CN109700789A - 一种大麻二酚提取物的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种大麻二酚提取物的用途，通过药理试验证明，大麻二酚具有很好的抗疲劳作用，特别很低的剂量就可以用于抗疲劳，特别优选的是：大麻二酚提取物中大麻二酚的重量百分含量为大于等于95％小于100％，四氢大麻酚的重量百分含量为未检出。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体一种大麻二酚提取物的新用途。
背景技术
大麻(Cannabis sativa)是一种非常有前途的药用植物，其中大麻酚类化合物中药用价值最高的化合物为四氢大麻酚和大麻二酚(CBD)，研究表明大麻二酚具有重要的临床应用前景，如对于多种癌症、癫痫、阿尔兹海默病、亨廷顿症等具体一定疗效。大麻二酚(cannabidiol，CBD)是大麻植物的一种化学成分，但它与大麻的另一种化学成分四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol，THC)不同，大麻二酚没有致幻作用。也就是说，大麻之所以被定义成“毒品”，其影响精神活动的成分是四氢大麻酚，而不是大麻二酚。美国FDA于2018年6月25日批准GWResearch Ltd.公司的Epidiolex(cannabidiol，大麻二酚)口服液用于年龄在2岁及以上的Lennox-Gastaut综合征(Lennox-Gastaut syndrome)和Dravet综合征(Dravetsyndrome)患者治疗癫痫发作。Lennox-Gastaut综合征和Dravet综合征是两种罕见但非常严重的癫痫病。Epidiolex是FDA批准的首种含有大麻提取物成分的药物，也是FDA批准的首种用于治疗Dravet综合征的药物。
现代药理研究表明，大麻二酚具有抗肿瘤、神经系统保护、免疫调节和抗炎抗氧化等方面具有药用价值，，具有很好的开发和应用前景；因此我们应充分利用我国的优势，加快其药理研究与开发应用。
发明内容
基于上述原因，申请人经过多次创造性试验，通过药理试验证明，大麻二酚具有很好的抗疲劳作用，特别很低的剂量就可以用于抗疲劳，特别优选的是：大麻二酚提取物中大麻二酚的重量百分含量为大于等于95％小于100％，四氢大麻酚的重量百分含量为未检出。
本发明的技术方案如下：
一种大麻二酚提取物在制备抗疲劳药物或食品中的应用。
其中大麻二酚提取物中大麻二酚的重量百分含量为大于等于95％小于100％，四氢大麻酚的重量百分含量为未检出。
其中大麻二酚提取物中大麻二酚的重量百分含量为大于等于97％小于100％，四氢大麻酚的重量百分含量为未检出。
该大麻二酚提取物的制备方法为：
(1)筛选和脱水：将晾干的工业大麻放入粉碎机中进行粉碎，再将粉碎过筛后的工业大麻进行脱水干燥，制备得到水分含量低于10％的工业大麻粗品(w/w)；
(2)球磨：将步骤(1)得到的工业大麻原料放入球磨机中，通过液氮冷却，研磨0.1～5小时得到球磨后工业大麻原料；
(3)浸提：向步骤(2)得到的原料加入浸提溶剂，常温下浸泡提取1～8小时，得到初提液；
(4)离心：将步骤(3)得到的初提液进行离心分离，取上清液；
(5)浓缩和干燥：将步骤(4)得到的上清液进行减压浓缩，烘干后得大麻二酚提取物粗品；
(5)将大麻二酚粗品溶于混合有机溶剂中，其中混合有机溶剂与大麻二酚粗品体积与重量比为15-25:1，制备得到大麻二酚粗品溶液；所述混合溶剂为C5～C10的饱和烷烃类和C1～C3的醇类的混合溶剂；所述C5～C10的饱和烷烃类和C1～C3的醇类的体积比选自1:1～1:3；
(6)5℃-10℃条件下，向步骤(5)中得到的大麻二酚粗品溶液加入大麻二酚的反溶剂，过滤，干燥，得到大麻二酚的提取物；所述反溶剂为水，所述水和大麻二酚粗品溶液的体积比选自1:1～1:5。
步骤(1)中所述粉碎机的筛网为30～50目；脱水干燥的温度选自60～80℃。
步骤(2)中所述的球磨机选自珠式磨机、行星式磨机、振动式磨机、偏心振动式磨机、重力依赖型球磨机、棒磨机和滚磨机；所述球磨机的研磨体直径选自2～15mm。
步骤(2)中所述的原料的D90的范围选自500～2000nm；所述原料的D50的范围选自1000～2000nm。
步骤(3)中所述的浸提溶剂选自C1-C4的醇类，优选甲醇、乙醇、异丙醇或其混合溶剂。
步骤(3)中所述原料与浸提溶剂的质体比选自3:1～1:3，优选2:1、1:1或1:2。
步骤(4)中所述离心分离的转速选自500～2000转/分钟，优选1000～1500转/分钟。本发明进一步提供一种通过上述方法从工业大麻中提取得到的大麻二酚精制品在制备治疗神经精神疾病的药物组合物中的用途，所述神经精神疾病选自精神分裂症、抑郁症、麻醉和躁狂症。
具体实施方式
以下以具体实施例来说明本发明的技术方案，但本发明的保护范围不限于此。
本说明书实施例所述的内容仅仅是对发明构思的实现形式的列举，本发明的保护范围不应当被视为仅限于实施例所陈述的具体形式，本发明的保护范围也及于本领域技术人员根据本发明构思所能够想到的等同技术手段。尽管以下本发明的实施方案进行了描述，但本发明并不局限于上述的具体实施方案和应用领域，下述的具体实施方案仅仅是示意性的、指导性的，而不是限制性的。本领域的普通技术人员在本说明书的启示下和在不脱离本发明权利要求所保护的范围的情况下，还可以做出很多种的形式，这些均属于本发明保护之列。
本发明下述试验，是在多次创造性试验的基础上，以本发明所要保护的技术方案为基础，总结的研发人员的结论性试验。
与现有技术相比，本发明的技术方案具有以下优点：
本发明提供的通过球磨法从工业大麻中提取大麻二酚的方法与现有技术中的提取方法相比，工艺简单，不需要使用大量有机溶剂反复提取；此外，能够大大的缩短提取时间和提高提取率，具有较好的制药工业应用价值。
实施例1、大麻二酚粗品提取
(1)将5kg工业大麻清洗、晾干，采用XL-60C型中药粉碎机(购买自南京威利朗食品机械有限公司)，然后过50目筛，粉碎过筛后的工业大麻花叶在放置于烘箱中，于75℃脱水干燥，得到工业大麻粗品；
(2)将工业大麻粗品放置于带有液氮冷却循环系统的立式球磨机(购买自莱州市龙骏化工机械有限公司)，采用直径为10mm和8mm的球形钢珠(约30～50个)进行研磨，研磨时间为1小时，温度设置为-10℃，制备得到的的工业大麻原料的粒径经测定(Winner2308智能型干湿一体激光粒度仪)，D90约为1500～1800nm，D50约为1000～1200nm；
(3)向球磨后得到的工业大麻原料加入无水乙醇，无水乙醇与工业大麻原料的质体积比为1:1，常温下浸泡3小时；
(4)离心步骤(3)所得初提液，转速1000转/分钟，离心15分钟，取上清液；
(5)将步骤(4)所得上清液进行减压浓缩，于90℃下烘干，制备得到大麻二酚粗品10.77g。
实施例2、大麻二酚粗品的精制-1
(1)将实施例1所得大麻二酚粗品1g溶于20ml乙醇和正己烷混合溶剂中(乙醇与正己烷混合溶剂的体积比为1:1)，制备得到大麻二酚粗品溶液；
(2)将步骤(1)所得大麻二酚粗品溶液温度降低至5℃，向溶液中加入纯水(水与大麻二酚粗品溶液的体积比为1:2)，5～10℃静置过夜，过滤，干燥，得到大麻二酚提取物0.819g(大麻二酚含量99.6％，未检出四氢大麻酚)。
实施例3、大麻二酚粗品的精制-2
(1)将实施例1所得大麻二酚粗品0.5g溶于10ml乙醇和正庚烷混合溶剂中(乙醇与正庚烷混合溶剂的体积比为4:1)，制备得到大麻二酚粗品溶液；
(2)将步骤(1)所得大麻二酚粗品溶液温度降低至8℃，向溶液中加入纯水(水与大麻二酚粗品溶液的体积比为1:4)，5～10℃静置过夜，过滤，干燥，得到大麻二酚提取物0.41g(大麻二酚含量99.5％，未检出四氢大麻酚)。
药理学试验：抗疲劳试验
试验动物：动物2-3月龄，昆明种雄性健康小鼠，体重(25±3)g。
试验方法：将实验动物小鼠分为10组，每组10只小鼠，进行5天水浸饲养。水浸饲养是指在塑料笼内装入水深1.5cm的水的状态下进行饲养。在此环境下，对于逃避水的大鼠来说不能得到充分的睡眠、不能采用休息姿势，精神上和肉体上总是处于不能休息的状态。已知当进行7天以上的水浸饲养后便开始出现死亡个体，进行5天水浸饲养后的大鼠可以说是实现疲劳困惫而过劳死的动物模型。从水浸饲养的第1天开始，1天1次以灌胃法，每天以10mg/kg给药量给小鼠灌胃实施例2大麻二酚提取物，阳性药组给予人参皂苷Rg11g/kg，对照组给予等量蒸馏水。第6天进行各项抗疲劳指标的测定。进行5天的水浸饲养后，使大鼠在载荷相当于体重80％的重物的状态下游泳，测定直到鼻尖被水没过10秒以上的时间，记录游泳时间用于评价疲劳度。
试验结果见表1。
表1力竭游泳时间
注：与对照组比较**P<0.01。
试验结论：上述试验表明，人参皂苷Rg1和本发明大麻二酚提取物都具有很好的抗疲劳作用，本发明大麻二酚提取物用药量是人参皂苷Rg1用药量的百分之一，就能达到同样的效果，充分说明，本发明所述的大麻二酚提取物更加适合开发成抗疲劳的产品。
Claims (10)
1.一种大麻二酚提取物在制备抗疲劳药物或食品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其中大麻二酚提取物中大麻二酚的重量百分含量为大于等于95％小于100％，四氢大麻酚的重量百分含量为未检出。
3.根据权利要求1所述的应用，其中大麻二酚提取物中大麻二酚的重量百分含量为大于等于97％小于100％，四氢大麻酚的重量百分含量为未检出。
4.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：该大麻二酚提取物的制备方法为：
(1)筛选和脱水：将晾干的工业大麻放入粉碎机中进行粉碎，再将粉碎过筛后的工业大麻进行脱水干燥，制备得到水分含量低于10％的工业大麻粗品(w/w)；
(2)球磨：将步骤(1)得到的工业大麻原料放入低温球磨机中，通过液氮冷却，研磨0.1～5小时得到球磨后工业大麻原料；
(3)浸提：向步骤(2)得到的原料加入浸提溶剂，常温下浸泡提取1～8小时，得到初提液；
(4)离心：将步骤(3)得到的初提液进行离心分离，取上清液；
(5)浓缩和干燥：将步骤(4)得到的上清液进行减压浓缩，烘干后得大麻二酚提取物粗品；
(5)将大麻二酚粗品溶于混合有机溶剂中，其中混合有机溶剂与大麻二酚粗品体积与重量比为15-25:1，制备得到大麻二酚粗品溶液；所述混合溶剂为C5～C10的饱和烷烃类和C1～C3的醇类的混合溶剂；所述C5～C10的饱和烷烃类和C1～C3的醇类的体积比选自1:1～1:3；
(6)5℃-10℃条件下，向步骤(5)中得到的大麻二酚粗品溶液加入大麻二酚的反溶剂，过滤，干燥，得到大麻二酚的精制品；所述反溶剂为水，所述水和大麻二酚粗品溶液的体积比选自1:1～1:5。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(1)中所述粉碎机的筛网为30～50目；脱水干燥的温度选自60～80℃。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(2)中所述的球磨机选自珠式磨机、行星式磨机、振动式磨机、偏心振动式磨机、重力依赖型球磨机、棒磨机和滚磨机；所述球磨机的研磨体直径选自2～15mm。
7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(2)中所述的原料的D90的范围选自500～2000nm；所述原料的D50的范围选自1000～2000nm。
8.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(3)中所述的浸提溶剂选自C1-C4的醇类，优选甲醇、乙醇、异丙醇或其混合溶剂。
9.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(3)中所述原料与浸提溶剂的质体比选自3:1～1:3，优选2:1、1:1或1:2。
10.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(4)中所述离心分离的转速选自500～2000转/分钟，优选1000～1500转/分钟。
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