CN109486706A - 一种脱氮优势菌菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于于环境生物的技术领域，尤其涉及一种脱氮优势菌菌剂及其制备方法和应用。本发明的制备方法，包括以下步骤：步骤1、将丝瓜络置于高温的NaOH溶液浸泡，然后清洗去除NaOH溶液，干燥处理得到改性丝瓜络；将好氧反硝化菌在富集培养基培养，得到菌悬液；步骤2、将改性丝瓜络置于菌悬液中，使得好氧反硝化菌附着在改性丝瓜络上生长，得到附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络；步骤3、将附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络与海藻酸钠溶液混合后，将附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络在氯化钙溶液中交联固化，清洗干燥后得到脱氮优势菌菌剂。本发明提供的脱氮优势菌菌剂，能解决现有技术中脱氮菌剂存在的易被流水冲走导致的脱氮效率低的技术缺陷。

Description

一种脱氮优势菌菌剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于于环境生物的技术领域，尤其涉及一种脱氮优势菌菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

随着规模化养殖业的发展.养殖业带来的污染排放问题日渐凸出.特别是以COD和氨氮浓度居高的养猪场废水。据统计，2010年畜禽养殖业排放的COD含量达到1268万t，约占全国COD排放总量的42％。由于养猪废水经过厌氧发酵处理，碳氮比较低，用传统的活性污泥法处理很难达到排放效果，用物理化学方法费用较高，不适合大规模化养猪场废水的批量处理。因而，规模化养殖场废水的有效、经济处理成为我国农业污染治理的重点.也是推进农业循环发展的关键。

目前各种物理、化学、生物脱氮方法(碱性吹脱法、化学沉淀法、折点加氯法和离子交换法)的比较如下：

碱性吹脱法是将废水中的离子态铵，通过调节pH值转化为分子态氨，随后被通入废水的空气或蒸汽吹出。吹脱法适用于高浓度氨氮废水，处理效率高，但是吹脱出来的含氨废气会造成二次污染，同时该法需要投加烧碱将调废水pH到11以上加药量很大，同时用风机吹脱耗能也很高。如果采用碱性吹脱，虽然方法简单，但产生的氨气从水中转移到空气中，并没有将其最终还原成氮气，只是污染转移而已，碱性吹脱法吹脱出来的氨气会造成办公及生产环境污染，是不允许的，必须对吹脱出来的氨气采用酸性水进行收集处理，处理后的废水仍是高浓度氨氮废水，实质上氨氮并没有被去除，因此该法可行性不大。

化学沉淀法是在含氨根离子的废水中，投加镁离子和磷酸根离子，使之与氨根离子生成难溶复盐MgNH4PO4·6H2O结晶，通过沉淀，使MAP从废水中分离出来。MAP除磷脱氮的基本原理如下：

Mg²⁺+HPO₄ ^2-+NH₄ ⁺+6H₂O→MgNH₄PO₄·6H₂O↓+H⁺(1)

Mg²⁺+PO₄ ^3-+NH₄ ⁺+6H₂O→MgNH₄PO₄·6H₂O↓(2)

Mg²⁺+H₂PO₄ ^-+NH₄ ⁺+6H₂O→MgNH₄PO₄·6H₂O↓+2H⁺(3)

再经重力沉淀或过滤，就得到MAP。其化学分子式是MgNH₄PO₄·6H₂O，俗称鸟粪石；它的溶度积为2.5×10^-13因为它的养分比其他可溶肥的释放速率慢，可以作缓释肥(SRFs)；肥效利用率高，施肥次数少；同时不会出现化肥灼烧的情况。

折点加氯法是将氯气通入废水中达到某一点，在该点时水中游离率含量最低，而氨的浓度降为零。当氯气通入量超过该点时，水中的游离氨就会增多，因此该点称为折点。折点加氯除氨的机理为氯气与氨反应生成了无害的氨气。

离子交换法是将中等酸性废水通过弱酸性阳离子交换柱，NH₄ ⁺被截留在树脂上，同时生成游离态的H₂S，从而达到去除氨氮的目的。离子交换法的一般流程为：先用物化法或生物法去除废水中大量的悬浮物和有机碳，然后使废水流经交换柱。当交换柱饱和或出水中氨浓度过高以前，需停止操作并用无机酸对交换柱进行再生。该法的缺点是离子交换柱树脂用量较大，再生频繁，废水先要进行预处理以去除悬浮物，而且该法并没有对氨进行真正的去除，再生液仍需要采用上述几种化学方法来处理，因此处理成本高。

