CN103416222B - 采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及液体深层发酵工艺 - Google Patents

采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及液体深层发酵工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN103416222B
CN103416222B CN201310327549.7A CN201310327549A CN103416222B CN 103416222 B CN103416222 B CN 103416222B CN 201310327549 A CN201310327549 A CN 201310327549A CN 103416222 B CN103416222 B CN 103416222B
Authority
CN
China
Prior art keywords
spore
medium
cooke
bull
lepista
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201310327549.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103416222A (zh
Inventor
余秉琦
焦友柯
虞成
史甦茵
耿朋
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Changzhou University
Original Assignee
Changzhou University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Changzhou University filed Critical Changzhou University
Priority to CN201310327549.7A priority Critical patent/CN103416222B/zh
Publication of CN103416222A publication Critical patent/CN103416222A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103416222B publication Critical patent/CN103416222B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Abstract

本发明采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及其液体深层发酵工艺，属于生物工程技术领域。提供了一种简便的由菌丝制备出紫丁香蘑孢子及采用黄酒糟作为主要培养料进行紫丁香蘑孢子深层发酵的方法，解决了当前进行紫丁香蘑孢子的研究和开发时无法获得大量孢子的问题，同时该孢子也可以用于紫丁香蘑菌种的长期保藏。

Description

采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及液体深层发酵工艺
技术领域
 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及其液体深层发酵的工艺。
背景技术
 紫丁香蘑(Lepista nuda)隶属于真菌界(Fungi)、担子菌门(Basidiomycota)、伞菌纲(Agaricomycetes)、伞菌亚纲(Agaricomycetidae)、伞菌目(Agaricales)、口蘑科(Tricholomataceae)、香蘑属(Lepista)，是一种珍稀的食药用菌。
 据《日用草本》等史料记载，紫丁香蘑具有很高的食用及药用价值。长期食用能有效地防止血管硬化，治疗肾脏病、胆结石、糖尿病、肝硬化等疾病。现代研究表明，经常食用紫丁香蘑能调节人体正常糖代谢，促进神经传导；其热水提取物具有显著抗癌活性，对小白鼠肉瘤S180的抑制率为90％，对艾氏瘤的抑制率为100％。此外还发现紫丁香蘑具有抗菌和抗氧化活性。
 紫丁香蘑也是一种名贵的食材，尽管在欧洲等地已能人工栽培，但是产量低，然而其野生资源有限。我国现在处在紫丁香蘑的驯化栽培阶段, 还没有商业化生产。
  目前关于紫丁香蘑的国内外研究报道少， 关于紫丁香蘑孢子的研究还未见报道， 也没有关于紫丁香蘑菌丝在液体深层发酵过程中产生大量孢子的报道。我们对紫丁香蘑孢子的初步研究发现其粗蛋白和粗脂肪含量分别为27.14%和10.26%，其水抽提物在线虫实验中显示出明显的抗热激抗氧化功能。然而，对紫丁香蘑孢子进行研究开发首先需要大量的紫丁香蘑孢子。食药用菌的孢子一般由成熟的子实体释放产生，通常情况下很难从菌丝直接产生。此外，也没有紫丁香蘑子实体能像灵芝子实体那样产生大量孢子的报道。如果通过液体深层发酵能制备出紫丁香蘑孢子就可以供研究和开发利用。目前，国内外尚没有关于紫丁香蘑孢子发酵生产方法的报道。
