CN109321616A - 一种井冈霉素发酵培养基及利用该培养基发酵井冈霉素的方法 - Google Patents

一种井冈霉素发酵培养基及利用该培养基发酵井冈霉素的方法 Download PDF

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Abstract

一种井冈霉素发酵培养基及利用该培养基发酵井冈霉素的方法，属于生物技术领域。该由以下组分构成：可溶性淀粉12%，黄豆饼粉1～1.5%，磷酸二氢钾0.1～0.15%，磷酸氢二钾0.15～0.3%，氯化钠0.1～0.3%，硫酸镁0.05～0.15%，井冈霉素滤液沉淀0.5～1%，水余量，PH值为7.5。本发明通过在井冈霉素发酵培养基中添加井冈霉素滤液沉淀，井冈霉素发酵效价提高了15%以上，生产周期缩短至40～42小时，生产成本大大的降低。

Description

一种井冈霉素发酵培养基及利用该培养基发酵井冈霉素的 方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种井冈霉素发酵培养基及利用该培养基发酵井冈霉素的方法。
背景技术
井冈霉素是一种放线菌产生的抗生素，具有较强的内吸性，易被菌体细胞吸收并在其内迅速传导，干扰和抑制菌体细胞生长和发育,主要用于水稻纹枯病，也可用于水稻稻曲病、玉米大小斑病以及蔬菜和棉花、豆类等作物病害的防治。多年大规模的田间使用结果充分显示其"防效高、无药害、无污染"的环保型农药的特点，深受国内外用户欢迎。
现有技术中，井冈霉素采用液态发酵法进行生产，其采用的发酵培养基由可溶性淀粉，黄豆饼粉，磷酸二氢钾，磷酸氢二钾，氯化钠和硫酸镁构成，采用上述的培养基进行发酵存在如下问题：
1）工业化发酵水平偏低，发酵效价在18000ug/ml左右；
2）发酵周期较长，通常在50小时左右，造成成本较高；
3）对氧气消耗较多，能耗较高。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种井冈霉素发酵培养基及利用该培养基发酵井冈霉素的方法的技术方案。
所述的一种井冈霉素发酵培养基，其特征在于由以下组分构成：可溶性淀粉12%，黄豆饼粉1～1.5%，磷酸二氢钾0.1～0.15%，磷酸氢二钾0.15～0.3%，氯化钠0.1～0.3%，硫酸镁0.05～0.15%，井冈霉素滤液沉淀0.5～1%，水余量，PH值为7.5。
所述的利用一种井冈霉素发酵培养基进行井冈霉素发酵的方法，其特征在于包括以下步骤：
1）取所述配方量的可溶性淀粉、黄豆饼粉、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、氯化钠、硫酸镁、井冈霉素滤液沉淀和水混合均匀，调pH值至7.5，灭菌，得到发酵培养基；
2）发酵培养基中接种井冈霉素种子液进行发酵培养，发酵后收集发酵产物，过滤得滤液。
所述的井冈霉素发酵的方法，其特征在于所述的井冈霉素种子液为吸水链霉菌井冈变种种子液。
所述的井冈霉素发酵的方法，其特征在于所述的井冈霉素接种量为10vol%。
所述的井冈霉素发酵的方法，其特征在于所述的发酵条件为：温度39～42℃，通气比2:1，搅拌转速180rpm，罐压0.05MPa，发酵周期40～42小时。
所述的井冈霉素滤液沉淀在提高井冈霉素发酵效价中的应用。
所述的应用，其特征在于在井冈霉素发酵培养基中添加井冈霉素滤液沉淀。
所述的应用，其特征在于所述井冈霉素滤液沉淀的添加量为0.5～1%。
本发明通过在井冈霉素发酵培养基中添加井冈霉素滤液沉淀，井冈霉素发酵效价提高了15%以上，生产周期缩短至40～42小时，生产成本大大的降低。
具体实施方式
以下结合实施例来进一步说明本发明。
井冈霉素发酵液制备：采用吸水链霉菌井冈变种（Streptomyceshygroscopicusv ar.jinggangensis）为菌种，以常规发酵培养基为原料，经过两级发酵而成。
常规发酵培养基由可溶性淀粉，黄豆饼粉，磷酸二氢钾，磷酸氢二钾，氯化钠和硫酸镁构成，如可溶性淀粉12%，黄豆饼粉2%，磷酸二氢钾0.1%，磷酸氢二钾0.15%，氯化钠0.15%，硫酸镁0.1%，水余量。
实施例1
井冈霉素滤液沉淀形成：取井冈霉素发酵液，用3mol/L盐酸调PH值至2.0~2.2，板框过滤，滤液调PH值为3.5~4.0，放置24小时以上，将有少量沉淀，将上清液抽走，所剩沉淀经烘箱烘干即为井冈霉素滤液沉淀。
实施例2
（1）培养基配方：可溶性淀粉12%，黄豆饼粉2%，磷酸二氢钾0.1%，磷酸氢二钾0.15%，氯化钠0.15%，硫酸镁0.1%，PH值为7.5。
（2）培养基配置方法：将可溶性淀粉，黄豆饼粉，磷酸二氢钾，磷酸氢二钾，氯化钠，硫酸镁，加入自来水溶解，定容，用30%氢氧化钠调PH值为7.5。
（3）灭菌：121℃，灭菌30分钟。
（4）接种：发酵液降温至40℃时，接种吸水链霉菌井冈变种（Streptomyceshygros copicusvar.jinggangensis）种子液，接种量为10vol%，发酵培养。
（5）发酵培养：温度40℃，通气比2:1，搅拌转速180rpm，罐压0.05MPa，发酵周期50小时，收集发酵产物，过滤得滤液，采用液相色谱法测得滤液井冈霉素效价为18100ug/ml。
实施例3
（1）培养基配方：可溶性淀粉12%，黄豆饼粉1.5%，磷酸二氢钾0.1%，磷酸氢二钾0.15%，氯化钠0.15%，硫酸镁0.1%，井冈霉素滤液沉淀0.5%，PH值为7.5。
（2）培养基配置方法：将可溶性淀粉，黄豆饼粉，磷酸二氢钾，磷酸氢二钾，氯化钠，硫酸镁，井冈霉素滤液沉淀加入自来水溶解，定容，用30%氢氧化钠调PH值为7.5。
（3）灭菌：121℃，灭菌30分钟。
（4）接种：发酵液降温至40℃时，接种吸水链霉菌井冈变种（Streptomyceshygros copicusvar.jinggangensis）种子液，接种量为10vol%，发酵培养。
（5）发酵培养：温度40℃，通气比2:1，搅拌转速180rpm，罐压0.05MPa，发酵周期42小时，收集发酵产物，过滤得滤液，采用液相色谱法测得滤液井冈霉素效价为21132ug/ml。
实施例4
（1）培养基配方：可溶性淀粉12%，黄豆饼粉1%，磷酸二氢钾0.15%，磷酸氢二钾0.3%，氯化钠0.1%，硫酸镁0.05%，井冈霉素滤液沉淀1%，PH值为7.5。
（2）培养基配置方法：将可溶性淀粉，黄豆饼粉，磷酸二氢钾，磷酸氢二钾，氯化钠，硫酸镁，井冈霉素滤液沉淀加入自来水溶解，用30%氢氧化钠调PH值为7.5。
（3）灭菌：121℃，灭菌30分钟。
（4）接种：发酵液降温至40℃时，接种吸水链霉菌井冈变种（Streptomyceshygros copicusvar.jinggangensis）种子液，接种量为10vol%，发酵培养。
（5）发酵培养：温度39℃，通气比2:1，搅拌转速180rpm，罐压0.05MPa，发酵周期40小时，收集发酵产物，过滤得滤液，采用液相色谱法测得滤液井冈霉素效价为20598ug/ml。
实施例5
（1）培养基配方：可溶性淀粉12%，黄豆饼粉1%，磷酸二氢钾0.1%，磷酸氢二钾0.15%，氯化钠0.15%，硫酸镁0.1%，井冈霉素滤液沉淀1%，PH值为7.5。
（2）培养基配置方法：将可溶性淀粉，黄豆饼粉，磷酸二氢钾，磷酸氢二钾，氯化钠，硫酸镁，井冈霉素滤液沉淀加入自来水溶解，用30%氢氧化钠调PH值为7.5。
（3）灭菌：121℃，灭菌30分钟。
（4）接种：发酵液降温至40℃时，接种吸水链霉菌井冈变种（Streptomyceshygros copicusvar.jinggangensis）种子液，接种量为10vol%，发酵培养。
（5）发酵培养：温度42℃，通气比2:1，搅拌转速180rpm，罐压0.05MPa，发酵周期40小时，收集发酵产物，过滤得滤液，采用液相色谱法测得滤液井冈霉素效价为21098ug/ml。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (8)