生物脱氮是从废水中去除氮素污染的较为经济有效的方法之一。传统生物脱氮过程包括好氧硝化和缺氧反硝化2个阶段，其中反硝化是硝酸盐或亚硝酸盐被还原成气态氮的生物过程。传统的反硝化菌是在厌氧条件下生长，有着生长缓慢、生长周期长、在混合活性污泥系统中无法与异养菌竞争、难以获得较高的生物量、导致自养微生物系统的抗冲击能力弱等不利影响，相比之下好氧反硝化菌有着生长迅速的明显优势，其次随着生物脱氮技术的不断改进与更新，固定化微生物技术日益受到广泛关注。固定化好氧反硝化菌脱氮技术在一定程度上解决了好氧反硝化菌直接投放于工艺研究中存在的脱氮效率低，菌种易流失，脱氮稳定性差等问题。

申请号为201310054249.6的中国专利、申请号为201711408766.3的中国专利和申请号为201310061522.8的中国专利都是液体或者粉末状的微生物菌剂。而液体或粉状菌剂在投入处理工艺中存在着菌种易流失导致的脱氮效率低等问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种菌种不容易流失的脱氮优势菌菌剂。

本发明的另一个目的是提供一种脱氮稳定性和脱氮效率高的脱氮优势菌菌剂。

本发明提供了一种脱氮优势菌菌剂的制备方法，包括以下步骤：

步骤1、将丝瓜络置于90～110℃的NaOH溶液浸泡，然后清洗去除NaOH溶液后，干燥处理得到改性丝瓜络；将好氧反硝化菌在富集培养基培养，得到菌悬液；

步骤2、将所述改性丝瓜络置于所述菌悬液中，使得所述好氧反硝化菌附着在所述改性丝瓜络上生长，得到附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络；

步骤3、将所述附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络与海藻酸钠溶液混合后，将所述附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络在氯化钙溶液中交联固化，然后清洗干燥后得到所述脱氮优势菌菌剂。

作为优选，步骤1中，所述NaOH溶液的质量百分比为2％～14％。

作为优选，步骤1中，所述NaOH溶液的质量百分比为2％～5％。

作为优选，步骤1中，所述浸泡时间为10-180min。

作为优选，步骤1中，所述浸泡时间为20-30min。

作为优选，步骤1中，所述干燥处理具体为30～50℃烘干8-12h。

作为优选，步骤1中，所述好氧反硝化菌为节杆菌属细菌Arthrobacter sp。

其中，本发明使用的好氧反硝化菌是经过测序鉴定后确认的节杆菌属细菌Arthrobacter sp。

更为优选，步骤1中，丝瓜络高温浸泡在NaOH溶液中的目的是将丝瓜络表层的光滑角质层去除，使得好氧反硝化菌能更好的附着。

更为优选，步骤1中，所述富集培养基包括水、硝酸、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、丁二酸钠和微量元素。

更为优选，步骤1中，所述富集培养基包括：1000～1500ml的去离子水、2～3g的硝酸钾、1～1.5g的磷酸氢二钾、1～1.5g的磷酸二氢钾、0.4～0.6g的硫酸镁，6.5～9.5g的丁二酸钠，2～3ml的微量元素。

更为优选，步骤1中，所述富集培养基为经过高温高压灭菌的富集培养基，高温高压条件为121℃，105-110kPa。

更为优选，步骤1中，将好氧反硝化菌在富集培养基培养的培养条件为30～35℃，110～150rmp转速培养12～16h。

更为优选，步骤2具体为：将干燥处理得到改性丝瓜络放置于300～500ml的菌悬液中集培养12～16h后，让好氧反硝化菌与干燥处理得到改性丝瓜络一起生长，使得好氧反硝化菌附着于干燥处理得到改性丝瓜络上。

