CN109646680A - 一种治疗kras突变型肠癌的联合用药物 - Google Patents
一种治疗kras突变型肠癌的联合用药物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109646680A CN109646680A CN201910106314.2A CN201910106314A CN109646680A CN 109646680 A CN109646680 A CN 109646680A CN 201910106314 A CN201910106314 A CN 201910106314A CN 109646680 A CN109646680 A CN 109646680A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hmgcs1
- inhibitor
- combination medicine
- mek inhibitor
- trimetinib
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 206010069755 K-ras gene mutation Diseases 0.000 title claims abstract description 29
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 28
- 201000002313 intestinal cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 21
- 208000005016 Intestinal Neoplasms Diseases 0.000 title claims abstract description 19
- 101000839025 Homo sapiens Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, cytoplasmic Proteins 0.000 claims abstract description 58
- 102100028888 Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, cytoplasmic Human genes 0.000 claims abstract description 58
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 41
- 229940124647 MEK inhibitor Drugs 0.000 claims abstract description 32
- 239000002829 mitogen activated protein kinase inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 32
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 17
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims description 7
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 7
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 6
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 6
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 5
- 101150096417 Hmgcs1 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 4
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 claims description 4
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 claims description 4
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 claims description 3
- 108010074438 Sterol Regulatory Element Binding Protein 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 3
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 claims description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 2
- 102000008079 Sterol Regulatory Element Binding Protein 2 Human genes 0.000 claims 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 19
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 abstract description 17
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 abstract description 17
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 abstract description 2
