CN109602775B - 乳苣醇提物在制备抗乳腺癌药物中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了乳苣醇提物在抗乳腺癌方面的应用，本发明可为治疗乳腺癌提供一种新的选择。乳苣为药食两用的菊科乳苣属植物，乳苣的醇提物能明显的抑制乳腺癌MCF‑7细胞的生长，且能明显抑制小鼠模型乳腺瘤的生长，这些抗癌作用的发现证明了乳苣有良好的药物前景，可为预防、保健和治疗乳腺癌药物的研发以及临床应用提供新的思路。

Description

乳苣醇提物在制备抗乳腺癌药物中的用途
技术领域
本发明涉及一种乳苣醇提物在抗乳腺癌方面的应用，属于医药技术领域。
背景技术
乳腺癌，作为严重影响女性生存、生活的恶性肿瘤，被称之为女性的第一杀手，2018年2月，国家癌症中心发布了最新一期的全国癌症统计数据，其中，女性方面恶性肿瘤发病首位即为乳腺癌。据统计，发达国家和发展中国家女性乳腺癌发病率均排名第1，所以乳腺癌的相关研究和治疗药物的研发都是绝对的关注热点。乳腺癌，作为多基因参与、多步骤发生的恶性肿瘤，基因表达谱的不同使乳腺癌具有高度的异质性，因此多靶标治疗成为一种理想的治疗方式。而中草药作为多组分复合物具有与多靶标相互作用的功能，且对耐药性影响较小，可作用于肿瘤发生及发展中。近年来积累的实验数据和临床实验越来越支持中草药治疗肿瘤的优势，因此开发可预防、保健和治疗癌症的民族药成为迫切的问题。
在新疆有一种当地人称为天平草的民族药材，营养成分丰富，并具有很高的药用价值。它是新疆博乐市盐碱地带自然生长的野生草本植物，经鉴定其为乳苣，可以提高人体免疫力，治疗人体内的多种炎症，防治多种细菌或病毒引起的感染症，并对维持人体正常的生理活动有较好的作用，但具体机制尚未研究透彻。已有的对乳苣的研究主要集中在对乳苣的总黄酮和多酚的提取和抗氧化方面的研究。而关于乳苣醇提物在抗乳腺癌方面的研究，申请者尚未见国内外有报道。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种乳苣醇提物在制备抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的药物中的应用。
本发明的目的之二在于提供一种乳苣醇提物在制备抑制乳腺瘤生长的药物中的应用。
为达上述目的，本发明进行如下实验：
第一步，乳苣醇提物的提取。
第二步，用不同浓度的乳苣醇提物作用于体外培养的乳腺癌MCF-7细胞，作用24h后在倒置显微镜下观察细胞形态，发现未给药组细胞状态良好，细胞透明；而实验组细胞则出现不同程度的细胞变小变圆、折光性差、悬浮细胞和细胞碎片增加，死亡数较多，且细胞状态与药物浓度呈正相关。
第三步，用MTT法检测不同浓度乳苣醇提物对MCF-7细胞的抑制作用，发现乳苣醇提物对MCF-7细胞有明显的抑制效果。
第四步，将不同浓度乳苣醇提物以口服灌胃的形式治疗乳腺瘤模型小鼠，发现与未给药对照组，实验组瘤的生长受到不同程度的抑制，平均瘤体积及瘤重明显小于对照组。
本发明通过用乳苣醇提物作用于乳腺癌MCF-7细胞和裸鼠MCF-7乳腺瘤模型，发现乳苣醇提物能明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长和乳腺瘤的增殖，治疗期间小鼠体征体重无明显变化，说明无明显毒副作用。这表明乳苣有良好的抗癌功效，副作用小，可为预防、保健和治疗乳腺癌药物的研发以及临床应用提供良好基础。
附图说明
图1为不同浓度乳苣醇提物对乳腺癌MCF-7细胞的抑制率；
图2为不同浓度乳苣醇提物对乳腺瘤生长的影响。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做详细具体的说明，但是本发明的保护范围并不局限于以下实施例。
实施例一：乳苣的处理
风干的乳苣全草采于新疆博乐地区，常温保存。将100g乳苣粉碎，浸泡到400mL70％乙醇，置于冷凝回流装置微沸2小时，回收药液，重复两遍；将收集的药液过滤后进行旋转蒸发，得到的浓缩物置于烘箱烘干。用培养基溶解浓缩物，分别配置100.0μg/mL、80.0μg/mL、60.0μg/mL、40.0μg/mL、20.0μg/mL的终浓度。
实施例二：不同浓度乳苣醇提物对乳腺癌MCF-7细胞生长的影响
将乳腺癌MCF-7细胞置于96孔板中培养，至96孔板中的细胞单层铺满孔底时上药，分别为100.0μg/mL、80.0μg/mL、60.0μg/mL、40.0μg/mL、20.0μg/mL的终浓度处理细胞，孵育24小时，在倒置显微镜下对细胞进行观察，发现发现未给药组细胞状态良好，细胞透明；而实验组细胞则出现不同程度的细胞变小变圆、折光性差、悬浮细胞增加，死亡数较多，且细胞状态与药物浓度呈正相关。
实施例三：不同浓度乳苣醇提物对乳腺癌MCF-7细胞有明显的抑制作用
在上一步观察完毕后，向每孔中加入10μLMTT溶液(5mg/mL)，继续在培养箱中培养4h，弃上清，每孔中加入150μL二甲基亚砜(DMSO)，置摇床上低速振荡30min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪上OD值为490nm处测量各孔的吸光值，计算IC50，发现乳苣醇提物对MCF-7细胞有强烈的抑制效果，细胞抑制率如图1所示，从图1中可以看出细胞状态与药物浓度呈正相关。
实施例四：不同浓度乳苣醇提物可明显抑制乳腺瘤的生长
建立裸鼠乳腺瘤模型，灌胃给药15d，以750mg/kg、1500mg/kg、3000mg/kg的剂量给药，实验结果如图2所示，实验结果显示，与未给药对照组相比，实验组瘤的生长受到不同程度的抑制，平均瘤体积及瘤重明显小于对照组，且小鼠体重保持稳定，无明显副作用。

Claims (2)

1.一种乳苣醇提物在制备抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的药物中的应用，所述乳苣醇提物采用以下方法所制得：将乳苣粉碎并浸泡到体积浓度70％的乙醇中，置于冷凝回流装置微沸，回收药液后将收集的药液过滤后进行旋转蒸发，得到的浓缩物置于烘箱烘干即制得所述乳苣醇提物。
2.一种权利要求1所述乳苣醇提物在制备抑制乳腺瘤生长的药物中的应用，所述乳苣醇提物采用以下方法所制得：将乳苣粉碎并浸泡到体积浓度70％的乙醇中，置于冷凝回流装置微沸，回收药液后将收集的药液过滤后进行旋转蒸发，得到的浓缩物置于烘箱烘干即制得所述乳苣醇提物。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN103316062A (zh) * 2013-06-06 2013-09-25 上海大学 乳苣的新用途

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乳苣水提取物对人肺癌细胞SPCA-1生长的影响;蒋佳君等;《上海师范大学学报（自然科学版）》;20161031;第45卷(第5期);全文 *

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