发明内容
 本发明的目的是提供一种采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及其液体深层发酵的工艺。
  本发明的目的通过以下方案实现：采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及液体深层发酵工艺,按照下述步骤进行：
  （1）将紫丁香蘑菌丝体转接至斜面培养基中，22-28℃培养168-312小时；
  （2）将步骤（1）中的斜面菌种转接入装有摇瓶培养基的摇瓶中，24-28℃培养，转速100-180rpm，培养72-288小时。发酵液会变成粉红色，显微镜检验可以发现其中有大量孢子存在；
  （3）将含孢子的发酵液在平皿培养基上进行划线，22-28℃培养72-168小时，挑红色单菌落转接至试管斜面培养基培养保存或将发酵液直接作为菌种进行紫丁香蘑孢子的液体深层发酵以便获得大量孢子；
  （4）将步骤（2）中含紫丁香蘑孢子的发酵液按2%-6%的接种量转接入装有种子培养基的种子罐中，24-28℃培养，转速100-150rpm，通气量0.5-2vvm，培养36-72小时；
  （5）将步骤（4）中的发酵液按体积比2%-6%的接种量转接入装有发酵培养基的发酵罐中，24-28℃培养，转速100-150rpm，通气量0.5-2vvm，培养36-96小时。
  其中步骤（1）中的斜面培养基（g/L）：马铃薯150-200，葡萄糖15-20，琼脂15-20，pH自然。
其中步骤（2）中的摇瓶培养基（g/L）：马铃薯150-200，葡萄糖15-20，黄酒糟5-20，pH自然。
  其中步骤（3）中的平皿培养基与步骤（1）中的斜面培养基相同。
  其中步骤（4）中的种子罐培养基（g/L）：葡萄糖15-30，黄酒糟15-30，pH自然。
  其中步骤（5）中的发酵培养基（g/L）：葡萄糖20-60，黄酒糟20-60，pH自然。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用方法，在不脱离本发明上述基本技术方法前提下，还可以做出多种其它形式的修改、替换和变更。
本发明的有益效果是：该发明方法提供了一种简便的由菌丝制备出紫丁香蘑孢子及采用黄酒糟作为主要培养料进行紫丁香蘑孢子深层发酵的方法，解决了当前进行紫丁香蘑孢子的研究和开发时无法获得大量孢子的问题，同时该孢子也可以用于紫丁香蘑菌种的长期保藏。
具体实施方式
  以下通过实例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再做进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
  采用菌丝摇瓶发酵制备紫丁香蘑孢子
  1.斜面培养：将紫丁香蘑（Lepista nuda)菌丝体转接到斜面培养基上，22℃培养312小时。
  斜面培养基（g/L）：马铃薯200，葡萄糖20，琼脂20，pH自然。
  2.摇瓶培养：将斜面菌种转接入装有100mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中，24℃培养，转速100rpm，培养288小时。发酵液会变成粉红色，显微镜检验可以发现其中有大量孢子存在, 密度可达107个/mL。
  摇瓶培养基（g/L）：马铃薯150，葡萄糖15，黄酒糟5，pH自然。
  3.将含孢子的发酵液进行平皿划线，28℃培养72小时，挑红色单菌落转接至试管斜面培养基培养保存或将发酵液直接作为菌种进行紫丁香蘑孢子的液体深层培养以便获得大量孢子。
  实施例2
  紫丁香蘑孢子摇瓶发酵工艺
  1.将按照实施例1中所述方法制备的紫丁香蘑孢子作为发酵种子。
  2.发酵摇瓶培养：将紫丁香蘑孢子种子发酵液按6%的接种量转接入装有100mL发酵培养基的250mL摇瓶中，28℃培养，转速180rpm，培养96小时，孢子密度可达108个/mL。
  发酵培养基（g/L）：葡萄糖60，黄酒糟60，pH自然。
  实施例3
  紫丁香蘑孢子的发酵罐发酵工艺
   1.将按照实施例1中所述方法制备的紫丁香蘑孢子作为发酵种子。
  2.种子罐发酵：将紫丁香蘑孢子种子发酵液按2%的接种量转接入装有种子发酵培养基的种子罐中，24℃培养，转速150rpm，通气量2.0vvm，培养36小时。
  种子罐培养基（g/L）：葡萄糖15，黄酒糟15，pH自然。
  3.发酵罐发酵：将紫丁香蘑孢子发酵液按2%的接种量转接入装有发酵培养基的发酵罐中，24℃培养，转速150rpm，通气量2.0vvm，培养48小时，孢子密度可达107个/mL。
  发酵罐培养基（g/L）：葡萄糖20，黄酒糟20，pH自然。

