CN109414452A - 作为促凝血剂的环糊精 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及取代的环糊精，其包含至少一个取代基‑S‑(Cn‑亚烷基)‑R，还涉及其药学上可接受的盐、药物组合物、试剂盒及其用作促凝血剂的用途。本发明进一步涉及所述环糊精在受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用的方法中的用途、在用于受试者中减少或防止出血的方法中的用途和用于治疗或预防凝血疾病的方法中的用途。

Description

作为促凝血剂的环糊精
技术领域
本发明涉及药物领域，特别涉及取代的环糊精及其作为促凝血剂的用途。
背景技术
血栓栓塞性疾病(例如心肌梗塞、中风和静脉血栓栓塞)是西方社会死亡和发病的最常见病因。这些血栓性事件可由凝血的过度激活触发，而凝血酶则在这些过程中起主要的作用。抗血栓形成治疗使用最广泛的药剂是肝素(包括低分子量肝素(heparin)，LMWH)和口服间接凝血酶抑制剂，例如维生素K拮抗剂(VKA)(华法林(warfarin)、醋硝香豆素(acenocoumarol)和苯丙香豆素(phenprocoumon))。但是，由于需要频繁监控并且期望更安全的抗凝血剂，因此开发了几种新型的非维生素K-依赖性的口服抗凝血剂(NOAC)。这些更新的药剂包括因子Xa抑制剂(例如利伐沙班(rivaroxaban)、阿哌沙班(apixaban)、依度沙班(edoxaban))，以及直接凝血酶抑制剂(达比加群(dabigatran))。与维生素K拮抗剂不同，这些新的抗凝血剂不需要常规(INR)监控并且具有有利的药理学特性。NOAC起作用很快，具有稳定的和可预测的与剂量相关的抗凝血作用，并且临床相关的药物相互作用很少。尽管这些治疗改进，但是抗凝血治疗一般而言会增加出血风险。
传统抗凝血剂(未分级的肝素(UFH)和维生素K拮抗剂(VKA))具有解毒剂来逆转其目标治疗作用。硫酸鱼精蛋白会在很大程度上逆转UHF的抗栓作用，但是存在一些潜在的严重副作用。维生素K通过恢复减少的维生素K-依赖性凝血因子的合成逆转被VKA削弱的凝血，但是存在缺点：需要12-24小时才会获得重要水平的这些因子来改进凝血。LMWH和磺达肝素两者都是肝素分子的进一步修饰，具有更有限的硫酸鱼精蛋白的逆转能力。磺达肝素仅具有抗-Xa活性，不会被硫酸鱼精蛋白逆转，达那肝素也是这种情况。另外，阿加曲班和比伐卢定(静脉内抗凝血剂)也没有逆转药剂，但是它们的半衰期很短，只有30-50分钟，其适应症有限，并且其用途通常持续时间较短。
最近的非维生素K-依赖性口服抗凝血剂是直接与其目标靶点(活化的因子II(IIa或凝血酶)或活化的因子X(Xa)结合并拮抗其活性的小分子。这些药物旨在长期供门诊病人用于与VKA相同的许多适应症。因此，这些药物不仅有数百万使用者，而且它们在使用者很大部分的生命中用于许多适应症。这导致个体在处于病患中的许多年都面临自发出血或者创伤或外科手术之后的出血的风险。目前只有一种抗-IIa抑制剂(达比加群)具有选择性解毒剂。尚未开发出针对其它NOAC(利伐沙班、依度沙班和阿哌沙班)的解毒剂。普遍共识是，NOAC缺乏逆转药剂是其更广泛使用的一个主要障碍，并且即使其半衰期短，但是如果能够在面对大出血或危及生命的出血时迅速逆转抗凝血无疑也将是有益的。逆转可能在用药过量的情况下或在准备紧急手术或紧急介入时也很重要。对于选择性的介入，逆转药剂还可在患者进行亚治疗从而准备介入时容许更短的间隔。
因此，服用抗凝血剂的患者在大出血、需要紧急手术、以及意外用药过量的情况下仍然需要安全、立即起效、并且易于施用的解毒剂。不管使用哪种类型的抗凝血疗法在紧急情况下均可使用的一般解毒剂相对于更具有选择性的解毒剂将特别具有优势，这是由于抗凝血疗法的准确类型通常是未知的，特别是在紧急情况下。优选的一般解毒剂还可另外用作出血性疾病的治疗中的促凝血剂。
发明内容
本发明的目的是提供具有促凝血作用的环糊精。优选地，环糊精在存在和不存在抗凝血剂的情况下均具有这种促凝血作用。本发明的另一个目的是提供用来在受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用和/或减少或防止出血和/或治疗或预防凝血疾病的方法。
因此本发明提供了根据式I的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，其包含至少一个取代基-S-(Cn亚烷基)-R，其中n为3-7，R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组。
式(I)
在根据本发明的优选的取代的环糊精中，p+q为6、7或8，其中p为5且q为1，或者p为6且q为1，或者p为7且q为1，或者p为0且q为6，或者p为0且q为7，或者p为0且q为8。
在根据本发明的优选的取代的环糊精中，S-(Cn亚烷基)-R为-S-(CH2)m-R，其中m为从3至7的整数。在根据本发明的优选的取代的环糊精中，R选自由-COOH和-OH组成的组。
在根据本发明的最优选的取代的环糊精中，p为0，q为8，m为5，并且R为COOH。
本发明进一步提供一种药物组合物，其包含根据本发明的取代的环糊精，以及至少一种药学上可接受的辅料。
在一个进一步的方面中，本发明提供一种试剂盒，其包含：
-根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，以及
-重组或分离的凝血因子。
在一个进一步的方面中，本发明提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐用作促凝血剂。
在一个进一步的方面，本发明提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，用于在受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用的方法中的用途。
在一个进一步的方面中，本发明提供一种用来在需要的受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用的方法，方法包括给已经施用过抗凝血剂的受试者施用治疗有效量的根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐。
在一个进一步的方面中，本发明提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，用于制备用作在受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用的药物。
在一个进一步的方面中，本发明提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，用于在受试者中减少或防止出血的方法中的用途。
还提供一种在需要的受试者中诱导或促进凝血的方法，其包括给受试者施用治疗有效量的根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐。
在一个进一步的方面中，本发明提供一种用来在需要的受试者中减少或防止出血的方法，方法包括给受试者施用治疗有效量的根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐。
在一个进一步的方面中，本发明提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，用于制备用来在受试者中减少或防止出血的药物。
在一个进一步的方面中，本发明提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，用于在治疗或预防凝血疾病的方法中的用途。
在一个进一步的方面中，本发明提供一种用来治疗或预防凝血疾病的方法，其包括给需要的受试者施用治疗有效量的根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐。
在一个进一步的方面中，本发明提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，用于制备用来治疗或预防凝血疾病的药物。
具体实施方式
本发明发明人确认了一组具有一个或多个特定的取代基的环糊精，其具有体外和体内促凝血作用。在以前并不知道环糊精的这种促凝血作用。尤其确定了环糊精对凝血酶的产生的几个参数的影响。凝血酶的产生是血凝过程中的数个最终阶段之一，因此在评估化合物对凝血过程的作用时是一个特别重要的参数。在本发明的环糊精的存在下凝血酶的产生的滞后时间的减少、凝血酶峰值水平的增加、达到凝血酶峰值水平的时间的减少或其组合证明环糊精的促凝血活性。另外，促进血液凝块的形成证明环糊精具有体内促凝血活性。如各实施例所示，本文的环糊精能够至少部分逆转广泛的抗凝血剂的抗凝血作用。进一步显示本文的特定环糊精会在收集的正常血浆中发挥促凝血作用，即它们会在不存在抗凝血剂或缺乏凝血因子的情况下影响正常的血凝。此外，本文的环糊精在缺乏血凝因子的血浆中具有促凝血作用。
如本文描述的用作促凝血剂的环糊精与使用已知的促凝血剂相比具有许多优势。例如，环糊精具有它们可用来逆转范围广泛的抗凝血剂的抗凝血作用的优点。直接用作口服抗凝血剂(例如因子Xa抑制剂，例如利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班)和直接凝血酶抑制剂(例如达比加群)、戊多糖(例如磺达肝素)、低分子量肝素(例如那屈肝素和亭扎肝素)、未分级的肝素以及维生素K拮抗剂的抗凝血活性会被本文的环糊精逆转。相反，目前已知的许多促凝血剂对于一种抗凝血剂或一类抗凝血剂是特异性的。因此，本发明的环糊精可用来在不需要首先确定特定的抗凝血剂的情况下逆转抗凝血作用，这是由于在紧急情况下这经常是未知的。不管使用哪种类型的抗凝血疗法均可使用的一般促凝血剂在紧急情况下相对于更具有选择性的解毒剂而言是优选的。
另外，本发明的环糊精能够逆转目前无逆转药剂可用的化合物(例如阿加曲班、比伐卢定、利伐沙班、依度沙班和阿哌沙班)的抗凝血作用。
另外，本发明的环糊精理论上会在施用之后迅速发挥其促凝血活性，例如在数分钟内，这与许多已知的特定促凝血剂不同，例如维生素K，其只有在12-24小时之后才能逆转维生素K拮抗剂的抗凝血作用。但是，环糊精的半衰期取决于其亲水性。因此，通常引入更具有亲水性的基团或者引入更多的亲水性基团可能会影响本发明的环糊精的半衰期。这会增加环糊精的半衰期。这样，可对环糊精进行修饰以便针对目标应用具有最佳的半衰期。
除了以上之外，环糊精还广泛用于食品和药物组合物中。它们的副作用很少。例如，与蛋白质类促凝血剂(例如重组凝血因子，其目前用来治疗缺乏这种凝血因子的患者)相比，在给人施用时环糊精的免疫原性更低。
