CN113230249A - 土荆皮乙酸在作为或制备Hedgehog信号通路抑制剂中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明分别通过体外细胞和体内实验表明了土荆皮乙酸(PAB)是SMO受体的拮抗剂，对Hedgehog信号通路有抑制效果，对Hedgehog通路活化依赖的肿瘤也具有显著的体内抗肿瘤效应。因此，可将PAB用于制备抑制Hedgehog信号通路相关的制剂。本发明不仅提供了PAB用于制备靶向Hedgehog信号通路的抗肿瘤药物的理论基础，还扩大PAB的应用领域。PAB能剂量依赖性地抑制髓母细胞瘤中的Hedgehog信号通路，具有剂量适中、疗效显著、作用靶点明确等优点，在临床上具有抗癌以及治疗其他Hedgehog信号通路异常相关疾病的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于肿瘤药理学及医药技术领域。更具体地，涉及土荆皮乙酸在作为或制备Hedgehog信号通路抑制剂中的应用。
背景技术
Hedgehog(Hh)信号转导途径以多种机制控制着脊椎动物的胚胎发育及成熟机体的组织稳态和再生。它们既可充当形态发生子，通过浓度依赖方式介导形态发生过程；又可充当有丝分裂原，通过调控有丝分裂控制细胞增殖。经典的Hedgehog通路有几个关键的组分，包括Hedgehog配体、Patched-1(Ptch1)受体、七次跨膜G蛋白偶联受体Smoothened(SMO)、胶质瘤相关原癌基因同源物(Gli)。正常生理状态下，Hedgehog信号级联反应是通过Hedgehog配体与Ptch1的结合而启动。在没有Hedgehog配体的情况下，跨膜蛋白Ptch1抑制SMO的活性；而Hedgehog配体结合Ptch1导致SMO脱离Ptch1的抑制作用，SMO从细胞内囊泡转移至纤毛部位，SMO在纤毛部位的募集最终激活GLI转录因子，诱导靶基因Gli1，cyclin D1，N-myc，GAS1，Ptch1等下游靶基因的转录。
越来越多的研究表明，Hedgehog参与调控肿瘤生长和维持，与肿瘤干细胞的自我更新、化疗耐药、肿瘤转移以及复发相关。在皮肤、脑、肺、前列腺、乳腺、胰腺、卵巢、宫颈、食管、胃肠道、头颈、软骨以及造血系统的恶性肿瘤中均发现Hedgehog信号通路的持续性活化。Hedgehog信号通路现已成为极具吸引力的肿瘤治疗靶点，许多通路特异性抑制剂正在进入临床试验。目前已发现可从多方面对Hedgehog信号通路进行靶向抑制，其中临床应用最广泛的是SMO拮抗剂。环巴胺(cyclopamine)是文献报道的第一种SMO抑制剂。研究表明，环巴胺可在髓母细胞瘤(Medulloblastoma，MB)体外和异体移植瘤模型中诱导神经元分化，在前列腺癌、消化道肿瘤以及小细胞肺癌动物模型中亦显现出良好的抗肿瘤效果。但由于环巴胺的药代动力学特性欠佳，代谢稳定性差，同时存在一定的毒副作用，其在临床开发中失败。然而，许多SMO靶向小分子表现出更强的药效以及更高的生物利用度。这些小分子药物包括vismodegib(GDC-0449)、saridegib(IPI-926)、erismodegib(LDE-225)等。
目前两种靶向SMO的Hedgehog抑制剂vismodegib和saridegib已上市用于治疗肿瘤，但上市的药物很快出现严重的毒副作用和耐药问题。在髓母细胞瘤患者的临床试验中发现，其肿瘤组织中存在SMO突变体(SMO D473H)，让患者对vismodegib产生耐药性。对两例皮肤基底细胞癌患者的肿瘤组织的测序也发现存在耐药相关的SMO突变体(SMO W535L)。在Ptch1+/-p53-/-小鼠髓母细胞瘤模型上也发现了鼠源的SMO突变体(SMO D477G)，导致肿瘤对vismodegib的敏感度降低，相应的鼠源SMO W539L突变体对vismodegib同样具有耐药性。目前上市的Hedgehog抑制剂均结合在SMO蛋白上的七次跨膜结构域，SMO突变导致SMO结构发生改变，从而抑制小分子化合物进入跨膜区，因此，寻找新型SMO抑制剂可以避免SMO突变诱发的耐药。
土荆皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)是一种从土荆皮中分离提取的二萜类化合物，其分子式为C23H28O8。2016年8月17日，中国专利CN 105853400A公开了AT-101在制备Hedgehog信号通路的选择性抑制剂中的用途。但目前还未见土荆皮乙酸对SMO蛋白的靶向抑制作用，以及对Hedgehog信号通路异常相关疾病的治疗的报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有上述技术的缺陷和不足，提供土荆皮乙酸在作为或制备Hedgehog信号通路抑制剂中的应用。
本发明的第一个目的是提供土荆皮乙酸在作为或制备Hedgehog信号通路的选择性抑制剂中的应用。
本发明的第二个目的是提供土荆皮乙酸在作为或制备SMO蛋白抑制剂中的应用。
本发明的第三个目的是提供土荆皮乙酸在作为或制备突变耐药型SMO蛋白抑制剂中的应用。
本发明的第四个目的是提供土荆皮乙酸在制备抑制SMO蛋白的药物中的应用。
本发明的第五个目的是提供土荆皮乙酸在制备抑制突变耐药型SMO蛋白的药物中的应用。
本发明的第六个目的是提供土荆皮乙酸在制备治疗Hedgehog信号通路异常相关疾病的药物中的应用。
本发明的第七个目的是提供土荆皮乙酸在制备抗Hedgehog通路活化依赖的癌症的药物中的应用。
本发明上述目的通过以下技术方案实现：
本发明所使用的土荆皮乙酸(PAB)的化学结构式如式(I)所示：
本发明分别通过体外细胞和体内实验表明了土荆皮乙酸对Hedgehog信号通路的特异性抑制效果，对Hedgehog通路活化依赖的肿瘤具有显著的体内抗肿瘤效应。体外通过SMO激动剂—SAG处理激活细胞内的Hedgehog信号通路，再利用PAB进行处理，发现PAB在体外NIH3T3和GNP细胞中呈剂量依赖性地抑制Hedgehog信号通路的活化，PAB可显著抑制Hedgehog信号通路活化的髓母细胞瘤细胞和小鼠髓母细胞瘤原代细胞的生长。通过分子对接模拟方法发现PAB与SMO有两个结合位点，分别位于SMO蛋白七次跨膜区的近胞外疏水口袋和胞内环状结构域。PAB对Hedgehog信号通路作用靶点的探索实验表明，PAB与Bodipy-cyclopamine可竞争性拮抗SMO。体外实验还表明，PAB可显著降低由鼠源野生型SMO-WT，以及鼠源突变体SMO-W539L和SMO-D477G所激活的GLI-luciferase(Gli-luc)的活性，表明PAB不仅是SMO的拮抗剂，同时还能抑制耐药相关的SMO突变体。体内实验结果则表明PAB对Hedgehog信号通路异常活化的癌症(髓母细胞瘤)的生长呈显著抑制。
因此，本发明申请保护土荆皮乙酸(PAB)在以下几个方面的应用：
土荆皮乙酸在作为或制备Hedgehog信号通路的选择性抑制剂中的应用。
土荆皮乙酸在作为或制备SMO蛋白抑制剂中的应用。
土荆皮乙酸在作为或制备突变耐药型SMO蛋白抑制剂中的应用。
土荆皮乙酸在制备抑制SMO蛋白的药物中的应用。
土荆皮乙酸在制备抑制突变耐药型SMO蛋白的药物中的应用。
土荆皮乙酸在制备治疗Hedgehog信号通路异常相关疾病的药物中的应用。
本发明还申请保护土荆皮乙酸在制备抗Hedgehog通路活化依赖的癌症的药物中的应用。
优选地，所述癌症包括皮肤基底细胞癌、髓母细胞瘤、原发性肝癌、胰腺癌、乳腺癌、急性粒细胞白血病、多发性骨髓瘤、肺癌、头颈癌、食管癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、神经胶质瘤、软骨肿瘤、横纹肌肉瘤和黑色素瘤。
更优选地，所述癌症包括皮肤基底细胞癌、髓母细胞瘤、神经胶质瘤、横纹肌肉瘤、急性粒细胞白血病和黑色素瘤。
更进一步优选地，所述癌症为髓母细胞瘤。
优选地，在上述应用中，土荆皮乙酸的浓度为0.1μM～1μM。
更优选地，土荆皮乙酸的浓度为0.4μM～0.6μM。
优选地，土荆皮乙酸的体内用量为50mg/kg～100mg/kg。
本发明还提供一种抑制SMO蛋白的药物制剂，一种抑制突变耐药型SMO蛋白的药物制剂，一种治疗Hedgehog信号通路异常相关疾病的药物制剂，一种抗Hedgehog通路活化依赖的癌症的药物制剂，上述药物制剂均包含土荆皮乙酸及其药学上可接受的药物载体。
本发明具有以下有益效果：
本发明分别通过体外细胞和体内实验表明了土荆皮乙酸(PAB)是SMO受体的拮抗剂，对Hedgehog信号通路有特异性抑制效果。其可以抑制SMO突变体所激活的Hedgehog信号通路，拮抗SMO突变诱发的耐药。PAB对Hedgehog通路活化依赖的肿瘤也具有显著的体内抗肿瘤效应。因此，可将PAB用于抑制Hedgehog信号通路或用于制备与抑制Hedgehog信号通路相关的制剂。本发明不仅提供了PAB用于制备靶向Hedgehog信号通路的抗肿瘤药物的理论基础，还扩大PAB的应用领域。PAB能剂量依赖性地抑制髓母细胞瘤中的Hedgehog信号通路，具有剂量适中、疗效显著、作用靶点明确等优点，在临床上具有抗癌以及治疗其他Hedgehog信号通路异常相关疾病的应用前景。
附图说明
图1为PAB对Hedgehog信号通路的抑制作用；其中图A为PAB呈剂量依赖性地降低NIH3T3/GLI-luc细胞中SAG诱导的luciferase活性；图B为PAB呈剂量依赖性地降低GNP细胞中SAG诱导的Gli1、cyclin D1和N-myc基因的表达；图C为PAB呈剂量依赖性地抑制髓母细胞瘤原代细胞中Gli1、cyclin D1和N-myc基因的表达。
图2为PAB对髓母细胞瘤原代细胞增殖的抑制作用效果；其中，图A为PAB呈剂量依赖性地抑制MB原代细胞增殖的Edu染色实验；图B为EdU阳性细胞统计柱状图。
图3为PAB与SMO分子对接模拟图；其中图A显示PAB与SMO跨膜区的近胞外疏水口袋和胞内环状结构域都具有潜在相互作用；图B为PAB与SMO近胞外疏水口袋和胞内环状结构域氨基酸的氢键结合示意图。
图4为PAB与BODIPY-cyclopamine竞争性结合SMO的实验结果。
图5为PAB对野生型和突变型SMO激活的Hedgehog信号通路的抑制作用。其中图A为vismodegib对稳定表达的鼠源野生型SMO(SMO-WT)和鼠源突变型SMO(SMO-D477G和SMO-W539L)基因的NIH3T3/GLI-luc细胞GLI-luciferase抑制作用；图B为PAB对稳定表达SMO-WT、SMO-D477G和SMO-W539L的NIH3T3/GLI-luc细胞GLI-luciferase的抑制作用。
图6为PAB给药18天后对裸鼠皮下接种的髓母细胞瘤的生长抑制效果。
图7为PAB在体内髓母细胞瘤荷瘤模型中对Hedgehog信号通路的抑制作用。
具体实施方式
以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
本发明实施例所用土荆皮乙酸为MedChemExpress公司的产品(货号为HY-N6939，CAS No.:82508-31-4)，其化学结构式如式(I)所示：
实施例1土荆皮乙酸对Hedgehog信号通路的抑制效果
1、双荧光素酶报告基因测试
本发明利用能稳定表达GLI-luciferase和TK-renilla报告基因的3T3/GLI-luc细胞，通过双荧光素酶报告基因测试，检测土荆皮乙酸(PAB)对Hedgehog信号通路的抑制效果。
首先将3T3/GLI-luc细胞按5×104个/孔接种于24孔板，用含10％胎牛血清的DMEM培养基于细胞培养箱中培养过夜。加入0.2μM的SMO激动剂—SAG预处理30分钟激活Hedgehog信号通路后，分别给予浓度为0.4μM、0.6μM的PAB进行联合处理，同时使用1μM的cyclopamine(cyc)作为阳性对照，并设置空白对照组。药物处理36h后，细胞用PBS洗2次，按照Vazyme公司的双荧光素酶报告基因检测试剂盒的说明书进行GLI-luciferase相对活性检测，本实验重复三次。
双荧光素酶报告基因测试的结果如图1A所示，用0.4μM、0.6μM的PAB和1μM的cyclopamine对细胞进行处理后，与SAG预处理组相比，GLI-luciferase的表达量显著下降，表明PAB可以对Hedgehog信号通路进行抑制，且抑制效果优于cyclopamine(***与对照组相比，P<0.001；##与SAG组相比，P<0.01)。
2、Hedgehog信号通路靶基因Gli1、cyclin D1、N-myc的荧光定量检测
从出生一周的幼鼠小脑内提取GNP细胞，Ptch1+/-转基因小鼠患髓母细胞瘤后从中提取髓母细胞瘤(MB)细胞。上述细胞分别按2×106个细胞/孔接种于24孔板，用含B-27添加剂的神经基础培养基于培养箱中培养。培养过夜后分别用浓度为0.4μM、0.6μM的PAB以及1μM的cyclopamine(cyc)进行处理，再置于细胞培养箱中培养24h。培养结束后，依据Macherey-nagel公司的RNA提取试剂盒(NucleoSpin RNA Plus)的说明书提取细胞内RNA，参照Vazyme公司的转录试剂盒(HiScript1st Strand cDNA Synthesis Kit)的说明书进行mRNA逆转录；然后按照Vazyme公司的实时荧光定量PCR试剂盒(HiScript II One Step RT-PCR Kit)的说明书对Hedgehog信号通路中的靶基因Gli1、cyclin D1和N-myc进行荧光定量检测。本实施例使用ABI 7500型快速实时荧光定量PCR系统进行检测，使用ΔΔCt方法以Actin作为内参基因来计算目的基因相对表达水平，本实验重复三次。
GNP和MB细胞中Hedgehog信号通路靶基因Gli1、cyclin D1和N-myc的荧光定量检测结果分别如图1B和1C所示。由图1B可知，分别用0.4μM、0.6μM的PAB和1μM的cyclopamine对GNP细胞进行处理后，与SAG预处理对照组相比，Gli1、cyclin D1和N-myc的表达量显著下降。由图1C可知，分别用0.4μM、0.6μM的PAB和1μM的cyclopamine对MB细胞进行处理后，与SAG对照组相比，Gli1、cyclin D1和N-myc的表达量显著下降，表明PAB可以对Hedgehog信号通路进行抑制，且抑制效果优于cyclopamine(*与对照组相比，P<0.05；**与对照组相比，P<0.01；***与对照组相比，P<0.001；#与SAG组相比，P<0.05；##与SAG组相比，P<0.01)。
实施例2EdU实验检测细胞增殖情况
从Ptch1+/-转基因小鼠的髓母细胞瘤组织中提取MB细胞，铺于24孔板中的玻璃片上(提前用基质胶包被3h)，每孔接种2×105个细胞，用含B-27添加剂的神经基础培养基培养过夜。然后分别用浓度为0.4μM、0.6μM的PAB以及1μM的cyclopamine(cyc)处理24小时，按照碧云天生物公司的BeyoClickTM EdU-488细胞增殖检测试剂盒的说明书，对细胞进行EdU染色3小时。EdU标记细胞完成后，去除培养液，加入4％的多聚甲醛室温固定15分钟，每孔用洗涤液洗涤细胞3次。每孔再用含0.3％Triton X-100的PBS进行室温透化15分钟，每孔用洗涤液洗涤细胞2次。然后每孔加入100μl Click反应液，轻轻摇晃培养板以确保反应混合物可以均匀覆盖样品。室温避光孵育30分钟，吸除Click反应液，用洗涤液洗涤3次。每孔加Hoechst 33342溶液室温避光孵育10分钟，随后进行荧光检测。
Azide 488为绿色荧光，最大激发波长是495nm，最大发射波长是519nm。Hoechst33342为蓝色荧光，最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm。EdU实验结果如图2A所示，用0.4μM、0.6μM的PAB和1μM的cyclopamine对MB细胞进行处理后，与对照组相比，EdU阳性细胞(绿色荧光)数量显著下降。
用ImageJ软件分别计算绿色荧光及蓝色荧光阳性细胞数量，绿色荧光阳性细胞数/蓝色荧光细胞数即为细胞增殖率。结果如图2B所示，与对照组相比，PAB和cyclopamine显著降低细胞增殖率，PAB抑制效果优于cyclopamine(**与对照组相比，P<0.01；***与对照组相比，P<0.001)。
实施例3分子对接模拟土荆皮乙酸与SMO结合情况
参考蛋白数据库(PDB)中SMO的三维晶体结构(PDB参考号：4jkv)，通过分子对接推测PAB与SMO的结合位点。通过Chem Draw Ultra软件画出化合物的三维结构，并利用AutoDock工具进行分子对接。结果如图3所示，PAB与SMO上两个位点存在相互作用，参见图3A。第一个结合位点位于SMO受体跨膜近胞外区的疏水口袋(P1)，即cyclopamine等SMO拮抗剂的经典结合位置，主要与氨基酸残基LYS395形成两个氢键，参见图3B上。第二个结合位点位于SMO的受体七次跨膜形成的胞内环状结构域(P2)，并形成8个氢键作用力，参与氢键作用的氨基酸残基包括ARG451、GLU447、THR448、THR538、ASP255、ASN258和SER259，参见图3B下。
上述结果表明，PAB与SMO具有两个潜在的结合位点，与cyclopamine等SMO经典拮抗剂相比，PAB具有多位点结合和抗SMO突变耐药的优势。
实施例4 BODIPY-cyclopamine竞争性结合Smoothened试验
293T细胞用含10％胎牛血清的DMEM培养基，置于细胞培养箱中培养。按1×105个细胞/孔接种到24孔板中，然后用脂质体转染试剂(Invitrogen)转染表达人源SMO的质粒(pcDNA3.1-SMO)。转染24小时后将293T接种于玻璃片上，置培养箱培养过夜。然后用4％多聚甲醛室温固定细胞10min，PBS漂洗2次。接着用BioVision公司的BODIPY-cyclopamine(货号：2160)进行以下四种处理：BODIPY-cyclopamine(5nM)，BODIPY-cyclopamine(5nM)+PAB(0.4μM)，BODIPY-cyclopamine(5nM)+PAB(0.6μM)，BODIPY-cyclopamine(5nM)+cyclopamine(1μM)。培养箱中避光孵育4小时后弃上清，用PBS漂洗2次。最后用Hoechest33342室温避光孵育15min。PBS漂洗2次，封片后进行荧光显微镜观察、拍照记录。
BODIPY-cyclopamine为绿色荧光，激发波长492nm，发射波长515nm。Hoechst33342为蓝色荧光，最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm。结果如图4A所示，对照组细胞在BODIPY-cyclopamine结合SMO后发出绿色荧光；分别用0.4μM、0.6μM的PAB和1μM的cyclopamine对MB细胞进行处理后，与对照组相比，绿色荧光强度显著下降。结果表明PAB与BODIPY-cyclopamine竞争性结合SMO，进一步说明PAB可以结合在cyclopamine等SMO拮抗剂的经典结合位置，是SMO的拮抗剂。
实施例5土荆皮乙酸对突变耐药型Smoothened的抑制能力
利用慢病毒载体pLVX-AcGFP-N1进行包装病毒并感染NIH3T3/GLI-luc细胞，获得能稳定表达鼠源野生型SMO(SMO-WT)和鼠源突变型SMO(SMO-D477G和SMO-W539L)的细胞株。将细胞株按5×104个细胞/孔接种于24孔板，用含10％胎牛血清的DMEM培养基置于细胞培养箱中培养过夜。过夜培养后，分别给予浓度为0.01μM、0.05μM、0.1μM、0.2μM、0.8μM和1.0μM的PAB，以及0.001μM、0.005μM、0.01μM、0.05μM、0.1μM、0.25μM和0.5μM的vismodegib(SMO拮抗剂)进行处理，同时设置空白对照组。药物处理36h后，细胞用PBS洗2次，按照Vazyme公司的双荧光素酶报告基因检测试剂盒的说明书进行GLI-luciferase相对活性检测，本实验重复三次。
相对活性检测结果如图5所示，其中图A为vismodegib对稳定表达鼠源野生型SMO-WT，鼠源突变SMO-D477G和SMO-W539L基因的NIH3T3/GLI-luc细胞GLI-luciferase抑制结果。图B为PAB对上述相同基因的抑制结果。如图5A所示，vismodegib只能显著抑制野生型SMO激活的GLI-luciferase，表达SMO-D477G和SMO-W539L的细胞株对vismodegib具有一定耐药性；如图5B所示，PAB对野生和突变型SMO激活的GLI-luciferase都具有抑制作用，说明PAB可以拮抗SMO突变诱发的耐药。
实施例6土荆皮乙酸对Hedgehog通路依赖的髓母细胞瘤的生长抑制效应
Ptch1+/-转基因小鼠自发长出髓母细胞瘤后，取髓母细胞瘤组织提取MB细胞。在无菌条件下接种于4～6周龄的雄性BALB/C裸鼠的右侧腋窝皮下，每只接种5×106个细胞。待移植瘤平均体积长至100mm3时，随机分组后给药，每组6只小鼠。土荆皮乙酸(PAB)给药组每天按照50mg/kg和100mg/kg腹腔注射给药，阳性药vismodegib对照组每天按照20mg/kg灌胃给药，溶媒对照组给予等量溶剂，每两天用游标卡尺测量一次肿瘤体积。肿瘤体积计算公式：Tumor volume＝1/2×a×b2，其中a、b分别表示长和宽。
结果如图6所示，PAB和vismodegib都能显著抑制体内肿瘤的生长，表明PAB在体内可以显著抑制Hedgehog通路依赖的髓母细胞瘤的生长，效果与vismodegib相当。
实施例7土荆皮乙酸在髓母细胞瘤体内荷瘤模型中对Gli1表达的影响
实施例6的动物实验结束后，过量麻醉处死小鼠并取肿瘤组织，用碧云天生物技术有限公司的组织裂解液匀浆提取总蛋白，并利用蛋白定量试剂盒(碧云天生物技术有限公司)进行蛋白定量，实验过程参照试剂盒说明书进行。取等量的蛋白样品进行免疫印迹实验，检测Gli1的表达情况，GAPDH作为内参。
结果如图7所示，结果显示PAB和阳性药vismodegib在体内给药后都可以显著下调Gli1表达，进一步表明PAB在体内是通过抑制Hedgehog信号通路抑制髓母细胞瘤生长，且效果与vismodegib相当。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.土荆皮乙酸在作为或制备Hedgehog信号通路的选择性抑制剂中的应用。
2.土荆皮乙酸在作为或制备SMO蛋白抑制剂中的应用。
3.土荆皮乙酸在作为或制备突变耐药型SMO蛋白抑制剂中的应用。
4.土荆皮乙酸在制备抑制SMO蛋白的药物中的应用。
5.土荆皮乙酸在制备抑制突变耐药型SMO蛋白的药物中的应用。
6.土荆皮乙酸在制备治疗Hedgehog信号通路异常相关疾病的药物中的应用。
7.土荆皮乙酸在制备抗Hedgehog通路活化依赖的癌症的药物中的应用。
8.根据权利要求1～7任一所述应用，其特征在于，土荆皮乙酸的浓度为0.1μM～1μM。
9.根据权利要求1～7任一所述应用，其特征在于，土荆皮乙酸的体内用量为50mg/kg～100mg/kg。
10.根据权利要求7所述应用，其特征在于，所述癌症包括皮肤基底细胞癌、髓母细胞瘤、原发性肝癌、胰腺癌、乳腺癌、急性粒细胞白血病、多发性骨髓瘤、肺癌、头颈癌、食管癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、神经胶质瘤、软骨肿瘤、横纹肌肉瘤、黑色素瘤。
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|---|---|---|---|---|
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1405164A (zh) * | 2001-08-14 | 2003-03-26 | 中国科学院上海药物研究所 | 土槿皮酸类衍生物及其制备方法和用途 |
| CN101062026A (zh) * | 2006-04-24 | 2007-10-31 | 黑龙江大学 | 土槿皮乙酸作为诱导肿瘤细胞凋亡的药物的应用 |
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Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1405164A (zh) * | 2001-08-14 | 2003-03-26 | 中国科学院上海药物研究所 | 土槿皮酸类衍生物及其制备方法和用途 |
| CN101062026A (zh) * | 2006-04-24 | 2007-10-31 | 黑龙江大学 | 土槿皮乙酸作为诱导肿瘤细胞凋亡的药物的应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| SU-FEN WEI等: "Identification of pseudolaric acid B as a novel Hedgehog pathway inhibitor in medulloblastoma", 《BIOCHEMICAL PHARMACOLOGY》 * |
| 黄颖等: "土槿皮乙酸抗肿瘤作用及其机制的研究进展", 《中国医学文摘(耳鼻咽喉科学)》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114668757A (zh) * | 2022-03-29 | 2022-06-28 | 葛鹏飞 | 土槿皮丙酸在制备预防和/或治疗恶性肿瘤药物中的应用 |
| CN114668757B (zh) * | 2022-03-29 | 2023-08-08 | 葛鹏飞 | 土槿皮丙酸在制备预防和/或治疗恶性肿瘤药物中的应用 |
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