CN109590036A - 一种elisa芯片及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种ELISA芯片及其使用方法,属于生物检测技术领域。本发明的芯片包括芯片本体,芯片本体包含相对设置的第一表面与第二表面,第一表面与第二表面之间设有若干个反应器,反应器为第一表面向第二表面设置的盲孔;反应器包括同轴设置的第一圆柱段和第二圆柱段,第一圆柱段的内径小于第二圆柱段,第一圆柱段的顶面与第一表面重叠,为开口设置,并将开口设置为加样口;第二表面设有微流道和出液口,微流道与若干第二圆柱段底部相连通,且微流道一端与出液口相连接,出液口与泵进行连接。本发明不仅能够达到增加抗原或抗体的包被面积,还能够起到减少外界光源对检测的影响。
Description
技术领域
本发明涉及一种ELISA芯片及其使用方法,属于生物检测技术领域。
背景技术
ELISA是一种免疫测定(immunoassay,IA),基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,由此进行定性或定量分析。由于各种抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体,利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原,因此免疫测定的应用范围极广。
但是传统的ELISA芯片的反应管都是直筒式,抗原或抗体的包被区域较小,并且传统的是需要借助第三方加液器,从上部向反应管中添加液体,然后再从上部用第三方加液器将液体取走,这样不仅操作繁琐,还会导致废液处理不干净,影响检测效果。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明提供一种ELISA芯片及其使用方法,在芯片下部设置微流道,将液体从芯片下部通过泵抽走,且通过上述设置后,可以进一步将反应器设置成内部呈阶梯式的筒状结构,不仅能够达到增加抗原或抗体的包被面积,还能够起到减少外界光源对检测的影响。
本发明的第一个目的是提供一种ELISA芯片,包括芯片本体,
所述的芯片本体包含相对设置的第一表面与第二表面,所述的第一表面与第二表面之间设有若干个反应器,所述反应器为第一表面向第二表面设置的盲孔;
所述的反应器包括同轴设置的第一圆柱段和第二圆柱段,第一圆柱段的内径小于第二圆柱段,所述第一圆柱段的顶面与第一表面重叠,为开口设置,并将开口设置为加样口;
所述第二表面设有微流道和出液口,所述的微流道与若干第二圆柱段底部相连通,且微流道一端与出液口相连接,出液口与泵进行连接,可以用过泵将反应器中的液体抽走。
进一步地,所述的第一圆柱段的直径为0.5~6mm。
进一步地,所述的第二圆柱段的直径为0.6~50mm。
进一步地,所述的第一表面采用不透明材料制备而成。进一步优选为黑色材料制成。
进一步地,所述的第二表面采用透明材料制备而成。第一表面与第二表面的材料设置,有利于整个芯片的光路采集。
进一步地,所述的反应器在芯片上按照线性排列。有利于自动加样设置。
进一步地,所述的微流道采用树形分布设置,所述的反应器设置在微流道的分支末端,所述的出液口设置在微流道的主干端。
本发明的第二个目的是提供所述的ELISA芯片的使用方法,包括如下步骤:通过加样口向反应器中加入抗原、抗体、包被液、封闭液或洗涤液,然后通过微流道将反应或洗涤后的液体去除。
进一步地,所述方法具体包括如下步骤:
(1)用包被液将抗原稀释,通过加样口向反应器中加入抗原,包被0.5~12h;
(2)通过加样口向反应器中加入洗涤液,洗涤之后通过微流道将洗涤液去除,洗涤2~3次;
(3)通过加样口向反应器中加入封闭液,封闭一定时间,然后通过微流道将封闭液去除;
(4)通过加样口向反应器中加入待测样品或对照样品进行孵育;采用步骤(2)洗涤方法进行洗涤;
(5)通过加样口向反应器中加入酶标抗体进行孵育,然后采用步骤(2)洗涤方法进行洗涤;
(6)通过加样口向反应器中加入底物显色液,反应后加入终止液,然后进行判断。
本发明的有益效果是:
本发明在芯片下部设置微流道,将液体从芯片下部通过泵抽走,操作方便,降低操作风险,且通过上述设置后,可以进一步将反应器设置成内部呈阶梯式的筒状结构,不仅能够达到增加抗原或抗体的包被面积,还能够起到减少外界光源对检测的影响。
附图说明
图1为现有技术的反应器示意图;
图2为本发明芯片的结构示意图;
图3为本发明芯片反应器的结构示意图;
图4为本发明芯片第一表面示意图;
图5为本发明含有包被的抗原或抗体的反应器的示意图;
图6为本发明反应器光电检测示意图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明,以使本领域的技术人员可以更好地理解本发明并能予以实施,但所举实施例不作为对本发明的限定。
实施例1:
结合附图2和3,本发明的一种ELISA芯片,包括芯片本体1,芯片本体1包含相对设置的第一表面2与第二表面3,第一表面2与第二表面3之间设有若干个反应器4,反应器4为第一表面2向第二表面3设置的盲孔,在第一表面上采用开口设置,并将开口设置为加样口43;第二表面上为封口设置;反应器4包括同轴设置的第一圆柱段41和第二圆柱段42,第一圆柱段41的内径小于第二圆柱段42,第一圆柱段41的直径为0.5~6mm,第二圆柱段42的直径为0.6~50mm;第二表面3设有微流道5和出液口6,微流道5与若干第二圆柱段42的底部相连通,且微流道5一端与出液口6相连接,出液口6连接有泵,可以用过泵将反应器4中的液体抽走。