- IZEKFCXSFNUWAM-UHFFFAOYSA-N dipyridamole Chemical compound C=12N=C(N(CCO)CCO)N=C(N3CCCCC3)C2=NC(N(CCO)CCO)=NC=1N1CCCCC1 IZEKFCXSFNUWAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- 229960002768 dipyridamole Drugs 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 10
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- 102400000888 Cholecystokinin-8 Human genes 0.000 description 8
- 101800005151 Cholecystokinin-8 Proteins 0.000 description 8
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 8
- 102000006311 Cyclin D1 Human genes 0.000 description 6
- 108010058546 Cyclin D1 Proteins 0.000 description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 6
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 description 4
- 101710135898 Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 description 4
- 101710150448 Transcriptional regulator Myc Proteins 0.000 description 4
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 3
- 102200006532 rs112445441 Human genes 0.000 description 3
- NPOAOTPXWNWTSH-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxy-3-methylglutaric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C)CC(O)=O NPOAOTPXWNWTSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100239628 Danio rerio myca gene Proteins 0.000 description 2
- 201000003741 Gastrointestinal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- UWAOJIWUVCMBAZ-UHFFFAOYSA-N [1-[1-(4-chlorophenyl)cyclobutyl]-3-methylbutyl]-dimethylazanium;chloride Chemical compound Cl.C=1C=C(Cl)C=CC=1C1(C(N(C)C)CC(C)C)CCC1 UWAOJIWUVCMBAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 102200006531 rs121913529 Human genes 0.000 description 2
- 102200006537 rs121913529 Human genes 0.000 description 2
- 229960003466 sibutramine hydrochloride Drugs 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- ROFVEXUMMXZLPA-UHFFFAOYSA-N Bipyridyl Chemical compound N1=CC=CC=C1C1=CC=CC=N1 ROFVEXUMMXZLPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005870 Coenzyme A Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102100030708 GTPase KRas Human genes 0.000 description 1
- 101000584612 Homo sapiens GTPase KRas Proteins 0.000 description 1
- 101150105104 Kras gene Proteins 0.000 description 1
- 108010011449 Long-chain-fatty-acid-CoA ligase Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000003281 allosteric effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 102000027450 oncoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008819 oncoproteins Proteins 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 102000016914 ras Proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004066 trametinib Drugs 0.000 description 1
- LIRYPHYGHXZJBZ-UHFFFAOYSA-N trametinib Chemical compound CC(=O)NC1=CC=CC(N2C(N(C3CC3)C(=O)C3=C(NC=4C(=CC(I)=CC=4)F)N(C)C(=O)C(C)=C32)=O)=C1 LIRYPHYGHXZJBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
为了解决目前临床上缺少有效治疗KRAS突变肿瘤的药物的问题，本发明提供了一种治疗肠癌的联合用药物，它含有相同或者不同规格的同时或者分别给药的HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂。本发明还提供了HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂对应的药用组合物及其制剂。本发明联合使用HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂可有效抑制KRAS突变型肠癌细胞在体外或者体内的生长，其抗癌效果明显优于HMGCS1抑制剂或MEK抑制剂单独使用，可以作为新的KRAS突变型肿瘤药物的新途径。
Description
技术领域
本发明涉及抗癌药物领域，具体涉及一种治疗KRAS突变型肠癌的联合用药物。
背景技术
近年来，随着人们生活方式的不断西化，我国肠癌的发病率不断攀升，其发病率和死亡率一直处于恶性肿瘤的前五位。约40％的肠癌中存在KRAS基因的突变，其严重影响了晚期肠癌患者的治疗选择和预后。由于KRAS信号通路调控的复杂性以及KRAS突变型肿瘤对靶向治疗的抵抗性，目前临床上仍无有效治疗KRAS突变肿瘤的药物。
尽管KRAS突变能引起持续的RAF-MEK-ERK的激活，促进肿瘤持续进展，然而针对RAS下游RAF/MEK的各种抑制剂均未能应用于KRAS突变型肿瘤患者。曲美替尼(GSK1120212)是一种新型的变构型MEK抑制剂，FDA仅批准用于BRAFV600E突变的转移性黑色素瘤的治疗，但令人遗憾的是曲美替尼在突变的KRAS突变肠癌患者身上获益非常有限。
HMGCS1(3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A合成酶)是胆固醇合成通路-甲羟戊酸通路中的关键代谢酶，而双嘧达莫可以通过抑制HMGCS1上游转录因子SREBP2，有效下调肿瘤细胞中HMGCS1的表达，进而抑制肿瘤增殖。但HMGCS1抑制剂对KRAS突变型肠癌的疗效也十分有限。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了一种治疗肠癌的联合用药物，其特征在于：它含有相同或者不同规格的同时或者分别给药的HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂；优选地，HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂的摩尔比是2∶1。
如前述的联合用药物，所述肠癌是KRAS突变型肠癌。
如前述的联合用药物，所述HMGCS1抑制剂为包含靶向HMGCS1基因的siRNA或miRNA序列的人工或天然核酸分子。
如前述的联合用药物，所述人工或天然核酸分子是shRNA或成熟的siRNA。
如前述的联合用药物，所述靶向HMGCS1基因的siRNA或miRNA的序列如SEQ IDNO.2所示。
如前述的联合用药物，所述核酸分子是通过包裹在慢病毒中进入人体组织的。
如前述的联合用药物，所述HMGCS1抑制剂为靶向HMGCS1基因上游转录因子SREBP2的物质。
如前述的联合用药物，所述HMGCS1抑制剂为双密哒莫。
如前述的联合用药物，所述MEK抑制剂为曲美替尼。
如前述的联合用药物，其特征在于：
所述HMGCS1抑制剂为双密哒莫，其每日用量是70mg/kg体重；
所述MEK抑制剂为曲美替尼，其每日用量是1mg/kg体重。
本发明还提供了一种治疗肠癌的药物组合物，其特征在于：它是以HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂作为活性成分、加上药学上可接受的辅助性成分制备而成。
如前述的药物组合物，其特征在于：
所述HMGCS1抑制剂为双密哒莫；
和/或，所述MEK抑制剂为曲美替尼。
本发明还提供了一种治疗肠癌的药物制剂，其特征在于：它是以HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂作为活性成分、加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成，优选地，HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂的摩尔比是2∶1。
本发明联合使用HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂可有效抑制KRAS突变型肠癌细胞在体外或者体内的生长，其抗癌效果明显优于HMGCS1抑制剂或MEK抑制剂单独使用。
本发明为治疗KRAS突变型肠癌提供了新的工具，既可以采用联合用药的方式，同理又可制成HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂的药用组合物或制剂，应用范围广泛，前景良好。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过具体实施方式对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1曲美替尼和/或si-HMGCS1体外抑制KRAS突变型肠癌细胞：a-c，CCK8检测癌细胞数量；d-f，克隆形成实验；g-i，蛋白免疫印迹。
图2曲美替尼和/或双嘧达莫体外抑制KRAS突变型肠癌细胞：a，CCK8检测癌细胞数量；b，克隆形成实验；c，蛋白免疫印迹。
图3曲美替尼和/或shHMGCS1体内抑制肿瘤体积。
图4曲美替尼和/或shHMGCS1体内抑制肿瘤体积统计图。
图5曲美替尼和/或双嘧达莫体内抑制肿瘤体积。
图6曲美替尼和/或双嘧达莫体内抑制肿瘤体积统计图。
图7裸鼠体重统计：ns，非显著差异。
图8裸鼠体内肿瘤蛋白免疫印迹：a，曲美替尼和/或si-HMGCS1的效果；b，曲美替尼和/或双嘧达莫的效果。
说明：附图中，Trame或Tram代表曲美替尼；si-CS1表示si-HMGCS1；Dipy代表双嘧达莫；*表示显著差异(p＜0.05)；**表示极显著差异(p＜0.01)；***表示非常显著的差异(p＜0.001)；免疫印迹图中：0表示对照，+表示联合用药。
具体实施方式
实验例1 MEK抑制剂联合HMGCS1抑制剂在体外抑制KRAS突变型肠癌细胞
KRAS突变型的肠癌细胞株：HCT116(KRAS G13D)；SW480(KRAS G12V)；SW1116(KRASG12A)。
MEK抑制剂：曲美替尼。
HMGCS1抑制剂：靶向HMGCS1的siRNA(si-HMGCS1)，其序列(SEQ ID NO.1)为：5′-GCCACAGGAAATGCTAGACCTAC-3′。
1.实验方法
1.1实验处理：使用生理盐水(对照)、曲美替尼(25nM)、si-HMGCS1(50nM)或曲美替尼(25nM)联合si-HMGCS1(50nM)处理三种肠癌细胞株。
1.2检测：
(1)CCK8检测细胞数量变化
实验处理3天后，采用CCK8检测
(2)观察细胞克隆形成
实验处理7天后，使用结晶紫染色，观察克隆数量。
(3)蛋白免疫印迹
实验处理24h后，提取细胞总蛋白，进行蛋白免疫印迹，检测HMGCS1、c-Myc(增殖相关蛋白)、Cyclin D1(增殖相关蛋白)和GAPDH(作为内参)。
2.实验结果
如图1所示，曲美替尼+si-HMGCS1组的相对细胞增殖比例显著低于其他组别，细胞克隆数也明显少于其他组别。
蛋白免疫印迹显示，HMGCS1在HCT116和SW480细胞被单独的曲美替尼显著抑制，表明曲美替尼有一定的HMGCS1抑制能力；在三种细胞中，联合用药都显著降低了HMGCS1、cMyc和Cyclin D1的表达，与CCK8和克隆形成实验的结果一致。
3.结论
联合使用曲美替尼和si-HMGCS1，相比曲美替尼或si-HMGCS1单独使用，有更好的抑制KRAS突变型肠癌细胞增殖的能力。
实验例2 MEK抑制剂联合HMGCS1抑制剂在体外抑制KRAS突变型肠癌细胞
KRAS突变型的肠癌细胞株：HCT116(KRAS G13D)；SW480(KRAS G12V)；SW1116(KRASG12A)。
MEK抑制剂：曲美替尼。
HMGCS1抑制剂：双嘧达莫。
1.实验方法
1.1实验处理：使用生理盐水(对照)、曲美替尼(25nM)、双嘧达莫(50μM)或曲美替尼(25nM)联合双嘧达莫(50μM)分别处理三种肠癌细胞株。
1.2检测：
(1)CCK8检测细胞数量变化
实验处理3天后，采用CCK8检测
(2)观察细胞克隆形成
实验处理7天后，使用结晶紫染色，观察克隆数量。
(3)蛋白免疫印迹
实验处理24h后，提取细胞总蛋白，进行蛋白免疫印迹，检测HMGCS1、c-Myc(增殖相关蛋白)、Cyclin D1(增殖相关蛋白)和GAPDH(作为内参)。
2.实验结果
如图1所示，曲美替尼+双嘧达莫组的相对细胞增殖比例显著低于其他组别，细胞克隆数也明显少于其他组别。
蛋白免疫印迹显示，HMGCS1在HCT116和SW480细胞被单独的曲美替尼显著抑制，表明曲美替尼有一定的HMGCS1抑制能力；在三种细胞中，联合用药都显著降低了HMGCS1、cMyc和Cyclin D1的表达，与CCK8和克隆形成实验的结果一致。
3.结论
联合使用曲美替尼和双嘧达莫，相比曲美替尼或双嘧达莫单独使用，有更好的抑制KRAS突变型肠癌细胞增殖的能力。
实验例3 MEK抑制剂联合HMGCS1抑制剂在体内抑制KRAS突变型肠癌细胞
KRAS突变型的肠癌细胞株：HCT116(KRAS G13D)。
MEK抑制剂：曲美替尼。
HMGCS1抑制剂：携带靶向HMGCS1的shRNA(shHMGCS1)的慢病毒，双嘧达莫。
动物模型构建：将肠癌细胞株异种移植到裸鼠体内。
1.实验方法
1.1实验处理：对动物模型分为对照组、曲美替尼、HMGCS1抑制剂(双嘧达莫和shHMGCS1)或曲美替尼联合HMGCS1抑制剂(双嘧达莫和shHMGCS1)。曲美替尼组(1mg/kg，口服)每天一次；HMGCS1抑制剂双嘧达莫组(70mg/kg，腹腔注射，每天一次)；HMGCS1抑制剂组慢病毒shHMGCS1组(25μl(1×108TU/ml)，瘤内注射)每七天一次，曲美替尼(1mg/kg，口服)每天一次+双嘧达莫组(70mg/kg，腹腔注射，每天一次，曲美替尼(1mg/kg，口服)每天一次+慢病毒shHMGCS1组(25μl(1×108TU/ml)，瘤内注射)每七天一次。
1.2检测：
在第14天分批处死动物模型，测定小鼠体重和移植肿瘤体积、重量，并对第14天所取的肿瘤进行蛋白免疫印迹分析，检测HMGCS1、c-Myc(增殖相关蛋白)、Cyclin D1(增殖相关蛋白)和GAPDH(作为内参)。
2.结果
小鼠体重方面，各组均无显著差别。
肿瘤体积方面，联合用药(曲美替尼+慢病毒/双嘧达莫)组的体积最小，且15天内没有增加；曲美替尼组的体积稍大，且在15天内有略微增加；HMGCS1抑制剂组有一定的抑制肿瘤效果。
蛋白表达方面，可见联合用药组的HMGCS1、c-Myc(增殖相关蛋白)、Cyclin D1(增殖相关蛋白)均低于其他组别。
3.结论
MEK抑制剂联合HMGCS1抑制剂可在体内有效抑制KRAS突变型肠癌细胞的增殖。
综上，MEK抑制剂联合HMGCS1抑制剂可显著抑制KRAS突变型肠癌细胞的增殖，具有良好的应用前景。
SEQUENCE LISTING
<110> 四川大学华西医院
<120> 一种治疗KRAS突变型肠癌的联合用药物
<130> GY026-2018P013368CC
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
gccacaggaa atgctagacc tac 23
Claims (13)
