CN109699394A - 一种利用液体培养基生产纵条纹炭角菌子实体的方法 - Google Patents

一种利用液体培养基生产纵条纹炭角菌子实体的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109699394A
CN109699394A CN201910181407.1A CN201910181407A CN109699394A CN 109699394 A CN109699394 A CN 109699394A CN 201910181407 A CN201910181407 A CN 201910181407A CN 109699394 A CN109699394 A CN 109699394A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fluid nutrient
nutrient medium
culture
xylaria
fructification
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201910181407.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109699394B (zh
Inventor
袁诗俊
贺新生
袁小红
简甜甜
李唯一
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Southwest University of Science and Technology
Original Assignee
Southwest University of Science and Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Southwest University of Science and Technology filed Critical Southwest University of Science and Technology
Priority to CN201910181407.1A priority Critical patent/CN109699394B/zh
Publication of CN109699394A publication Critical patent/CN109699394A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109699394B publication Critical patent/CN109699394B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Abstract

本发明提供一种液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，步骤为，制备液体培养基：去皮马铃薯切片，加水煮烂，过滤取滤液稍冷；称量酵母粉、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1，加入马铃薯汁，搅拌至溶解得液体培养基；装瓶灭菌；接种：在无菌环境下液体培养基在超净工作台接入带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；在25～30℃阴凉处静置培养，十天左右开始长菌苔，再过一周以开始生长子实体。还可以包括将纵条纹炭角菌子实体采摘后，采用其液体培养基再次接种培养子实体的步骤。本发明的方法工艺简单、易实施，菌丝可直接在液体培养基长成子实体，大幅度提高产菌效率，且比固体培养的子实体致密，为提高产量提供了保障。