Claims (1)

1.采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及其液体深层发酵工艺,其特征在于按照下述步骤进行：
  （1）将紫丁香蘑菌丝体转接至斜面培养基中，22-28℃培养168-312小时；
  （2）将步骤（1）中的斜面菌种转接入装有摇瓶培养基的摇瓶中，24-28℃培养，转速100-180rpm，培养72-288小时，发酵液会变成粉红色，显微镜检验可以发现其中有大量孢子存在；
  （3）将含孢子的发酵液在平皿培养基上进行划线，22-28℃培养72-168小时，挑红色单菌落转接至试管斜面培养基培养保存或将发酵液直接作为菌种进行紫丁香蘑孢子的液体深层发酵以便获得大量孢子；
  （4）将步骤（2）中含紫丁香蘑孢子的发酵液按2%-6%的接种量转接入装有种子培养基的种子罐中，24-28℃培养，转速100-150rpm，通气量0.5-2vvm，培养36-72小时；
  （5）将步骤（4）中的发酵液按体积比2%-6%的接种量转接入装有发酵培养基的发酵罐中，24-28℃培养，转速100-150rpm，通气量0.5-2vvm，培养36-96小时;
其中步骤（1）中的斜面培养基（g/L）：马铃薯150-200，葡萄糖15-20，琼脂15-20，pH自然;
其中步骤（2）中的摇瓶培养基（g/L）：马铃薯150-200，葡萄糖15-20，黄酒糟5-20，pH自然;
其中步骤（3）中的平皿培养基与步骤（1）中的斜面培养基相同;
其中步骤（4）中的种子罐培养基（g/L）：葡萄糖15-30，黄酒糟15-30，pH自然;
其中步骤（5）中的发酵培养基（g/L）：葡萄糖20-60，黄酒糟20-60，pH自然。
CN201310327549.7A 2013-07-31 2013-07-31 采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及液体深层发酵工艺 Expired - Fee Related CN103416222B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310327549.7A CN103416222B (zh) 2013-07-31 2013-07-31 采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及液体深层发酵工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310327549.7A CN103416222B (zh) 2013-07-31 2013-07-31 采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及液体深层发酵工艺

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103416222A CN103416222A (zh) 2013-12-04
CN103416222B true CN103416222B (zh) 2015-06-24