更为优选，步骤3具体为：使用无菌的镊子将附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络夹出，然后放置于海藻酸钠溶液中，浸泡5-10min后，转移到质量百分比为5％-6％的氯化钙溶液中交联固化30-40min(氯化钙溶液配制方法为将13～15g的氯化钙溶解于250～300ml去离子水制成)，然后用去离子水冲洗，放至于滤纸上室温风干，待其风干至恒重，得到所述脱氮优势菌菌剂。

作为优选，步骤3中，所述海藻酸钠溶液的质量百分比为3％；氯化钙溶液的质量百分比为5-6％。

本发明还提供了一种脱氮优势菌菌剂，包括所述制备方法制得的脱氮优势菌菌剂。

本发明还公开了所述的制备方法制得的脱氮优势菌菌剂或所述的脱氮优势菌菌剂在降解硝态氮中的应用。

作为优选，脱氮优势菌菌剂在污水中降解硝态氮的应用。

作为优选，所述污水的碳氮比(C/N)为10～12、PH为7.5～8.5、转速为80rmp～110rmp的污水。

本发明针对在实际污水处理工艺中游离的细菌菌体易被流水冲走，使得好氧反硝化菌浓度容易被稀释，脱氮效率由于菌体浓度的降低而下降，脱氮效果不稳定的技术缺陷。本发明提供的脱氮优势菌菌剂，采用丝瓜络，以丝瓜络为载体制备固定化好氧反硝化菌，丝瓜络来源广泛，价格低廉，丝瓜络具有结构多孔，比表面积大，适合菌的生长与附着，而且有着易保存，性质稳定，使用寿命长，且可重复利用的特性，其机械强度高，稳定性好，丝瓜络表面多孔粗糙，适合作为固定化细菌的载体。且在制作菌剂前将丝瓜络使用NaOH改性，让丝瓜络上光滑的保护膜脱落，更易于好氧反硝化菌的附着，而且本专利采用的好氧反硝化菌为革兰氏阴性菌，在pH在7左右的模拟废水中表面带负电荷，而改性后的丝瓜络表面带正电荷，使得好氧反硝化菌更易于附着在丝瓜络上，实验表明，好氧反硝化菌能高效的附着在经过NaOH溶液变性的丝瓜络上，使得本发明的脱氮优势菌菌剂对硝态氮的去除率最高可达80％，且亚硝态氮的积累少。本发明的脱氮优势菌菌剂的制备方法工艺操作简单，生产成本低，易于在工业上应用。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1示本发明实施例提供的在进行单因素变化实验中在不同碳氮比下好氧反硝化菌对硝态氮降解效果图；

图2示本发发明实施例提供的进行单因素变化实验中在不同pH值下好氧反硝化菌对硝态氮降解效果图；

图3示本发发明实施例提供的在进行单因素变化实验中在不同温度下好氧反硝化菌对硝态氮降解效果图；

图4示本发发明实施例提供的在进行单因素变化实验中在不同转速下好氧反硝化菌对硝态氮降解效果图；

图5示本发发明实施例提供的进行正交实验中不同组别的硝态氮降解的效果图；

图6示本发发明实施例提供的不同氢氧化钠处理丝瓜络后得到的改性丝瓜络的负载菌量图；

图7示本发发明实施例提供的氢氧化钠以不同时间浸泡丝瓜络后得到的改性丝瓜络的负载菌量图；

图8示本发发明实施例提供的未经细菌包埋的丝瓜络脱氮作用效果图；

图9示本发发明实施例提供的实施例1制备的脱氮优势菌菌剂脱氮作用效果图。

具体实施方式

本发明提供了一种脱氮优势菌菌剂及其制备方法和应用，用于解决现有技术中脱氮菌剂存在的易被流水冲走导致的脱氮效率低的技术缺陷。

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

其中，以下实施例所用的原料均为市售或自制，以下实施例所用好氧反硝化菌为节杆菌属细菌(Arthrobacter sp.)，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心CGMCC，保藏编号为保藏编号为CGMCC No.10611，该菌种已在公开号为CN104946556A、申请号为201510251242.2的在先专利中公开。

实施例1

本发明提供了一种脱氮优势菌菌剂，其制备步骤如下：

(1)将丝瓜络剪成1.2cm×1.2cm×1.2cm的立方体，放置与2％的NaOH溶液中煮沸25min，然后用去离子水冲洗去残留的NaOH溶液，然后放置于40℃烘箱中烘干12h至恒重，于干燥器中贮存得到改性丝瓜络。

(2)配制富集培养基，富集培养基的配方为去离子水1000ml，硝酸钾2g，磷酸氢二钾1g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.4g，丁二酸钠6.5g和微量元素2ml，将富集培养基经过高温高压(121℃，105KPa)灭菌，挑取1～2环斜面保存的好氧反硝化菌，加入到的已灭菌的富集培养基中，在摇瓶中培养，在35℃，110rmp培养16h，得到菌悬液。

(3)将15粒改性丝瓜络放置于500ml的菌悬液中，让好氧反硝化菌与改性丝瓜络一起生长，让好氧反硝化菌附着于改性丝瓜络上，与菌悬液的好氧反硝化菌一起摇16h后，得到附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络，使用无菌的镊子将附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络夹出，然后放置于海藻酸钠溶液(将9g海藻酸钠加热溶解于300ml温度为100℃的去离子水中配制而成)中，浸泡8min后，转移到质量百分比为5％的氯化钙溶液中交联固化(氯化钙溶液将15g氯化钙溶解于300ml去离子水中)，固化时间为35min，然后用去离子水冲洗。然后放至于滤纸上室温风干，待其风干至恒重，得到脱氮优势菌菌剂。

(4)将步骤3中的脱氮优势菌菌剂，菌量相同的脱氮优势菌菌剂和未经细菌包埋的丝瓜络分别放在反硝化细菌培养基(反硝化细菌培养基的配方为：硝酸钾0.36g/L，磷酸氢二钠7.9g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，硫酸镁0.1g/L和丁二酸钠1.686g/L)内，每隔3h取一次样，测定三氮，以及COD，结果如图8和图9所示，从图8中可以看出，18h的过程中并没有发现硝态氮的降低，亚硝态氮与氨氮的量也并没有变化，而相对于图9可以看出硝态氮在9h的时候开始明显的降低，而亚硝态氮也略有升高，但三氮的总量有明显的下降。证明丝瓜络对菌剂的作用没有显著的作用，只是作为一个载体来支撑细菌的生长。

实施例2

本发明提供了好氧反硝化菌在碳氮比不同条件下好氧反硝化菌对硝态氮的降解效果实验，具体步骤如下：

取保存的好氧反硝化菌斜面菌种接种到反硝化菌培养基(反硝化细菌培养基的配方为：硝酸钾0.36g/L，磷酸氢二钠7.9g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，硫酸镁0.1g/L和丁二酸钠1.686g/L)中，于35℃，110r/min条件下活化菌种，使菌液的OD₆₀₀值到达0.5，以1ml活化菌种接种到经过高压灭菌后的碳氮比(C/N)分别为2、5、7、10的反硝化细菌培养基中，分别在0小时、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时、12小时用酚二磺酸光度法测定硝态氮浓度，结果见图1。

由图1可以看出碳氮比为2时，降解率最低，只达到8％左右；碳氮比为5和7是去除率稍微高点，分别达到了15％和30％，碳氮比为10的时候，降解率最高能达到60％左右。表明碳氮比为10时最适合好氧反硝化菌的生长。

实施例3

本发明提供了好氧反硝化菌在pH不同条件下好氧反硝化菌对硝态氮的降解效果实验，具体步骤如下：

取保存的好氧反硝化菌斜面菌种接种到反硝化菌培养基(反硝化细菌培养基的配方为：硝酸钾0.36g/L，磷酸氢二钠7.9g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，硫酸镁0.1g/L和丁二酸钠1.686g/L)中，于35℃，110r/min条件下活化菌种，使菌液的OD₆₀₀值到达0.5，以1ml活化菌种接种到经过高压灭菌后的pH分别为6、7、8、9的反硝化细菌培养基中，分别在0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h用酚二磺酸光度法测定硝态氮浓度，结果见图2。

由图2可以看出不同pH条件下的液体培养基的好氧反硝化菌的硝态氮的降解效果差别不大，其pH为6时，降解率最低，达到70％左右；pH为9和7是去除率稍微高点，分别达到了75％和82％，pH为8的时候，降解率最高能达到91％左右。表明pH为8时最适合好氧反硝化菌的生长。

实施例4

本发明提供了好氧反硝化菌在温度不同条件下好氧反硝化菌对硝态氮的降解效果实验，具体步骤如下：

取保存的好氧反硝化菌斜面菌种接种到反硝化菌培养基(反硝化细菌培养基的配方为：硝酸钾0.36g/L，磷酸氢二钠7.9g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，硫酸镁0.1g/L和丁二酸钠1.686g/L)中，于35℃，110r/min条件下活化菌种，使菌液的OD₆₀₀值到达0.5，以1ml活化菌种接种到经过高压灭菌后的温度分别为25℃、30℃、35℃、40℃的反硝化细菌培养基中，分别在0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h用酚二磺酸光度法测定硝态氮浓度，结果见图3。

由图3可以看出在25℃和30℃的液体培养基好氧反硝化菌对硝态氮的降解效果差别不大，降解率达到23％左右；温度为40℃的时候是去除率稍微高点，分别达到了50％左右，温度为35℃的时候，降解率最高能达到80％左右。表明温度为35℃时最适合好氧反硝化菌的生长。

实施例5

本发明提供了好氧反硝化菌在溶解氧不同条件下好氧反硝化菌对硝态氮的降解效果实验，具体步骤如下：

取保存的好氧反硝化菌斜面菌种接种到反硝化菌培养基(反硝化细菌培养基的配方为：硝酸钾0.36g/L，磷酸氢二钠7.9g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，硫酸镁0.1g/L，丁二酸钠1.686g/L)中，于35℃，110r/min条件下活化菌种，使菌液的OD₆₀₀值到达0.5，以1ml活化菌种接种到经过高压灭菌后的转速分别为50、100、150、200rmp的反硝化细菌培养基中，分别在0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h用酚二磺酸光度法测定硝态氮浓度，结果见图4。

由图4可以看出50rmp时好氧反硝化菌降解率最低，降解率达到23％左右；转速为150rmp的时候是去除率稍微高点，分别达到了26％左右，转速为200rmp的时候，降解率能达到35％左右；转速为100rmp时，降解率最高在60％左右。表明转速为100rmp时最适合好氧反硝化菌的生长。

实施例6

本发明提供了好氧反硝化菌在正交实验不同条件下好氧反硝化菌对硝态氮的降解效果实验，具体步骤如下：

取保存的好氧反硝化菌斜面菌种接种到反硝化菌培养基(反硝化细菌培养基的配方为：硝酸钾0.36g/L，磷酸氢二钠7.9g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，硫酸镁0.1g/L，丁二酸钠1.686g/L)中，于35℃，110r/min条件下活化菌种，使菌液的OD₆₀₀值到达0.5，以1ml活化菌种接种到经过高压灭菌后的9组正交实验的反硝化细菌培养基中，分别在0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h用酚二磺酸光度法测定硝态氮浓度。正交实验方案设计如表1和图5所示。

正交实验设计表正交实验结果如下：

T1、T2、T3这三行数据是各因素同一水平结果之和，例如：

T1A＝91.46573+68.78951+61.003954＝221.2948。

t1、t2、t3是对T1、T2、T3这三行数据除以3，通过t的大小比对能看出每个因素最适合的水平，最适pH值为8.5左右，最适转速为80(测得80转时溶解氧在3.5)，最适碳氮比为12。

R是t1、t2、t3三列数据的极差，即，可以看出碳氮比的R是11.81337，其次是转速的R是9.322683，最后是pH的R是7.040617。碳氮比是影响最大的因素，其次是转速，影响最小的是pH。

表1

实施例7

本发明提供了不同浓度氢氧化钠溶液改性丝瓜络的负载的菌量实验，步骤如下：

将氢氧化钠的质量浓度按照2％、5％、8％、11％、14％分成5组和空白组。每组浓度的氢氧化溶液中投加等量的丝瓜络，并加热至100℃浸泡30min，然后将丝瓜络取出，在去离子水中洗净，最后将改性的丝瓜络放入250ml的反硝化液体培养基中加入2ml的OD₆₀₀为0.5的菌悬液，一同在35℃的条件下，摇速为170rmp的条件下在摇床中培养24h，然后从每个瓶中取出10g丝瓜络，放入90g的无菌水中，在179rmp的转速下，摇30min，其目的是为了将丝瓜络上附着的菌均匀的混在无菌水中，然后再将混匀的菌液逐级稀释，稀释到浓度，再接种到固体培养基(固体培养基的配方为：硝酸钾0.36g/L，磷酸氢二钠7.9g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，硫酸镁0.1g/L，丁二酸钠1.686g/L，琼脂粉20g/L)中，放置于35℃的恒温培养箱中培养48h，最后通过菌落数计算载体负载的菌量，结果如表2、图6和表3所示。

表2

根据国标法计算出载体上的负载菌量。

式中：

n_m——质量有效活菌数，单位为亿每克(亿/g)；

——菌落平均数，单位为个；

k——稀释倍数；

V₁——基础液体积，单位为毫升(mL)；

m₁——样品量，单位为克(g)；

V₂——菌悬液加入量，单位为毫升(mL)；

n_v——体积有效活菌数，单位为亿每毫升(亿/mL)；

V₀——样品量，单位为毫升(mL)。

表3

氢氧化钠浓度(％)	空白	2	5	8	11	14
							负载菌量(亿/g)	1.53	5.13	5.58	4.41	2.7	3.24

实施例8

本发明提供了氢氧化钠溶液不同浸泡时间的改性丝瓜络的负载的菌量实验，步骤如下：

本实施例设置了一组按时间梯度变化的实验，将浸泡时间按照0min、10min、20min、30min、3h分成5组。每组氢氧化溶液中投加等量的丝瓜络，并煮沸浸泡相应不同的时间(分别为0min、10min、20min、30min、3h)，然后将丝瓜络取出，在去离子水中洗净，最后放入250ml的反硝化液体培养基中加入2ml的OD₆₀₀为0.5的菌液，一同在35℃的条件下，摇速为170rmp的条件下在摇床中培养24h，然后从每个瓶中取出10g丝瓜络，放入90g的无菌水中，在179rmp的转速下，摇30min，其目的是为了将丝瓜络上附着的菌均匀的混在无菌水中，然后再将混匀的菌液逐级稀释，稀释到10^-5浓度，再接种到固体培养基中，放置于35℃的恒温培养箱中培养48h，最后通过菌落数计算载体负载的菌量，结果表4、图7和表5所示。

表4

浸泡时间(min)	0	10	20	30	180
						培养基上的菌落数(个)	20	26	33	52	48

根据实施例7提供的国标法计算出负载菌量，测得的菌量如表5所示。

表5

浸泡时间(min)	0	10	20	30	180
						负载菌量(亿/g)	1.8	2.34	2.97	4.68	4.32

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种脱氮优势菌菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、将丝瓜络置于90～110℃的NaOH溶液浸泡，清洗去除NaOH溶液后，干燥处理得到改性丝瓜络；将好氧反硝化菌在富集培养基培养，得到菌悬液；

步骤2、将所述改性丝瓜络置于所述菌悬液中，使得所述好氧反硝化菌附着在所述改性丝瓜络上生长，得到附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络；

步骤3、将所述附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络与海藻酸钠溶液混合后，将所述附着好氧反硝化菌的改性丝瓜络在氯化钙溶液中交联固化，然后清洗干燥后得到所述脱氮优势菌菌剂。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中，所述NaOH溶液的质量百分比为2％～14％。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中，所述NaOH溶液的质量百分比为2％～5％。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中，所述浸泡时间为10-180min。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中，所述浸泡时间为20-30min。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中，所述干燥处理具体为30～50℃烘干8-12h。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中，所述好氧反硝化菌为节杆菌属细菌Arthrobacter sp。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3中，所述海藻酸钠溶液的质量百分比为3％；所述氯化钙溶液的质量百分比为5-6％。

9.一种脱氮优势菌菌剂，其特征在于，包括如权利要求1至8任意一项所述制备方法制得的脱氮优势菌菌剂。

10.权利要求1至8任意一项所述的制备方法制得的脱氮优势菌菌剂或权利要求9所述的脱氮优势菌菌剂在降解硝态氮中的应用。