CN105494097A - 一种鸡树条荚蒾的离体快繁技术 - Google Patents

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杜凤国
王志
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Abstract

本发明属于植物组织培养领域，提供了一种鸡树条荚蒾的离体快繁技术。本发明以鸡树条荚蒾的幼嫩茎段为外植体，以MS为基本培养基，添加植物生长调节剂6-BA、IBA诱导腋芽萌发生长，再经继代增殖培养、生根诱导及炼苗移栽，可在短时间内获得大量遗传性一致的再生植株。为其良种快速繁育提供技术支撑,也为满足我国对鸡树条荚蒾的需求、加速鸡树条荚蒾综合开发利用具有重要的现实意义。

Description

一种鸡树条荚蒾的离体快繁技术
技术领域
本发明属于植物组织培养领域，具体涉及一种鸡树条荚蒾的离体快繁技术。
背景技术
鸡树条荚蒾（ViburnumsargentiiKoehne）又名天目琼花、鸡树条子，是忍冬科(Caprifoliaceae)荚蒾属的落叶灌木。它对环境适应能力强，耐寒、耐干旱，对土壤要求不严。萌芽力强、耐修剪，根系发达，易移栽成活。鸡树条荚蒾树姿清秀，春季叶片碧绿，夏季繁花似锦，秋季红果累累，晶莹剔透，冬季红果宿存，是花、果、叶均可观赏的优良绿化树种。
鸡树条荚蒾的果实营养丰富，含有较高的氨基酸、维生素和微量元素。叶中富含绿原酸，具有抗菌消炎、清热解毒、免疫调节、抗癌抗衰老等作用。其叶、嫩枝及果实均可入药,叶外用主治疮疖、疥癣、皮肤瘙痒；嫩枝主治风湿性关节炎、腰酸腿痛、跌打损伤；果实有止咳的功用,主治急、慢性气管炎、咳嗽。目前鸡树条荚蒾主要通过播种和扦插的方法繁殖。但其种子休眠期长，播种繁殖困难，野生资源不能满足实际需要，因此对其组织培养技术的研究显得尤为迫切。
鸡树条荚蒾具有很高的园林应用价值和经济价值，但目前现存野生资源很少，因此培育大量优质苗木势在必行。目前鸡树条荚蒾主要通过播种和扦插的方法繁殖，但其种子存在胚轴和胚乳双休眠特点，休眠期长，且种皮结构致密、坚硬，必需经过2冬1夏的层积处理后才能播种，而且种子发芽率低。扦插受插穗来源和季节限制，生长速度慢，制约了鸡树条荚蒾的推广种植，已不能满足市场对优质鸡树条荚蒾种苗的需求。因此,有必要建立一种鸡树条荚蒾的离体快繁技术,为其良种快速繁育提供技术支撑和保障,也为满足我国对鸡树条荚蒾的需求、加速鸡树条荚蒾良种的推广种植具有重要的现实意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鸡树条荚蒾的离体快繁技术,实现规模化育苗。通过外植体选择及消毒、启动诱导培养、增殖培养、生根诱导培养、炼苗移栽等过程实现了鸡树条荚蒾离体快繁。
本发明提供一种鸡树条荚蒾离体快繁技术,包括以下步骤:
（1）外植体的消毒及启动培养：选择生长健壮的无病虫害的当年萌发的幼嫩枝条为外植体，先用流水冲洗1h，然后用0.1％升汞灭菌6～8min，无菌水漂洗5～6次。将嫩枝修剪成1cm左右带芽茎段接种于启动诱导培养基上，置于每天光照10～12h，光照强度为15001x，培养温度为23～25℃条件下培养，直至诱导腋芽生长；
（2）继代增殖培养：将腋芽萌发伸长生长的芽苗转入增殖培养基上进行继代增殖培养,置于每天光照12小时,光照强度为15001x,培养温度为23～25℃条件下培养，直至腋芽萌发或形成丛生芽，继代周期为35d；
（3）生根诱导培养：将高度约为3cm生长健壮的无根苗接种到生根培养基上进行生根诱导,置于每天光照12小时,光照强度为2000～25001x,培养温度为23～25℃条件下培养至生根；
(4)炼苗移栽:鸡树条荚蒾在生根培养基中培养30～35d后，挑选生长健壮、根系发达的组培苗,先打开封口膜置于自然光照下炼苗3～5d,然后用清水洗净根部残留的培养基,移栽到已消毒的基质中（草炭土：河沙=1：2或珍珠岩：蛭石=1：1）。
上述步骤(1)所述的启动培养基为MS+1.0mg/L6-BA(6—苄氨基腺嘌呤)+0.1mg/LIBA（吲哚丁酸）+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，pH值为5.8。经过15d左右的诱导培养，腋芽萌发并分化出2片小叶；30d左右在叶腋处分化出少量丛生芽，同时茎段伸长至3cm左右。
上述步骤(2)所述的增殖培养基为MS+1.0～2.0mg/L6-BA+0.1～0.3mg/LIBA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，pH值为5.8，增殖系数达6以上。
上述步骤(3)所述的生根培养基为1/2MS+2.0mg/LIBA+15g/L蔗糖+7g/L琼脂粉,pH值为5.8。大约20d开始生根，30d可产生3～8条粗壮的不定根，根长平均为2cm，生根率达到90%。
上述步骤(4)移栽前将基质用0.3%高锰酸钾溶液淋透消毒，然后再用清水冲淋3～5遍。移栽前期覆盖塑料薄膜保湿并用遮荫网适当遮阴，每天喷雾１次，每隔5天喷施800倍多菌灵杀菌溶液，移栽后期逐渐降低湿度，增加光照。移栽15d左右长出新根，移栽成活率达85％以上。保证温湿度平衡和光照需求是移栽成功的关键。
本发明的有益效果
目前国内外还未见鸡树条荚蒾离体快繁的相关报道，本发明采用植物组织培养技术，通过诱导腋芽萌发和形成丛生芽的途径，可在短时间内繁育大量苗木。本发明具有增殖系数高、生根时间短、根系发达、移栽成活率高、生长周期短等特点，大大提高了鸡树条荚蒾的育苗效率，利于工厂化生产。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明,不是对本发明的限制。
具体实施
（1）外植体的消毒及启动培养：选择生长健壮的无病虫害的当年萌发的幼嫩枝条或萌发条为外植体，先用流水冲洗1h，然后剪去幼枝上的叶片，留3～5mm叶柄，再用0.1％升汞灭菌6～8min，无菌水漂洗5～6次。将嫩枝剪成1cm左右带芽茎段接种于启动诱导培养基上，置于每天光照10～12h，光照强度为15001x，培养温度为23～25℃条件下培养。所用的启动培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.1～0.3mg/LIBA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，pH值为5.8。经过15d的诱导培养，腋芽萌发并分化出2片小叶；30d在叶腋处分化出少量丛生芽，同时茎段伸长至3～4cm。
（2）继代增殖培养：将腋芽萌发伸长生长的芽苗转入增殖培养基上进行继代增殖培养,置于每天光照12小时,光照强度为15001x,培养温度为23～25℃条件下培养。增殖培养基为MS+1.0～2.0mg/L6-BA+0.1～0.3mg/LIBA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，pH值为5.8。在最初的继代培养过程中，腋芽萌发且高生长快，多次继代培养后，常形成丛生芽，增殖系数大于6，继代周期为35d；
（3）生根诱导培养：将高度约为3cm生长健壮的无根苗接种到生根培养基上进行生根诱导,置于每天光照12小时,光照强度为2000～25001x,培养温度为23～25℃条件下培养。生根培养基为1/2MS+2.0mg/LIBA+15g/L蔗糖+7g/L琼脂粉,pH值为5.8。培养约20d开始生根，30d可产生3～8条粗壮的不定根，根长平均为2cm，生根率达到90%。
(4)炼苗移栽:鸡树条荚蒾在生根培养基中培养30～35d后，挑选生长健壮、根系发达的组培苗,先打开封口膜置于自然光照下炼苗3～5d,然后用清水洗净根部残留的培养基,移栽到已消毒的基质中（草炭土：河沙=1：2或珍珠岩：蛭石=1：1），移栽期间保证温湿度条件，精心管护，移栽成活率达85％以上。

Claims (4)

1.一种鸡树条荚蒾的离体快繁技术，其特征在于包括以下步骤：
（1）外植体的消毒及启动培养：选择生长健壮的无病虫害的当年萌发的幼嫩枝条为外植体，先用流水冲洗1h，然后用0.1％升汞灭菌6～8min，无菌水漂洗5～6次；将嫩枝修剪成1cm左右带芽茎段接种于启动诱导培养基上，置于每天光照10～12h,光照强度为15001x,培养温度为23～25℃条件下培养,直至诱导腋芽生长；
（2）继代增殖培养：将腋芽萌发伸长生长的芽苗转入增殖培养基上进行继代增殖培养,置于每天光照12小时,光照强度为15001x,培养温度为23～25℃条件下培养，直至腋芽萌发或形成丛生芽，继代周期为35d；
（3）生根诱导培养：将高度约为3cm的生长健壮的无根苗接种到生根培养基上进行生根诱导,置于每天光照12小时,光照强度为2000～25001x,培养温度为23～25℃条件下培养至生根；
(4)炼苗移栽:鸡树条荚蒾在生根培养基中培养30～35d后，挑选生长健壮、根系发达的组培苗,先打开封口膜置于自然光照下炼苗3～5d,然后用清水洗净根部残留的培养基,移栽到已消毒的基质中（草炭土：河沙=1：2或珍珠岩：蛭石=1：1）。
2.根据权利要求1所述的一种鸡树条荚蒾的离体快繁技术,其特征在于步骤(1)所述的初代培养基为:MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LIBA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，pH值为5.8。
3.根据权利要求1所述的一种鸡树条荚蒾的离体快繁技术,其特征在于步骤(2)所述的增殖培养基为MS+1.0～2.0mg/L6-BA+0.1～0.3mg/LIBA++30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，pH值为5.8。
4.根据权利要求1所述的一种鸡树条荚蒾的离体快繁技术,其特征在于步骤(3)所述的生根培养基为1/2MS+2.0mg/LIBA+15g/L蔗糖+7g/L琼脂粉,pH值为5.8。
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