Description

一种利用液体培养基生产纵条纹炭角菌子实体的方法
技术领域
本发明属于生物学技术领域，具体涉及到一种可以在液体培养基直接长纵条纹炭角菌子实体的方法。
背景技术
纵条纹炭角菌(Xylaria striata Pat.1887)，属子囊菌门，盘菌亚门，粪壳菌纲，炭角菌亚纲，炭角菌目，炭角菌科，炭角菌属(Xylaria Hill ex Schrank)。该菌是一种植物内生菌，夏季埋生或表生于阔叶树的腐朽树皮和活树根上。各项研究表明，炭角菌属真菌极具开发价值。据文献研究报道，除了抗菌、抗氧化、抗肿瘤和酶抑制活性外，炭角菌还有许多方面的活性，炭角菌在精神心理疾病、神经系统疾病和消化系统疾病也有应用。
发明人在获得纵条纹炭角菌野生菌种后，对其进行了系统性研究，活性筛选结果显示该菌乙醇提取物对植物病原真菌及植物病原细菌均具有较好的抑制活性，并对肝癌细胞也有较强的抑制活性，此外，前期安全性评价实验和改善睡眠预实验表明该菌子实体粉末是无毒的，通过戊巴比妥钠协同实验表明该菌还具有改善小鼠睡眠的活性。基于发明人前期的研究成果来看，该新型真菌具有一定的开发价值，有望将该菌用于新药开发(抗菌、抗肿瘤药物；改善睡眠药物等)及保健食品等的开发中。
但是该菌实验室液体培养多为菌丝体，而野生子实体多生于野外，受季节气候等影响，均很难得到大量的纵条纹炭角菌成熟子实体。
发明内容
为解决纵条纹炭角菌实验室液体培养多为菌丝体，而野生子实体多生于野外，受季节气候等影响，均很难得到大量的纵条纹炭角菌成熟子实体的问题，本发明提供了一种液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法。
本发明采用如下的技术方案实现上述技术目的。
本发明提供一种液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，包括以下步骤：
步骤一，制备液体培养基
将去皮马铃薯切片，后加入水至没过马铃薯，加热煮沸，直至马铃薯软烂，过滤，取滤液，稍冷得到马铃薯汁；
分别称量酵母粉、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1于烧杯中，加入已冷却至70～80℃的马铃薯汁，搅拌至固体物全部溶解既得液体培养基；
步骤二，装瓶灭菌
将液体培养基分装至各培养容器，把装有液体培养基的培养容器放置到高压容器灭菌。
步骤三，接种
在无菌环境下往已经灭好菌的液体培养基在消好毒的超净工作台上接入一小块带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；
培养方式：把接好种的液体培养基放置到阴凉处静置培养保证温度在25～30℃之间；
培养时间：培养十天左右培养基液面开始长黑褐色菌苔，再过一周以后开始生长子实体。
进一步的，本发明提供一种液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，包括以下步骤：
步骤一，制备液体培养基
将200g去皮马铃薯切片，后加入水至没过马铃薯，加热煮沸，直至马铃薯软烂，用三层纱布过滤，取滤液，稍冷得到马铃薯汁；
分别称量酵母粉2～3g、葡萄糖15～25g、蛋白胨2～3g、磷酸二氢钾2.5～3.5g、硫酸镁1.5～2g、维生素B10.1～0.5g于烧杯中，加入已冷却至70～80℃的马铃薯汁，搅拌至固体物全部溶解，定容至1升，即得液体培养基。
步骤二，装瓶灭菌
将液体培养基分装至各培养容器，装入量保持在培养基厚度至少2cm；
把装有液体培养基的培养容器放置到高压容器里，经过101千帕压力、温度为121℃的条件下灭菌30分钟。
步骤三，接种
在无菌环境下往已经灭好菌的液体培养基在消好毒的超净工作台上接入一小块带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；
培养方式：把接好种的液体培养基放置到阴凉处静置培养保证温度在25～30℃之间；
培养时间：培养十天左右培养基液面开始长黑褐色菌苔，再过一周以后开始生长子实体。
进一步的，本发明提供一种液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，还可以包括以下步骤：
采用以上的方法得到的纵条纹炭角菌子实体采摘过后的培养基，再次接种得到纵条纹炭角菌子实体的步骤。
在无菌环境下往已经灭好菌的液体培养基在消好毒的超净工作台上接入一小块带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；
培养方式：把接好种的液体培养基放置到阴凉处静置培养保证温度在25～30℃之间；
培养时间：培养十天左右培养基液面开始长黑褐色菌苔，再过一周以后开始生长子实体。
本发明采用上述技术方案，取得如下的技术效果。
1、本发明所提出的方法工艺简单、易实施。
2、本发明的创新点是通过调整液体培养基的配方，菌丝可直接在液体培养基萌发、转色并长成子实体，大幅度提高了产菌效率。
3、通过本发明培植出来的纵条纹炭角菌子实体比固体培养的子实体要致密得多，为后期提高产量提供了保障。
4、通过实施本发明，纵条纹炭角菌子实体采摘过后，培养基不需补充添加新的营养液亦能获得第二次产量稳定、品质好的子实体。
附图说明
图1为本发明的实施例1获得的纵条纹炭角菌子实体图；
图2为本发明的实施例2获得的纵条纹炭角菌子实体图；
图3为本发明的实施例1的出芽图；
图4为本发明的实施例2的出芽图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，对本发明的技术方案进行进一步的描述，使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施。