本发明的第一圆柱段和第二圆柱段的设置,不仅能够增加抗原或抗体的包被面积,还能够起到减少外界其他光源对检测结果的影响,参见附图6,如图6所示:普通的反应器不能够阻挡干扰光10,光信号检测器8不仅吸收到正常光源9发出的光,干扰光10也会被光信号检测器8吸收;而本发明的第一圆柱段的直径小于第二圆柱段,从侧面照射进来的干扰光10就会被第一圆柱段挡住,不能被光信号检测器8吸收到,能够起到屏蔽干扰的作用。
本发明第一表面2采用不透明的黑色材料制备而成,第二表面3采用透明材料制备而成,第一表面与第二表面的材料设置,有利于整个芯片的光路采集。
本发明的反应器4在芯片上按照线性排列。有利于自动加样设置。
本发明的微流道5采用树形分布设置,反应器4设置在微流道5的分支末端,出液口6设置在微流道5的主干端。
在使用时,本发明的芯片的使用方法,包括如下步骤:通过加样口向反应器中加入抗原、抗体、包被液、封闭液或洗涤液,然后通过微流道将反应或洗涤后的液体去除。
具体在采用间接法时,具体包括如下步骤:
(1)用包被液将抗原稀释,通过加样口向反应器中加入抗原,包被0.5~12h;
(2)通过加样口向反应器中加入洗涤液,洗涤之后通过微流道将洗涤液去除,洗涤2~3次;
(3)通过加样口向反应器中加入封闭液,封闭一段时间,然后通过微流道将封闭液去除;
(4)通过加样口向反应器中加入待测样品或对照样品进行孵育;采用步骤(2)洗涤方法进行洗涤;
(5)通过加样口向反应器中加入酶标抗体进行孵育,然后采用步骤(2)洗涤方法进行洗涤;
(6)通过加样口向反应器中加入底物显色液,反应后加入终止液,然后进行判断。
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例,本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换,均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。
Claims (9)
1.一种ELISA芯片,其特征在于,包括芯片本体,
所述的芯片本体包含相对设置的第一表面与第二表面,所述的第一表面与第二表面之间设有若干个反应器,所述反应器为第一表面向第二表面设置的盲孔;
所述的反应器包括同轴设置的第一圆柱段和第二圆柱段,第一圆柱段的内径小于第二圆柱段,所述第一圆柱段的顶面与第一表面重叠,为开口设置,并将开口设置为加样口;
所述第二表面设有微流道和出液口,所述的微流道与若干第二圆柱段底部相连通,且微流道一端与出液口相连接,出液口与泵进行连接。
2.根据权利要求1所述的一种ELISA芯片,其特征在于,所述的第一圆柱段的直径为0.5~6mm。
3.根据权利要求1所述的一种ELISA芯片,其特征在于,所述的第二圆柱段的直径为0.6~50mm。
4.根据权利要求1所述的一种ELISA芯片,其特征在于,所述的第一表面采用不透明材料制备而成。
5.根据权利要求1所述的一种ELISA芯片,其特征在于,所述的第二表面采用透明材料制备而成。
6.根据权利要求1所述的一种ELISA芯片,其特征在于,所述的反应器在芯片上按照线性排列。
7.根据权利要求1所述的一种ELISA芯片,其特征在于,所述的微流道采用树形分布设置,所述的反应器设置在微流道的分支末端,所述的出液口设置在微流道的主干端。
8.一种权利要求1~7任一项所述的ELISA芯片的使用方法,其特征在于,包括如下步骤:通过加样口向反应器中加入抗原、抗体、包被液、封闭液或洗涤液,然后通过微流道将反应或洗涤后的液体去除。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,具体包括如下步骤:
(1)用包被液将抗原稀释,通过加样口向反应器中加入抗原,进行包被;
(2)通过加样口向反应器中加入洗涤液,洗涤之后通过微流道将洗涤液去除,洗涤2~3次;
(3)通过加样口向反应器中加入封闭液,进行封闭,然后通过微流道将封闭液去除;
(4)通过加样口向反应器中加入待测样品或对照样品进行孵育;采用步骤(2)洗涤方法进行洗涤;
(5)通过加样口向反应器中加入酶标抗体进行孵育,然后采用步骤(2)洗涤方法进行洗涤;
(6)通过加样口向反应器中加入底物显色液,反应后加入终止液,然后进行判断。
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Legal Events
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---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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GR01 | Patent grant | ||
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