CN109536552A - 一种灵芝小分子肽的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种灵芝小分子肽的制备方法，属于多肽提取技术领域。所述制备方法包括如下步骤：1)将灵芝粉浸泡，得到溶胀的灵芝粉；2)将溶胀的灵芝粉与水混合，将得到的灵芝粉水溶液在100～110℃，压力0.1～0.3MPa的条件下加热110～130min，得到破壁液；3)待破壁液酶解，将得到的酶解液灭活，得到灭活液；4)将灭活液依次进行离心和膜分离，得到灵芝小分子肽。本发明制备得到的灵芝小分子肽性质稳定，保质期长，且小分子肽的占比高，更易于人体吸收，提高了营养价值。

Description

一种灵芝小分子肽的制备方法
技术领域
本发明属于多肽提取技术领域，具体涉及一种灵芝小分子肽的制备方法。
背景技术
灵芝又称林中灵、琼珍，是多孔菌科真菌灵芝的子实体。灵芝具有非常广泛的应用范围。对人的整体机能来说，灵芝具有双向调节人体机能的作用，在整体上双向调节人体机能的平衡，全面的使人的免疫系统得到快速的提升，恢复人体的内脏和细胞达到标准化。灵芝小分子肽是采用灵芝为原料，从灵芝中提取的多肽物质，具有较高的营养价值。而现有技术中制备的灵芝小分子肽存在性质不稳定、不易于保存且吸收效率较低的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种灵芝小分子肽的制备方法，使制备得到的多肽性质温定、易保存，且营养价值高。
为了解决上述问题，本发明提供了以下技术方案：
本发明提供了一种灵芝小分子肽的制备方法，包括如下步骤：
1)用水浸泡灵芝粉2～4h，得到溶胀的灵芝粉；
2)将所述步骤1)的溶胀的灵芝粉与水混合，将得到的灵芝粉和水的混合物在100～110℃，压力0.1～0.3MPa的条件下加热110～130min，得到破壁液；
所述溶胀的灵芝粉和水的质量比为1：15～20；
3)待所述步骤2)的破壁液降温至50～60℃后，加入生物复合酶进行酶解，将得到的酶解液灭活，得到灭活液；
所述生物复合酶为谷氨酶和纤维素酶；
4)将所述步骤3)的灭活液依次进行离心和膜分离，得到的分离液即为灵芝小分子肽。
优选的，所述步骤1)中浸泡的温度为20～60℃。
优选的，所述步骤3)中破壁液与生物复合酶的质量比为10000：1～3。
优选的，所述步骤3)中谷氨酶和纤维素酶的质量比为1:2.5～3.5。
优选的，所述步骤3)中谷氨酶和纤维素酶的酶活力独立为4000～10000IU。
优选的，所述步骤3)中酶解的温度为50～55℃；酶解的时间3～4h。
优选的，所述步骤3)中灭酶的温度为90～110℃；灭酶的时间为25～35min。
优选的，所述步骤4)中膜分离后还包括将分离液依次进行浓缩、干燥。
优选的，所述浓缩的方式为低温降膜浓缩法；所述所述低温降膜浓缩的浓缩温度为40～80℃，压力为-0.008～-0.006Mpa。
优选的，所述干燥的方法为喷雾干燥法，所述喷雾干燥的温度为155～165℃。
本发明提供了一种灵芝小分子肽的制备方法，本发明提供的方法通过低温提取酶解，低温筛选浓缩，瞬时高温干燥的技术，从而能够使制备得到的多肽性质稳定、易保存，实施例结果表明：本发明制备得到的灵芝小分子肽保质期在两年以上，出粉率为2.6％～3.4％，100～1000道尔顿小分子肽占比28.5～34.6％，灵芝小分子肽中小分子肽含量高，更易于人体吸收，提高了营养价值。
具体实施方式
本发明提供了一种灵芝小分子肽的制备方法，包括如下步骤：
1)用水浸泡灵芝粉2～4h，得到溶胀的灵芝粉；
2)将所述步骤1)的溶胀的灵芝粉与水混合，将得到的灵芝粉和水的混合物在100～110℃，压力0.1～0.3MPa的条件下加热110～130min，得到破壁液；
所述溶胀的灵芝粉和水的质量比为1：15～20；
3)待所述步骤2)的破壁液降温至50～60℃后，加入生物复合酶进行酶解，将得到的酶解液灭活，得到灭活液；
所述生物复合酶为谷氨酶和纤维素酶；
4)将所述步骤3)的灭活液依次进行离心和膜分离，得到的分离液即为灵芝小分子肽。
本发明用水浸泡灵芝粉2～4h，得到溶胀的灵芝粉。在本发明中，所述灵芝粉的粒度优选为24～100目，更优选为60目。在本发明中，所述灵芝粉与水的质量比优选为1：1.8～2.2，更优选为1：2。在本发明中，所述浸泡的温度优选为20～60℃，更优选为45℃。所述浸泡的时间优选为3h。在本发明中，将灵芝粉进行浸泡以达到溶胀细胞壁的效果，减少高温高压的时间，节能降耗。本发明对所述灵芝粉的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。本发明实施例中购买自山东冠县。本发明对所述水的来源没有特殊限定，采用饮用水即可。
