CN109696344A - 一种改良氏Schiff染色液及其配制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种改良氏Schiff染色液及其配制方法。将传统Schiff染色液中的碱性品红用盐酸副玫瑰苯胺替代，20 mL当量盐酸改为1mL盐酸。配制过程中，无需配制当量盐酸和煮沸，可明显简化染色液的配制方法。通过将改良氏糖原染色液与传统染色液对肝脏切片中糖原染色的结果进行对比研究发现，新的染色液染色效果良好，两种染色方法所得出的染色效果在统计学上差异无显著意义（P>0.05），因该染色液配制方法简单，易于掌握，可广泛推广应用于病理切片糖原染色中，有效防止传统配制过程中，配制当量盐酸所带来的风险和因加热导致的有毒气体挥发而对配制人员及配制环境产生的危害。
Description
技术领域
本发明涉及一种全新改良的Schiff染色液成分及配制方法，属于病理技术新方法领域。
背景技术
随着医学实验技术的发展，糖原染色应用的范围更加广泛，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质，心肌病变及其他心血管疾病的诊断，糖原累积病诊断和研究，糖尿病的诊断和研究，用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外，还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色，为临床诊断、分类和治疗提供了重要的依据。然而传统用于糖原染色的染色液配制过程繁琐，需配制当量盐酸并煮沸，配制当量盐酸具有一定的风险性，在煮沸过程中亦会产生有毒有害气体影响环境和人员的职业卫生安全。
发明内容
为了克服上述缺陷，本发明将传统Schiff染色液中的碱性品红用盐酸副玫瑰苯胺替代，20mL当量盐酸改为1mL盐酸，得到一种新的改良Schiff 染色液及其配制方法。配制过程中，无需配制当量盐酸和煮沸，可明显简化染色液的配制方法，降低配制盐酸带来的风险和传统配制过程中因加热导致的有毒气体挥发而对配制人员及配制环境产生的危害。
为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：一种改良氏Schiff 染色液，包括以下组分：盐酸副玫瑰苯胺0.5-2.0g,活性炭2g，浓度为36-38％的浓盐酸1ml，偏重亚硫酸钠1.5g。
优选的，改良氏Schiff染色液包括以下组分：盐酸副玫瑰苯胺1g,活性炭2g，浓度为36-38％的浓盐酸1ml，偏重亚硫酸钠1.5g。
前述的改良氏Schiff染色液的配制方法，包括如下步骤：
确定染色液组成；将盐酸副玫瑰苯胺放入200毫升蒸馏水中搅拌溶解，然后依次加入浓盐酸和偏重亚硫酸钠并搅拌10分钟，置于暗处过夜；再加入活性炭2g，搅拌2分钟并过滤得到染色液，制得的染色液装入棕色瓶中 4℃冰箱保存。
本发明还提供改良氏Schiff染色液在对组织切片中的糖原染色中的应用。所述的组织切片为任意种属动物及人的组织切片。
本发明还提供前述的配制方法在制备对组织切片中的糖原进行染色的染色液的应用。
本发明的染色液在配制过程中，无需配制当量盐酸和煮沸，可明显简化染色液的配制方法，降低配制盐酸带来的风险和传统配制过程中因加热导致的有毒气体挥发而对配制人员及配制环境产生的危害。本发明通过将改良氏糖原染色液与传统染色液对肝脏切片中糖原染色的结果进行对比研究发现，新的染色液染色效果良好，两种染色方法所得出的染色效果在统计学上差异无统计学意义(P>0.05)。
附图说明
图1大鼠肝脏糖原传统Schiff染色液染色效果图；
图2大鼠肝脏糖原本发明的改良Schiff染色液染色效果图。
具体实施方式
以下所列实施例，仅为帮助本领域技术人员更全面理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
对比例1
传统Schiff染色液配方组成及配制方法：
传统Schiff染色液配方：碱性品红1g,活性炭2g，当量盐酸20ml，偏重亚硫酸钠1.5g。溶剂为蒸馏水。