实施例1
一种液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，包括以下步骤：
步骤一，制备液体培养基
将200g去皮马铃薯切片，后加入水至没过马铃薯，加热煮沸，直至马铃薯软烂，用三层纱布过滤，取滤液，稍冷得到马铃薯汁；
分别称量酵母粉2g、葡萄糖15g、蛋白胨2g、磷酸二氢钾2.5g、硫酸镁1.5g、维生素B10.1g于烧杯中，加入已冷却至70～80℃的马铃薯汁，搅拌至固体物全部溶解，定容至1L，即得液体培养基；
步骤二，装瓶灭菌
将液体培养基分装至各培养容器，装入量保持在培养基厚度为2cm；
把装有液体培养基的培养容器放置到高压容器里，经过101千帕压力、温度为121℃的条件下灭菌30min。
步骤三，接种
在无菌环境下往已经灭好菌的液体培养基在消好毒的超净工作台上接入一小块带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；
培养方式：把接好种的液体培养基放置到阴凉处静置培养保证温度在25℃；
培养时间：培养十天左右培养基液面开始长黑褐色菌苔，再过一周以后开始生长子实体。
实施例2
一种液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，包括以下步骤：
步骤一，制备液体培养基
将200g去皮马铃薯切片，后加入水至没过马铃薯，加热煮沸，直至马铃薯软烂，用三层纱布过滤，取滤液，稍冷得到马铃薯汁；
分别称量酵母粉3g、葡萄糖25g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾3.5g、硫酸镁2g、维生素B10.5g于烧杯中，加入已冷却至70～80℃的马铃薯汁，搅拌至固体物全部溶解，定容至1L，即得液体培养基；
步骤二，装瓶灭菌
将液体培养基分装至各培养容器，装入量保持在培养基厚度3cm；
把装有液体培养基的培养容器放置到高压容器里，经过101千帕压力、温度为121℃的条件下灭菌30min。
步骤三，接种
在无菌环境下往已经灭好菌的液体培养基在消好毒的超净工作台上接入一小块带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；
培养方式：把接好种的液体培养基放置到阴凉处静置培养保证温度在30℃；
培养时间：培养十天左右培养基液面开始长黑褐色菌苔，再过一周以后开始生长子实体。
实施例3
一种液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，包括以下步骤：
步骤一，制备液体培养基
将200g去皮马铃薯切片，后加入水至没过马铃薯，加热煮沸，直至马铃薯软烂，用三层纱布过滤，取滤液，稍冷得到马铃薯汁；
分别称量酵母粉2.5g、葡萄糖20g、蛋白胨2.5g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.8g、维生素B10.3g于烧杯中，加入已冷却至70～80℃的马铃薯汁，搅拌至固体物全部溶解，定容至1L，即得液体培养基；
步骤二，装瓶灭菌
将液体培养基分装至各培养容器，装入量保持在培养基厚度4cm；
把装有液体培养基的培养容器放置到高压容器里，经过101千帕压力、温度为121℃的条件下灭菌30min。
步骤三，接种
在无菌环境下往已经灭好菌的液体培养基在消好毒的超净工作台上接入一小块带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；
培养方式：把接好种的液体培养基放置到阴凉处静置培养保证温度在27℃；
培养时间：培养十天左右培养基液面开始长黑褐色菌苔，再过一周以后开始生长子实体。
实施例4
一种液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，包括以下步骤：
采用实施例1的纵条纹炭角菌子实体采摘过后的培养基，再次接种。
在无菌环境下往已经灭好菌的液体培养基在消好毒的超净工作台上接入一小块带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；
培养方式：把接好种的液体培养基放置到阴凉处静置培养保证温度在25～30℃之间；
培养时间：培养十天左右培养基液面开始长黑褐色菌苔，再过一周以后开始生长子实体。
实施例5
一种液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，包括以下步骤：
采用实施例3的纵条纹炭角菌子实体采摘过后的培养基，再次接种。
在无菌环境下往已经灭好菌的液体培养基在消好毒的超净工作台上接入一小块带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；
培养方式：把接好种的液体培养基放置到阴凉处静置培养保证温度在25～30℃之间；
培养时间：培养十天左右培养基液面开始长黑褐色菌苔，再过一周以后开始生长子实体。
表1为实施例1至实施例5的采用液体培养纵条纹炭角菌子实体过程的生物量及出芽的实验结果。
表1纵条纹炭角菌液体培养过程生物量及芽数记录
表1中，生物量代表产菌效率；出芽数代表致密度；“*”表示该方法培养不产生子实体；一般液体培养体积为800mL；液体子实体培养的培养瓶底径70mm；芽数观察在第12天；以上数据均有五个重复。
从上表可知，通过本发明培植出来的纵条纹炭角菌子实体致密，出芽率高，为后期提高产量提供了保障，且纵条纹炭角菌子实体采摘过后，培养基不需补充添加新的营养液亦能获得第二次产量稳定、品质好的子实体。
本发明提供的技术方案，不受上述实施例的限制，凡是利用本发明的结构和方式，经过变换和代换所形成的技术方案，都在本发明的保护范围内。

Claims (4)

1.一种液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤一，制备液体培养基
将去皮马铃薯切片，后加入水至没过马铃薯，加热煮沸，直至马铃薯软烂，过滤，取滤液，稍冷得到马铃薯汁；
分别称量酵母粉、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1于烧杯中，加入已冷却至70～80℃的马铃薯汁，搅拌至固体物全部溶解既得液体培养基；
步骤二，装瓶灭菌
将液体培养基分装至各培养容器，把装有液体培养基的培养容器放置到高压容器灭菌；
步骤三，接种
在无菌环境下往已经灭好菌的液体培养基在消好毒的超净工作台上接入一小块带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；
培养方式：把接好种的液体培养基放置到阴凉处静置培养保证温度在25～30℃之间；
培养时间：培养十天左右培养基液面开始长黑褐色菌苔，再过一周以后开始生长子实体。
2.根据权利要求1所述的液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤一，制备液体培养基
将200g去皮马铃薯切片，后加入水至没过马铃薯，加热煮沸，直至马铃薯软烂，用三层纱布过滤，取滤液，稍冷得到马铃薯汁；
分别称量酵母粉2～3g、葡萄糖15～25g、蛋白胨2～3g、磷酸二氢钾2.5～3.5g、硫酸镁1.5～2g、维生素B10.1～0.5g于烧杯中，加入已冷却至70～80℃的马铃薯汁，搅拌至固体物全部溶解，定容至1升，即得液体培养基；
步骤二，装瓶灭菌
将液体培养基分装至各培养容器，装入量保持在培养基厚度至少2cm；
把装有液体培养基的培养容器放置到高压容器里，经过101千帕压力、温度为121℃的条件下灭菌30分钟；
步骤三，接种
在无菌环境下往已经灭好菌的液体培养基在消好毒的超净工作台上接入一小块带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；
培养方式：把接好种的液体培养基放置到阴凉处静置培养保证温度在25～30℃之间；
培养时间：培养十天左右培养基液面开始长黑褐色菌苔，再过一周以后开始生长子实体。
3.如权利要求1或2所述的液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，其特征在于：还包括将纵条纹炭角菌子实体采摘过后，采用其液体培养基再次接种培养子实体的步骤。
4.根据权利要求3所述的液体培养纵条纹炭角菌子实体的方法，其特征在于：将纵条纹炭角菌子实体采摘过后，采用其液体培养基再次接种培养子实体的方法的步骤为，
在无菌环境下往已经灭好菌的液体培养基在消好毒的超净工作台上接入一小块带有纵条纹炭角菌菌丝体的固体培养基或一到两根子实体；
培养方式：把接好种的液体培养基放置到阴凉处静置培养保证温度在25～30℃之间；
培养时间：培养十天左右培养基液面开始长黑褐色菌苔，再过一周以后开始生长子实体。
CN201910181407.1A 2019-03-11 2019-03-11 一种利用液体培养基生产纵条纹炭角菌子实体的方法 Active CN109699394B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910181407.1A CN109699394B (zh) 2019-03-11 2019-03-11 一种利用液体培养基生产纵条纹炭角菌子实体的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910181407.1A CN109699394B (zh) 2019-03-11 2019-03-11 一种利用液体培养基生产纵条纹炭角菌子实体的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109699394A true CN109699394A (zh) 2019-05-03
CN109699394B CN109699394B (zh) 2021-06-22

Family

ID=66266736

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910181407.1A Active CN109699394B (zh) 2019-03-11 2019-03-11 一种利用液体培养基生产纵条纹炭角菌子实体的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109699394B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110172411A (zh) * 2019-05-29 2019-08-27 绍兴市曙光科技开发有限公司 一种痂状炭角菌菌株zj1811及其培养方法和应用
CN112029668A (zh) * 2020-09-11 2020-12-04 云南菌视界生物科技有限公司 一种纵条纹炭角菌菌株及其菌核培育方法
CN112876537A (zh) * 2021-01-29 2021-06-01 西南科技大学 一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103283480A (zh) * 2012-03-05 2013-09-11 何寒 一种可以在液体培养基直接长虫草子实体的方法
CN104885787A (zh) * 2015-06-17 2015-09-09 桂林丰润莱生物科技有限公司 活性物含量高的蛹虫草子实体种植方法
CN106588279A (zh) * 2016-11-24 2017-04-26 颍上县唐垛湖现代农业科技有限公司 一种富硒食用菌的栽培方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103283480A (zh) * 2012-03-05 2013-09-11 何寒 一种可以在液体培养基直接长虫草子实体的方法
CN104885787A (zh) * 2015-06-17 2015-09-09 桂林丰润莱生物科技有限公司 活性物含量高的蛹虫草子实体种植方法
CN106588279A (zh) * 2016-11-24 2017-04-26 颍上县唐垛湖现代农业科技有限公司 一种富硒食用菌的栽培方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
肖自添等: "《草菇优质生产技术》", 30 June 2017, 中国科学技术出版社 *
马贝贝等: ""纵条纹炭角菌子实体培养"", 《食品与发酵科技》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110172411A (zh) * 2019-05-29 2019-08-27 绍兴市曙光科技开发有限公司 一种痂状炭角菌菌株zj1811及其培养方法和应用
CN110172411B (zh) * 2019-05-29 2021-02-26 绍兴市曙光科技开发有限公司 一种痂状炭角菌菌株zj1811及其培养方法和应用
CN112029668A (zh) * 2020-09-11 2020-12-04 云南菌视界生物科技有限公司 一种纵条纹炭角菌菌株及其菌核培育方法
CN112876537A (zh) * 2021-01-29 2021-06-01 西南科技大学 一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法
CN112876537B (zh) * 2021-01-29 2022-01-04 西南科技大学 一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN109699394B (zh) 2021-06-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103766114B (zh) 一种富硒香芋的栽培方法
CN105210671A (zh) 一种段木灵芝培育方法
CN105724047B (zh) 一种高产优质富硒北虫草的栽培方法
CN109699394A (zh) 一种利用液体培养基生产纵条纹炭角菌子实体的方法
CN102687640A (zh) 一种樟芝真菌的液体深层培养方法及樟芝真菌的多糖提取方法
CN105110961A (zh) 一种香菇液体发酵培养基及其生产香菇的方法
CN103299826A (zh) 可提高虫草素含量的北虫草培养方法
CN102154407A (zh) 北冬虫夏草多糖两阶段发酵合成工艺
CN104170653B (zh) 一种羊肚菌杂交菌的菌核培养方法及其在菌种制备的应用
CN105875198B (zh) 一种提高蛹虫草菌种稳定性的培养方法
CN109370914A (zh) 一种冬虫夏草菌丝体粉及其生产方法
CN104350942A (zh) 一种用桑枝蚕蛹粉制备虫草菌丝体的方法
CN102925527A (zh) 一种金针菇、灵芝混菌发酵的方法
CN109479622A (zh) 一种茶树菇菌种工厂化生产方法
CN102342218A (zh) 固态发酵生产冬虫夏草菌丝的方法
CN103416222B (zh) 采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及液体深层发酵工艺
CN104303845B (zh) 一种利用荆条屑培养灵芝的方法
CN105586269B (zh) 利用诱变灰树花菌株生产灰树花菌丝体原料的方法
CN101570768A (zh) 一种深层液体发酵法制备富硒茶树菇粗多糖粉的方法
CN107027516A (zh) 一种富硒蝉花虫草、其培养方法及应用
CN107302867A (zh) 无菌培养牛樟芝子实体的方法
CN109198123A (zh) 一种桑黄保健茶及其制备方法
CN107099465B (zh) 用于促进扦插茶苗生根的促生菌株及其微生物育苗基质
CN105586267B (zh) 生产灵芝菌丝体的灵芝诱变菌株
CN1536069B (zh) 大规模生产虫草菌和灵芝菌的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Huang Yi

Inventor after: Yuan Shijun

Inventor after: He Xinsheng

Inventor after: Yuan Xiaohong

Inventor after: Jian Tiantian

Inventor after: Li Weiyi

Inventor before: Yuan Shijun

Inventor before: He Xinsheng

Inventor before: Yuan Xiaohong

Inventor before: Jian Tiantian

Inventor before: Li Weiyi

CB03 Change of inventor or designer information
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant