CN109752474B - 一种检测卷烟爆珠中酸性绿50和/或固绿fcf的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种检测卷烟爆珠中酸性绿50和/或固绿FCF的方法，包括以下操作：加热待测样品使之熔融；将熔融的样品进样；采用液相色谱仪对样品进行检测。本发明的检测方法对样品的预处理简单，取样后直接加热即可进样，每个样品的预处理只需5分钟，且不需要化学试剂，检测结果更加准确，更接近真实值，样品回收率高。

Description

一种检测卷烟爆珠中酸性绿50和/或固绿FCF的方法

技术领域

本发明属于分析化学领域，涉及一种检测卷烟爆珠中的酸性绿50和/或固绿FCF的方法。

背景技术

“爆珠”也称作香丸、脆性胶囊、珠子，是指嵌在卷烟过滤嘴内的一颗液体小胶珠。它包裹了不同类型的香料，吸烟者可以在吸烟过程中将其捏爆，使珠内液体流出，使香烟的口感更丰富、香润，使吸烟者得到更为舒适的体验。

在爆珠的制作过程中，往往会加入了一定量的人工合成色素，起到美观和易于工艺观察的目的。市场抽查发现，爆珠中加入的人工合成色素以酸性绿50、固绿FCF为主。过量的人工合成色素可能对卷烟吸食者有潜在的健康危害，因此，需要对卷烟制品中爆珠的酸性绿、固绿进行定性或定量分析，为卷烟安全性评价提供科学依据。

发明内容

本发明提供一种检测卷烟爆珠中酸性绿50和/或固绿FCF的方法，包括以下操作：

加热待测样品使之熔融；

将熔融的样品进样；

采用液相色谱仪对样品进行检测；

可选地，根据特征峰的保留时间判断样品中是否含有酸性绿50和/或固绿FCF；

可选地，利用特征峰的峰面积对样品中的酸性绿50和/或固绿FCF进行定量。

在某些实施方案中，本发明所述的检测方法，其中加热待测样品至45℃～60℃使样品熔融。

在某些实施方案中，本发明所述的检测方法，其中在加热时对样品进行振摇，振摇的转速优选为40r/min～60r/min。

在某些实施方案中，本发明所述的检测方法，其中待测样品为20～30粒随机抽取的爆珠。

在某些实施方案中，本发明所述的检测方法，其中进样量为5～10μL。

在某些实施方案中，本发明所述的检测方法，其中在温度高于样品温度2℃～3℃的温度(例如47℃～63℃)下进行进样。

在某些实施方案中，本发明所述的检测方法，其中所述液相色谱仪采用凝胶渗透色谱对样品进行洗脱。所述凝胶渗透色谱优选采用Zenix体积排阻色谱柱对样品进行洗脱。所述Zenix体积排阻色谱柱的粒径为3μm，孔径为100nm或150nm，柱长为150mm或250mm。

在某些实施方案中，本发明所述的检测方法，其中色谱柱的柱温高于样品温度2℃～3℃(例如47℃～63℃)。

在某些实施方案中，本发明所述的检测方法，采用水作为洗脱液，水的温度优选高于样品温度2℃～3℃(例如47℃～63℃)，水的流速优选为1.2mL/min～1.5mL/min。

在某些实施方案中，本发明所述的检测方法，其中液相色谱仪采用蒸发光散射检测器对样品进行检测。蒸发光散射检测器的气流量优选为1.5～1.9mL/min，漂移管温度优选为120℃～150℃，分流器开度优选为30％～40％。

在某些实施方案中，本发明所述的检测方法采用外标法进行定量。

在某些实施方案中，用超纯水配制标准工作溶液。

在某些实施方案中，本发明所述的检测方法的检测流程如图1所示。

本发明的有益技术效果

本发明的方法具有以下一项或多项优点：

1)本发明的检测方法对样品的预处理简单、快速，取样后直接加热即可进样，每个样品的预处理只需5分钟；

2)本发明的检测方法不需要化学试剂，无污染，检测结果更加准确，更接近真实值；

3)本发明的检测方法回收率高，可达99.99％；

4)本发明的检测方法的不确定性RSD为0.5～1.2％。

附图说明

图1为本发明的一个实施例的检测方法的检测流程图；

图2为实施例1得到的样品色谱图，其中左侧的特征峰为酸性绿50的特征峰，右侧的特征峰为固绿FCF的特征峰。

具体实施方式

下面结合本发明的具体实施例来进一步说明本发明的实质性内容，应理解，以下实施例仅用于说明本发明，但并不以此来限定本发明的保护范围。下面实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的进行。所用药品或试剂未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

虽然以下实施例中所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，如果未特别说明，下面实施例中所用的材料和操作方法是本领域公知的。

下面实施例中用到的色谱仪为Waters公司的ACQUITY UPLC，检测器是Waters公司的ELS Detector蒸发光散射检测器。

下面实施例中用到的标准品为酸性绿50标准品(CAS号3087-16-9，购自百灵威科技有限公司)和固绿FCF标准品(CAS号2353-45-9，购自德国Dr.Ehrenstorfer公司)。

实施例1

1.1前处理和进样：从待测的样品中随机抽取20粒，称重(精确到0.0001g)，装入2mL色谱瓶，盖上塞子，成批置于进样器，40r/min振摇加热到45℃使之熔融，停止振摇后直接高温进样(进样针温度47℃)，进样量为10μL。

1.2洗脱条件：凝胶渗透色谱洗脱(凝胶色谱柱：Zenix体积排阻色谱柱，粒径3μm，孔径100nm，柱长150mm)，柱温：47℃，洗脱液：水(温度47℃)，流速：1.2mL/min。

1.3检测方法：采用蒸发光散射检测器进行检测，气流量：1.5mL/min，漂移管温度：120℃，分流器开度30％。

1.4定性方法：根据保留时间进行定性。

1.5定量方法：外标法定量。

a)标准溶液的配制：分别移取酸性绿50、固绿FCF的标准品到容量瓶中，用超纯水定容至刻度，然后逐级稀释，得到浓度分别为0.50μg/mL、1.0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL、7.5μg/mL和10.0μg/mL的标准工作溶液。

b)线性回归方程的建立

将a)中配制好的一系列标准溶液按本实施例的色谱条件进样10μL检测，得到色谱图，以相应浓度C(μg/mL)对峰面积X作回归分析，建立线性方程，并计算相关系数，结果如表1所示。

表1标准工作溶液的线性方程和相关系数

1.6检测结果

本实施例共检测3批样品，得到的色谱图如图2所示，其中左侧的特征峰为酸性绿50的特征峰，右侧的特征峰为固绿FCF的特征峰。定量检测结果如表2所示。

表2

实施例2

2.1前处理和进样：从待测的样品中随机抽取25粒，称重(精确到0.0001g)，装入2mL色谱瓶，盖上塞子，成批置于进样器，50r/min振摇加热到50℃使之熔融，停止振摇后直接高温进样(进样针温度52℃)，进样量为10μL。

2.2洗脱条件：凝胶渗透色谱洗脱(凝胶色谱柱：Zenix体积排阻色谱柱，粒径3μm，孔径150nm，柱长150mm)，柱温：52℃，洗脱液：水(温度52℃)，流速：1.3mL/min。

2.3检测方法：蒸发光散射检测器测定，气流量：1.7mL/min，漂移管温度：135℃，分流器开度35％。

2.4定性方法：保留时间定性。

2.5定量方法：外标法定量。分别移取酸性绿50、固绿FCF标准品到容量瓶中，用超纯水定容至刻度，然后逐级稀释，得到浓度分别为、1.5μg/mL、2.0μg/mL、3.0μg/mL、3.5μg/mL和4.0μg/mL的标准工作溶液。将配制好的系列标准溶液按本实施例的色谱条件进样10μL，检测，得到色谱图，以相应浓度C(μg/mL)对峰面积X作回归分析，建立线性方程。

2.6检测结果

本实施例共检测3批样品，检测结果如表3所示。

表3

实施例3

3.1前处理和进样：从待测的样品中随机抽取30粒，称重(精确到0.0001g)，装入2mL色谱瓶，盖上塞子，成批置于进样器，60r/min振摇加热到60℃使之熔融，停止振摇后直接高温进样(进样针温度63℃)，进样量为10μL。

3.2洗脱条件：凝胶渗透色谱洗脱(凝胶色谱柱：Zenix体积排阻色谱柱，粒径3μm，孔径150nm，柱长250mm)，柱温：63℃，洗脱液：水(温度63℃)，流速：1.5mL/min。

3.3检测方法：蒸发光散射检测器测定，气流量：1.9mL/min，漂移管温度：150℃，分流器开度40％。

3.4定性方法：保留时间定性。

3.5定量方法：外标法定量。分别移取酸性绿50、固绿FCF标准品到容量瓶中，用超纯水定容至刻度，然后逐级稀释，得到浓度分别为1.0μg/mL、3.0μg/mL、5.0μg/mL、7.0μg/mL和9.0μg/mL的标准工作溶液。将配制好的系列标准溶液按本实施例的色谱条件进样10μL，检测，得到色谱图，以相应浓度C(μg/mL)对峰面积X作回归分析，建立线性方程。

3.6检测结果

本实施例共检测4批样品，检测结果如表4所示。

表4

比对例1

采用CN10439150B公开的检测方法(参见说明书第11-56段)对样品进行检测，其中样品与实施例1中的样品为同一批次样品，随机抽取20粒作为待测样品。共检测3批样品，结果如表5所示。

表5

实施例4精密度与回收率评价

采用实施例1中所述的检测方法，对本发明的方法进行精密度和回收率进行评价。其中所用样品与实施例1中的样品为同一批次样品，随机抽取20粒作为待测样品，以3水平加标方法进行回收率和精密度实验，回收率与重复性结果如表6所示。

表6检测方法回收率与重复性(n＝5)

经过比较，可以看出本发明的方法具有以下优点：

1)本发明的检测方法对样品的预处理简单，取样后直接加热即可进样，每个样品的预处理只需5分钟；

2)本发明的检测方法不需要化学试剂，检测结果更加准确，更接近真实值；

3)本发明的检测方法回收率高，可达99.99％；

4)本发明的检测方法的不确定性RSD为0.5～1.2％。

而现有技术(例如CN10439150B)的检测方法，样品预处理较为复杂，需要使用多种有机溶剂，前处理耗费时间较多，一个样品大约需要60分钟进行预处理，样品回收率约为85～90％，不确定性RSD为7.5～10％。

最后应当说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制；尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细的说明，所属领域的普通技术人员应当理解：依然可以对本发明的具体实施方式进行修改或者对部分技术特征进行等同替换；而不脱离本发明技术方案的精神，其均应涵盖在本发明请求保护的技术方案范围当中。

Claims (18)

1.一种检测卷烟爆珠中酸性绿50和/或固绿FCF的方法，包括以下操作：

加热待测样品使之熔融；

将熔融的样品进样；

采用液相色谱仪对样品进行检测；

其中液相色谱仪采用凝胶渗透色谱对样品进行洗脱；

所述凝胶渗透色谱采用Zenix体积排阻色谱柱对样品进行洗脱；

所述Zenix体积排阻色谱柱的粒径为3μm，孔径为

或

柱长为150mm或250mm。

2.权利要求1所述的方法，还包括：根据特征峰的保留时间判断样品中是否含有酸性绿50和/或固绿FCF。

3.权利要求2所述的方法，还包括：利用特征峰的峰面积对样品中的酸性绿50和/或固绿FCF进行定量。

4.权利要求1所述的方法，其中加热待测样品至45℃～60℃。

5.权利要求1所述的方法，其中在加热时对样品进行振摇。

6.权利要求5所述的方法，其中振摇的转速为40r/min～60r/min。

7.权利要求1所述的方法，其中待测样品为20～30粒随机抽取的爆珠。

8.权利要求1所述的方法，其中进样量为5～10μL。

9.权利要求1所述的方法，其中在温度高于样品温度2℃～3℃的温度下进行进样。

10.权利要求9所述的方法，其中在47℃～63℃温度下进样。

11.权利要求1所述的方法，其中采用水作为洗脱液。

12.权利要求11所述的方法，其中水的温度高于样品温度2℃～3℃。

13.权利要求12所述的方法，其中水的温度为47℃～63℃。

14.权利要求11所述的方法，其中水的流速为1.2mL/min～1.5mL/min。

15.权利要求1-14任一项的方法，其中液相色谱仪采用蒸发光散射检测器对样品进行检测。

16.权利要求15的方法，其中蒸发光散射检测器的气流量为1.5～1.9mL/min。

17.权利要求15的方法，其中蒸发光散射检测器的漂移管温度为120℃～150℃。

18.权利要求15的方法，其中蒸发光散射检测器的分流器开度为30％～40％。

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