1.一种治疗肠癌的联合用药物，其特征在于：它含有相同或者不同规格的同时或者分别给药的HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂；优选地，HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂的摩尔比是2∶1。
2.如权利要求1所述的联合用药物，其特征在于：所述肠癌是KRAS突变型肠癌。
3.如权利要求1所述的联合用药物，其特征在于：所述HMGCS1抑制剂为包含靶向HMGCS1基因的siRNA或miRNA序列的人工或天然核酸分子。
4.如权利要求3所述的联合用药物，其特征在于：所述人工或天然核酸分子是shRNA或成熟的siRNA。
5.如权利要求3所述的联合用药物，其特征在于：所述靶向HMGCS1基因的siRNA或miRNA的序列如SEQ ID NO.2所示。
6.如权利要求3所述的联合用药物，其特征在于：所述核酸分子是通过包裹在慢病毒中进入人体组织的。
7.如权利要求1所述的联合用药物，其特征在于：所述HMGCS1抑制剂为靶向HMGCS1基因上游转录因子SREBP2的物质。
8.如权利要求7所述的联合用药物，其特征在于：所述HMGCS1抑制剂为双密哒莫。
9.如权利要求1所述的联合用药物，其特征在于：所述MEK抑制剂为曲美替尼。
10.如权利要求1所述的联合用药物，其特征在于：
所述HMGCS1抑制剂为双密哒莫；
和/或，所述MEK抑制剂为曲美替尼。
11.一种治疗肠癌的药物组合物，其特征在于：它是以HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂作为活性成分、加上药学上可接受的辅助性成分制备而成；优选地，HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂的摩尔比是2∶1。
12.如权利要求10所述的药物组合物，其特征在于：
所述HMGCS1抑制剂为双密哒莫；
和/或，所述MEK抑制剂为曲美替尼。
13.一种治疗肠癌的药物制剂，其特征在于：它是以HMGCS1抑制剂和MEK抑制剂作为活性成分、加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910106314.2A CN109646680B (zh) | 2019-01-31 | 2019-01-31 | 一种治疗kras突变型肠癌的联合用药物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910106314.2A CN109646680B (zh) | 2019-01-31 | 2019-01-31 | 一种治疗kras突变型肠癌的联合用药物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109646680A true CN109646680A (zh) | 2019-04-19 |
| CN109646680B CN109646680B (zh) | 2020-02-11 |
Family
ID=66122128
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910106314.2A Expired - Fee Related CN109646680B (zh) | 2019-01-31 | 2019-01-31 | 一种治疗kras突变型肠癌的联合用药物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109646680B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113440616A (zh) * | 2020-03-25 | 2021-09-28 | 上海科州药物研发有限公司 | Ras或raf突变型癌症的联合疗法 |
| CN114010642A (zh) * | 2021-07-21 | 2022-02-08 | 四川大学华西医院 | 一种治疗kras突变型肠癌的药物组合物及其联合用药物 |
| CN116004835A (zh) * | 2023-01-16 | 2023-04-25 | 四川大学华西医院 | Fmn1基因在制备抗消化道肿瘤药物中的应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014072357A1 (en) * | 2012-11-06 | 2014-05-15 | Interna Technologies B.V. | Combination for use in treating diseases or conditions associated with melanoma, or treating diseases or conditions associated with activated b-raf pathway |
| CN105189456A (zh) * | 2013-03-15 | 2015-12-23 | 亚瑞克西斯制药公司 | Kras g12c的共价抑制剂 |
| WO2017033113A1 (en) * | 2015-08-21 | 2017-03-02 | Acerta Pharma B.V. | Therapeutic combinations of a mek inhibitor and a btk inhibitor |
| CN108452310A (zh) * | 2017-02-17 | 2018-08-28 | 四川大学华西医院 | 一种治疗肿瘤的联合用药物 |
-
2019
- 2019-01-31 CN CN201910106314.2A patent/CN109646680B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014072357A1 (en) * | 2012-11-06 | 2014-05-15 | Interna Technologies B.V. | Combination for use in treating diseases or conditions associated with melanoma, or treating diseases or conditions associated with activated b-raf pathway |
