CN109362570A - 一种半夏种苗组培生产方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种半夏种苗组培生产方法，包括以下步骤：外植体选择胚状体诱导培养；球茎半固体培养基培养，与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：可诱导外植体直接分化出胚状体，还可诱导胚状体直接形成离体球茎，工艺简单合理，培养基配制方便，诱导率高，繁殖力强，球茎移栽成活率高，不需特殊驯化即可直接栽培或贮藏，实现了与半夏种苗生产与人工大规模栽培的对接，具有较大的生产应用价值。

Description

一种半夏种苗组培生产方法
技术领域
本发明是一种半夏种苗组培生产方法，属于一种中药组织培养方法。
背景技术
半夏以球茎入药，具有燥湿化痰、降逆止咳、消肿散结、抗早孕、抗肿瘤等多种功效，是我国特有的一种大宗传统中药材。随着药理研究的深入，半夏的市场需求量越来越大。半夏一直以野生资源为主，由于人们过度采挖和土地的精细耕作，使得野生半夏资源近乎枯竭。尽管半夏已经推广人工栽培，但由于长期采用小球茎作为种球，导致病毒感染不断积累在球茎中，造成半夏产量和药用成分极不稳定的现象。为了解决半夏资源保护和市场需求的矛盾，我国对半夏组培快繁技术的研究和应用已迅速展开。常见的半夏组织快繁体系是通过外植体诱导愈伤组织、愈伤组织分化出苗、继代增殖、生根、炼苗训化、组培苗移栽等环节，程序繁琐，而且移栽成活率不高。组织培养中的胚状体具有可发芽、不可生根的特点，所以不用生根就能获得完整植株，而且还有繁殖速度快等优点，已经广泛应用于生产实践。在适宜的组培条件下，半夏外植体诱导形成的离体球茎外形、大小均匀。另外，离体球茎还可直接作为繁殖材料应用于生产，节约了原种，大大缩短大田生长周期，避免了种球远程运输和贮存过程中存在的种种问题，具有较广阔的应用前景。通过检索发现，半夏报道的胚状体诱导率一般都只在50%-60%。
在CN102160523A专利中，用适宜浓度的灵发素可使半夏叶柄的胚状体诱导率提高80～100%，但没有离体球茎的形。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明目的是提供一种半夏种苗组培生产方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：一种半夏种苗组培生产方法，包括以下步骤：
外植体选择；
胚状体诱导培养；
球茎半固体培养基培养。
进一步地，外植体选择的具体步骤为：选择半夏嫩叶柄并切出伤口备用。
进一步地，胚状体诱导培养的具体步骤为：制作胚状体诱导培养基，所述胚状体诱导培养基为MS+6-BA 0.1-1mg/L+IBA 0.1-1mg/L+糖30%，将半夏嫩叶柄切断为长0.8～1.2cm的继代扩繁材料，接种在胚状体诱导培养基中，23°C～27°C、光照1200Lx、12h/d条件下培养20天，稀释为500倍液液体培养基喷雾培养，每6小时开启0.5小时。
进一步地，球茎半固体培养基培养的具体步骤为：配制球茎半固体培养基为：MS+糖30%+6-BA0.1-1mg/L+NAA1-1 mg/L，将所得的胚状体接种于球茎半固体培养基中，23°C～27°C，室内自然光照条件下培养40天，胚状体就长成一粒粒的离体球茎。
进一步地，在将半夏嫩叶柄切断后需灭菌处理，所述灭菌处理为取叶柄用0.1％升汞灭菌15分钟，无菌水冲洗5次，或经75％的酒精浸泡 0.5～1min，再用2％的次氯酸钠水溶液消毒15min。
进一步地，MS+糖30%采用2-3倍配方，经验证该浓度提高后可加快半夏组培种新芽长势好，球茎增长速度。
本发明的有益效果：本发明的一种半夏种苗组培生产方法，可诱导外植体直接分化出胚状体，还可诱导胚状体直接形成离体球茎，工艺简单合理，培养基配制方便，诱导率高，繁殖力强，球茎移栽成活率高，不需特殊驯化即可直接栽培或贮藏，实现了与半夏种苗生产与人工大规模栽培的对接，具有较大的生产应用价值。
具体实施方式
为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。
本发明提供一种技术方案：一种半夏种苗组培生产方法，包括以下步骤：
外植体选择；
胚状体诱导培养；
球茎半固体培养基培养。
外植体选择的具体步骤为：选择半夏嫩叶柄并切出伤口备用。
胚状体诱导培养的具体步骤为：制作胚状体诱导培养基，所述胚状体诱导培养基为MS+6-BA 0.1-1mg/L+IBA 0.1-1mg/L+糖30%，将半夏嫩叶柄切断为长0.8～1.2cm的继代扩繁材料，接种在胚状体诱导培养基中，23°C～27°C、光照1200Lx、12h/d条件下培养20天，稀释为500倍液液体培养基喷雾培养，每6小时开启0.5小时。
球茎半固体培养基培养的具体步骤为：配制球茎半固体培养基为：MS+糖30%+6-BA0.1-1mg/L+NAA1-1 mg/L，将所得的胚状体接种于球茎半固体培养基中，23°C～27°C，室内自然光照条件下培养40天，胚状体就长成一粒粒的离体球茎。
进一步地，在将半夏嫩叶柄切断后需灭菌处理，所述灭菌处理为取叶柄用0.1％升汞灭菌15分钟，无菌水冲洗5次，或经75％的酒精浸泡 0.5～1min，再用2％的次氯酸钠水溶液消毒15min。
MS+糖30%采用2-3倍配方，经验证该浓度提高后可加快半夏组培种新芽长势好，球茎增长速度。
作为本发明的一个实施例：本发明的一种半夏种苗组培生产方法，可诱导外植体直接分化出胚状体，还可诱导胚状体直接形成离体球茎，工艺简单合理，培养基配制方便，诱导率高，繁殖力强，球茎移栽成活率高，不需特殊驯化即可直接栽培或贮藏，实现了与半夏种苗生产与人工大规模栽培的对接，具有较大的生产应用价值。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点,对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (6)

1.一种半夏种苗组培生产方法，其特征在于：包括以下步骤：
外植体选择；
胚状体诱导培养；
球茎半固体培养基培养。
2.根据权利要求1所述的一种半夏种苗组培生产方法，其特征在于：外植体选择的具体步骤为：选择半夏嫩叶柄并切出伤口备用。
3.根据权利要求1所述的一种半夏种苗组培生产方法，其特征在于：胚状体诱导培养的具体步骤为：制作胚状体诱导培养基，所述胚状体诱导培养基为MS+6-BA 0.1-1mg/L+IBA0.1-1mg/L+糖30%，将半夏嫩叶柄切断为长0.8～1.2cm的继代扩繁材料，接种在胚状体诱导培养基中，23°C～27°C、光照1200Lx、12h/d条件下培养20天，稀释为500倍液液体培养基喷雾培养，每6小时开启0.5小时。
4.根据权利要求1所述的一种半夏种苗组培生产方法，其特征在于：球茎半固体培养基培养的具体步骤为：配制球茎半固体培养基为：MS+糖30%+6-BA0.1-1mg/L+NAA1-1 mg/L，将所得的胚状体接种于球茎半固体培养基中，23°C～27°C，室内自然光照条件下培养40天，胚状体就长成一粒粒的离体球茎。
5.根据权利要求3所述的一种半夏种苗组培生产方法，其特征在于：在将半夏嫩叶柄切断后需灭菌处理，所述灭菌处理为取叶柄用0.1％升汞灭菌15分钟，无菌水冲洗5次，或经75％的酒精浸泡 0.5～1min，再用2％的次氯酸钠水溶液消毒15min。
6.根据权利要求4所述的一种半夏种苗组培生产方法，其特征在于：MS+糖30%采用2-3倍配方，经验证该浓度提高后可加快半夏组培种新芽长势好，球茎增长速度。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101491214A (zh) * 2009-03-11 2009-07-29 华中农业大学 半夏人工种茎的生产方法
CN102160523A (zh) * 2010-02-23 2011-08-24 中国医学科学院医药生物技术研究所 一种生产半夏胚状体和组培苗的方法
CN102919122A (zh) * 2012-10-19 2013-02-13 遵义市龙驰生物科技有限公司 一种半夏离体球茎的高效诱导方法
CN105850728A (zh) * 2016-04-01 2016-08-17 荆楚理工学院 一种荆半夏种茎快速繁殖方法
KR20180101960A (ko) * 2017-03-06 2018-09-14 한국 한의학 연구원 알반하 기내 배양용 배지 조성물 및 이를 이용한 묘반하의 대량생산 방법

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101491214A (zh) * 2009-03-11 2009-07-29 华中农业大学 半夏人工种茎的生产方法
CN102160523A (zh) * 2010-02-23 2011-08-24 中国医学科学院医药生物技术研究所 一种生产半夏胚状体和组培苗的方法
CN102919122A (zh) * 2012-10-19 2013-02-13 遵义市龙驰生物科技有限公司 一种半夏离体球茎的高效诱导方法
CN105850728A (zh) * 2016-04-01 2016-08-17 荆楚理工学院 一种荆半夏种茎快速繁殖方法
KR20180101960A (ko) * 2017-03-06 2018-09-14 한국 한의학 연구원 알반하 기내 배양용 배지 조성물 및 이를 이용한 묘반하의 대량생산 방법

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
张利霞: "外源激素和外植体对半夏胚状体诱导的影响", 《现代农业科技》 *
白雨 等: "半夏组织培养诱导胚状体的正交试验", 《植物资源与环境学报》 *

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