发明的特定部分，本发明所属技术领域的普通技术人员当知，该具体记载仅仅是一个实现例而无法据此限制本发明的范畴。因此，本发明的实质范畴应由权利要求书及其等值范围定义。

实验例5:珍珠发酵物的成分分析

在本实施例中，确定实施例1中制备的珍珠发酵物的有效成分变化(表3)。

表3

序列表

<110> 泉标食品有限公司

科丝美诗株式会社

<120> 包含珍珠发酵物的用于改善皮肤状况的组合物

<130> PCT5036749

<150> KR 10-2016-0122312

<151> 2016-09-23

<150> KR 10-2017-0113624

<151> 2017-09-06

<160> 12

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> IVL正向引物(IVL forward primer)

<400> 1

tgaaacagcc aactccactg 20

<210> 2

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> IVL反向引物(IVL reverse primer)

<400> 2

ggagctccaa cagttgctct 20

<210> 3

<211> 21

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> LOR正向引物(LOR forward primer)

<400> 3

aatagatccc ccagggtacc a 21

<210> 4

<211> 17

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> LOR反向引物(LOR reverse primer)

<400> 4

cggtgcccct ggaaaac 17

<210> 5

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> KLK-5正向引物(KLK-5 forward primer)

<400> 5

gccacactgc aggaagaaa 19

<210> 6

<211> 18

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> KLK-5反向引物(KLK-5 reverse primer)

<400> 6

ggatttgacc ccctggaa 18

<210> 7

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> KLK-7正向引物(KLK-7 forward primer)

<400> 7

gcatccccga ctccaagaa 19

<210> 8

<211> 21

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> KLK-7反向引物(KLK-7 reverse primer)

<400> 8

cagggtacct ctgcacacca a 21

<210> 9

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> β-肌动蛋白正向引物(Beta-actin forward primer)

<400> 9

ggccatctct tgctcgaagt 20

<210> 10

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> β-肌动蛋白反向引物(Beta-actin reverse primer)

<400> 10

gacaccttca acaccccagc 20

<210> 11

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 1型前胶原正向引物(Type 1 procollagen forward primer)

<400> 11

ctcgaggtgg acaccaccct 20

<210> 12

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 1型前胶原反向引物(Type 1 procollagen reverse primer)

<400> 12

cagctggatg gccacatcgg 20

Claims

1.一种用于改善皮肤状况的组合物，其特征在于，包括珍珠发酵物，上述珍珠发酵物通过加入0.05w/v至20％w/v范围内的珍珠粉并将该珍珠粉用苹果发酵醋后发酵来制备。

2.根据权利要求1所述的用于改善皮肤状况的组合物，其特征在于，上述珍珠发酵物的总多酚含量为100至1,000ppm，总氨基酸含量为300至1,000ppm，总钙含量为1,000至20,000ppm。

3.根据权利要求1所述的用于改善皮肤状况的组合物，其特征在于，在20至40℃下进行上述后发酵3至7天。

4.根据权利要求1所述的用于改善皮肤状况的组合物，其特征在于，上述皮肤状况改善为皮肤再生、皮肤美白、皮肤保湿、皮肤弹性、皮肤老化或皱纹改善。

5.根据权利要求1所述的用于改善皮肤状况的组合物，其特征在于，抑制黑色素生成。

6.根据权利要求1所述的用于改善皮肤状况的组合物，其特征在于，促进角质细胞分化。

7.根据权利要求1所述的用于改善皮肤状况的组合物，其特征在于，促进角质层去除。