因此本发明提供一种取代的环糊精或其药学上可接受的盐，其包含至少一个取代基-S-(Cn亚烷基)-R，其中n为1或者从3至10的整数，R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组。n优选为从3至7的整数。
本发明进一步提供一种取代的环糊精或其药学上可接受的盐，用作促凝血剂的用途，取代的环糊精包含至少一个取代基-S-(Cn亚烷基)-R，其中n为1或者从3至10的整数，优选为3-7，R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组。
包含至少一个取代基-S-(Cn亚烷基)-R，其中n为1或者从3至10的整数，优选为3-7，R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组的取代的环糊精在本文中还称作“根据本发明的取代的环糊精”。
环糊精是一类环状低聚醣。环糊精由1->4连接的6个或更多个α-D-吡喃葡萄糖苷单元组成(参见图1a)。含有6个、7个和8个糖单元的环糊精分别称作α-环糊精(α-CD)、β-环糊精(β-CD)和γ-环糊精(γ-CD)。环糊精含有一个有些亲脂性的中央空腔和一个亲水性的外表面。它们用于食品、药物和化学工业，并用于递送药物。可将一个或多个-OH基团取代以提供范围广泛的环糊精衍生物或取代的环糊精。
如本文所使用，术语“环糊精”是指一种环状低聚醣基团，其由通过α-(1,4)糖苷键连接的6个或更多个-D-吡喃葡萄糖苷单元组成。如本文所使用的术语“取代的环糊精”是指被至少一个取代基-S-(Cn亚烷基)-R取代的环糊精基团，其中n和R如本文所定义。这种取代的环糊精还称作环糊精衍生物。优选地，位于环糊精基团的第一表面(参见图1b)上的一个或多个-OH基团被-O-S-(Cn亚烷基)-R基团替代，其中n和R如本文所定义。环糊精基团不含任何更多的取代基。
根据本发明的或者根据本发明使用的取代的环糊精优选包含6-10个吡喃葡萄糖苷单元，更优选包含6-8个单元。因此，取代的环糊精优选包含α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精或其混合物。一种或多种取代的α-环糊精、一种或多种取代的β-环糊精和/或一种或多种取代的γ-环糊精的混合物是更优选的。因此，取代的环糊精更优选包含α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精或其混合物。
取代的环糊精优选基本上不包括络合化合物，即与环糊精形成络合物并位于环糊精的亲脂性中央空腔内的化合物。
根据本发明的或者根据本发明使用的取代的环糊精包含至少一个取代基-S-(Cn亚烷基)-R，其中n为1或者从3至10的整数，R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组。n优选为从3至7的整数。各取代优选通过将位于吡喃葡萄糖单元的第一表面(参见图1b)的伯羟基取代进行。
根据本发明的或者用于根据本发明的用途的取代的环糊精优选具有式(I)：
其中n为1或者从3至10的整数，n优选为从3至7的整数，p为从0至7的整数，q为从1至8的整数，条件是p+q为6、7或8。p+q优选为7或8。
如本文所使用，术语“-Cn亚烷基-”是指具有n个碳原子的支链或非支链的饱和亚烷基基团。例如，其中n为4的Cn亚烷基可以是以下：-(CH2)4-、-C(CH3)2-CH2-、-CHCH3-(CH2)2-。在取代基-S-(Cn亚烷基)-R中，n优选为从3至10、更优选从3至9、更优选从3至8、更优选从3至7、或从3至5的整数。在特别优选的取代的环糊精中，n为从3至7的整数。所述取代基-S-(Cn亚烷基)-R优选为-S-(CH2)m-R，其中m为1或者从3至10的整数，并且-(CH2)m-基团任选地被1至3个CH3基团取代，条件是碳原子总数不超过10。在一个更优选的实施例中，m为从3至10、更优选从3至9、更优选从3至8、更优选从3至7、更优选从3至5的整数，并且-(CH2)m-基团任选地被1至3个CH3基团取代，条件是碳原子总数不超过10。碳原子总数优选不超过8，更优选不超过7，更优选不超过6，更优选不超过5。在一个特别优选的实施例中，-(CH2)m-基团是未取代的。
因此，根据本发明的或者根据本发明使用的取代的环糊精优选具有式(II)：
其中m为1或者从3至10的整数，m优选为从3至7的整数，-(CH2)m-基团任选地被1至3个CH3基团取代，条件是碳原子总数不超过10，p为从0至7的整数且q为从1至8的整数，条件是p+q为6、7或8。优选地，p+q为7或8。在一个特别优选的实施例中，-(CH2)m-基团是未取代的，m为从3至7、更优选为从3至5的整数。
根据本发明的或者根据本发明使用的取代的环糊精包含至少一个取代基-S-(Cn亚烷基)-R。在一个优选实施例中，取代的α-环糊精包含1至6个这种取代基，取代的β-环糊精包含1至7个这种取代基，和/或取代的γ-环糊精包含1至8个这种取代基。在一个特别优选的实施例中，根据本发明的或者根据本发明使用的取代的环糊精，优选α-环糊精、β-环糊精和/或γ-环糊精，是单取代的或全取代的环糊精。
如本文所使用，术语“单取代的环糊精”是指包含一个如本文所定义的取代基-S-(Cn亚烷基)-R或-S-(CH2)m-R的环糊精。在根据式(I)或式(II)的单取代的α-环糊精中，p为5且q为1。在根据式(I)或式(II)的单取代的β-环糊精中，p为6且q为1。在根据式(I)或式(II)的单取代的γ-环糊精中，p为7且q为1。
如本文所使用，术语“全取代的环糊精”是指其中所有伯羟基均被如本文所定义的取代基-S-(Cn亚烷基)-R或-S-(CH2)m-R取代的环糊精。因此，全取代的α-环糊精含有6个如本文所定义的取代基-S-(Cn亚烷基)-R或-S-(CH2)m-R，全取代的β-环糊精含有7个如本文所定义的取代基-S-(Cn亚烷基)-R或-S-(CH2)m-R，全取代的γ-环糊精含有8个如本文所定义的取代基-S-(Cn亚烷基)-R或-S-(CH2)m-R。在根据式(I)或式(II)的全取代的α-环糊精中，p为0且q为6。在根据式(I)或式(II)的全取代的β-环糊精中，p为0且q为7。在根据式(I)或式(II)的全取代的γ-环糊精中，p为0且q为8。
因此，在式(I)和式(II)中，p+q优选为7，其中p为0且q为7，或者p为6且q为1；或者p+q为8，其中p为0且q为8，或者p为7且q为1。
在取代基-S-(Cn亚烷基)-R和取代基-S-(CH2)m-R中，其中n和m如本文所定义，R选自由COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组。最优选地，R选自由COOH和OH组成的组。
根据本发明的或者用于根据本发明的用途的特别优选的取代的环糊精是式(I)环糊精，其中：
-p为从0至7的整数且q为从1至8的整数，条件是p+q为7或8；
-n为1或者从3至10的整数，n优选为从3至7的整数，更优选为从3至5的整数；并且
-R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组，更优选选自由-COOH和-OH组成的组，
或其药学上可接受的盐。
根据本发明的或者用于根据本发明的用途的更优选的取代的环糊精是式(I)环糊精，其中：
-p+q为7，其中p为0且q为7，或者p为6且q为1；或者p+q为8，其中p为0且q为8，或者p为7且q为1；
-n为1或者从3至10的整数，n优选为从3至7的整数，更优选为从3至5的整数；并且
-R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组，更优选选自由-COOH和-OH组成的组，
或其药学上可接受的盐。
根据本发明的或者用于根据本发明的用途的更优选的取代的环糊精是式(II)环糊精，其中：
-p+q为7，其中p为0且q为7；或者p为6且q为1；或者p+q为8，其中p为0且q为8，或者p为7且q为1；
-m为从3至7的整数，优选为从3至5的整数；
--(CH2)m-基团任选地被1至3个CH3基团取代，其中-(CH2)m-基团优选是未取代的；并且
-R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组，更优选选自由-COOH和-OH组成的组，
或其药学上可接受的盐。
根据本发明的或者用于根据本发明的用途的更优选的取代的环糊精是式(II)环糊精，其中：
-p+q为7，其中p为0且q为7，或者p为6且q为1；或者p+q为8，其中p为0且q为8，或者p为7且q为1；
-m为从3至7、优选从3至5的整数；
--(CH2)m-基团是未取代的；并且
-R选自由-COOH和-OH组成的组，
或其药学上可接受的盐。
根据本发明的或者用于根据本发明的用途的更优选的取代的环糊精是式(II)环糊精，其中：
-p+q为7，其中p为0且q为7；
--(CH2)m-基团是未取代的；
-m为3或4，优选为3；并且
-R选自由-COOH和-OH组成的组，R优选为COOH，
或其药学上可接受的盐。
根据本发明的或者用于根据本发明的用途的更优选的取代的环糊精是式(II)环糊精，其中：
-p+q为7，其中p为6且q为1；
--(CH2)m-基团是未取代的；
-m为从3至7的整数，优选为从3至5的整数，更优选为从3至5的整数，m更优选为5；并且
-R选自由-COOH和-OH组成的组，R优选为COOH，
或其药学上可接受的盐。
根据本发明的或者用于根据本发明的用途的更优选的取代的环糊精是式(II)环糊精，其中：
-p+q为8，其中p为0且q为8；
--(CH2)m-基团是未取代的；
-m为从3至7的整数，优选为从3至5的整数，更优选为3或5；并且
-R选自由-COOH和-OH组成的组，R优选为COOH，
或其药学上可接受的盐或酯。
根据本发明的或者用于根据本发明的用途的更优选的取代的环糊精是式(II)环糊精，其中：
-p+q为8，其中p为7，q为1；
--(CH2)m-基团是未取代的；
-m为从3至7的整数，优选为从3至5的整数，更优选为3或5；并且
-R选自由-COOH和-OH组成的组，R优选为COOH，
或其药学上可接受的盐或酯。
根据本发明的和/或根据本发明的用途的特别优选的取代的环糊精是式(II)环糊精，其中：
-p为0，q为7，m为3且R为COOH；
-p为7，q为1，m为3且R为COOH；
-p为0，q为8，m为3且R为COOH；
-p为6，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为7，m为5且R为COOH；
-p为7，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为8，m为5且R为COOH；
-p为0，q为8，m为3且R为OH；
-p为0，q为8，m为4且R为COOH；
-p为0，q为8，m为6且R为COOH；
-p为0，q为8，m为4且R为OH；
-p为0，q为7，m为4且R为COOH；
-p为0，q为7，m为6且R为COOH；
-p为0，q为7，m为7且R为COOH；
-p为0，q为7，m为3且R为OH；
-p为5，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为6，m为5且R为COOH；
-p为6，q为1，m为6且R为COOH；
-p为6，q为1，m为4且R为OH；
-p为7，q为1，m为6且R为COOH；或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH，或者任何这些取代的环糊精药学上可接受的盐或酯。在一个优选实施例中，取代的环糊精不是6-全脱氧-6-全(5-羧基戊基)硫代-γ-环糊精钠盐、6-全脱氧-6-全3-羧基丙基)硫代-γ-环糊精钠盐或6-全脱氧-6-全(3-羧基丙基)硫代-β-环糊精钠盐。在另一个更优选的实施例中，药学上可接受的盐不是钠盐。
更优选地，根据本发明的或者用于根据本发明的用途的取代的环糊精是式(II)环糊精，其中：
-p为0，q为8，m为5且R为COOH，
-p为0，q为8，m为4且R为COOH，
-p为0，q为8，m为6且R为COOH，
-p为0，q为8，m为4且R为OH，
-p为0，q为8，m为3且R为COOH
-p为0，q为7，m为7且R为COOH，
-p为0，q为7，m为3且R为OH，
-p为0，q为6，m为5且R为COOH，
-p为6，q为1，m为6且R为COOH，
-p为6，q为1，m为4且R为OH，或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH，
或者任何这些取代的环糊精药学上可接受的盐或酯。在一个优选实施例中，取代的环糊精不是6-全脱氧-6-全(5-羧基戊基)硫代-γ-环糊精钠盐或6-全脱氧-6-全3-羧基丙基)硫代-γ-环糊精钠盐。在另一个更优选的实施例中，药学上可接受的盐不是钠盐。
在一个更优选的实施例中，根据本发明的或者用于根据本发明的用途的取代的环糊精是环糊精，其中：
-p为0，q为8，m为5且R为COOH，
-p为0，q为6，m为5且R为COOH，
-p为6，q为1，m为6且R为COOH，
-p为7，q为1，m为3且R为COOH，
-p为6，q为1，m为6且R为COOH，
-p为6，q为1，m为4且R为OH，或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH，
或者任何这些取代的环糊精药学上可接受的盐或酯。在一个优选实施例中，取代的环糊精不是6-全脱氧-6-全(5-羧基戊基)硫代-γ-环糊精钠盐或6-全脱氧-6-全3-羧基丙基)硫代-γ-环糊精钠盐。在另一个更优选的实施例中，药学上可接受的盐不是钠盐。
在另一个更优选的实施例中，根据本发明的或者用于根据本发明的用途的取代的环糊精是环糊精，其中：
-p为0，q为6，m为5且R为COOH，
-p为6，q为1，m为6且R为COOH，
-p为7，q为1，m为3且R为COOH，
-p为6，q为1，m为6且R为COOH，
-p为6，q为1，m为4且R为OH，或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH，
或者任何这些取代的环糊精药学上可接受的盐或酯。
根据本发明的或者用于根据本发明的用途的特别优选的取代的环糊精是其中p为0、q为8、m为5且R为COOH的式(II)环糊精或其酯，优选为其中p为0、q为8、m为5且R为COOH的式(II)环糊精。根据本发明的或者根据本发明使用的另一种特别优选的环糊精为其中p为0、q为6、m为5且R为COOH的式(II)环糊精或其药学上可接受的盐或酯，优选为其中p为0、q为6、m为5且R为COOH的式(II)环糊精。
还提供根据本发明的取代的环糊精的盐。这种盐可在本发明的方法和用途中用作促凝血剂。这种盐包括(但不限于)加酸盐和加碱盐。如本文所使用的术语“药学上可接受的盐”是指会保留取代的环糊精的药理学活性的那些盐，其在合理的医疗判断范围内，适合用于人类或动物而不会产生过度的毒性、刺激、过敏反应等，并且与合理的益处/风险比相称。药学上可接受的盐在本领域中是众所周知的。它们可在分离和纯化本发明的取代的环糊精时原位制备，或者通过将其与药学上可接受的非毒性的碱或酸(包括无机碱或有机碱以及无机酸或有机酸)反应(例如通过在不溶解盐的溶剂或介质中，或者在像水这样的溶剂中或者在随后通过真空除去或者通过冷冻干燥除去的有机溶剂中，将游离酸或游离碱形式的产物与一个或多个当量的适当的酸或碱反应)单独制备，或者通过在合适的离子交换树脂上将存在的盐的阳离子与另一种阳离子交换制备。药学上可接受的酸和碱的实施例包括：有机酸和无机酸，例如醋酸、丙酸、乳酸、乙醇酸、草酸、丙酮酸、丁二酸、马来酸、丙二酸、三氟乙酸、肉桂酸、硫酸、氢氯酸、氢溴酸、硝酸、高氯酸和磷酸；以及碱，例如乙胺、甲胺、二甲胺、三乙胺、异丙基胺、二异丙基胺以及其它单烷基胺、二烷基胺和三烷基胺，以及芳基胺；以及钠盐、钾盐和锂盐。
还提供根据本发明的取代的环糊精的酯。这种酯可在本发明的方法和用途中用作促凝血剂。含有酯基或酯键的化合物作为含有羧酸的化合物的前药而众所周知。这种酯在给患者施用之后通过体内酯酶活化。这种酯优选为如本文所定义的环糊精，其中R为-COO(1-4C)烷基，优选为-COO(1-2C)烷基。
还提供一种药物组合物，其包含根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯和至少一种药学上可接受的辅料。药学上可接受的辅料的实施例包括药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂。通过“药学上可接受的”意思是辅料、载体、稀释剂或赋形剂必须与制剂的其它成分相容，并且对其接受者是无害的。一般而言，不会干扰活性化合物的功能的任何药学上合适的添加剂均可使用。根据本发明的药物组合物优选适合人类使用。合适的载体的实施例包含溶液、乳糖、淀粉、纤维素衍生物等、或其混合物。在一个优选的实施例中，合适的载体是一个溶液，例如盐水。为了制备剂量单元，例如片剂，考虑使用常规添加剂，例如填料、色料、聚合粘合剂等。片剂、胶囊等中可使用的赋形剂的实施例如下：粘合剂，例如龙胶，阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；赋形剂，例如微晶纤维素；崩解剂，例如玉米淀粉、预糊化淀粉、海藻酸等；润滑剂，例如硬脂酸镁；甜味剂，例如蔗糖、乳糖或糖精；调味剂，例如薄荷、冬青油或樱桃。用于静脉内施用的组合物可以是(例如)溶液，其包含无菌等渗含水缓冲液中的本发明抗体。静脉内组合物可包括(例如)增溶剂、稳定剂和/或缓解注射部位疼痛的外用麻醉剂。
在一个实施例中，根据本发明的药物组合物被配制为用于全身给药，优选用于肠胃外给药，包括(但不限于)静脉内给药、肌内给药和皮下给药，或者用于口服给药，包括(但不限于)片剂、胶囊、液体剂、乳剂、悬浮剂。
根据本发明的药物组合物优选适合外用给药，适合外用(局部)治疗出血。因此药物组合物优选被配制为用于外用给药，优选配制为凝胶(gel)、霜剂(cream)、油膏(ointment)、喷剂(spray)、漱口剂(mouth wash)、滴眼剂(eye drop)、敷料(dressing)、压片(compress)、膏药(plaster)、急救带(band-aid)或贴剂(patch)。这种外用制剂特别适合用来治疗伤口和/或局部(大)出血。
进一步提供一种试剂盒，其包含：
-根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯，以及
-重组或分离的凝血因子。
术语“分离的重组凝血因子”是指重组产生的或从血液或血浆分离的凝血。优选(但不限于)的凝血因子是因子V、因子VII、因子VIII、因子IX、因子X、因子XI、因子XIII、α2-抗血纤维蛋白溶酶、血管性血友病因子(von Willebrand factor)。因子VIII和因子IX是特别优选的。优选地，根据本发明的试剂盒中存在的凝血因子是重组凝血因子。
这种试剂盒特别适合提供联合治疗，用来治疗缺乏凝血因子的患者，例如患有A型血友病、B型血友病，血管性血友病或C型血友病的患者。使用这种试剂盒具有治疗这种患者需要的分离或重组的凝血因子更少的优点。
在一个优选实施例中，根据本发明的试剂盒包含因子VIII作为重组或分离的凝血因子，并包含选自由式(II)环糊精组成的组的取代的环糊精，其中：
-p为0，q为8，m为5且R为COOH，
-p为0，q为8，m为4且R为COOH，
-p为0，q为8，m为6且R为COOH，
-p为0，q为8，m为4且R为OH，
-p为0，q为7，m为7且R为COOH，
-p为0，q为7，m为3且R为OH，
-p为0，q为6，m为5且R为COOH，
-p为6，q为1，m为6且R为COOH，
-p为6，q为1，m为4且R为OH，或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH，
或其药学上可接受的盐或酯。
在另一个优选的实施例中，根据本发明的试剂盒包含因子IX作为重组或分离的凝血因子，并包含选自由式(II)环糊精组成的组的取代的环糊精，其中：
-p为0，q为8，m为5且R为COOH，
-p为0，q为8，m为6且R为COOH，
-p为0，q为8，m为4且R为OH，
-p为0，q为7，m为7且R为COOH，
-p为0，q为7，m为3且R为OH，
-p为6，q为1，m为6且R为COOH，
-p为6，q为1，m为4且R为OH，或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH，
或其药学上可接受的盐或酯。
在另一个优选的实施例中，根据本发明的试剂盒包含因子XI作为重组或分离的凝血因子，并且取代的环糊精为式(II)环糊精或其药学上可接受的盐或酯，其中p为0，q为8，m为5且R为COOH。
在本发明的一个实施例中，提供包含一个或多个包装盒的试剂盒，容器装有根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯以及重组或分离的凝血因子。这种包装盒可包含各种书面材料，例如使用说明书，或者管理药物产品的制造、使用或销售的政府机构规定形式的简介，其反应该机构批准制造、使用或销售用于人类或兽医给药。优选地，根据本发明的试剂盒包含使用说明书。
如本文所使用，术语“凝血”是指纤维蛋白单体的聚合过程，形成血液凝块，其中血液或血浆从液体变为凝胶相。如本文所使用，术语“用作促凝血剂”是指引发或加速形成血液凝块的过程。可使用本领域已知的任何方法来确定如本文的取代的环糊精的促凝血作用，例如测量凝血酶的产生和/或在血浆或血液样品中形成血液凝块之前的时间长度。本文的实施例中描述了一种特别合适的方法用来测量凝血酶的产生。简而言之，向正常血浆中引入环糊精和任选的抗凝血剂。凝血在存在例如重组人类组织因子和荧光底物Z-Gly-Gly-Arg-AMC的情况下通过复钙作用触发。可通过计算凝血酶形成的滞后时间、凝血酶峰值、速度指数和曲线下的面积对荧光进行监控和跟踪。
还提供取代的环糊精或其药学上可接受的盐用作促凝血剂的用途，环糊精包含至少一个取代基-S-(Cn亚烷基)-R，其中n为从3至10、优选3至7的整数，并且R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组。还提供一种用来促进凝血的方法，其包含给需要的受试者施用治疗有效量的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，环糊精包含至少一个取代基-S-(Cn亚烷基)-R，其中n为从3至10的整数，R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组。还提供一种在需要的受试者中诱导或促进凝血的方法，其包含给受试者施用治疗有效量的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，环糊精包含至少一个取代基-S-(Cn亚烷基)-R，其中n为从3至10的整数，R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组。
本文描述的环糊精特别适合逆转抗凝血剂的抗凝血作用，即作为抗凝血剂的解毒剂。如各实施例所示，取代的环糊精能够逆转所测试的所有抗凝血剂的抗凝血活性。因此提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯用于用来在受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用的方法。还提供一种用来在需要的受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用的方法，方法包括给已经施用过抗凝血剂的受试者施用治疗有效量的根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯。进一步提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯用来制备用来在受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用的药物。
如本文所使用的术语“抗凝血剂”是指能够预防或延迟体外和/或体内形成血液凝块的药剂或化合物。
如本文所使用，术语“逆转抗凝血剂的抗凝血作用”是指降低抗凝血剂预防或延迟形成血液凝块的能力。因此，抗凝血剂的抗凝血作用至少被部分逆转。特别地，该术语是指与在存在抗凝血剂但不存在取代的环糊精的情况下引发血液凝块的形成的时间或者血液凝块的强度相比在既存在如本文的取代的环糊精又存在抗凝血剂的情况下会缩短引发血液凝块的形成的时间或者增加血液凝块的强度。可使用本领域已知的任何方法来确定如本文的取代的环糊精的促凝血作用，例如测量血浆或血液样品中或体内出血模型中凝血酶的产生、血液凝块的强度和/或形成凝块之前的时间长度。在各实施例中和以上描述了一种合适的凝血酶的形成的化验。在各实施例中还描述了一种合适的体内出血化验。简而言之，通过用针刺入接着进行切割将被麻醉的小鼠的后肢大隐静脉横切。慢慢将血吸走直到止血发生。然后将凝块移去，再次将血吸走直到止血，重复30分钟。可评估的参数是止血在30分钟内发生的次数和每次止血需要的时间。
由于根据本发明的环糊精针对所测试的所有抗凝血剂均具有可证实的活性，因此抗凝血剂可以是本领域已知的任何抗凝血剂。在一个优选实施例中，抗凝血剂选自由以下组成的组：
-直接凝血酶抑制剂，例如达比加群(dabigatran)、水蛭素(hirudin)、比伐卢定(bivalirudin)、来匹卢定(lepirudin)或阿加曲班(argatroban)，
-直接因子Xa抑制剂，例如利伐沙班(rivaroxaban)、阿哌沙班(apixaban)、依度沙班(edoxaban)、贝曲西班(betrixaban)、达瑞沙班(darexaban)、letaxaban或eribaxaban，
-戊多糖，例如磺达肝素(fondaparinux)或艾卓肝素(idraparinux)，
-低分子量肝素，例如那屈肝素(nadroparin)、亭扎肝素(tinzaparin)、达肝素(dalteparin)、依诺肝素(enoxaparin)、贝米肝素(bemiparin)、瑞维肝素(reviparin)、帕肝素(parnaparin)或舍托肝素(certoparin)，
-未分级的肝素(unfractionated heparin)，
-维生素K拮抗剂，例如醋硝香豆素(acenocoumarol)、苯丙香豆素(phenprocoumon)、华法林(warfarin)、裂盒蕈色素(atromentin)或苯茚二酮(phenindione)，以及
-抗血小板药，例如不可逆环氧酶抑制剂(例如阿司匹林或其衍生物或三氟醋柳酸(triflusal))、ADP受体抑制剂(例如氯吡格雷(clopidogrel)、普拉格雷(prasugrel)、替格雷洛(ticagrelor)、噻氯吡啶(ticlopedine)、坎格雷洛(cangrelor)或依利格雷(elinogrel))、磷酸二酯酶抑制剂(phosphodiesterase inhibitor)(例如西洛他唑(cilostazol))、PAR-1拮抗剂(例如沃拉帕沙(voraxapar))、GPIIB/IIIa抑制剂(例如阿昔单抗(abciximab)、依替巴肽(eptifibatide)、替罗非班(tirofiban)、罗西非班(roxifiban)或奥波非班(orbofiban))、腺苷再吸收抑制剂(adenosine reuptakeinhibitor)(例如潘生丁(dipyridamole))、血栓素抑制剂(thromboxane inhibitor)(例如伊非曲班(ifetroban)或匹考他胺(picotamide))或血栓素受体拮抗剂(thromboxanereceptor antagonist)(例如特鲁曲班(terutroban)或匹考他胺(picotamide))。
注意该列表不是穷举性的，属于所列抗凝血剂类别的许多其它抗凝血剂对于本领域技术人员而言是已知的。它们的抗凝血作用也可以使用本发明的取代的环糊精逆转。在本发明的一个特定实施例中，抗凝血剂选自由以下组成的组：达比加群、利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班、磺达肝素、那屈肝素、亭扎肝素、未分级的肝素、水蛭素、比伐卢定和维生素K拮抗剂。在一个优选的实施例中，抗凝血剂选自由以下组成的组：达比加群、利伐沙班、阿哌沙班和依度沙班。
在一个优选实施例中，根据本发明的用于在受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用的取代的环糊精选自由以下组成的组：OKL-1105、OKL-1106、OKL-1107、OKL-1108、OKL-1109、OKL-1110、OKL-1111、OKL-1146、OKL-1171、OKL-1172、OKL-1174、OKL-1178、OKL-1180、OKL-1181、OKL-1186、OKL-1187、OKL-1188、OKL-1189、OKL-1190、OKL-1191(其结构在表1中给出)、及其组合，更优选选自由以下组成的组：OKL-1105、OKL-1106、OKL-1107、OKL-1108、OKL-1110、OKL-1111、OKL-1146、OKL-1171、OKL-1172、OKL-1174、OKL-1178、OKL-1180、OKL-1181、OKL-1186、OKL-1187、OKL-1188、OKL-1189、OKL-1190、OKL-1191及其组合。在一个特别优选的实施例中，根据本发明用来在受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用的取代的环糊精为OKL-1111(一种式(II)全取代的γ-环糊精，其中取代基为-S-(CH2)5-COOH)或其药学上可接受的盐或酯，或者OKL-1187(一种式(II)全取代的α-环糊精，其中取代基为-S-(CH2)5-COOH)或其药学上可接受的盐或酯。
特定的抗凝血剂的作用是否可被本发明特定的取代的环糊精逆转可由技术人员容易地评估，例如通过进行如本文实施例中的凝血化验进行评估。在这种化验中，含有抗凝血剂的正常人类血浆在存在和不不存在取代的环糊精的情况下进行孵育，并确定如本文的一个或多个参数(凝血酶形成的滞后时间、凝血酶峰值、速度指数和曲线下的面积)，以评估取代的环糊精是否能够在特定的血浆样品中逆转抗凝血作用。
实施例进一步显示，本发明的环糊精在缺乏凝血因子之一的患者血浆中具有促凝血作用。因此本发明的环糊精进一步特别适合拮抗凝血疾病，即适合作为促止血剂。因此提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯用于用来治疗或预防凝血疾病的方法。还提供一种用来治疗或预防凝血疾病的方法，其包含给需要的受试者施用治疗有效量的根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯。还提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯用来制备用来治疗或预防凝血疾病的药物。
如本文所使用，术语“凝血疾病”是指一种导致止血系统和/或凝血系统异常的疾病。这种疾病的特征通常在于易于出血。众所周知的凝血疾病的实施例包括：A型血友病，其特征在于缺乏凝血因子VIII(FVIII)；B型血友病，其特征在于缺乏凝血因子IX(FIX)；C型血友病，其特征在于缺乏凝血因子XI(FXI)。一种特定的凝血疾病是否可以使用本发明特定的取代的环糊精治疗可由技术人员容易地评估，例如通过进行如本文各实施例中的凝血化验进行评估。在这种化验中，一个或多个患有凝血疾病的患者的血浆在存在和不存在取代的环糊精的情况下进行孵育，并确定如本文的一个或多个参数(凝血酶形成的滞后时间、凝血酶峰值、速度指数和曲线下的面积)，以评估取代的环糊精在特定的血浆样品中是否具有促凝血作用。优选(但不限于)的凝血疾病的实施例是先天性或者获得性的A型血友病、B型血友病、C型血友病、血管性血友病、凝血因子缺乏症(例如缺乏因子V、缺乏因子VII并/或缺乏因子X)、因子XIII或α2-抗血纤维蛋白溶酶缺乏症、遗传的或者药物引起的血小板减少症(包括免疫性血小板减少性紫癜、血栓性血小板减少性紫癜、胎儿或新生儿同种免疫血小板减少症和输血后血小板减少性紫癜、欧德里症候群、血小板无力症、巨血小板综合症、特发性致密颗粒疾病、Hermansky-Pudlak综合征、Chediak-Higashi综合征、灰色血小板综合征、Paris-Trousseau血小板减少症/Jacobsen综合征)、弥散性血管内凝血和维生素K缺乏症(包括新生儿维生素K缺乏症)。在本发明的一个优选的实施例中，凝血疾病选自由疾病组成的组。在一个更优选的实施例中，疾病为凝血因子缺乏症，特别是缺乏选自由以下组成的组的凝血因子：因子V、因子VII、因子VIII、因子IX、因子X、因子XI、因子XIII和α2-抗血纤维蛋白溶酶。根据本发明治疗或预防的特别优选的疾病选自由以下组成的组：A型血友病、B型血友病和C型血友病。
在一个优选实施例中，根据本发明用来治疗或预防凝血疾病(优选为A型血友病、B型血友病或C型血友病)的取代的环糊精选自由以下组成的组：OKL-1111、OKL-1171、OKL-1172、OKL-1174、OKL-1180、OKL-1181、OKL-1187、OKL-1188、OKL-1189、OKL-1191，优选选自由以下组成的组：OKL-1111、OKL-1172、OKL-1180、OKL-1187、OKL-1188、OKL-1189和OKL-1191，优选选自由以下组成的组：OKL-1111、OKL-1180和OKL-1187，其结构在表1中示出，以及它们的组合。在一个更优选的实施例中，根据本发明用来治疗或预防凝血疾病(优选为A型血友病，B型血友病或C型血友病)的取代的环糊精为式(II)取代的环糊精，其中m为从5至10的整数，更优选为5至7的整数，更优选为5，p为0且q为7或8。在一个特别优选的实施例中，根据本发明用来治疗或预防凝血疾病(优选为A型血友病、B型血友病或C型血友病)的取代的环糊精选自由以下组成的组：OKL-1111、OKL-1172、OKL-1180、OKL-1187、OKL-1188、OKL-1189、OKL1191、或其混合物，优选为OKL-1111(一种式(II)全取代的γ-环糊精，其中取代基为-S-(CH2)5-COOH)或其药学上可接受的盐或酯。
在一个优选的实施例中，凝血疾病为A型血友病，取代的环糊精为式(II)环糊精，其中：
-p为0，q为8，m为5且R为COOH，
-p为0，q为8，m为4且R为COOH，
-p为0，q为8，m为6且R为COOH，
-p为0，q为8，m为4且R为OH，
-p为0，q为7，m为7且R为COOH，
-p为0，q为7，m为3且R为OH，
-p为0，q为6，m为5且R为COOH，
-p为6，q为1，m为6且R为COOH，
-p为6，q为1，m为4且R为OH，或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH，
或者这些取代的环糊精的任一种的药学上可接受的盐或酯。
在另一个优选的实施例中，凝血疾病为B型血友病，取代的环糊精为式(II)环糊精，其中：
-p为0，q为8，m为5且R为COOH，
-p为0，q为8，m为6且R为COOH，
-p为0，q为8，m为4且R为OH，
-p为0，q为7，m为7且R为COOH，
-p为0，q为7，m为3且R为OH，
-p为6，q为1，m为6且R为COOH，
-p为6，q为1，m为4且R为OH，或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH，
或者这些取代的环糊精的任一种的药学上可接受的盐或酯。
在另一个优选的实施例中，凝血疾病为C型血友病，取代的环糊精为式(II)环糊精，其中p为0，q为8，m为5且R为COOH，或其药学上可接受的盐或酯。
实施例进一步显示，本发明的环糊精在正常血浆中在存在和不存在抗凝血剂的情况下均具有促凝血作用。因此，本发明的环糊精还特别适合在受试者中减少或防止出血，即在出血情况下用作促止血剂，不管出血的原因是什么。因此进一步提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯用于用来在受试者中减少或防止出血的方法。还提供一种用来在需要的受试者中减少或防止出血的方法，方法包括给受试者施用治疗有效量的根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯。还提供根据本发明的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯用来制备用来在受试者中减少或防止出血的药物。
优选地，受试者已经使用抗凝血剂进行治疗、正在进行手术、正在进行牙科治疗、遭受创伤、遭受诱发性或自发性大出血(例如颅内出血或胃肠道出血)和/或患有遗传性或药物引起的血小板减少症或面临遗传性或药物引起的血小板减少症的风险。
由于根据本发明的环糊精针对所测试的所有抗凝血剂均具有可证实的活性，因此抗凝血剂可以是本领域中已知的任何抗凝血剂。在一个优选实施例中，抗凝血剂选自由以下组成的组：
-直接凝血酶抑制剂，例如达比加群、水蛭素、比伐卢定、来匹卢定或阿加曲班，
-直接因子Xa抑制剂，例如利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班、贝曲西班、达瑞沙班、letaxaban或eribaxaban，
-戊多糖，例如磺达肝素或艾卓肝素，
-低分子量肝素，例如那屈肝素、亭扎肝素、达肝素、依诺肝素、贝米肝素、瑞维肝素、帕肝素或舍托肝素，
-未分级的肝素，
-维生素K拮抗剂，例如醋硝香豆素、苯丙香豆素、华法林、裂盒蕈色素或苯茚二酮，以及
-抗血小板药，例如不可逆环氧酶抑制剂(例如阿司匹林或其衍生物或三氟醋柳酸)、ADP受体抑制剂(例如氯吡格雷、普拉格雷、替格雷洛、噻氯吡啶、坎格雷洛或依利格雷)、磷酸二酯酶抑制剂(例如西洛他唑)、PAR-1拮抗剂(例如沃拉帕沙)、GPIIB/IIIa抑制剂(例如阿昔单抗、依替巴肽、替罗非班、罗西非班或奥波非班)、腺苷再吸收抑制剂(例如潘生丁)、血栓素抑制剂(例如伊非曲班或匹考他胺)或血栓素受体拮抗剂(例如特鲁曲班或匹考他胺)。
注意该类别不是穷举性的，属于所列抗凝血剂类别的许多其它抗凝血剂(其作用可使用本发明的方法或用途逆转)对于本领域技术人员而言是已知的。在本发明的一个特定实施例中，抗凝血剂选自由以下组成的组：达比加群、利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班、磺达肝素、那屈肝素、亭扎肝素、未分级的肝素、水蛭素、比伐卢定和维生素K拮抗剂。
在一个优选实施例中，根据本发明的用于在受试者中减少或防止出血的取代的环糊精选自由式(II)环糊精组成的组，其中：
-p为0，q为7，m为3且R为COOH；
-p为7，q为1，m为3且R为COOH；
-p为0，q为8，m为3且R为COOH；
-p为6，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为7，m为5且R为COOH；
-p为7，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为8，m为5且R为COOH；
-p为0，q为8，m为3且R为OH；
-p为0，q为8，m为4且R为COOH；
-p为0，q为8，m为6且R为COOH；
-p为0，q为8，m为4且R为OH；
-p为0，q为7，m为4且R为COOH；
-p为0，q为7，m为6且R为COOH；
-p为0，q为7，m为7且R为COOH；
-p为0，q为7，m为3且R为OH；
-p为5，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为6，m为5且R为COOH；
-p为6，q为1，m为6且R为COOH；
-p为6，q为1，m为4且R为OH；
-p为7，q为1，m为6且R为COOH；或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH，
或其药学上可接受的盐或酯，更优选选自由以下组成的组：OKL-1105、OKL-1106、OKL-1107、OKL-1108、OKL-1109、OKL-1110、OKL-1111、OKL-1146、OKL-1171、OKL-1172、OKL-1174、OKL-1178、OKL-1180、OKL-1181、OKL-1186、OKL-1187、OKL-1188、OKL-1189、OKL-1190、OKL-1191或其药学上可接受的盐或酯及其组合，更优选选自由以下组成的组：OKL-1105、OKL-1106、OKL-1107、OKL-1110、OKL-1111、OKL-1146、OKL-1172、OKL-1174、OKL-1180、OKL-1181、OKL-1187、OKL-1188、OKL-1189、OKL-1191或其药学上可接受的盐或酯及其组合，更优选选自由以下组成的组：OKL-1106、OKL-1107、OKL-1111、OKL-1146、OKL-1172、OKL-1174、OKL-1180、OKL-1187、OKL-1188、OKL-1189、OKL-1191或其药学上可接受的盐或酯及其组合，更优选选自由以下组成的组：OKL-1106、OKL-1111、OKL-1174、OKL-1187、OKL-1188、OKL-1189、OKL-1191或其药学上可接受的盐或酯及其组合。在一个更优选的实施例中，根据本发明用来在受试者中减少或防止出血的取代的环糊精是式(II)取代的环糊精，其中m为从5至10的整数，更优选为5至7的整数，更优选为5，p为0且q为7或8。在一个特别优选的实施例中，根据本发明用来在受试者中减少或防止出血的取代的环糊精是OKL-1111(一种式(II)全取代的γ-环糊精，其中取代基为-S-(CH2)5-COOH)或其药学上可接受的盐或酯，或者OKL-1187(一种式(II)全取代的α-环糊精，其中取代基为-S-(CH2)5-COOH)或其药学上可接受的盐或酯。
如本文所使用的术语“治疗有效量”是指在所治疗的疾病的预防、治疗、或管理中提供治疗益处的药物组合物的量。
如本文所使用，术语“受试者”包括人类和动物，优选为哺乳动物。优选地，受试者为哺乳动物，更优选为人类。在一个特定的实施例中，受试者是经抗凝血剂治疗、患有凝血疾病、正在进行手术、正在进行牙科治疗、遭受创伤、遭受诱发性或自发性大出血(例如颅内出血或胃肠道出血)和/或患有遗传性的或药物引起的血小板减少症或面临遗传性的或药物引起的血小板减少症的风险的患者。
如本文所使用，术语“预防”是指在尚未出现疾病的临床症状的受试者中预防或延迟疾病发作和/或出现疾病的临床症状。术语“治疗”是指抑制疾病(即中断或减慢其进展或其至少一种临床症状)以及缓解疾病的症状。
本文的取代的环糊精可使用本领域中已知用来制备环糊精的任何方法来制备。特别合适的从可商购的中间体环糊精开始来制备取代的环糊精、特别是取代的α-环糊精、取代的β-环糊精和取代的γ-环糊精的方法及其纯化在各实施例中进行了描述。
为了清楚和简洁描述的目的，各种特征可作为本发明相同或不同的方面或实施例的部分进行描述。技术人员应理解，本发明的范围可包括具有本文作为相同或不同的实施例的部分描述的所有特征或部分特征的组合的实施例。
在以下非限制性的实施例中更详细地对本发明进行解释。
附图说明
图1：α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精的基本结构。a.化学结构；b.3-D结构。
图2：OKL-1108(A)、OKL-1109(B)、OKL-1110(C)和OKL-1111(D)的结构。
图3-图8、图12、图14-图19和图22-图27：向收集的正常血浆中引入环糊精(100μM，除非另外指出)和抗凝血剂。抗凝血剂的浓度对于达比加群为100ng/ml(A)，对于利伐沙班为100ng/ml(B)，对于阿哌沙班为60ng/ml(C)，对于依度沙班为60ng/ml(D)。如材料和方法部分使用1pM的组织因子(TF)作为凝血引发剂对血浆进行凝血酶产生分析。
图9：向收集的正常血浆中引入OKL-1111(100μM，除非另外指出(A))和抗凝血剂(B-E)。抗凝血剂的浓度对于达比加群为100ng/ml(B)，对于利伐沙班为100ng/ml(C)，对于阿哌沙班为60ng/ml(D)，对于依度沙班为60ng/ml(E)。如材料和方法部分使用1pM的组织因子(TF)作为凝血引发剂对血浆进行凝血酶产生分析。
图10：向收集的正常血浆中引入OKL-1111(100μM)和抗凝血剂(A-F)。抗凝血剂的浓度对于磺达肝素为2μg/ml(A)，对于那屈肝素为0.4U/ml(B)，对于亭扎肝素为0.1U/ml(C)，对于未分级的肝素(UFH)为0.03U/ml(D)，对于水蛭素为0.5U/ml(E)，对于比伐卢定为10μg/ml(F)。如材料和方法部分使用1pM的组织因子(TF)作为凝血引发剂对血浆进行凝血酶产生分析。
图11：使用来自服用维生素K-拮抗剂的个体的血浆(VKA血浆)。如(A)和(B)中所示，存在两种不同强度的处理(以INR给出)。如材料和方法部分使用1pM的组织因子(TF)作为凝血引发剂对血浆进行凝血酶产生分析。
图13：向收集的正常血浆中引入OKL-1147(100μM，除非另外指出(A))和抗凝血剂(B-E)。抗凝血剂的浓度对于达比加群为100ng/ml(B)，对于利伐沙班为100ng/ml(C)，对于阿哌沙班为60ng/ml(D)，对于依度沙班为60ng/ml(E)。如材料和方法部分使用1pM的组织因子(TF)作为凝血引发剂对血浆进行凝血酶产生分析。
图20：以所指示的浓度向缺乏凝血因子VIII的血浆中引入环糊精OKL-1111(A)、OKL-1180(B)和OKL-1187(C)。
图21：OKL-1111对引入针对因子VIII(A)、因子IX(B)和因子XI(C)的抑制性抗体的正常血浆的作用。
图28：OKL-1111(A)、OKL-1180(B)和OKL-1187(C)在具有抗-因子VIII抗体的A型血友病患者的血浆中对凝血的作用。BU＝Bethesda单位。
图29：OKL-1111和OKL-1147的促凝血潜能的体内分析。除了对照之外，将动物用利伐沙班处理4天，并在出血化验之前5分钟施用环糊精。
图30：在小鼠A型血友病化验中OKL-1111和OKL-1187对凝血的作用。
实施例
实施例1
材料和方法
环糊精的合成
用硫醇合成修饰的β-环糊精的一般步骤。
为了合成单修饰的β-环糊精衍生物，将6-单甲苯磺酰基-β-环糊精(500mg，0.388mmol，1.0当量)在DMSO(3mL)中的溶液脱气。将该溶液滴加到脱气的适当的硫醇(H-S-R；4.67mmol，12当量)和NaOH(460mg，11.5mmol，30当量)在DMSO/H2O(4mL/2mL)中的溶液中。将该悬浮液在50℃下搅拌过夜。让反应混合物冷却至室温。加入甲醇(8mL)。将白色沉淀过滤并用甲醇洗涤。将沉淀溶于H2O(5mL)中，并用3M的盐酸将pH调节至7。将该溶液倒入MeOH(8-16mL)或丙酮中。将沉淀过滤，用甲醇或丙酮洗涤，并减压干燥。
使用商购的七-(6-溴-6-脱氧)-β-环糊精作为原料合成与硫连接的全修饰的β-环糊精衍生物。使用NaH作为碱在DMF中在室温下搅拌过夜成功地与适当的硫醇(H-S-R)和NaOH进行反应。
方案1显示全修饰的β-环糊精衍生物的反应。
方案1：将β-环糊精与硫连接的步骤
用硫醇合成修饰的γ-环糊精的一般步骤。
为了合成全修饰的γ-环糊精衍生物，将八-6-溴-6-脱氧-γ-环糊精(1.8g，1mmol，1.0当量)在DMSO(9mL)中的溶液脱气。将该溶液滴加到脱气的适当的硫醇(12.5mmol，12.5当量)和NaOH(1.1g，27.5mmol，27当量)在DMSO/H2O(12mL/6mL)中的溶液中。在50℃下将该悬浮液搅拌过夜。让反应混合物冷却至室温。加入甲醇(80mL)。将白色沉淀过滤，并用甲醇洗涤。将沉淀溶于H2O(50mL)中，并用3M的盐酸将pH调节至7。将该溶液倒入EtOH(100mL)或丙酮中。将沉淀过滤，用甲醇或丙酮洗涤，并减压干燥。
为了合成单修饰的γ-环糊精衍生物，单甲苯磺酰基化的γ-环糊精以与单修饰的β-环糊精类似的方式官能化。
方案2：将γ-环糊精与硫连接的步骤
与β-环糊精类似将γ-环糊精官能化(参见全取代的γ-环糊精的方案2)。该化合物使用NaOH和作为溶剂的DMSO来合成，造成分离困难，但是最终添加EtOAc产生良好的沉淀。
纯化
通常，官能化的环糊精通过从合适的溶剂沉淀分离，接着用溶剂洗涤几次以除去过量的试剂和副产物。根据1H NMR(通常观察到宽峰或者(特别是在单取代的情况下)相当复杂的谱图)或者HPLC-MS或其组合，这一步骤通常提供被认为对于应用来说纯的材料。在许多情况下，产生修饰的环糊精的反应不得不进行重复，以制备新的批次从而分离纯的产物。另外还使用纯化环糊精的其它方法，包括正相色谱、反相色谱和制备HPLC。
修饰的α环糊精的合成
α-单-S-C6-酸(OKL-1186)根据以上的一般步骤使用6-巯基己酸(131μl，140mg，0.943mmol)、NaOH(38mg，0.0925mmol)和6-单脱氧-6-单碘代-α-环糊精(200mg，0.185mmol)制备。根据本发明的其它α-单取代的环糊精可以同样的方式使用适当的起始化合物制备。
α-全-S-C6-酸(OKL-1187)：在氮气下，将NaH(70mg，1.70mmol，23.0当量)悬浮于DMF(5mL)中。滴加6-巯基己酸(134mg，0.897mmol，12.1当量)在DMF(2mL)中的溶液。10分钟之后加入六-(6-溴-6-脱氧)-α-环糊精(102mg，0.0741mmol，1.0当量)，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。通过添加丙酮(大过量)将反应混合物沉淀，过滤，并用丙酮洗涤。将沉淀溶于去矿质水(5mL)中，并用去矿质水中3M的HCl溶液将pH调节至恰好低于7。所得悬浮液用丙酮稀释，过滤，用丙酮洗涤，并真空干燥，得到产物。根据本发明的其它α-全取代的环糊精可以同样的方式使用适当的起始化合物制备。
表1和表2显示制备的环糊精。图2显示四种示例性的单取代和全取代的β-环糊精和γ-环糊精(化合物OKL-1108、OKL-1109、OKL-1110和OKL-1111)的结果。
表1.具有促凝血活性的环糊精。
表2对比环糊精
化合物 环糊精类型 取代模式 取代基
OKL-1100 β 单取代 -S-(CH<sub>2</sub>)<sub>2</sub>-COOH
OKL-1101 β 全取代 -S-(CH<sub>2</sub>)<sub>2</sub>-COOH
OKL-1102 γ 单取代 -S-(CH<sub>2</sub>)<sub>2</sub>-COOH
OKL-1103 γ 全取代 -S-(CH<sub>2</sub>)<sub>2</sub>-COOH
OKL-1147 γ 全取代 -NH<sub>2</sub>
OKL-1170 γ 全取代 -S-(CH<sub>2</sub>)<sub>2</sub>-COOH
凝血化验
Calibrated Automated在凝固血浆中使用微量滴定板读取荧光计(Fluoroskan Ascent，Thermo Labsystems，芬兰赫尔辛基)和软件(Thrombinoscope BV，荷兰马斯特里赫特)化验凝血酶的产生。化验如Hemker等人(Pathofysiol.Haemost.Thromb.2003，33，4-15)和手册进行。凝血在1pM或5pM的重组人组织因子(西门子，德国马尔堡)、4μM的磷脂和417μM的荧光底物Z-Gly-Gly-Arg-AMC(Bachem，瑞士布本多夫)的存在下通过复钙作用触发。荧光使用Fluoroskan Ascent荧光计(Thermo Labsystems，芬兰赫尔辛基)监控，滞后时间、凝血酶峰值、速度指数和曲线下的面积(ETP)使用软件(Thrombinoscope BV)计算。
体内出血模型
所有动物试验方案均由北卡罗来纳大学的研究所动物照管与使用委员会批准。C57BL6/J小鼠从Charles Rivers Laboratories(马萨诸塞州威明顿)购买。出血研究基本上如之前Pastoft等人(Haemophilia 2012，18：782-8)进行。小鼠在整个所有步骤中均被异氟烷麻醉。将两条后肢腹侧的毛除去。将该动物仰卧置于温度和心电图监控板上。通过用软聚乙烯管将爪子缠绕并将该管固定到心电图板从而将爪子轻轻约束。将左后肢和右后肢腹侧的皮肤切割，将隐神经血管束的长度曝露；将隐神经血管束用生理盐水覆盖以防止变干。为了对止血进行评估，通过在血管的远端部分用23-G针将其刺穿接着纵向切开将右隐静脉横切。轻轻将血吸走，直到止血发生。然后将凝块移去，以重新开始出血，再次将血吸走，直到止血再次发生。每次发生止血30分钟之后重复凝块破坏。给小鼠喂食每克食物含有0.1mg利伐沙班的食物。小鼠如此喂食4天，让其达到稳定状态。在出血化验开始前5分钟通过尾静脉注射施用环糊精。对两个参数进行测量：1)30分钟时段内发生止血的次数，2)每次止血需要的时间。
结果
正常血浆中的凝血化验
凝血酶产生的分析在收集的正常血浆中在添加和不添加抗凝血剂的情况下进行。各结果概括于表3中。
表3.所测试的环糊精的促凝血活性的概览。
阴影显示促凝血活性的强度。更深的阴影表示更强的促凝血活性。
带有数字的白框表示在凝血化验中没有作用。
没有数字的白框：未测定。
α-单羧基环糊精：
OKL-1186在正常血浆中具有显著的促凝血作用，拮抗达比加群、利伐沙班、阿哌沙班和依度沙班的抗凝血作用(表4和图14)。
α-全羧基环糊精：
OKL-1187在正常血浆中显示出很强的促凝血作用，并且强烈拮抗达比加群、利伐沙班、阿哌沙班和依度沙班的抗凝血作用(表4和图15)。
β-单羧基环糊精：
OKL-1108在血浆中具有显著的促凝血作用，并且拮抗达比加群、利伐沙班、阿哌沙班和依度沙班的抗凝血作用(表4和图3)。OKL-1188在正常血浆中显示出强烈的促凝血作用，并且拮抗达比加群、利伐沙班、阿哌沙班和依度沙班的抗凝血作用(表4和图16)。
β-全羧基环糊精：
添加OKL-1105在血浆中给出显著的促凝血作用。在达比加群、利伐沙班、阿哌沙班和依度沙班的存在下也观察到促凝血作用。照此，NOAC的抗凝血作用被拮抗(表4和图4)。OKL-1109在血浆中对凝血酶的产生具有较小的作用。在达比加群、利伐沙班、阿哌沙班和依度沙班的存在下对凝血酶的产生的作用微不足道或者对凝血酶的产生没有作用(表4和图5)。OKL-1178、OKL-1179和OKL-1180在正常血浆中显示出不同程度的促凝血活性(表4和图25-26)。
γ-单羧基环糊精
OKL-1106在正常血浆中引起促凝血作用，并显著拮抗达比加群和利伐沙班的抗凝血作用。其对阿哌沙班和依度沙班的抗凝血作用的作用较不显著(表4和图6)。OKL-1110在正常血浆中引起非常强有力的促凝血作用，并且完全抵消Xa-拮抗剂利伐沙班、依度沙班和阿哌沙班的抗凝血作用。OKL-1110也强烈地拮抗直接凝血酶抑制剂达比加群的抗凝血作用(表4和图7)。OKL-1190在正常血浆中具有促凝血作用，并且也拮抗达比加群、利伐沙班、阿哌沙班和依度沙班的抗凝血作用(表4和图18)。
γ-全羧基环糊精
添加OKL-1107在血浆中给出强烈的促凝血作用。凝血酶峰值被大大增加，并且滞后时间显著更短。添加达比加群、利伐沙班、阿哌沙班或依度沙班之后，OKL-1107的作用保留，并且凝血酶的产生被完全恢复或者甚至高于未经抗凝血处理的血浆(表4和图8)。OKL-1171和OKL-1172在血浆中显示出显著的促凝血活性(表4和图22-图23)。
添加OKL-1111在血浆中给出很强的促凝血作用(表4和图9)。凝血酶峰值被大大增加，并且滞后时间比缺少CD的情况显著缩短。在添加达比加群、利伐沙班、阿哌沙班或依度沙班之后，OKL-1111的作用仍然是高度促凝血的，凝血酶的产生恢复至远高于未经抗凝血处理的血浆的水平(图10)。OKL-1111在经未分级的和低分子量的肝素、戊多糖(Arixtra)、水蛭素和比伐卢定抗凝血处理的血浆中也能够恢复凝血酶的产生(图10)。另外，在使用维生素K拮抗剂的患者的血浆中，可通过添加OKL-1111改进凝血酶的产生(图11)。
β-单羟基环糊精
OKL-1189在正常血浆中显示出强烈的促凝血活性，并且强烈拮抗达比加群、利伐沙班、阿哌沙班和依度沙班的抗凝血作用(表4和图17)。
β-全羟基环糊精
OKL-1181在血浆中显示出显著的促凝血活性(表4和图27)。
γ-单羟基环糊精
OKL-1191在血浆中显示出强的促凝血活性，并且也拮抗达比加群、利伐沙班、阿哌沙班和依度沙班的抗凝血作用(表4和图19)。
γ-全羟基环糊精
在血浆中添加OKL-1146给出很强的促凝血作用(表4和图12)。凝血酶峰值被大大增加，并且滞后时间比不存在CD的情况显著更短。添加达比加群、利伐沙班、阿哌沙班或依度沙班之后，OKL-1146的作用仍然是高度促凝血的，凝血酶的产生恢复至远高于未经抗凝血处理的血浆的水平(图12)。类似地，OKL-1174在血浆中给出强烈的促凝血作用，也是在抗凝血剂的存在下(图24)。
含有C2取代基的取代的环糊精
β-单羟基取代的环糊精、β-全羟基取代的环糊精、γ-单羟基取代的环糊精和γ-全羟基取代的环糊精OKL-1100、OKL-1101、OKL-1102和OKL-1103/OKL-1170在正常血浆中未显示促凝血活性，在含有抗凝血剂的血浆中也未显示促凝血活性。因此这些环糊精未在缺陷性的血浆中进行测试。
γ-全氨基-取代的环糊精
在几个实验中，胺取代的γ-环糊精OKL-1147用作γ-系列环糊精的阴性对照，这是由于它在血浆中没有促凝血作用，也不会影响NOAC的抗凝血作用(图13)。
缺陷性血浆中的凝血化验
还在缺乏凝血因子VIII和IX的血浆中测试了取代的环糊精的促凝血作用。在缺乏凝血因子XI的人血浆中进一步对环糊精OKL-1107、OKL-1110、OKL-1111的促凝血作用进行研究。各结果概括于表4中，OKL-1111、OKL-1180和OKL-1187的代表性图表示于图20中。
OKL-1111能够在缺乏因子VIII、IX和XI的血浆中显著促进凝血(表4，图20)。OKL-1171、OKL-1172、OKL-1174、OKL-1180、OKL-1181、OKL-1187、OKL-1188、OKL-1189和OKL-1191还在缺乏因子VIII的血浆中显示出促凝血作用，并且OKL-1172、OKL-1174、OKL-1180、OKL-1181、OKL-1188、OKL-1189和OKL-1191在缺乏因子IX的血浆中显示出促凝血活性(表4)。
表4.促凝血CD在缺失因子VIII或因子IX的血浆中的作用。阴影和*数量显示促凝血活性的强度。阴影变暗和*数量增加表示更强的促凝血活性。-表示在凝血化验中没有促凝血活性。
经抗体预处理的血浆中的凝血化验
正常血浆很快产生抗因子VIII(Sanquin，VK34，14μg/ml)、因子IX(Sanquin，5F5，20μg/ml)或因子XI(Sanquin，#203和#175的混合物，75μg/ml)的抑制性抗体。在凝血酶产生的化验中使用1pM的组织因子(TF)对OKL-1111的作用进行测试。该模型代表A型、B型和C型血友病患者，其已经产生针对血浆产生的或重组的因子VIII或IX或XI的抑制性抗体，它们用该抗体进行处理。
OKL-1111在预先经抗因子VIII、因子IX和因子XI的抑制性抗体处理的正常人血浆中浓度依赖性地促进凝血酶的产生(图21A-C)。
A型血友病患者血浆中的凝血化验
还在A型血友病患者的血浆中测试了OKL-1111、OKL-1180和OKL-1187的促凝血作用(George King Bio-Medical，美国)。患者在抽取血浆之前已经产生了抗因子VIII的抗体。血浆含有高含量的抗-FVIII抗体(50BU)。所有测试的环糊精在含有抗-FVIII抗体的该血浆中均浓度依赖性地促进了凝血酶的产生(图28)。
体内出血模型
为了研究体外化验中观察到的促凝血作用是否在体内也会观察到，给经利伐沙班抗凝血处理的小鼠施用OKL-1111。
在未经抗凝血处理的小鼠中，在刺穿血管1分钟后不久形成凝块。照此，在30分钟的时间段内形成约20-25块凝块。在喂食利伐沙班的小鼠中，出血时间大致加倍，因此各动物在30分钟内仅形成约10-13块凝块。一剂OKL-1111预期会在血浆中给出25μM，从而将凝固时间正常化。对比之下，OKL-1147在这方面则没有任何显著作用(图29)。
为了测试OKL-1111和OKL-1187在血友病中的体内效力，还使用隐静脉出血模型。给A型血友病小鼠注射很低剂量的因子VIII(2.5IU/kg，其旨在在存在或不存在OKL-1111或OKL-1187的情况下给出约0.0625IU/dL)的血浆含量。
血友病小鼠(其完全缺乏因子VIII)在刺穿隐静脉之后30分钟内未形成凝块，或者仅形成一块凝块，而在野生型小鼠中该量则是约20块凝块。在存在低剂量的因子VIII的情况下，血友病小鼠中的凝块数量增加至大约2-3块凝块。在旨在给出25μM的血浆值的1μmol/kg的剂量下，OKL-1111与单独的因子VIII相比增加止血显著更高。在存在OKL-1111的情况下，在30分钟的时段内形成7-9块凝块(图30)。在存在0.2μmol/kg的OKL-1187的情况下获得了类似的结果。

Claims (22)

1.一种式(I)取代的环糊精或其药学上可接受的盐，用于作为促凝血剂的用途：
其中n为3至7的整数并且R选自由-COOH、-OH和-COO(1-4C)烷基组成的组，并且其中p+q为6、7或8，其中p为5且q为1，或者p为6且q为1，或者p为7且q为1，或者p为0且q为6，或者p为0且q为7，或者p为0且q为8。
2.根据权利要求1所述的用于用途的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，其中S-(Cn亚烷基)-R为-S-(CH2)m-R，并且其中m为3至7的整数。
3.根据权利要求1或2所述的用于用途的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，其中R选自由-COOH和-OH组成的组。
4.一种药物组合物，包含至少一种如权利要求1-3中任一项所定义的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯和至少一种药学上可接受的辅料，其中所述药物组合物被配制为用于作为凝胶、霜剂、油膏、敷料、压片、膏药、急救带或贴剂而局部给药。
5.一种式(II)取代的环糊精：
其中：
-p为0，q为7，m为3且R为COOH；
-p为7，q为1，m为3且R为COOH；
-p为0，q为8，m为3且R为COOH；
-p为6，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为7，m为5且R为COOH；
-p为7，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为8，m为5且R为COOH；
-p为0，q为8，m为3且R为OH；
-p为0，q为8，m为4且R为COOH；
-p为0，q为8，m为6且R为COOH；
-p为0，q为8，m为4且R为OH；
-p为0，q为7，m为4且R为COOH；
-p为0，q为7，m为6且R为COOH；
-p为0，q为7，m为7且R为COOH；
-p为0，q为7，m为3且R为OH；
-p为5，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为6，m为5且R为COOH；
-p为6，q为1，m为6且R为COOH；
-p为6，q为1，m为4且R为OH；
-p为7，q为1，m为6且R为COOH；或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH，
或者这些环糊精中的任一种的药学上可接受的盐或酯。
6.根据权利要求5所述的取代的环糊精，其中：
-p为7，q为1，m为3且R为COOH；
-p为6，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为7，m为5且R为COOH；
-p为7，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为8，m为3且R为OH；
-p为0，q为8，m为4且R为COOH；
-p为0，q为8，m为6且R为COOH；
-p为0，q为8，m为4且R为OH；
-p为0，q为7，m为4且R为COOH；
-p为0，q为7，m为6且R为COOH；
-p为0，q为7，m为7且R为COOH；
-p为0，q为7，m为3且R为OH；
-p为5，q为1，m为5且R为COOH；
-p为0，q为6，m为5且R为COOH；
-p为6，q为1，m为6且R为COOH；
-p为6，q为1，m为4且R为OH；
-p为7，q为1，m为6且R为COOH；或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH，
或者这些环糊精的任一种的药学上可接受的盐或酯。
7.根据权利要求5所述的取代的环糊精，其中p为0，q为8，m为5且R为COOH。
8.一种药物组合物，包含根据权利要求5-7中任一项所述的取代的环糊精或其药学上可接受的盐或酯和至少一种药学上可接受的辅料。
9.一种试剂盒，包含：
-权利要求1-3中任一项所定义的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，以及
-重组或分离的凝血因子。
10.根据权利要求9所述的试剂盒，其中所述重组或分离的凝血因子为因子VIII，并且所述取代的环糊精为其中S-(Cn亚烷基)-R为-S-(CH2)m-R的环糊精或其药学上可接受的盐或酯，并且其中：
-p为0，q为8，m为5且R为COOH，
-p为0，q为8，m为4且R为COOH，
-p为0，q为8，m为6且R为COOH，
-p为0，q为8，m为4且R为OH，
-p为0，q为7，m为7且R为COOH，
-p为0，q为7，m为3且R为OH，
-p为0，q为6，m为5且R为COOH，
-p为6，q为1，m为6且R为COOH，
-p为6，q为1，m为4且R为OH，或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH。
11.根据权利要求9所述的试剂盒，其中所述重组或分离的凝血因子为因子IX，并且所述取代的环糊精为其中S-(Cn亚烷基)-R为-S-(CH2)m-R的环糊精或其药学上可接受的盐或酯，并且其中：
-p为0，q为8，m为5且R为COOH，
-p为0，q为8，m为6且R为COOH，
-p为0，q为8，m为4且R为OH，
-p为0，q为7，m为7且R为COOH，
-p为0，q为7，m为3且R为OH，
-p为6，q为1，m为6且R为COOH，
-p为6，q为1，m为4且R为OH，或者
-p为7，q为1，m为4且R为OH。
12.根据权利要求9所述的试剂盒，其中所述重组或分离的凝血因子为因子IX，并且所述取代的环糊精为其中S-(Cn亚烷基)-R为-S-(CH2)m-R的环糊精或其药学上可接受的盐或酯，并且其中p为0，q为8，m为5且R为COOH。
13.一种在需要的受试者中诱导或促进凝血的方法，包括对所述受试者施用治疗有效量的权利要求1-3中任一项所定义的取代的环糊精或其药学上可接受的盐。
14.根据权利要求1-3中任一项所定义的取代的环糊精或其药学上可接受的盐用于在受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用的方法中的用途。
15.一种用来在需要的受试者中逆转抗凝血剂的抗凝血作用的方法，所述方法包括给已经施用所述抗凝血剂的所述受试者施用治疗有效量的权利要求1-3中任一项所定义的取代的环糊精或其药学上可接受的盐。
16.根据权利要求1-3中任一项所定义的取代的环糊精或其药学上可接受的盐在用于减少或防止受试者中的出血的方法中的用途。
17.一种用来在需要的受试者中减少或防止出血的方法，所述方法包括给所述受试者施用治疗有效量的权利要求1-3中任一项所定义的取代的环糊精或其药学上可接受的盐。
18.根据权利要求14-17中任一项所述的用于用途或方法的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，其中所述受试者已经使用抗凝血剂进行治疗、正在进行手术、正在进行牙科治疗、遭受创伤、遭受诱发性或自发性大出血，如颅内出血或胃肠道出血，和/或遭受遗传性的或药物引起的血小板减少症或者面临遗传性的或药物引起的血小板减少症的风险。
19.根据权利要求14、15或18中任一项所述的用于用途或方法的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，其中所述抗凝血剂选自由以下项组成的组：
-直接凝血酶抑制剂，如达比加群、水蛭素、比伐卢定、来匹卢定或阿加曲班，
-直接因子Xa抑制剂，如利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班、贝曲西班、达瑞沙班、letaxaban或eribaxaban，
-戊多糖，如磺达肝素或艾卓肝素，
-低分子量肝素，如那屈肝素、亭扎肝素、达肝素、依诺肝素、贝米肝素、瑞维肝素、帕肝素或舍托肝素，
-未分级的肝素，
-维生素K拮抗剂，如醋硝香豆素、苯丙香豆素、华法林、裂盒蕈色素或苯茚二酮，以及
-抗血小板药，如不可逆环氧酶抑制剂(如阿司匹林或其衍生物或三氟醋柳酸)、ADP受体抑制剂(如氯吡格雷、普拉格雷、替格雷洛、噻氯吡啶、坎格雷洛或依利格雷)、磷酸二酯酶抑制剂(如西洛他唑)、PAR-1拮抗剂(如沃拉帕沙)、GPIIB/IIIa抑制剂(如阿昔单抗、依替巴肽、替罗非班、罗西非班或奥波非班)、腺苷再吸收抑制剂(如潘生丁)、血栓素抑制剂(如伊非曲班或匹考他胺)或血栓素受体拮抗剂(如特鲁曲班或匹考他胺)。
20.根据权利要求1-3中任一项所定义的取代的环糊精或其药学上可接受的盐用于在治疗或预防凝血疾病的方法中的用途。
21.一种用来治疗或预防凝血疾病的方法，包括给需要的受试者施用治疗有效量的权利要求1-3中任一项所定义的取代的环糊精或其药学上可接受的盐。
22.根据权利要求20或21所述的用于用途或方法的取代的环糊精或其药学上可接受的盐，其中所述疾病选自由以下项组成的组：先天性或获得性的A型血友病、B型血友病、C型血友病、血管性血友病、因子V、因子VII、因子X和/或因子XI缺乏症、因子XIII或α2-抗血纤维蛋白溶酶缺乏症、遗传性的或药物引起的血小板减少症，包括免疫性血小板减少性紫癜、血栓性血小板减少性紫癜、胎儿或新生儿同种免疫血小板减少症和输血后血小板减少性紫癜、Wiskott-Aldrich症候群、血小板无力症、巨血小板综合症、特发性致密颗粒疾病、Hermansky-Pudlak综合征、Chediak-Higashi综合征、灰色血小板综合征、Paris-Trousseau/Jacobsen综合征，弥散性血管内凝血和维生素K缺乏症，包括新生儿的维生素K缺乏症。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1188428C (zh) * 1999-11-29 2005-02-09 阿克佐诺贝尔公司 6－巯基环糊精衍生物、包含6－巯基环糊精衍生物的药物组合物及其用途
CN102300880A (zh) * 2008-09-22 2011-12-28 阿尔卡里奥斯有限责任公司 用作药物的羧基烷基环糊精多硫酸酯
WO2013116366A1 (en) * 2012-01-30 2013-08-08 Baxter International Inc. Non-anticoagulant sulfated or sulfonated polysaccharides

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000229882A (ja) * 1998-12-10 2000-08-22 Sankyo Co Ltd 修飾シクロデキストリン含有トロンビン水性液剤
AU2002220654A1 (en) * 2000-11-02 2002-05-15 Akzo Nobel N.V. Use of cortisol-sequestering agents for the treatment of hypercortisolaemia related disorders
CN102060941B (zh) 2010-11-26 2012-12-26 漆又毛 6-脱氧α-氨基酸衍生物环糊精及制备和应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1188428C (zh) * 1999-11-29 2005-02-09 阿克佐诺贝尔公司 6－巯基环糊精衍生物、包含6－巯基环糊精衍生物的药物组合物及其用途
CN102300880A (zh) * 2008-09-22 2011-12-28 阿尔卡里奥斯有限责任公司 用作药物的羧基烷基环糊精多硫酸酯
WO2013116366A1 (en) * 2012-01-30 2013-08-08 Baxter International Inc. Non-anticoagulant sulfated or sulfonated polysaccharides

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JULIA M. ADAM 等: "Cyclodextrin-Derived Host Molecules as Reversal Agents for the Neuromuscular Blocker Rocuronium Bromide: Synthesis and Structure-Activity Relationships", 《JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》 *
刘妹女: "容量控制性失血性休克猪体内罗库溴铵药代动力学及药效学特点的研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 *

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Publication number Publication date
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