Family

ID=49642031

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310327549.7A Expired - Fee Related CN103416222B (zh) 2013-07-31 2013-07-31 采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及液体深层发酵工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103416222B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103708968B (zh) * 2013-12-31 2016-06-15 贵州省生物研究所 花脸香蘑一级菌种固体培养基及菌种快速栽培方法
CN105331548B (zh) * 2015-12-03 2018-09-25 中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所 一种紫丁香蘑菌株及其液体菌种与制备方法
CN106047725A (zh) * 2016-07-14 2016-10-26 安徽天明生态林农科技开发有限公司 一种基于黄酒糟的紫丁香蘑培养基以及紫丁香蘑液体菌种制备方法
CN108174744A (zh) * 2018-02-24 2018-06-19 刘峰 野生紫丁香蘑驯化栽培方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1561667A (zh) * 2004-04-21 2005-01-12 云南省农业科学院 金耳酵母状孢子发酵生产食品和食品添加剂的方法
CN102174461A (zh) * 2011-03-07 2011-09-07 江南大学 一种基于液体深层发酵的樟芝无性孢子的制备方法及应用
CN102823937A (zh) * 2012-08-16 2012-12-19 湖北中烟工业有限责任公司 紫丁香蘑深层发酵的菌丝体提取物的提取方法及其在卷烟中的应用
CN102835251A (zh) * 2012-09-11 2012-12-26 史长山 药用猴头菌菌丝体液体深层发酵培养方法
CN103190279A (zh) * 2013-04-22 2013-07-10 中国科学院西北高原生物研究所 一种黄绿蜜环菌的深层发酵及其应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1561667A (zh) * 2004-04-21 2005-01-12 云南省农业科学院 金耳酵母状孢子发酵生产食品和食品添加剂的方法
CN102174461A (zh) * 2011-03-07 2011-09-07 江南大学 一种基于液体深层发酵的樟芝无性孢子的制备方法及应用
CN102823937A (zh) * 2012-08-16 2012-12-19 湖北中烟工业有限责任公司 紫丁香蘑深层发酵的菌丝体提取物的提取方法及其在卷烟中的应用
CN102835251A (zh) * 2012-09-11 2012-12-26 史长山 药用猴头菌菌丝体液体深层发酵培养方法
CN103190279A (zh) * 2013-04-22 2013-07-10 中国科学院西北高原生物研究所 一种黄绿蜜环菌的深层发酵及其应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
珍稀食药用菌紫丁香蘑的研究进展;周峰等;《食用菌学报》;20101231;第17卷(第04期);79-83 *
紫丁香蘑原基诱导合成培养基初探;姚志伟等;《化学与生物工程》;20101231;第27卷(第01期);59-62 *
紫丁香蘑液体合成培养基优化初探;姚志伟等;《武汉生物工程学院学报》;20090331;第5卷(第01期);5-9、69 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN103416222A (zh) 2013-12-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107699499B (zh) 一株米曲霉za127及其应用
CN104170653B (zh) 一种羊肚菌杂交菌的菌核培养方法及其在菌种制备的应用
CN103416222B (zh) 采用菌丝摇瓶培养催生紫丁香蘑孢子及液体深层发酵工艺
CN102864114B (zh) 一种恩拉霉素高产菌株及其制备方法和应用
CN105110961A (zh) 一种香菇液体发酵培养基及其生产香菇的方法
CN103555594A (zh) 一种米曲霉及其应用
CN105039194A (zh) 酵母融合菌混菌剂及其发酵有机废水制备液体肥的方法
CN106635851A (zh) 一种高核酸酿酒酵母菌的选育方法
CN105238703B (zh) 一株高产阿魏酸酯酶的枝状枝孢菌及在食醋酿造中的应用
CN103283608A (zh) 一种金针菇工厂化栽培菌种及其栽培方法
CN102037856A (zh) 一种简易蛹虫草菌种复壮的方法
CN103919224A (zh) 黄伞发酵液发酵乳酸饮料及制备方法
CN109699394A (zh) 一种利用液体培养基生产纵条纹炭角菌子实体的方法
CN102766663B (zh) 桑黄活性多糖的制备方法
CN104893985A (zh) 一种棘孢曲霉菌株及其应用
CN101861794A (zh) 一种北冬虫夏草液体菌种的生产方法
CN106434368A (zh) 一种云南白灵芝液体菌种的培养方法
CN106376914A (zh) 一种利用松茸深层发酵菌丝体制备松茸精粉的方法
CN101302480B (zh) 高产γ-氨基丁酸红色红曲霉Mr-5菌株及其筛选方法和用途
CN1932004A (zh) 低温β－半乳糖苷酶菌株、低温β－半乳糖苷酶及其生产工艺
CN107488591A (zh) 一种高酶活、高耐盐的酱油菌株的选育方法及其应用方法
CN109355203A (zh) 一种裂褶菌液体菌种的培养方法
CN102875240B (zh) 一种生物菌叶面肥料的生产方法
CN101861796B (zh) 一种利用有色稻米发酵废糟培养豹斑毒鹅膏的方法
CN103103062A (zh) 复合益生菌制备桑葚营养饮料方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20150624

Termination date: 20210731

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee