CN109589309A - 烟酰胺核糖微囊的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种烟酰胺核糖微囊的制备方法，其以烟酰胺核糖粗品为起始原料，经萃取、上柱纯化后加入倍他环糊精、糊精、微孔淀粉、纯胶、乳糖、羧甲基纤维素、聚维酮或它们的任意种混合物后混匀，经高压均质，冷冻干燥，制成，具有工艺步骤简单，原料易得，控制容易，适于工业化生产，且所获产品纯度高，品质稳定，便于贮藏运输及应用的特点。

Description

烟酰胺核糖微囊的制备方法

技术领域

本发明涉化工生产技术领域，具体是涉及一种规模化的烟酰胺核糖微囊的制备方法。

背景技术

烟酰胺核糖（Nicotinamide riboside ，NR）是一种维生素类小分子。它在 21 世纪初营养和代谢的研究中开始进入人们的视野，之前的研究发现其对于肥胖具有一定的抑制效果。而现在，瑞士联邦理工大学 Johan Auwerx 教授实验室博士研究生生张宏波主导的研究课题对这一神秘的小分子赋予了新的功能。他们发现烟酰胺核糖能有效抑制老年小鼠干细胞衰老并延长小鼠寿命。人体的几乎每一个部分都由细胞构成，干细胞曾经被认为是人体内一种「永葆青春」的细胞。 人的每一个细胞皆由干细胞发育衍生而来，成年后一部分干细胞得到保留下来，他们少量存在于骨，肌肉，脂肪组织，脑，皮肤等多种组织，用于修复损伤或者衰老死亡的细胞。近年来，研究人员发现，干细胞并非能够无限地发挥功能，在人衰老的过程中也伴随着干细胞衰老。因此干细胞衰老自然地与人的衰老以及伴随而来的疾病，例如肥胖，糖尿病，肿瘤，肌肉萎缩，视网膜病变，帕金森，阿尔茨海默综合症等联系起来。寻找干细胞衰老的原因并阻止或者延缓干细胞衰老成为无数科学家奋斗的目标。现在由张宏波主导，联合瑞士两所国立联邦理工大学，加拿大以及巴西的研究者共同组成的研究小组使人们有望看到解决这一问题的曙光。他们的最新研究成果于上星期以最高规格的长论文形式（Research article）在线发表于国际顶级期刊 Science。线粒体是细胞内存在的“能量工厂”。 它不断为正常细胞高效提供能量。与正常细胞不同，大多数干细胞一直处于静止的“睡眠”状态，他们只有在需要时才被唤醒，之后再次沉睡。长期以来人们认为线粒体不是其功能必须：因为“沉睡”的干细胞只有很低的能量代谢，并不需要大量线粒体来行使功能。相反，线粒体产生的自由基还有可能毒害干细胞。然而张宏波等人的研究发现，这一认识可能需要修正：即使是沉睡的干细胞，他们在衰老的过程中也逐渐表现为线粒体丧失功能。“这是对干细胞衰老的全新的认识”Auwerx 教授评价。干细胞衰老能在老鼠内完整重现，因此该研究组以老鼠作为材料来开展研究。「我们发现，两年大的老鼠与两个月大的老鼠比较骨骼肌干细胞存在明显的线粒体功能下降，两年的老鼠正好相当于人在 60-70岁年龄，这些老鼠存在骨骼肌干细胞数量减少，骨骼肌受损后修复困难等症状，张宏波介绍，一旦我们以含有烟酰胺核糖的食物饲喂老鼠，这些症状能明显缓解。不仅是骨骼肌干细胞，该研究发现烟酰胺核糖对脑和皮肤系统内的干细胞具有同样的抗衰老作用。而更为重要的是这些烟酰胺核糖饲喂的老鼠具有更长的寿命。这是第一个以营养干预的方式来延长哺乳动物寿命，Auwerx 教授对这一发现激动不已。

不仅仅是衰老，人体多种疾病与干细胞功能有关，例如遗传性骨骼肌萎缩，帕金斯综合症等。该研究也尝试用烟酰胺核糖饲料喂骨骼肌萎缩的病变老鼠，这些老鼠存在着骨骼肌干细胞早衰。烟酰胺核糖也能明显提高这些疾病老鼠的骨骼肌功能。对脑和皮肤干细胞的良好作用有望使烟酰胺核糖成为一种有效的治疗神经退行性疾病和白发的药物或营养辅料，从而使得烟酰胺核糖成为再生医学的明星分子。

烟酰胺核糖制备在相关专利CN 103233051B 涉及，但高纯度烟酰胺核糖在空气中极易吸潮，且在室温超过30℃时，易降解，不便于贮藏运输及应用。制备出合适的烟酰胺核糖并采用稳定制剂技术显得尤为重要。。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能规模化制备且产品稳定和纯度高易保存的烟酰胺核糖微囊制备方法。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

（1）以烟酰胺核糖粗品为起始原料，加入水将烟酰胺核糖溶解，再加溶剂萃取除去杂质；

（2）将萃取后的烟酰胺核糖水溶液，上柱纯化，得烟酰胺核糖溶液；

（3）取烟酰胺核糖溶液加入倍他环糊精或糊精或微孔淀粉或纯胶或乳糖或羧甲基纤维素或聚维酮或它们中的几种混合物，两者比例以重量计为0.1：10至2: 0.1之间；

（4）然后混匀，高压均质，冷冻干燥，而成。

上述的步骤（1）中所用的溶剂可以为二氯甲烷或氯仿或石油醚或正己烷或亚磷酸二乙酯或亚磷酸三乙酯。

上述的步骤（2）中上柱纯化所用的材料可以为大孔吸附树脂或离子交换树脂、聚酰胺吸附树脂。

上述的步骤（4）中所述的均质压力可以在0.1MPa至60MPa之间。

上述的步骤（4）所述的冷冻温度可以在摄氏0度至零下50度之间。

上述的步骤（3）中烟酰胺核糖溶液与倍他环糊精或糊精或微孔淀粉或纯胶或乳糖或羧甲基纤维素或聚维酮或它们中的几种混合物两者比例还可以是以重量计为2：10至5:1之间。

本发明的烟酰胺核糖微囊制备方法，工艺步骤简单，原料易得，控制容易，适于工业化生产，且所获产品纯度高，品质稳定，便于贮藏运输及应用。

具体实施方式

为使对本发明的特征及所达成的功效有更进一步的了解与认识，用以较佳的实施例说明如下：

实施例1

取烟酰胺核糖粗品80克，经HPLC检测纯度为61%（面积归一化法计算纯度），加入400克水将其溶解，再加入500克二氯甲烷，搅拌均匀，静置分层，除去有机层，再加入新的二氯甲烷500克，重复上述操作。所得水层，再上大孔吸附树脂柱，用水洗脱，收集相应时段的洗脱液共900克，加500克糊精，搅拌均匀，用30MPa压力高压均质，再用冷冻干燥机冷冻干燥72小时，得575克粉末，HPLC检测纯度为95.8%（面积归一化法计算纯度）。25℃留样六个月，检测，纯度为95.3%。

实施例2

取烟酰胺核糖粗品600克，HPLC检测纯度为59%（面积归一化法计算纯度），加入3000克水将其溶解，再加入3500克正己烷，搅拌均匀，静置分层，除去有机层，再加入新的正己烷3500克，重复上述操作。所得水层，再上聚酰胺吸附树脂柱，用水洗脱，收集相应时段的洗脱液共6500克，加3200克倍他环糊精，搅拌均匀，用35MPa压力高压均质，再用冷冻干燥机冷冻干燥75小时，得3751克粉末，HPLC检测，纯度为96.3%（面积归一化法计算纯度）。25℃留样六个月，检测，纯度为96.5%。

实施例3

取烟酰胺核糖粗品3千克HPLC检测纯度为58%，（面积归一化法计算纯度），加入15千克水将其溶解，再加入17千克亚磷酸二乙酯，搅拌均匀，静置分层，除去有机层，再加入新的亚磷酸二乙酯17千克，重复上述操作。所得水层，再上离子吸附树脂柱，用水洗脱，收集相应时段的洗脱液液共32千克，加16千克乳糖，搅拌均匀，用20MPa压力高压均质，再用冷冻干燥机冷冻干燥72小时，得18.9千克粉末，HPLC检测，纯度为95.1%（面积归一化法计算纯度）。25℃留样六个月，检测，纯度为95.2%。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明的范围内。本发明要求的保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。

Claims (6)

1.一种烟酰胺核糖微囊的制备方法，特征在于包括如下步骤：

（1）以烟酰胺核糖粗品为起始原料，加入水将烟酰胺核糖溶解，再加溶剂萃取除去杂质；

（2）将萃取后的烟酰胺核糖水溶液，上柱纯化，得烟酰胺核糖溶液；

（3）取烟酰胺核糖溶液加入倍他环糊精或糊精或微孔淀粉或纯胶或乳糖或羧甲基纤维素或聚维酮或它们中的几种混合物，两者比例以重量计为0.1：10至2: 0.1之间；

（4）然后混匀，高压均质，冷冻干燥，而成。

2.根据权利要求1所述的烟酰胺核糖微囊的制备方法，特征在于：步骤（1）中所用的溶剂为二氯甲烷或氯仿或石油醚或正己烷或亚磷酸二乙酯或亚磷酸三乙酯。

3.根据权利要求1或2所述的烟酰胺核糖微囊的制备方法，特征在于：步骤（2）中上柱纯化所用的材料为大孔吸附树脂或离子交换树脂、聚酰胺吸附树脂。

4.根据权利要求1所述的烟酰胺核糖微囊的制备方法，特征在于：步骤（4）中所述的均质压力在0.1MPa至60MPa之间。

5.根据权利要求1所述的烟酰胺核糖微囊的制备方法，特征在于：步骤（4）所述的冷冻温度在摄氏0度至零下50度之间。

6.根据权利要求1所述的烟酰胺核糖微囊的制备方法，特征在于：步骤（3）中烟酰胺核糖溶液与倍他环糊精或糊精或微孔淀粉或纯胶或乳糖或羧甲基纤维素或聚维酮或它们中的几种混合物两者比例以重量计为2：10至5: 1之间。