传统Schiff染色液的配制方法：
(1)碱性品红1g，放入200毫升蒸馏水中，煮沸，搅拌，充分溶解。
(2)冷却至20℃过滤，滤液中加入当量盐酸20毫升。
(3)加偏重亚硫酸钠1.5g，置于暗处过夜。
(4)加活性炭2g，摇晃，过滤，棕色瓶4℃冰箱保存。
实施例1改良氏Schiff染色液配方组成及配制方法
改良氏Schiff染色液配方：盐酸副玫瑰苯胺1g，活性炭2g，市售浓盐酸(浓度36-38％)1ml，偏重亚硫酸钠1.5g。溶剂为蒸馏水。
改良氏Schiff染色液的配制方法：
将盐酸副玫瑰苯胺放入200毫升蒸馏水中搅拌溶解，然后依次加入盐酸和偏重亚硫酸钠并搅拌10分钟，置于暗处过夜；再加入活性炭2g，搅拌2 分钟并过滤，制得染色液，装入棕色瓶中4℃冰箱保存。
实施例2传统Schiff染色液与改良氏Schiff染色液对肝脏病理切片中糖原染色效果的对比研究
研究方法：将40张大鼠肝脏组织病理学切片，随机分成2组，分别为传统Schiff染色液组和改良氏Schiff染色液组，每组各20张，二甲苯脱蜡 15min，梯度酒精水化，去离子水洗2min，高碘酸氧化10min，去离子水水洗2次，每次2min，根据分组情况，分别用传统Schiff染色液和改良氏Schiff 染色液染色10min，自来水冲洗10min，置于苏木素浸泡30s，自来水冲洗 5min，梯度酒精脱水，二甲苯透明，封片。待二甲苯挥发完后显微镜下阅片，并对染色效果进行评估，评估结果分四级，分别为极差、差、一般、良好。用SPSS22.0统计软件将传统Schiff染色液组与改良氏Schiff染色液组进行Fisher精确概率统计，P＜0.05认为两组之间具有统计学差异。
研究结果：研究结果见表1和图1-2。结果显示传统Schiff染色液和改良氏Schiff染色液对大鼠肝脏病理切片中糖原皆能染色，其染色结果均良好，其染色效果良好率皆为100％。两种染色方法染色结果比较显示其差异在统计学上无显著意义(P>0.05)。
表1.不同Schiff染色液大鼠肝脏病理切片糖原染色结果(n＝20)
结论：
传统Schiff染色液和改良氏染色液对大鼠肝脏病理切片中糖原进行染色，其染色结果均良好，其染色效果良好率均为100％，两种染色方法比较，在统计学上差异无显著意义(P>0.05)。因该染色液配制方法简单，易于掌握，降低配制当量盐酸和传统配制过程中因加热导致的有毒气体挥发而对配制人员及配制环境产生的危害，可广泛推广应用于病理切片糖原染色中。
以上显示描述了本发明的基本原理、主要特征以及优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落进要求保护本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (6)
1.一种改良氏Schiff染色液，其特征在于，包括以下组分：盐酸副玫瑰苯胺0.5-2.0 g，活性炭 2 g，浓度为36-38%的浓盐酸1 ml，偏重亚硫酸钠 1.5 g。
2.根据权利要求1所述的改良氏Schiff染色液，其特征在于，包括以下组分：盐酸副玫瑰苯胺1 g， 活性炭 2 g，浓度为36-38%的浓盐酸1 ml，偏重亚硫酸钠 1.5 g。
3.根据权利要求1或2所述的一种改良氏Schiff染色液的配制方法，其特征在于，包括如下步骤：
将盐酸副玫瑰苯胺放入200毫升蒸馏水中搅拌溶解，然后依次加入浓盐酸和偏重亚硫酸钠并搅拌10分钟，置于暗处过夜；再加入活性炭2 g，搅拌2分钟、过滤，制成染色液；制得的染色液装入棕色瓶中，4 ℃冰箱保存。
4.权利要求1所述的改良氏Schiff染色液在对组织切片中的糖原染色中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的组织切片为任意种属动物及人的组织切片。
6.权利要求3所述的配制方法在制备对组织切片中的糖原进行染色的染色液的应用。
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20190430 |