得到溶胀的灵芝粉后，本发明将所述溶胀的灵芝粉与水混合，将得到的灵芝粉和水混合物在100～110℃，压力0.1～0.3MPa的条件下加热110～130min，得到破壁液；所述溶胀的灵芝粉和水的质量比为1：15～20。优选为1：18。在本发明中，所述加热的温度优选为105℃；加热的时间优选为120min。本发明中，高温水可以轻松透过细胞壁，使其内部的大分子物质充分吸水溶胀，膨胀达到一定比例后就可达到破壁的效果，破壁后使里面的有效物质最大限度的被提取出来。
得到破壁液后，本发明将所述破壁液降温至50～60℃后，加入生物复合酶进行酶解，将得到的酶解液灭活，得到灭活液；所述生物复合酶为谷氨酶和纤维素酶。在本发明中，所述降温的方式优选为采用列管式换热器进行降温。在本发明中，优选降温至55℃后，加入生物复合酶进行酶解。在本发明中，所述酶解的温度优选为50～55℃，更优选为52℃；所述酶解的时间优选为3～4h，更优选为3.5h。在本发明中，所述灭酶的温度优选为90～110℃，更优选为100℃；所述灭酶的时间优选为25～35min，更优选为30min。在本发明中，所述破壁液与生物复合酶的质量比优选为10000:1～3，更优选为10000:1.5。在本发明中，所述谷氨酶和纤维素酶的质量比优选为1:2.5～3.5，更优选为1:3。在本发明中，所述谷氨酶和纤维素酶的酶活力独立优选为4000～10000IU，更优选为9000IU。本发明对所述谷氨酶和纤维素酶的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。在本发明中，将破壁液采用生物复合酶进行酶解，以得到小分子肽。
得到灭活液后，本发明将所述灭活液依次进行离心和膜分离，得到灵芝小分子肽。在本发明中，所述离心的转速优选为2900～3100rpm，更优选为3000rpm；在本发明中，所述膜分离用膜的孔径优选为100nm。在本发明中，优选将得到的分离液依次进行浓缩、干燥。在本发明中，所述浓缩的方式优选为低温降膜浓缩法；所述低温降膜浓缩的浓缩温度优选为40～80℃，更优选为60℃；所述低温降膜浓缩的压力优选为-0.008～-0.006Mpa，更优选为-0.007Mpa。在本发明中，所述干燥的方法优选为喷雾干燥法；所述喷雾干燥的温度优选为155～165℃，更优选为160℃。
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
1)将灵芝粉碎，称量1000g灵芝粉，与1800g水混合，浸泡2h，得到溶胀的灵芝粉；
2)将步骤1)中得到的溶胀的灵芝粉与20倍的水混合，在110℃，压力0.10MPa的条件下加热110min，得到破壁液；
3)将步骤2)中获得的破壁液降温至52℃，加入2.5g调配好的生物复合酶(谷氨酶和纤维素酶的质量比为1:3.5，谷氨酶的酶活性为10000IU，纤维素酶的酶活性为4000IU)，在52℃进行催化酶解4h，得到酶解液；
4)将步骤3)中所获得的酶解液，在90℃进行灭酶处理35min，得到灭活液；
5)将灭活液在2900rpm下离心，将上清液采用孔径为100nm的膜进行分离，收集膜分离后的透过液，将透过液通过低温降膜浓缩法(80℃，-0.006Mpa)进行浓缩，将浓缩液用喷雾法(160℃)进行干燥获得灵芝小分子肽。
实施例2
1)称量1000g粒度为60目的灵芝粉，与2000g水混合，浸泡3h，得到溶胀的灵芝粉；
2)将步骤1)中得到的溶胀的灵芝粉与20倍的水混合，在105℃，压力0.30MPa的条件下加热120min，得到破壁液；
3)将步骤2)中获得的破壁液降温至55℃，加入3g生物复合酶(谷氨酶和纤维素酶的质量比为1:2.5，谷氨酶的酶活性为10000IU，纤维素酶的酶活性为4000IU)在52℃下酶解3.5h，得到酶解液；
4)将步骤3)中所获得的酶解液，在100℃进行灭酶处理30min，得到灭活液；
5)将灭活液在3100rpm下离心，将上清液采用孔径为100nm的膜进行分离，收集膜分离后的透过液，将透过液通过低温降膜浓缩法(80℃，-0.006Mpa)进行浓缩，将浓缩液用喷雾法(160℃)进行干燥获得灵芝小分子肽。
实施例3
1)称量1000g粒度为60目的灵芝粉，与2200g水混合，浸泡4h，得到溶胀的灵芝粉；
2)将步骤1)中得到的溶胀的灵芝粉与15倍的水混合，在105℃，压力0.13MPa的条件下加热120min，得到破壁液；
3)将步骤2)中获得的破壁液降温至50～60℃，加入2.25g生物复合酶(谷氨酶和纤维素酶的质量比为1:3，谷氨酶的酶活性为4000IU，纤维素酶的酶活性为10000IU)在52℃下酶解3.5h，得到酶解液；
4)将步骤3)中所获得的酶解液，在100℃进行灭酶处理35min，得到灭活液；
5)将灭活液在2900rpm下离心，将上清液采用孔径为100nm的膜进行分离，收集膜分离后的透过液，将透过液通过低温降膜浓缩法(40℃，-0.006Mpa)进行浓缩，将浓缩液用喷雾法(160℃)进行干燥获得灵芝小分子肽。
实施例4
1)称量1000g粒度为60目的灵芝粉，与2000g水混合，浸泡4h，得到溶胀的灵芝粉；
2)将步骤1)中得到的溶胀的灵芝粉与18倍的水混合，在105℃，压力0.14MPa的条件下加热120min，得到破壁液；
3)将步骤2)中获得的破壁液降温至50～60℃，加入2.7g生物复合酶(谷氨酶和纤维素酶的质量比为1:3，谷氨酶的酶活性为10000IU，纤维素酶的酶活性为9000IU)在52℃下酶解3.5h，得到酶解液；
4)将步骤3)中所获得的酶解液，在100℃进行灭酶处理30min，得到灭活液；
5)将灭活液在3000rpm下离心，将上清液采用孔径为100nm的膜进行分离，收集膜分离后的透过液，将透过液通过低温降膜浓缩法(60℃，-0.006Mpa)进行浓缩，将浓缩液用喷雾法(160℃)进行干燥获得灵芝小分子肽。
实施例5
分别对实施例1～4制备得到的灵芝小分子肽进行分子量测定，具体测定方法为(GB/T 22729-2008)，计算100～1000道尔顿小分子肽的比例；同时对出粉率进行测定，具体结果如表1所示。
出粉率(％) 小分子肽比例(％)
实施例1 2.6 28.5％
实施例2 3.4 34.5％
实施例3 2.9 32.9％
实施例4 3.2 34.6％
由表1可以看出，本发明制备得到的灵芝小分子肽出粉率在2.6％～3.4％，其中小分子肽比例占多肽总量的28.5％～34.6％，实验结果表明：本发明制备得到的灵芝小分子肽，产量高，小分子肽含量高，更易于人体吸收，从而提高营养价值。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种灵芝小分子肽的制备方法，包括如下步骤：
1)用水浸泡灵芝粉2～4h，得到溶胀的灵芝粉；
2)将所述步骤1)的溶胀的灵芝粉与水混合，将得到的灵芝粉和水混合物在100～110℃，压力0.1～0.3MPa的条件下加热110～130min，得到破壁液；
所述溶胀的灵芝粉和水的质量比为1：15～20；
3)待所述步骤2)的破壁液降温至50～60℃后，加入生物复合酶进行酶解，将得到的酶解液灭活，得到灭活液；
所述生物复合酶为谷氨酶和纤维素酶；
4)将所述步骤3)的灭活液依次进行离心和膜分离，得到的分离液即为灵芝小分子肽。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中浸泡的温度为20～60℃。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中破壁液与生物复合酶的质量比为10000:1～3。
4.根据权利要求1或3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中谷氨酶和纤维素酶的质量比为1:2.5～3.5。
5.根据权利要求1或3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中谷氨酶和纤维素酶的酶活力独立为4000～10000IU。
6.根据权利要求1或3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中酶解的温度为50～55℃；酶解的时间3～4h。
7.根据权利要求1或3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中灭酶的温度为90～110℃；灭酶的时间为25～35min。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中膜分离后还包括将分离液依次进行浓缩、干燥。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述浓缩的方式为低温降膜浓缩法；所述低温降膜浓缩的浓缩温度为40～80℃，压力为-0.008～-0.006Mpa。
10.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述干燥的方法为喷雾干燥法，所述喷雾干燥的温度为155～165℃。
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