CN109485687A - 奥贝胆酸的晶型j及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及奥贝胆酸的晶型J及其制备方法，以及无定型奥贝胆酸的制备。本发明获得的奥贝胆酸纯度高、水分含量小，在高温、高湿条件下增重均不明显，具有良好的稳定性，适合长期储存和工业化生产；且本发明的奥贝胆酸晶型J可转化为无定型奥贝胆酸，获得的无定型奥贝胆酸收率高，纯度好。

Description

奥贝胆酸的晶型J及其制备方法

技术领域

本发明涉及化学医药领域，具体涉及奥贝胆酸的晶型J及其制备方法。

背景技术

奥贝胆酸(Obeticholic Acid)又名6-乙基鹅去氧胆酸，属于法尼醇X受体激动剂，通过活化法尼醇X受体，可以抑制胆酸合成。其由美国Intercept制药公司研发，是二十年来首个研发用于治疗胆汁淤积性肝病的药物。

奥贝胆酸存在多种晶型，如Intercept公司在WO2013192097A、US20160108082A中公开了A、C、D、E、F晶型；CN105175473A公开了一种奥贝胆酸的单晶晶型；CN105777836A、CN105801653A等报道了奥贝胆酸的多晶型；但是这些晶型存在水分含量较高，含有有机溶剂，稳定性、溶解性较差等缺陷，如晶型C含有庚烷，水分含量在1.5％左右，且略微吸湿。此外，药物的不同晶型在溶解度、熔点、稳定性等方面也具有显著差异，从而影响药物的稳定性、生物利用度、疗效和安全性等。因此期望能够研究出一种不含有机溶剂、水分含量少、具有一定溶解性、稳定性良好的奥贝胆酸晶型。

发明内容

本发明的目的在于提供一种奥贝胆酸的新晶型，本发明提供的新晶型解决了现有晶型存在的有机溶剂残留、水分含量高、溶解度小、稳定性差等缺陷，且本发明的制备方法简单，成本低，对未来该药物的开发具有重要的价值。

具体地，本发明的一个目的在于提供奥贝胆酸的一种新晶型，命名为晶型J。

本发明提供的晶型J，其特征在于其X射线粉末衍射图在2θ值为13.6°±0.2°处具有特征峰。

进一步地，本发明提供的晶型J，其特征在于其X射线粉末衍射图在2θ值为10.9°±0.2°、12.5°±0.2°、13.6°±0.2°、14.8°±0.2°、15.8°±0.2°处具有特征峰。

进一步地，本发明提供的晶型J，其特征在于其X射线粉末衍射图在2θ值为6.8°±0.2°、10.9°±0.2°、12.5°±0.2°、13.6°±0.2°、14.8°±0.2°、15.8°±0.2°、17.5°±0.2°、18.6°±0.2°处具有特征峰。

更进一步地，本发明提供的晶型J，其特征在于其X射线粉末衍射图在2θ值为6.1°±0.2°、6.8°±0.2°、7.3°±0.2°、10.9°±0.2°、12.5°±0.2°、13.6°±0.2°、14.8°±0.2°、15.8°±0.2°、17.5°±0.2°、18.6°±0.2°处具有特征峰。

更进一步地，本发明提供的晶型J，其特征还在于，其X射线粉末衍射图基本如图1所示，X射线粉末衍射数据如下所示。

衍射角2θ	相对强度I％
		6.094	13.5
6.751	15.7
		7.327	10.7
9.851	11.3
		10.899	27.5
11.687	10.1
		12.549	31.7
13.601	100.0
		14.791	61.0
15.837	43.8
		17.501	21.8
18.644	22.8
		19.389	7.1
20.796	3.3
		21.554	4.2
23.101	12.4
		23.645	6.0
24.749	12.7

本发明提供的晶型J，其特征在于，在加热至75.4℃附近开始出现吸热峰，其差示扫描量热分析图基本如图2所示。

本发明的另一个目的在于提供晶型J的制备方法，其特征在于：

1)向奥贝胆酸粗品中加入氢氧化钠、纯化水溶清后酸调节至pH为3-4；

2)向步骤1)溶液中加入乙酸正丁酯或二氯甲烷，搅拌溶清，分液；

3)向有机相中加入苯，搅拌析晶，过滤，干燥，既得。

其中步骤3)的苯为甲苯、乙苯或二甲苯，优选甲苯。

进一步地，本发明也可以利用奥贝胆酸中间体制备晶型J，其特征在于：

1)向原料3α-羟基-6α乙基-7-酮-5β胆烷-24酸中加入氢氧化钠、纯化水、乙醇溶清后加入硼氢化钠进行还原反应，反应完毕后酸调节至pH为3-4；

2)向步骤1)溶液中加入乙酸正丁酯或二氯甲烷，搅拌溶清，分液；

3)向有机相中加入苯，搅拌析晶，过滤，干燥，既得。

其中，步骤1)中还原反应如下：

步骤3)中的苯为IM甲02苯、乙苯或二甲苯，优选甲苯。

本发明的另一个目的还在于提供一种无定型奥贝胆酸的制备方法，其特征在于将奥贝胆酸晶型J转变为无定型奥贝胆酸。具体的，将奥贝胆酸晶型J转变为无定型奥贝胆酸包括将奥贝胆酸结晶J溶于氢氧化钠水溶液中并加入HCl的步骤。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：本发明制备获得了一种新的奥贝胆酸晶型J，该晶型纯度高于99％，甚至可以达到99.9％，最大单杂小于0.1％；本发明的奥贝胆酸晶型J水分含量低至0.8％，在高温、高湿条件下增重均不明显，具有良好的稳定性，适合长期储存和工业化生产；本发明的奥贝胆酸晶型溶解性较好；本发明奥贝胆酸晶型J制备工艺简单，成本低；本发明的奥贝胆酸晶型J可转化为无定型奥贝胆酸，获得的无定型奥贝胆酸收率高，纯度好。

附图说明

图1为根据本发明实施例1的奥贝胆酸晶型J的X射线粉末衍射图谱；

图2为根据本发明实施例1的奥贝胆酸晶型J的DSC图；

图3为根据本发明实施例6的无定型奥贝胆酸的X射线粉末衍射图谱；

具体实施方式

本发明通过以下实施例对本发明的内容作进一步的详细说明，并不能用于限制本发明的保护范围。

检测仪器及方法：

X-射线粉末衍射(PXRD)测试方法：仪器型号：DX 2700，衍射线：CuK(40KV，30mA)扫描速率：0.05°/s，扫描范围：3°-53°(2θ)。

差示扫描量热(DSC)测试方法：仪器型号：Mettler TGA/DSC 2；升温速率：10℃/min。

参考实施例1奥贝胆酸粗品的制备

在50％wt氢氧化钠溶液(1.5mL)和水(20mL)的混合物中，在90℃-105℃下使化合物3α-羟基-6α-乙基-7-酮-5β-胆烷酸(86g，205.4mmol)、水(688mL)和50％氢氧化钠溶液(56.4mL)的混合物与硼氢化钠(7.77g，205.4mmol)反应。将反应混合物加热至回流，并搅拌5小时。反应完成后，使反应混合物冷却至约80℃，并转移到冷却的反应器中。在30℃-50℃下，加入水(491mL)中的乙酸正丁酯(860mL)和柠檬酸(320.2g，无水)。在检查pH值以确保是酸性后，分离水相并弃去。有机相减压旋蒸除去乙酸丁酯。残余物用乙酸正丁酯稀释，并慢慢冷却至15℃-20℃，析出固体过滤、50℃干燥得奥贝胆酸粗品40g，收率约为46.3％，纯度99.20％。

对比实施例1原研奥贝胆酸晶型C的制备

参考CN104781272A，取上述参考实施例1制备的奥贝胆酸粗品(8.00g，0.019mol)与氢氧化钠(0.91g，0.023mol)、水(80ml)混合，30-50℃条件下搅拌溶清，滴加柠檬酸水溶液(20ml)调节溶液PH至酸性，后加入乙酸丁酯(56ml)，搅拌溶清，分液，减压旋蒸除去有机溶剂，残余物用乙酸丁酯(40ml)稀释，慢慢冷却至15℃-20℃,析出固体极易附着于瓶壁，较粘稠，较难过滤、50℃干燥得奥贝胆酸C晶型，干燥过程中极易出现溶剂化合物的塌陷现象，收率约为44.58％，纯度为99.83％。结果显示C晶型纯度较高，除杂效果好，但是收率低，抽滤或者甩滤都存在困难，不利于工业化生产和放大。

对比实施例2厦门蔚扬和海乐景晶型I的制备

参考CN105777836A，将上述参考实施例1制备的奥贝胆酸粗品(8.00g，0.019mol)加入乙酸正丁酯中(62ml)，加热升温至回流，搅拌2h，加入庚烷(178ml)，降温至室温时抽滤，滤饼用庚烷淋洗，50℃鼓风干燥得奥贝胆酸I晶型,收率约为56.39％，纯度为99.56％，单杂大于0.2％。结果显示奥贝胆酸I晶型除杂效果一般，收率低，单杂大于0.2％，析出固体易于附着于瓶壁，较粘稠，损失较大，固体堆密度低，难以抽滤或者甩滤，工业化生产较困难。

对比实施例3苏州晶云晶型A的制备

参考CN105801653A，将上述参考实施例1制备的奥贝胆酸粗品的粉末(2.16g)加入到50ml体积比1:9的乙酸乙酯与正庚烷的混合溶液中，制成悬浮液，将该悬浮液置于室温下搅拌48h，所得滤饼置于25℃真空干燥箱内干燥过夜，得到奥贝胆酸A晶型，收率87.42％，纯度99.23％。结果显示A晶型收率较高，但无除杂效果，仅仅是晶型的转变。

对比实施例4丽珠医药晶型I的制备

参考CN105175473A，取上述参考实施例1制备的2g奥贝胆酸粗品加入200ml二氯甲烷溶解，10℃下挥发得到奥贝胆酸晶型I。收率88.43％，纯度99.26％。结果显示产物收率较高，但无除杂效果，仅仅是晶型的转变。

实施例1奥贝胆酸晶型J的制备

依次向烧瓶中加入上述参考实施例1制备的奥贝胆酸粗品(4.20g)、氢氧化钠(0.48g)、纯化水(42ml)，室温搅拌溶清，20％柠檬酸调节溶液PH至3-4，后向溶液中加入二氯甲烷(29.4ml)搅拌溶清，静置分液，有机相中加入甲苯(29.4ml)，室温搅拌析晶3h，白色固体析出，过滤，抽干，50℃鼓风干燥得白色固体奥贝胆酸晶型J。其收率为84.76％，纯度为99.91％，主要单杂均小于0.1％。其X-射线粉末衍射图谱、差示扫描量热图谱分别如图1、2所示。

实施例2奥贝胆酸晶型的制备

依次向反应器中加入3α-羟基-6α乙基-7-酮-5β胆烷-24酸(4.18g，0.01mol)、氢氧化钠(0.48g，0.012mol)，纯化水(37.6ml)，无水乙醇(4.2ml)，室温搅拌溶清，后加入硼氢化钠(0.56g，0.015mol)，搅拌均匀后加热至回流反应5h，TLC监测原料反应完毕，冷却至室温。20％柠檬酸淬灭反应并调节溶液PH至3-4,后向溶液中加入乙酸正丁酯(29.4ml)，室温搅拌溶清，静置分液，有机相中加入乙苯(29.4ml)室温搅拌析晶3h，过滤抽干，50℃鼓风干燥得白色固体奥贝胆酸晶型J。其收率为79.8％，纯度为99.60％，主要单杂均小于0.1％。X-射线粉末衍射(XRD)图谱同附图1基本相同。

实施例3奥贝胆酸晶型的制备

依次向反应器中加入3α-羟基-6α乙基-7-酮-5β胆烷-24酸(4.18g，0.01mol)、氢氧化钠(0.48g，0.012mol)，纯化水(37.6ml)，无水乙醇(4.2ml)，室温搅拌溶清，后加入硼氢化钠(0.56g，0.015mol)，搅拌均匀后加热至回流反应5h，TLC监测原料反应完毕，冷却至室温。20％柠檬酸淬灭反应并调节溶液PH至3-4,后向溶液中加入二氯甲烷(29.3ml)，室温搅拌溶清，静置分液，有机相中加入甲苯(29.3ml)室温搅拌析晶3h，过滤抽干，50℃鼓风干燥得白色固体奥贝胆酸粗品。其收率为89.7％，纯度为99.36％。X-射线粉末衍射(XRD)图谱同附图1基本相同。

实施例4奥贝胆酸晶型的制备

依次向反应器中加入3α-羟基-6α乙基-7-酮-5β胆烷-24酸(4.18g，0.01mol)、氢氧化钠(0.48g，0.012mol)，纯化水(37.6ml)，无水乙醇(4.2ml)，室温搅拌溶清，后加入硼氢化钠(0.56g，0.015mol)，搅拌均匀后加热至回流反应5h，TLC监测原料反应完毕，冷却至室温。20％柠檬酸淬灭反应并调节溶液PH至3-4，后向溶液中加入二氯甲烷(29.3ml)，室温搅拌溶清，静置分液，有机相中加入乙苯(29.3ml)室温搅拌析晶3h，过滤抽干，50℃鼓风干燥得白色固体奥贝胆酸粗品。其收率为88.3％，纯度为99.21％。X-射线粉末衍射(XRD)图谱同附图1基本相同。

实施例5奥贝胆酸晶型J的制备

取上述参考实施例1制备的奥贝胆酸粗品(8.00g，0.019mol)与氢氧化钠(0.91g，0.023mol)、水(80ml)混合，30-50℃条件下搅拌溶清，滴加柠檬酸水溶液(20ml)调节溶液PH至酸性，后加入乙酸丁酯(40ml)，搅拌溶清，分液，水相用乙酸丁酯(16ml)洗涤，合并有机相，后向有机相中加入甲苯(56ml)，室温搅拌析晶1-5h，析出固体过滤，50℃鼓风干燥得奥贝胆酸J晶型。收率86.72％，纯度99.92％。X-射线粉末衍射(XRD)图谱同附图1基本相同。结果表明本发明的晶型J收率较高，除杂效果较好，杂质个数少且单杂均小于0.05％，堆密度大，利于过滤，利于工业化生产。参考实施例1-4所制备的晶型与本发明晶型J纯度和收率对比如下：

实施例6无定型奥贝胆酸的制备

依次向反应器中加入按照实施例1的方法制备的奥贝胆酸晶型J(4.20g)、氢氧化钠(0.48g)、纯化水(63ml)，室温搅拌溶清，35±5℃条件下将该溶液缓慢滴加至稀盐酸溶液(0.2mol/L，72ml)，大量白色固体析出，过滤，50℃鼓风干燥得到奥贝胆酸无定形3.84g，收率91.43％，纯度为99.86％。其X-射线粉末衍射图谱如图3所示。

实施例7含水量测试

取按照实施例1方法获得的奥贝胆酸晶型J，真空干燥至恒重，按照K-F法测定含水量，其含水量为0.82％。

实施例8晶型水溶性考察

参考CN104781272A的方法，取对比实施例1-4及实施例5所得的各种晶型各200mg悬浮于低pH(HCl 0.1mol/L)的水(10ml)中，并在稍稍混合下置于25℃下一周以使之平衡。将饱和溶液过滤，根据溶解前后固体重量变化，计算溶液中化合物的浓度：

晶型	0.1mol/L HCl水溶液(7d)化合物浓度(μmol/L)
		本发明晶型J	10.31
原研晶型C	2.84
		厦门蔚扬和海乐景晶型I	8.17
苏州晶云晶型A	6.42
		丽珠医药晶型I	2.16

实施例9稳定性考察

取按照实施例1和实施例6方法获得的奥贝胆酸晶型J、无定型奥贝胆酸，将其分别放置在温度为50、60℃进行稳定性实验。其结果如下：

从稳定性来看，本发明所获得的晶型在50℃高温条件下，纯度几乎不变化，在60℃高温条件下，纯度变化也仅为0.06％，而无定型奥贝胆酸在高温条件下其有关物质快速增加(0.19％)。说明晶型J具有良好的稳定性，适合长期储存和大规模生产。

Claims (10)

1.一种奥贝胆酸的晶型J，其特征在于，其X射线粉末衍射图在2θ值为13.6°±0.2°处具有特征峰。

2.根据权利要求1所述的晶型J，其特征在于，其X射线粉末衍射图在2θ值为10.9°±0.2°、12.5°±0.2°、13.6°±0.2°、14.8°±0.2°、15.8°±0.2°处具有特征峰。

3.根据权利要求1所述的晶型J，其特征在于，其X射线粉末衍射图在2θ值为6.8°±0.2°、10.9°±0.2°、12.5°±0.2°、13.6°±0.2°、14.8°±0.2°、15.8°±0.2°、17.5°±0.2°、18.6°±0.2°处具有特征峰。

4.根据权利要求1所述的晶型J，其特征在于，其X射线粉末衍射图在2θ值为6.1°±0.2°、6.8°±0.2°、7.3°±0.2°、10.9°±0.2°、12.5°±0.2°、13.6°±0.2°、14.8°±0.2°、15.8°±0.2°、17.5°±0.2°、18.6°±0.2°处具有特征峰。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的晶型J，其特征在于，其X射线粉末衍射图基本与图1一致。

6.一种制备权利要求1-5中任一项所述的奥贝胆酸晶型J的方法，其特征在于：

1)向奥贝胆酸粗品中加入氢氧化钠、纯化水溶清后酸调节至pH为3-4；

2)向步骤1)溶液中加入乙酸正丁酯或二氯甲烷，搅拌溶清，分液；

3)向有机相中加入苯，搅拌析晶，过滤，干燥，既得。

7.一种权利要求1-5中任一项所述的奥贝胆酸晶型J的制备方法，其特征在于：

1)向原料3α-羟基-6α乙基-7-酮-5β胆烷-24酸中加入氢氧化钠、纯化水、乙醇溶清后加入硼氢化钠进行还原反应，反应完毕后酸调节至pH为3-4；

2)向步骤1)溶液中加入乙酸正丁酯或二氯甲烷，搅拌溶清，分液；

3)向有机相中加入苯，搅拌析晶，过滤，干燥，既得。

8.根据权利要求6或7所述的奥贝胆酸晶型J的制备方法，其特征在于，步骤3)中的苯为甲苯、乙苯或二甲苯，优选甲苯。

9.一种无定型奥贝胆酸的制备方法，其特征在于将奥贝胆酸晶型J转变为无定型奥贝胆酸。

10.根据权利要求9所述的无定型奥贝胆酸的制备方法，其特征在于包括将奥贝胆酸结晶J溶于氢氧化钠水溶液中并加入HCl的步骤。