1.一种井冈霉素发酵培养基，其特征在于由以下组分构成：可溶性淀粉12%，黄豆饼粉1～1.5%，磷酸二氢钾0.1～0.15%，磷酸氢二钾0.15～0.3%，氯化钠0.1～0.3%，硫酸镁0.05～0.15%，井冈霉素滤液沉淀0.5～1%，水余量，PH值为7.5。
2.利用权利要求1所述的一种井冈霉素发酵培养基进行井冈霉素发酵的方法，其特征在于包括以下步骤：
1）取所述配方量的可溶性淀粉、黄豆饼粉、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、氯化钠、硫酸镁、井冈霉素滤液沉淀和水混合均匀，调pH值至7.5，灭菌，得到发酵培养基；
2）发酵培养基中接种井冈霉素种子液进行发酵培养，发酵后收集发酵产物，过滤得滤液。
3.如权利要求2所述的井冈霉素发酵的方法，其特征在于所述的井冈霉素种子液为吸水链霉菌井冈变种种子液。
4.如权利要求2所述的井冈霉素发酵的方法，其特征在于所述的井冈霉素接种量为10vol%。
5.如权利要求2所述的井冈霉素发酵的方法，其特征在于所述的发酵条件为：温度39～42℃，通气比2:1，搅拌转速180rpm，罐压0.05MPa，发酵周期40～42小时。
6.井冈霉素滤液沉淀在提高井冈霉素发酵效价中的应用。
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于在井冈霉素发酵培养基中添加井冈霉素滤液沉淀。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于所述井冈霉素滤液沉淀的添加量为0.5～1%。
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