| CN105189456A (zh) * | 2013-03-15 | 2015-12-23 | 亚瑞克西斯制药公司 | Kras g12c的共价抑制剂 |
| WO2017033113A1 (en) * | 2015-08-21 | 2017-03-02 | Acerta Pharma B.V. | Therapeutic combinations of a mek inhibitor and a btk inhibitor |
| CN108452310A (zh) * | 2017-02-17 | 2018-08-28 | 四川大学华西医院 | 一种治疗肿瘤的联合用药物 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 厉金雷， 蔡剑辉等: "《Nras、Braf、Kras、Pik3ca基因突变检测在大肠癌治疗和预后中的临床价值研究》", 《中国现代医生》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113440616A (zh) * | 2020-03-25 | 2021-09-28 | 上海科州药物研发有限公司 | Ras或raf突变型癌症的联合疗法 |
| CN114010642A (zh) * | 2021-07-21 | 2022-02-08 | 四川大学华西医院 | 一种治疗kras突变型肠癌的药物组合物及其联合用药物 |
| CN116004835A (zh) * | 2023-01-16 | 2023-04-25 | 四川大学华西医院 | Fmn1基因在制备抗消化道肿瘤药物中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN109646680B (zh) | 2020-02-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Liu et al. | The use of antibody modified liposomes loaded with AMO-1 to deliver oligonucleotides to ischemic myocardium for arrhythmia therapy | |
| CN105377289A (zh) | 用于下调Bcl-xL和/或Bcl-w的活性和/或量的试剂 | |
| CN109646680A (zh) | 一种治疗kras突变型肠癌的联合用药物 | |
| CN109477107B (zh) | 一种抑制EGFR基因表达的siRNA及其前体和应用 | |
| WO2022012329A1 (zh) | 一种在肿瘤治疗中具有增效作用的化合物的应用 | |
| WO2017190694A1 (zh) | 一种抑制K-RAS基因表达的siRNA及其前体和应用 | |
| CN107744518B (zh) | 乙莫克舍在治疗结直肠癌方面的应用 | |
| TWI547277B (zh) | Honokiol for the treatment or prevention of bladder cancer growth and metastasis and improve the cachexia new use | |
| CN117547524A (zh) | 吉马酮化合物的新用途 | |
| CN113230249A (zh) | 土荆皮乙酸在作为或制备Hedgehog信号通路抑制剂中的应用 | |
| CN113528427A (zh) | 一种结直肠靶向载药外泌体及应用和治疗结直肠疾病药物 | |
| CN108653737B (zh) | Mthfd1l抑制剂在制备舌鳞癌治疗药物中的用途 | |
| KR20200143668A (ko) | 구강암을 치료하기 위한 약제를 제조하기 위한 진세노사이드 m1의 용도 | |
| CN111419832B (zh) | 药物组合物及其在制备治疗肿瘤药物中的用途 | |
| CN107661324B (zh) | 普罗帕酮在制备治疗食管癌药物中的应用 | |
| US9415078B2 (en) | Method of treating desmocollin-3 expressing cancer with Mycobacterium w | |
| CN102895671B (zh) | 一种微小rna在预防和/或治疗心脏疾病中的用途 | |
| CN112076216A (zh) | 三氧化二砷在治疗胃肠道间质瘤中的应用 | |
| CN112569240A (zh) | 盐酸氯丙嗪在制备细胞周期素蛋白抑制剂中的用途 | |
| CN117323418B (zh) | 一种含乳铁蛋白的胶囊在阻止hpv病毒感染中的用途 | |
| CN115919850B (zh) | 一种抗阿霉素心脏毒性的中药单体组合物及其制备方法和应用 | |
| US20220233540A1 (en) | Compositions and methods for inhibiting tcf/lef transcriptional activity | |
| CN106727916A (zh) | 罗勒多糖提取物在制备治疗肺纤维化药物中的应用 | |
| CN114617969A (zh) | 乐伐替尼和Aurora-A激酶抑制剂在制备抑制癌症的药物中的应用 | |
| CN118416151A (zh) | 黄连上清片联合糖皮质激素在制备治疗白血病药物中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20200211 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |