CN109601391A - 一种鸢尾的种子组培繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种直接培育鸢尾种子成生根苗的便捷方法，涉及植物组织培养与打破种子休眠的领域。该方法以鸢尾成熟的种子为对象，利用化学手段打破种子休眠、通过一种培养基直接成苗，生根。通过这种方式大大缩短育种进程，降低成本。筛选出最适的改良培养基使其符合育种目标。有益效果是采用种子组培，所得到的的幼苗污染率低，分化率高；遗传形状稳定，有效物质含量高。操作相比根状茎、花药等外植体更简单，易上手。
Description
技术领域
本发明属于鸢尾育苗技术领域，具体涉及一种鸢尾种子的组培繁殖方法。
背景技术
鸢尾属（Iris ），鸢尾科（Iridaceae）宿根花卉，鸢尾属植物花姿奇特，花色艳丽而丰富，其品种繁多，适应性强，在园林中应用广泛，是绿化、美化和香化城市，装饰花坛、花径、花带、路旁及草坪的优良材料。其根状茎可提炼香精，也可作中药。多采用分株、播种法繁殖。
国内鸢尾种苗多数从国外引进，数量少，鸢尾品种间杂交结实率低，且种子普遍存在休眠现象，休眠期长，出苗率低，且分株繁殖系数低，种苗扩繁所需时间长 ；鸢尾组织培养外植体多采用根茎，但根茎接触泥土，内生菌较多，污染率高，加上基础材料少，短时间内很难获得大量外植体，大大限制了鸢尾组培扩繁的进度。因此，在很大程度上影响了鸢尾育种的进程。
发明内容
本发明的目的是提供一种鸢尾种子的组培繁殖方法。该方法有效缩短了鸢尾苗的培育周期，加速了种苗繁殖效率，同时改良后可直接生根成苗的培养基无需换瓶，操作更简单，减少人工成本。
为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案来实现的 ：
一种鸢尾的种子组培繁殖方法，其特征在于：以鸢尾成熟种子为对象，利用浓硫酸浸种后，可有效打破种子休眠且不伤害其种胚，有效缩短育种进程，降低生产成本；通过改良后的培养基无需换瓶，可有效减少工作量，降低人工成本；采用种子组培的方式，所得到的幼苗遗传性状稳定，有效物质含量高；操作相比其他外植体更简便，易上手；通过这种方式亦可快速建立新的组培体系。
优选的，所述的打破鸢尾种子休眠的方法为浓硫酸浸种5min。
优选的，所述的鸢尾种子为当年及时采摘的种子，陈旧的种子将影响其发芽率。
优选的，所述诱导生根出苗中包括如下步骤 ：将浸种后的种子流水冲洗，带入无菌操作台；用75%浓度的酒精浸泡并搅拌；再用5%浓度的次氯酸钠溶液浸泡并搅拌；最后用镊子将种子接入MS培养基。
优选的，所述的改良培养基为MS+NAA(0.3mg/L)+6-BA(2mg/L～6mg/L)；所述的炼苗为将培养瓶放置在散射光5000Lx、温度 23-25℃的温室中封口培养3d；所述的移栽基质为蛭石。
优选的，所述的 MS 培养基每升含30g蔗糖与7g琼脂，pH 值调至6.7左右。
优选的，所述的培养温度为24～26℃，每天光照12～14h，光照强度1000～1500Lx。
浓硫酸浸种是打破种子休眠、提高种子萌发率进而影响植物育种进程的一项有效途径。传统的播种繁殖，第2-3年开花，用花蕾组培快繁，最早也得第4年才能获得少量优良无性系种苗，第 5 年才能规模化生产。而运用该技术培育，可在2～3个月得到完整的鸢尾苗。因此运用该培养技术，可以缩短育种周期，加快育种进程。
本发明通过对三个浓度梯度的6-BA(2mg/L～6mg/L)做观察，发现不同浓度的生长激素对植物生长有不同的刺激程度。
具体实施方式
以下将对本发明作进一步的描述，需要说明的是，以下实施例以本技术方案为前提，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围并不限于本实施例。
一种鸢尾种子的组培繁殖方法，包括如下步骤。
S1将种子置入放有浓硫酸的烧杯中浸泡5min，5min左右将浓硫酸缓慢倒入水中稀释，尽快完成稀释后将鸢尾种子取出。
S2将浸种后的种子流水冲洗30min，带入无菌操作台；用75%浓度的酒精浸泡并搅拌5min后，用无菌水冲洗3～5次；再用5%浓度的次氯酸钠溶液浸泡并搅拌3min后，用无菌水冲洗5～6次；最后用镊子将种子接入MS培养基。
所述的改良MS培养基为MS+NAA(0.3mg/L)+6-BA(2mg/L～6mg/L)；培养基PH值为6.7，培养温度独立为24～26℃，每天光照12～14h，光照强度1000～1500Lx。
以上实验重复3次得到最后数据。
不同的6-BA浓度将影响浓硫酸处理的鸢尾种子在培养基中的生长情况，具体实验数据如表1所示：
表1
。
对于本领域的技术人员来说，可以根据以上的技术方案和构思，给出各种相应的改变和变形，而所有的这些改变和变形，都应该包括在本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种鸢尾组培苗的繁殖方法，包括以下步骤：
1)将鸢尾种子依次经过浓硫酸浸种、流动水冲洗、酒精浸泡消毒、次氯酸钠溶液浸泡消毒和无菌水冲洗后获得消毒种子；
2)将所述步骤1)获得的消毒种子接种于MS固体培养基培养50～60天获得无菌苗；
3)从所述步骤2)的培养基PH值为6.7，培养温度独立为24～26℃，每天光照12～14h，光照强度1000～1500Lx。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的浓硫酸浸种是指以浓硫酸浸泡鸢尾种子5min后，可以有效打破鸢尾种子的休眠状态，软化种皮，缩短育种进程，降低时间成本。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的流动水冲洗为30min，在75%浓度的酒精中浸泡并搅动5min后，用无菌水冲洗3～5次；再于5%次氯酸钠溶液中浸泡3min后，用无菌水冲洗5～6次；最后将种子用镊子接种于培养基中。
4.根据权利要求1所述的用于鸢尾种子改良的直接生根成苗的培养基，其特征在于：所述培养基由MS+NAA(0.3mg/L)+6-BA(2mg/L～6mg/L)+蔗糖(30g/L)+琼脂粉(7g/L)组成。
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